董 穎，周 梅，巴曉軍，司婧文，李文婷，王 穎，李 東，李 挺△

(1.北京大學(xué)第一醫(yī)院病理科，北京 100034； 2.新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科，烏魯木齊 830011)

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·論著·

子宮內(nèi)膜癌中DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3B的表達特點與臨床意義

董 穎1△*，周 梅2*，巴曉軍1，司婧文1，李文婷2，王 穎1，李 東1，李 挺1△

(1.北京大學(xué)第一醫(yī)院病理科，北京 100034； 2.新疆醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科，烏魯木齊 830011)

目的：探討子宮內(nèi)膜癌中DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3B(DNA methyltransferase 3B, DNMT3B)的表達特點、與雌激素受體(estrogen receptor，ER)和孕激素受體(progesterone receptor，PR)的相關(guān)性及意義。方法：免疫組織化學(xué)法檢測DNMT3B、ER、PR在104例子宮內(nèi)膜癌組織中的表達并與臨床病理特點及預(yù)后相對照。結(jié)果：104例子宮內(nèi)膜癌組織中DNMT3B陽性率為50%，Ⅰ型內(nèi)膜癌(內(nèi)膜樣癌)中DNMT3B過表達率(54.8%)顯著高于Ⅱ型內(nèi)膜癌(30.0%，P=0.028)，且Ⅰ型內(nèi)膜癌中，隨腫瘤分化變差，DNMT3B陽性率增加(1級、2級、3級分別為43.3%、51.3%、86.7%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.019)。DNMT3B在肌層侵犯程度重、存在脈管癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分期晚的病例中過表達率更高，DNMT3B過表達的患者組預(yù)后更差，但差異未見統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。Ⅰ型內(nèi)膜癌DNMT3B與ER、PR表達呈負相關(guān)，ER、PR陰性組DNMT3B過表達率(78.9%、86.7%)高于ER、PR陽性組DNMT3B過表達率(47.7%、47.8%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.016，P=0.006)；ER、PR均陰性時，DNMT3B過表達率最高(92.9%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.002)。Ⅱ型內(nèi)膜癌中DNMT3B與ER、PR表達未見相關(guān)性(P>0.05)。序列分析顯示，DNMT3B基因啟動子區(qū)有多個ER、PR結(jié)合位點。結(jié)論：內(nèi)膜樣癌與非內(nèi)膜樣癌中DNMT3B表達特點不同，DNMT3B過表達有可能作為預(yù)后或預(yù)測因子而輔助病理診斷和生物學(xué)行為評估。Ⅰ/Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌的甲基化特點可能不同，Ⅰ型內(nèi)膜癌中DNMT3B過表達與ER、PR表達呈負相關(guān)，Ⅱ型內(nèi)膜癌中DNMT3B表達與ER、PR表達關(guān)系不大。

子宮內(nèi)膜腫瘤；DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3B；甲基化；受體，雌激素；受體，孕激素

子宮內(nèi)膜癌是女性生殖道最常見的惡性腫瘤之一，世界范圍內(nèi)每年約新增病例15萬[1]。根據(jù)臨床病理特點，子宮內(nèi)膜癌可分為兩型[2]：Ⅰ型癌，雌激素依賴型，以子宮內(nèi)膜樣癌(endometrioid adenocarcinomas，EC)為代表，常與雌激素過度刺激有關(guān)，腫瘤分化好，預(yù)后相對良好，但仍有約15%的病例術(shù)后復(fù)發(fā)，各種治療難以奏效；Ⅱ型癌，非雌激素依賴型，組織學(xué)類型為非子宮內(nèi)膜樣癌(nonendometrioid adenocarcinomas，NEC)，以漿液性癌和透明細胞癌為代表，多見于絕經(jīng)后老年女性，具有高度侵襲性，預(yù)后差。目前人們對兩型內(nèi)膜癌涉及的分子機制已有一些了解[1]：EC主要為抑癌基因PTEN失活，微衛(wèi)星不穩(wěn)定性，PIK3CA、K-ras和β-catenin突變；NEC的突出特點是p53突變及人表皮生長因子受體2(human epidermal growth factor receptor 2，HER-2)的過表達。

過去幾十年中，以體細胞突變?yōu)橹鞯陌┳兝碚撚辛嗽S多變化，表觀遺傳學(xué)在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中的重要地位被揭示[3-4]。哺乳動物中許多編碼基因(大約60%)的啟動子區(qū)存在CpG島，DNA甲基化多發(fā)生在CpG島的胞嘧啶第五位碳(C5)上，從而引起轉(zhuǎn)錄失活和基因表達沉默。DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNA methyltransferase，DNMT)家族正是催化DNA CpG島發(fā)生甲基化的重要組分[5]。研究顯示，子宮內(nèi)膜癌中PTEN、ER、PR、E-cadherin、hMLH1、hMSH2等基因都存在異常甲基化現(xiàn)象，導(dǎo)致這些基因表達與功能的缺失[6-9]。

目前有關(guān)DNMT在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生與演進中的作用與意義的研究不多，有限的資料顯示EC/NEC中DNMT的表達特點截然相反[10]：EC中DNMT3B表達上調(diào)[11]，NEC中其表達水平降低，推測與NEC全基因組低甲基化狀態(tài)有關(guān)[12]。同時一些研究提示，雌激素以受體依賴方式上調(diào)子宮內(nèi)膜癌DNMT3B表達，促進腫瘤形成[13],另外一些研究則提示甲基化可導(dǎo)致激素受體失表達[14]。鑒于DNMT3B和激素受體皆可在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控基因表達，并與子宮內(nèi)膜癌密切相關(guān)，兩者內(nèi)在關(guān)系的揭示對深入闡明子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展的分子機制，探討內(nèi)膜癌治療新靶點可能具有重要意義。

1 資料與方法

1.1 材料獲取和判定

收集北京大學(xué)第一醫(yī)院病理科2001年至2012年子宮內(nèi)膜癌石蠟組織標本104例(84例EC，20例NEC)， 10例正常增殖期內(nèi)膜作為對照。由兩位病理醫(yī)師復(fù)閱切片，組織學(xué)分型參照2014年WHO女性生殖系統(tǒng)腫瘤病理學(xué)和遺傳學(xué)分類標準[15]，將子宮內(nèi)膜癌分為兩型：Ⅰ型，主要為子宮內(nèi)膜樣癌；Ⅱ型，組織類型為非子宮內(nèi)膜樣癌(圖1)。臨床分期采用2009年國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(The International Federation of Gynecology and Obstetrics，F(xiàn)IGO)標準[16]。無病生存時間定義為自手術(shù)治療之日至末次隨訪或死亡或腫瘤復(fù)發(fā)之間間隔的時間。

1.2 免疫組織化學(xué)染色

將石蠟組織4 μm切片，采用Dako EnVisionTM免疫組織化學(xué)檢測試劑盒，實驗用試劑包括：抗體DNMT3B(52A1018, Abcam, 1∶250)、雌激素受體(estrogen receptor，ER，1D5, Dako, Glostrup, Denmark)、孕激素受體(progesterone receptor，PR，PgR636, Carpinteria, CA, USA)。DNMT3B蛋白在細胞核與細胞質(zhì)中均可表達，每批染色均設(shè)置陰性對照(PBS代替一抗)。染色結(jié)果評估采用免疫反應(yīng)評分(immunoreactive score，IRS)系統(tǒng)，IRS=染色強度(staining intensity, SI)×陽性細胞百分比(percentage of positive cells, PP)。根據(jù)陽性信號的強弱將染色強度分為4個等級：0分=陰性，1分=弱陽性，2分=中度陽性，3分=強陽性；根據(jù)全片陽性細胞所占比例將陽性細胞百分比分為5個等級：0=0～1%， 1=2%～10%， 2=11%～33%， 3=34%～66%， 4>66%。IRS在0～12之間，根據(jù)以往文獻報道和本課題組的經(jīng)驗[17]，我們將IRS≥6定義為DNMT3B過表達，IRS<6定義為DNMT3B表達正常。ER和PR為胞核陽性，將10%以上的腫瘤細胞核陽性定義為陽性[18](圖1)。

1.3 序列分析

轉(zhuǎn)錄因子預(yù)測分析軟件采用rVista 2.0 (http://rvista.dcode.org)，CpG島分析采用CpG island searcher (http://cpgislands.usc.edu)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件包，兩組間差異采用χ2檢驗，多組間比較采用秩和檢驗，相關(guān)性采用Spearmen相關(guān)分析，采用Kaplan-Meier進行生存分析，P<0.05認為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床病理特征

104例子宮內(nèi)膜癌患者年齡37～76歲，中位年齡54歲。組織病理標本均為手術(shù)切除標本，其中47例同時進行了淋巴結(jié)清掃術(shù)。臨床分期：85.6%(89/104)為Ⅰ/Ⅱ期，14.4%(15/104)為進展期(Ⅲ/Ⅳ期)。84例Ⅰ型癌均為子宮內(nèi)膜樣癌，35.7%(30/84)為高分化，46.4%(39/84)為中分化，17.9%(15/84)為低分化。所有患者的隨訪截止時間為2014年8月，其中89例獲得隨訪資料，隨訪時間6～100個月(平均48個月)。

2.2 DNMT3B表達與內(nèi)膜癌臨床病理特點及預(yù)后的關(guān)系

DNMT3B陽性信號位于細胞核和細胞質(zhì)(圖2)，正常子宮內(nèi)膜DNMT3B為陰性表達(IRS=0)。本組中Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌的DNMT3B過表達率(54.8%)顯著高于Ⅱ型癌(30.0%，P=0.028)，且Ⅰ型內(nèi)膜癌中秩和檢驗顯示，隨腫瘤分化變差，級別提升，DNMT3B的過表達率增加(1級、2級、3級分別為43.3%、51.3%、86.7%，P=0.019)。Spearman相關(guān)分析顯示，DNMT3B過表達與Ⅰ型內(nèi)膜癌的腫瘤級別呈正相關(guān)(r=0.388,P<0.001)，同時，Ⅰ型內(nèi)膜癌中，DNMT3B在肌層侵犯程度重、存在脈管癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分期晚的病例中過表達率更高，但差異未見統(tǒng)計意義(表1)。Kaplan-Meier生存分析也顯示DNMT3B過表達組的無病生存期更短，但差異亦未見統(tǒng)計學(xué)意義。

ER, estrogen receptor; PR, progesterone receptor.

圖1 免疫組織化學(xué)染色ER、PR在子宮內(nèi)膜樣癌陽性(A～C)，在漿液性癌陰性(D～F)(EnVision ×100, HE ×100)
Figure 1 ER and PR immunohistochemistry staining and corresponding histological features of endometrioid carcinoma (positive, A, B, and C)and serous carcinoma (negative, D, E, and F) (EnVision ×100, HE ×100)

DNMT, DNA methyltransferase.
圖2 子宮內(nèi)膜樣癌免疫組織化學(xué)染色DNMT3B蛋白過表達(A)及相應(yīng)的組織學(xué)表現(xiàn)(B)(EnVision ×100)
Figure 2 The immunohistochemistry staining of DNMT3B overexpression (A) and corresponding histological features of endometrioid carcinoma (B) (EnVision ×100)

表1 DNMT3B在104例子宮內(nèi)膜癌中的表達特點

Table 1 Comparsion of clinicopathological features and expression of DNMT3B in 104 endometrial carcinomas

a, 47 patients received lymphadenectomy. DNMT, DNA methyltransferase; EC, endometrioid carcinoma; NEC, nonendometrioid carcinoma; FIGO, the International Federation of Gynecology and Obstetrics.

2.3 DNMT3B與ER、PR表達的相關(guān)性

本組研究顯示，Ⅰ型內(nèi)膜癌DNMT3B與ER、PR的表達呈負相關(guān)，而在Ⅱ型內(nèi)膜癌中未見此相關(guān)性。Ⅰ型內(nèi)膜癌中，ER、PR陰性時DNMT3B的過表達率(78.9%、86.7%)高于ER、PR陽性組DNMT3B的過表達率(47.7%、47.8%),同時，DNMT3B過表達組中ER、PR陰性率(32.6%、28.3%)顯著高于DNMT3B低表達組中ER、PR的陰性率(10.5%、5.3%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.016，P=0.006)。另外，ER、PR兩者均陰性時，DNMT3B過表達率最高(92.9%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.002，表2，圖2)。

NEC中DNMT3B與ER、PR的相關(guān)性不顯著(P>0.05)，ER、PR陰性組DNMT3B過表達率(28.6%、27.3%)與ER、PR陽性組DNMT3B過表達率近似(33.3%、33.3%,P=0.861、P=1.000)。DNMT3B過表達組ER、PR的陰性率(66.7%、50.0%)與DNMT3B低表達組中ER、PR的陰性率近似(71.4%、57.1%，表2，圖3)。

2.4 ER、PR結(jié)合位點及甲基化預(yù)測分析

采用轉(zhuǎn)錄因子預(yù)測分析軟件(rVista 2.0)分析DNMT3B基因5′非翻譯區(qū)(2 kb)，有多個ER、PR結(jié)合位點(圖4)。ER(ESR1)，PR(PGR)基因啟動子區(qū)富于CpG島(圖5)。

表2 子宮內(nèi)膜樣癌和非內(nèi)膜樣癌中DNMT3B表達與ER、PR的關(guān)系Table 2 Associations between DNMT3B and ER or PR status in EC and NEC

DNMT, DNA methyltransferase; EC, endometrioid carcinoma; NEC, nonendometrioid carcinoma; ER, estrogen receptor; PR, progesterone receptor.

DNMT, DNA methyltransferase; EC, endometrioid carcinoma; NEC, nonendometrioid carcinoma;ER, estrogen receptor; PR, progesterone receptor.

圖3 子宮內(nèi)膜樣癌中DNMT3B過表達與ER、PR表達呈負相關(guān)，非內(nèi)膜樣癌中未見相關(guān)性
Figure 3 DNMT3B negatively correlated with ER and PR expression in EC, whereas such correlation was not present in NEC

3 討論

表觀遺傳調(diào)控是近年腫瘤研究的熱點之一，反映出腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中各種在DNA 序列不變情況下的基因表達調(diào)控。DNA甲基化是表觀調(diào)控的重要機制之一，甲基化異常在腫瘤發(fā)病中扮演重要角色，特別是使抑癌基因失活。DNA甲基化多發(fā)生在基因啟動子區(qū)CpG島的胞嘧啶第五位碳(C5)上，即在C5加上一個甲基，從而引起基因轉(zhuǎn)錄失活和表達沉默。DNMT家族正是催化DNA CpG島發(fā)生甲基化的重要組分，DNMT與DNA結(jié)合，將目標核苷酸反轉(zhuǎn)暴露于DNA雙螺旋之外，之后半胱氨酸的親核基團從S-腺苷甲硫氨酸處轉(zhuǎn)甲基至胞嘧啶C5上，通過這種甲基化機制實現(xiàn)對基因表達的調(diào)控[4-5]。

DNMT, DNA methyltransferase; TSS, transcription start site;ER, estrogen receptor; PR, progesterone receptor.

圖4 序列分析顯示DNMT3B基因啟動子區(qū)有多個ER、PR結(jié)合位點
Figure 4 Schematic representation of predicted ER or PR binding sites in the promoter regions of DNMT3B gene

TSS, transcription start site.

圖5 序列分析顯示雌、孕激素受體基因(ESR1，PGR)上游調(diào)控區(qū)富于CpG島
Figure 5 Sequence analyses demonstrated CpG rich regions upstream of ESR1 and PGR genes

哺乳動物中，DNMT蛋白家族至少有5個成員(DNMT1、DNMT2、DNMT3A、DNMT3B、DNMT3L)，研究顯示，只有DNMT1、DNMT3A及DNMT3B具有甲基轉(zhuǎn)移酶活性[5]。DNMT1在人體普遍表達，起著維持甲基化(maintenance methylation)的作用，即根據(jù)親本鏈上特異的甲基化位點，在DNA半保留復(fù)制的新生鏈相應(yīng)的胞嘧啶上進行甲基化修飾。DNMT3A和DNMT3B主要參與從頭甲基化(denovomethylation)，即在沒有甲基化的DNA雙鏈上進行甲基化,從頭甲基化完成后就由DNMT1來維持其穩(wěn)定的甲基化狀態(tài)。DNMT3A主要在胚胎干細胞中表達，在成熟體細胞中表達豐度很低，在某些特定的腫瘤(如睪丸生殖細胞腫瘤)中適度上調(diào)[19]。DNMT3B在成熟體細胞中表達豐度也很低，但在多種腫瘤中表達上調(diào)，被認為是腫瘤發(fā)生的早期事件[20]。

有關(guān)子宮內(nèi)膜癌DNMT3B表達的研究相對有限，Xiong等[10]以real-time PCR法和Western blot法分析子宮內(nèi)膜癌組織DNMTmRNA和蛋白表達，結(jié)果顯示，EC、NEC的DNMT表達特點相反，EC中DNMT3B、DNMT1的表達較正常對照升高，且分化差的腫瘤表達更高，而在NEC中則顯著降低，DNMT3A、DNMT2在EC和NEC中均無明顯變化。細胞系的研究結(jié)果相似，DNMT3B在分化差的內(nèi)膜癌細胞系(如KLE)中的表達顯著高于分化較好的細胞系(如Ishikawa)[11]。

本研究以免疫組織化學(xué)法分析84例內(nèi)膜樣癌及20例漿液性癌中DNMT3B的表達，結(jié)果與以往文獻報道一致，正常周期子宮內(nèi)膜中DNMT3B幾乎全部陰性，EC中DNMT3B的過表達率(54.8%)顯著高于NEC(30.0%)，隨腫瘤分化變差，級別提升，DNMT3B在EC中的陽性率顯著增加(1級、2級、3級分別為43.3%、51.3%、86.7%)；同時，DNMT3B在肌層侵犯程度重、存在脈管癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分期晚的EC病例中過表達率更高，生存分析也顯示DNMT3B過表達組的預(yù)后更差，但差異均未見統(tǒng)計學(xué)意義，可能與我們的病例數(shù)量不夠充足、隨訪資料有限有關(guān)。

有研究顯示，Ⅰ型內(nèi)膜癌發(fā)病的重要分子事件，如PTEN、ER、PR、E-cadherin、hMLH1、hMSH2等基因都存在異常甲基化現(xiàn)象[6-9]。結(jié)合本組研究結(jié)果，我們推測DNMT3B過表達可能通過參與這些基因甲基化，導(dǎo)致其表達與功能缺失，從而參與Ⅰ型內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展。Ⅱ型癌中DNMT3B過表達率不高，研究顯示Ⅱ型癌全基因組DNA呈現(xiàn)一種低甲基化狀態(tài)，從而容易發(fā)生染色體異常和基因突變[12]，DNMT3B過表達率不高可能是導(dǎo)致這種現(xiàn)象的因素之一。

ER、PR與內(nèi)膜癌，特別是Ⅰ型內(nèi)膜癌的發(fā)病密切相關(guān)，無孕激素拮抗的雌激素過度刺激被認為是子宮內(nèi)膜增生和Ⅰ型內(nèi)膜癌形成的重要誘導(dǎo)因素，但在內(nèi)膜癌進展過程中，激素受體丟失反而提示腫瘤侵襲性增強。當(dāng)前有研究提示，啟動子甲基化是激素受體失表達的機制之一。Sasaki等[14]的研究發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜癌細胞系及組織中PR亞型PRB的啟動子甲基化而失活，PRA啟動子未甲基化而正常表達。PRA/PRB兩者的比例很重要，Cui等[13]的研究認為兩者比例異?？蓪?dǎo)致孕激素拮抗雌激素(E2)保護內(nèi)膜的作用消失，E2可上調(diào)Ishikawa細胞DNMT3B表達，并促進DNA從頭甲基化活性，此過程依賴ER。另有研究則提示E2特異性上調(diào)DNMT3B4(非活化亞型)表達，降低CXCR4和CXCL12基因啟動子高甲基化狀態(tài)，增加CXCR4和CXCL12表達及該通路活性，從而促進內(nèi)膜癌細胞增殖[21]。

本組研究結(jié)果似乎與上述文獻不太一致，EC中DNMT3B表達與ER、PR表達呈顯著負相關(guān)，且ER、PR同時陰性時的相關(guān)性更強，DNMT3B過表達率高達92.9%。雖然本文結(jié)果與以往文獻看似不一致，但從另一角度看，DNMT3B過表達與ER、PR的負相關(guān)性與它們對內(nèi)膜癌生物學(xué)行為特點的提示作用相吻合，即ER、PR陰性及DNMT3B過表達均提示內(nèi)膜癌更具侵襲性。

雖然本組數(shù)據(jù)顯示EC中DNMT3B與ER、PR的表達呈負相關(guān)，序列分析也顯示ER、PR基因啟動子區(qū)含有CpG島，以往文獻研究也提示內(nèi)膜癌激素受體丟失與甲基化有關(guān)，但本組數(shù)據(jù)進一步的分析顯示，DNMT3B陽性時，ER、PR陰性率僅分別為32.6%和28.3%，提示DNMT3B陽性所致的啟動子甲基化對ER、PR陰性的貢獻不大，甲基化可能不是Ⅰ型內(nèi)膜癌ER、PR陰性的主要調(diào)控機制。

另外，本組數(shù)據(jù)還顯示ER或PR陰性時，DNMT3B陽性率高達78.9%和86.7%，ER/PR同時陰性時，DNMT3B陽性率更高(92.9%)，較ER、PR陽性組的DNMT3B陽性率增加近1倍。序列分析顯示，DNMT3B基因上游調(diào)控區(qū)含有多個ER、PR結(jié)合位點，結(jié)果提示ER、PR可能通過直接或間接方式負性調(diào)控DNMT3B表達。結(jié)合前面所述，ER、PR陽性的內(nèi)膜癌生物學(xué)行為偏良善，我們有理由推測Ⅰ型內(nèi)膜癌中，ER、PR陽性表達通過直接或間接抑制DNMT3B表達，降低下游一些相關(guān)抑癌基因甲基化失活，從而在腫瘤演進過程中扮演保護或拮抗的角色,而在Ⅱ型內(nèi)膜癌中，DNMT3B過表達與ER或PR的狀態(tài)關(guān)系不大。

綜上所述，本研究結(jié)果提示EC和NEC中DNMT3B的表達特點不同，兩者的甲基化特點可能不同，DNMT3B過表達有可能作為預(yù)后或預(yù)測因子而輔助病理診斷與生物學(xué)行為評估。EC中DNMT3B與ER、PR表達呈負相關(guān)，ER、PR陽性可能會干擾DNMT3B表達，間接保護一些相關(guān)基因，特別是抑癌基因，避免其甲基化失活，但EC中ER、PR自身甲基化可能并不是導(dǎo)致其失表達的主要機制。

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(2015-03-06收稿)

(本文編輯：任英慧)

Characteristic and clinical significance of DNA methyltransferase 3B overexpression in endometrial carcinoma

DONG Ying1△*, ZHOU Mei2*, BA Xiao-jun1, SI Jing-wen1, LI Wen-ting2, WANG Ying1, LI Dong1, LI Ting1△

(1. Department of Pathology, Peking University First Hospital, Beijing 100034, China; 2. Department of Pathology, Affiliated Canaer Hospital of Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, China)

Objective： To determine the clinicopathological significance of the DNA methyltransferase 3B (DNMT3B) overexpression in endometrial carcinomas and to evaluate its correlation with hormone receptor status. Methods: Immunohistochemistry was performed to assess the expression of DNMT3B and hormone receptors in 104 endometrial carcinomas. Results:DNMT3B overexpression occurred frequently in endometrioid carcinoma (EC, 54.8%) more than in nonendometrioid carcinoma (NEC, 30.0%) with statistical significance (P=0.028). Furthermore, there was a trend that EC with worse clinico-pathological variables and shorter survival had a higher DNMT3B expression, and the correlation between DNMT3B and tumor grade reached statistical significance (P=0.019).A negative correlation between DNMT3B and estrogen receptor (ER) or progesterone receptor (PR) expression was found in EC. NMT3B overexpression occurred frequently in the ER or PR negative subgroups (78.9%, 86.7%) more than in the positive subgroups (47.7%, 47.8%) with statistical significance (P=0.016,P=0.006). In addition, the DNMT3B overexpression increased in tumors with both ER and PR negative expression (92.9%,P=0.002). However, no such correlation was found in NEC (P>0.05). Sequence analyses demonstrated multiple ER and PR binding sites in the promoter regions ofDNMT3Bgene. Conclusion: This study showed that the expression of DNMT3B in EC and NEC was different. DNMT3B overexpression in EC was associated with the worse clinicopathological variables and might have predictive value. The methylation status of EC and NEC maybe different. In addition, in EC, DNMT3B overexpression negatively correlated with ER or PR expression. In NEC, the correlation between DNMT3B and ER or PR status was not present.

Endometrial neoplasms; DNA methyltransferase 3B; Methylation; Receptors, estrogen; Receptor, progesterone

新疆維吾爾自治區(qū)自然科學(xué)基金(201318101-2)資助 Supported by the Natural Science Foundation of Xinjiang Uygur Autonomous Region (201318101-2)

時間：2016-1-6 10：32：58

http://www.cnki.net/kcms/detail/11.4691.R.20160106.1032.020.html

R737.33

A

1671-167X(2016)05-0788-07

10.3969/j.issn.1671-167X.2016.05.007

△ Corresponding author’s e-mail, dongying_999@163.com， Lixiaoting12@hotmail.com

* These authors contributed equally to this work