劉建群，余昭芬（江西中醫(yī)藥大學(xué)現(xiàn)代中藥制劑教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，南昌 330004）

雷公藤及其偽品的熱分析研究Δ

劉建群＊，余昭芬（江西中醫(yī)藥大學(xué)現(xiàn)代中藥制劑教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，南昌 330004）

目的：為雷公藤的鑒別、炮制及熱分解產(chǎn)物研究提供參考。方法：采用熱重-微商熱重（TG-DTG）和差熱-微商差熱（DTA-DDTA）分析法對(duì)3個(gè)產(chǎn)地雷公藤及其同屬種昆明山海棠、東北雷公藤及其常見偽品藤梨根、野葡萄根進(jìn)行熱譜掃描分析，測(cè)定7批藥材及其藥渣、浸膏樣品的熱譜，分析雷公藤藥材與藥渣樣品熱譜的差譜。結(jié)果：7批藥材的TG-DTG和DTA-DDTA熱譜基本相似，并與本身藥渣熱譜基本相似。3個(gè)產(chǎn)地雷公藤及其同屬種昆明山海棠浸膏的DTG曲線均呈（299±3）℃單一主峰，且強(qiáng)度相似，而東北雷公藤及偽品藤梨根和野葡萄根DTG曲線呈多個(gè)峰，且（299±3）℃不為主峰。結(jié)論：藥材熱譜不能區(qū)分雷公藤及其偽品；浸膏DTG曲線特征可區(qū)分雷公藤及其偽品；雷公藤的適宜煨法炮制溫度為200～380℃。該研究結(jié)果可為雷公藤的鑒別、炮制及熱分解產(chǎn)物研究提供一定參考。

雷公藤；偽品；熱分析；鑒別；炮制

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎屬于嚴(yán)重危害人類健康的10類（種）重大疾病之一，兩年致殘率高達(dá)50%，素有“不死的癌癥”之說［1］。雷公藤Tripterygium wilfordii是國內(nèi)外公認(rèn)具有良好療效的治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等自身免疫功能亢進(jìn)性疾病的首選中藥［2］。但雷公藤毒性較大，具有肝、腎、生殖系統(tǒng)等多臟器毒性，是毒副作用和不良反應(yīng)報(bào)道較多的中藥［3-6］。目前，流入市場(chǎng)的雷公藤藥材比較混亂，常見外形相似的偽品有藤梨根Actinidia argutaor和野葡萄根Vitis wilsonae等，還有以同屬種植物昆明山海棠［7］或東北雷公藤作為雷公藤藥用的。誤用雷公藤偽品將影響患者治療效果，產(chǎn)生嚴(yán)重后果。因此，雷公藤及其偽品鑒別具有重要意義。熱分析具有方便、快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好、樣品用量少等優(yōu)點(diǎn)，在中藥材鑒定中的應(yīng)用前景十分廣闊［8］。研究發(fā)現(xiàn)，雷公藤等7種樣品藥材與其藥渣熱譜基本相似，藥材熱譜主要體現(xiàn)了藥渣的熱譜，這可能與藥渣為藥材的主要基質(zhì)有關(guān)，藥材熱譜難以區(qū)分雷公藤及其偽品。前期本課題組發(fā)現(xiàn)，雷公藤經(jīng)煨法炮制后具有顯著的減毒增效效果［9-10］。煨法炮制是指將藥物用濕面、濕紙或黃泥等包裹，埋于熱火灰中緩慢加熱的炮制方法，具有緩和藥性、增強(qiáng)療效的作用［9］。因熱分析過程與煨法炮制加熱過程類似，為進(jìn)一步研究雷公藤炮制規(guī)律，本試驗(yàn)首次采用熱重-微商熱重（TG-DTG）和差熱-微商差熱（DTA-DDTA）分析法測(cè)定了雷公藤藥材、浸膏和藥渣的熱譜。為使熱分析過程更好地模擬指導(dǎo)煨法炮制過程，還首次提出了藥材與藥渣熱譜的差譜概念。本研究結(jié)果可為雷公藤鑒別、炮制及熱分解產(chǎn)物研究提供一定參考。

1 材料

1.1 儀器

SII Nano Technology TG/DTA 6300型熱分析儀（日本精工納米科技有限公司）；BT25S型電子天平（德國Sartorius公司）。

1.2 藥材

7批藥材采集或采購于我國多個(gè)省份（見表1），均由筆者鑒定。

表1 雷公藤藥材及其偽品來源Tab 1 Origins of T.wilfordii and its counterfeits

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品的制備

將7批藥材樣品粉碎后過150目篩，經(jīng)70℃烘箱烘干，得藥材樣品。精密稱取上述藥材樣品各10 g，用70%乙醇回流提取3次，每次2 h，濾過，合并濾液，減壓蒸干，再經(jīng)70℃烘箱烘干，放入干燥器中干燥2 d，得浸膏樣品。藥渣晾干，經(jīng)70℃烘箱烘干，得藥渣樣品。

2.2 試驗(yàn)條件

稱樣量：5 mg；載氣：氮?dú)猓魉伲?00 ml/min；溫度：25～600℃；升溫速率：15℃/min；參比物：空瓷坩堝。

2.3 7批藥材樣品的熱分解行為

從7批藥材樣品的TG-DTG曲線（見圖1A、B）中可看出，TG曲線出現(xiàn)2個(gè)失重平臺(tái)，一個(gè)為100～235℃，失重率10%，為藥材樣品脫水過程；另一個(gè)為235～380℃，失重率55%，為藥材樣品降解過程。7批藥材樣品TG曲線235～380℃失重平臺(tái)對(duì)應(yīng)DTG曲線（315±6）℃和（358±4）℃2個(gè)失重峰，說明藥材樣品降解分為兩步。DTA-DDTA曲線（與TG-DTG曲線趨勢(shì)相似，因此略，下同）出現(xiàn)80℃和358℃2個(gè)吸熱峰和400℃放熱峰；其中80℃峰為脫水峰，358℃峰為裂解峰，400℃峰為燃燒放熱峰。7批藥材樣品的TG-DTG、DTA-DDTA曲線基本相似，沒有鑒別特征，藥材熱譜難以區(qū)分雷公藤及其偽品。溫度低于200℃時(shí)，除脫水過程外，藥材樣品TG和DTA曲線基本無變化。溫度為380℃時(shí)藥材樣品失重率達(dá)65%，絕大部分發(fā)生了降解。因此，雷公藤適宜炮制溫度為200～380℃。

圖1 7批藥材、藥渣和浸膏的TG和DTG曲線A.藥材TG；B.藥材DTG；C.藥渣TG；D.藥渣DTG；E.浸膏TG；F.浸膏DTGFig 1 TG and DTG curves of 7 medicinal materials，its dregs and extractum A.TG of medicinal materials；B.DTG of medicinal materials；C.TG of dregs；D.DTG of dregs；E.TG of extractum；F.DTG of extractum

2.4 7批藥渣樣品的熱分解行為

從7批藥渣樣品的TG-DTG曲線（見圖1C、D）中可看出，7批藥渣樣品的TG-DTG、DTA-DDTA曲線（圖略）基本相似，并且與其藥材樣品曲線基本相似，說明藥材熱譜主要體現(xiàn)了藥渣熱譜，這可能與藥渣為藥材的主要基質(zhì)有關(guān)。

2.5 7批浸膏樣品的熱分解行為

從7批浸膏樣品的TG-DTG曲線（見圖1E、F）中可看出，TG曲線沒有明顯的失重平臺(tái)，但3個(gè)產(chǎn)地雷公藤及其同屬種昆明山海棠的浸膏DTG曲線均呈現(xiàn)（299±3）℃單一主峰，且強(qiáng)度相似；而東北雷公藤及偽品藤梨根和野葡萄根DTG曲線呈多個(gè)峰，且（299±3）℃不為主峰，如偽品藤梨根和野葡萄根DTG曲線均出現(xiàn)3個(gè)主要峰，而東北雷公藤出現(xiàn)2個(gè)主要峰。據(jù)此可區(qū)分雷公藤及其偽品，也說明昆明山海棠與雷公藤親緣關(guān)系可能比東北雷公藤與雷公藤的更近。7批浸膏樣品的DTA-DDTA曲線（圖略）基本相似，出現(xiàn)100℃吸熱峰和400℃放熱峰，其中100℃峰為脫水峰，400℃峰為裂解峰。

2.6 藥材樣品雷公藤與藥渣樣品熱譜的差譜

藥材中各成分相互分散，在藥材煨法加熱炮制過程中相互作用的可能性較小，而浸膏熱分析過程中各成分之間很可能存在相互作用。因此，浸膏熱分析過程與藥材煨法加熱炮制過程成分變化可能差異較大。為使熱分析過程能更好地模擬指導(dǎo)藥材煨法加熱炮制過程，筆者首次提出藥材與藥渣熱譜的差譜概念。將藥材與藥渣的熱重差譜定義為藥材減藥渣失重率（%）隨加熱溫度變化曲線，藥材減藥渣失重率（%）=（藥材失重率－藥渣失重率×藥渣得率）×100%。將藥材與藥渣的差熱差譜定義為藥材減藥渣差熱差（μV/mg）隨加熱溫度變化曲線，藥材減藥渣差熱差（μV/mg）=藥材DTA（μV）/藥材樣質(zhì)量（mg）－藥渣DTA（μV）/藥渣樣質(zhì)量（mg）×藥渣得率。藥材樣品雷公藤與藥渣樣品熱譜的差譜曲線見圖2、圖3。

圖2 雷公藤藥材與藥渣的熱重差譜1.萍鄉(xiāng)雷公藤；2.南昌雷公藤；3.河南雷公藤Fig 2 TG differential spectrum of tripterygium and dregs1.T.wilfordii from Pingxiang；2.T.wilfordii from Nanchang；3.T.wilfordii from Henan

圖3 雷公藤藥材與藥渣的差熱差譜1.萍鄉(xiāng)雷公藤；2.南昌雷公藤；3.河南雷公藤Fig 3 DTA of differential spectrum of tripterygium and dregs1.T.wilfordii from Pingxiang；2.T.wilfordii from Nanchang；3.T.wilfordii from Henan

由圖2、圖3可知，藥材與藥渣的熱重差譜中，100～200℃之間基本為平臺(tái)，藥材比藥渣失重率基本恒定（約6%），可能為藥材與藥渣中水分等揮發(fā)性成分差異導(dǎo)致；約360℃出現(xiàn)最大峰值，應(yīng)為藥材中除藥渣外的成分熱分解導(dǎo)致。藥材與藥渣的差熱差譜中，100～200℃之間藥材與藥渣熱量變化差基本穩(wěn)定，說明藥材中除藥渣外的成分基本未熱分解；約380℃出現(xiàn)最大峰值，應(yīng)為藥材中除藥渣外的成分熱分解導(dǎo)致。從差譜確定雷公藤適宜炮制溫度為200～380℃。

3 討論

雷公藤浸膏的DTG曲線上（299±3）℃特征主峰具有鑒別意義，據(jù)此能夠區(qū)分出雷公藤同屬種東北雷公藤以及其他屬種藤梨根和野葡萄根偽品，但不能區(qū)分出雷公藤同屬種昆明山海棠。昆明山海棠為雷公藤的同屬種，親緣關(guān)系較近，根據(jù)植物親緣關(guān)系越近其化學(xué)成分越相似的原理，昆明山海棠與雷公藤化學(xué)成分相似，相關(guān)文獻(xiàn)［10］也報(bào)道雷公藤和昆明山海棠兩種植物所含的化學(xué)成分基本一致。研究結(jié)果表明，熱分析技術(shù)有利于鑒別化學(xué)成分差別較大的屬種，而對(duì)于化學(xué)成分相似的同屬種區(qū)別可能存在困難和局限性，對(duì)于這種情況，應(yīng)該結(jié)合顯微、薄層色譜和高效液相色譜等技術(shù)進(jìn)一步鑒別。

［1］熊雪婷，許碧蓮.Wnt信號(hào)通路在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)病機(jī)制中的研究進(jìn)展［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)，2014，30（1）：13.

［2］萬歡.中西藥物治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的研究進(jìn)展［J］.實(shí)用心腦肺血管病雜志，2010，18（9）：1 379.

［3］ 郭艷紅，譚墾.雷公藤的毒性及其研究概況［J］.中藥材，2007，30（1）：112.

［4］余洲，姜菊芬，陳燕萍，等.雷公藤片不良反應(yīng)的防治［J］.中國藥房，2010，21（44）：4 223.

［5］王景紅，劉菁華，汪文琪，等.類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎常用藥物及其不良反應(yīng)［J］.中國藥房，2014，25（48）：4 601.

［6］劉平，袁繼麗，倪力強(qiáng).重視中藥的肝損傷問題［J］.中國新藥與臨床雜志，2007，26（5）：388.

［7］姜店春，宋韶錦.建議對(duì)雷公藤類藥材建立質(zhì)量檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，1998，9（4）：58.

［8］康阿龍，龐來祥，湯迎爽.熱分析技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用［J］.中藥材，2001，24（11）：843.

［9］劉建群，高俊博，舒積成，等.微波炮制對(duì)雷公藤毒性及其化學(xué)成分的影響研究［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2014，25（2）：344.

［10］劉建群，張國華，高俊博.一種雷公藤的炮制方法：中國，CN104306426A［P］.2015-01-28.

Study on ThermalAnalysis of Tripterygium wilfordii and Its Counterfeits

LIU Jianqun，YU Zhaofen（Key Laboratory of Modern Preparation of TCM，Ministry of Education，Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine，Nanchang 330004，China）

OBJECTIVE：To provide reference for the identification，processing，processing technology and research for thermal decomposition products.METHODS：Thermogravimetry-derivative thermogravimetry（TG-DTG）and differential thermal-derivative differential thermal（DTA-DDTA）analysis were conducted to scan thermal spectrum of tripterygium from 3 places and T. hypoglaucum，T.regelii，common counterfeits Actinidia arguta and Vitis quinquangularis，determine 7 medicinal materials，its dregs and extractum，and analyze differential spectrum of T.wilfordii and dregs.RESULTS：The TG-DTG and DTA-DDTA thermal spectrum were not only basically similar to each other but also to their dregs.There was a singlet main characteristics peak at about（299±3）℃only in the DTG curves of extracts of tripterygium from 3 places and T.hypoglaucum extractum with similar intensity，while T.regelii，counterfeits A.arguta and V.quinquangularis showed multiple peaks，and（299±3）℃ was not the main peak. CONCLUSIONS：The thermal spectrum can not distinguish tripterygium and its counterfeits；extractum DTG curves can do it；suitable processing temperature of tripterygium was 200-380℃.The study can provide reference for the identification，processing，processing technology and research for thermal decomposition products.

Tripterygium wilfordii；Counterfeit；Thermal analysis；Identification；Processing

R927.2

A

1001-0408（2016）30-4269-03

2015-10-30

2015-12-20）

（編輯：張 靜）

江西省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No.20151BAB205075）

＊教授，博士。研究方向：中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及質(zhì)量評(píng)價(jià)。電話：0791-87119027。E-mail：liu5308@sina.com

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.30.30