西電集團(tuán)醫(yī)院婦產(chǎn)科(西安 710077)

何淑瑩 賈小文 楊 蕾

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下生殖道感染與陰道局部免疫的關(guān)系*

西電集團(tuán)醫(yī)院婦產(chǎn)科(西安 710077)

何淑瑩 賈小文 楊 蕾

目的:探討Th1細(xì)胞因子干擾素-γ( IFN-γ)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-12(IL-12) 和Th2細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)在細(xì)菌性陰道病(BV)和外陰陰道假絲酵母菌病(VVC)患者陰道局部的表達(dá)情況及其檢測(cè)的臨床意義。方法:選擇BV患者、VVC患者和健康女性(對(duì)照組)各 30例，用ELISA 方法檢測(cè)3組對(duì)象陰道后穹隆灌洗液中的細(xì)胞因子的含量。結(jié)果:BV組和VVC組患者陰道灌洗液Th1細(xì)胞因子IFN-γ、 IL-2、IL-12 值明顯低于對(duì)照組(P<0.05)；VVC組IL-2和 IL-12值明顯低于BV組(P<0.05)。結(jié)論:BV和VVC患者陰道局部Th1細(xì)胞因子減少,Th1/Th2失衡,陰道局部免疫功能下降,病原微生物易于繁殖而發(fā)生BV、VVC等下生殖道感染性疾病。

近年來對(duì)于下生殖道感染與陰道局部免疫的研究逐漸成為熱點(diǎn),細(xì)菌性陰道病(BV)和外陰陰道假絲酵母菌病(VVC)是臨床上最常見的下生殖道感染疾病,但是目前準(zhǔn)確的發(fā)病機(jī)制還不清楚[1]。本研究通過檢測(cè)BV 和VVC患者陰道局部Th1細(xì)胞因子干擾素-γ( IFN-γ)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)、白細(xì)胞介素-12(IL-12) 和Th2細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)的含量,探討陰道局部免疫在下生殖道感染發(fā)病機(jī)制中的作用。

資料與方法

1 一般資料 將2014年8～11月在我院婦產(chǎn)科門診就診的下生殖道感染患者及健康體檢結(jié)果陰道菌群正常的婦女(年齡20～45歲)作為研究對(duì)象，根據(jù)陰道分泌物微生態(tài)檢測(cè)結(jié)果分為BV組、VVC組和對(duì)照組，每組各30例。BV組診斷標(biāo)準(zhǔn)：陰道分泌物微生態(tài)檢測(cè)Nugent評(píng)分≥7分；VVC組診斷標(biāo)準(zhǔn)：革蘭染色檢查找到假絲酵母菌的芽生孢子或假菌絲。對(duì)照組：Nugent 評(píng)分≤3 分,密集度Ⅱ～Ⅲ級(jí),多樣性Ⅱ～Ⅲ級(jí),優(yōu)勢(shì)菌為革蘭陽性大桿菌G+b(L),炎性反應(yīng)白細(xì)胞0～5個(gè)/高倍視野,pH值<4.5,H2O2(+)。排除標(biāo)準(zhǔn)：3 d內(nèi)有性生活、有陰道沖洗或陰道放藥者；混合性陰道炎；3個(gè)月內(nèi)服用性激素者；妊娠期及哺乳期婦女；患肝、腎等器質(zhì)性疾病者；糖尿病、血液病患者；長(zhǎng)期使用抗生素、類固醇制劑者；正在參加其他藥物臨床試驗(yàn)者。

2 方 法 標(biāo)本采集:一次性窺器充分暴露陰道,灌洗陰道上段注入5 ml生理鹽水,停留15 s后，再抽出4 ml，加標(biāo)簽后隨即放入-30℃冰箱保存,以備檢測(cè)免疫因子含量。試劑及檢測(cè):試劑采用人IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-4、IL-10 EILSA試劑盒(上海信裕生物科技有限公司)。進(jìn)行檢測(cè)前將所有標(biāo)本取出,放在室溫下緩慢融解后,于離心機(jī)上3000r/min離心5 min,取上清液用于ELISA法檢測(cè)。所有操作步驟按試劑盒說明書進(jìn)行,測(cè)量吸光度(OD值),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，然后將待測(cè)樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即得出樣品的實(shí)際濃度。

結(jié) 果

3組細(xì)胞因子水平比較：見附表。

附表 3組細(xì)胞因子水平比較(pg/ml)

注：與對(duì)照組比較,△P<0.05；與BV組比較,*P<0.05

BV和VVC兩組的Th1細(xì)胞因子IFN-γ、IL-2、IL-12值均明顯低于對(duì)照組(P<0.05)；而兩組Th2細(xì)胞因子IL-4值略高于對(duì)照組,IL-10值略低于對(duì)照組,但差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。BV組和VVC組兩組比較：VVC組IL-2、IL-12值明顯低于BV組(P<0.05)；VVC組IFN-γ值略高于BV組,IL-4、IL-10值略低于BV組,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

討 論

女性生殖道固有的免疫系統(tǒng)是抵御病原體的第一道屏障，包括完整的陰道黏膜上皮及其表面的黏液層組成的物理屏障,酸堿性、補(bǔ)體系統(tǒng)、固有免疫系統(tǒng)的細(xì)胞及生殖道中的抗微生物因子。女性下生殖道是一個(gè)極其復(fù)雜的黏膜微環(huán)境,其結(jié)構(gòu)性組織細(xì)胞、局部免疫細(xì)胞和寄居于陰道的微生物相互作用,并受多種因素的精確調(diào)節(jié)(尤其是性激素)[2]。下生殖道微生物的感染造成黏膜炎癥反應(yīng),局部細(xì)胞因子在免疫反應(yīng)中起著重要的作用并與局部炎癥的發(fā)生息息相關(guān)。近年來研究認(rèn)為,陰道感染與細(xì)胞介導(dǎo)的免疫狀態(tài)有關(guān)[3]。眾多研究均認(rèn)為,下生殖道感染與Th1/ Th2 失衡有關(guān),但眾研究結(jié)果中陰道局部Th1和Th2各細(xì)胞因子的變化不盡相同[4-6],可能與標(biāo)本采集方式或樣本量少有關(guān)。本研究探討在感染狀態(tài)下,陰道局部細(xì)胞免疫功能發(fā)生的變化,結(jié)果顯示,BV和VVC兩組的Th1細(xì)胞因子IFN-γ、IL-2、IL-12值均明顯低于對(duì)照組(P<0.05)；而BV和VVC兩組Th2細(xì)胞因子IL-4、IL-10值與對(duì)照組比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

按免疫調(diào)節(jié)作用將T 淋巴輔助細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子分為 Th1 和Th2 兩類[3]。Th1細(xì)胞分泌IFN-γ、IL-2、IL-12等,Th2細(xì)胞分泌IL-4、IL-10等。Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子不僅決定了每個(gè)亞群的免疫效應(yīng)功能,還調(diào)控整個(gè)亞群的形成和擴(kuò)增[7]。Th1細(xì)胞的主要效應(yīng)功能是增強(qiáng)吞噬細(xì)胞介導(dǎo)的抗感染免疫,特別是抗胞內(nèi)病原體的感染[7]。IL-2 是 Th1 細(xì)胞的代表細(xì)胞因子,反映了機(jī)體的細(xì)胞免疫功能[8]。IFN-γ活化吞噬細(xì)胞,增強(qiáng)其殺傷已被吞噬的病原體的能力。IFN-γ還能促進(jìn)IgG生成,IgG可通過調(diào)理作用和激活補(bǔ)體系統(tǒng)促進(jìn)吞噬細(xì)胞的吞噬和殺傷功能[7]。IL-12刺激活化的T細(xì)胞和NK細(xì)胞的增值,增加其細(xì)胞毒作用,促進(jìn)IFN-γ等細(xì)胞因子的產(chǎn)生；IFN-γ能促使T細(xì)胞向Th1細(xì)胞分化。IL-12 在感染性疾病發(fā)生、發(fā)展中也具有重要作用, IL-12 已成為機(jī)體抵御細(xì)菌及胞內(nèi)寄生蟲感染必不可少的因子[9]。Th2 細(xì)胞分泌 IL-4、IL-10 等細(xì)胞因子可促進(jìn)B 細(xì)胞的增值、分化和抗體形成,主要作用是誘導(dǎo)和促進(jìn) B 細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答[7]。IL-4主要由T細(xì)胞產(chǎn)生,能促進(jìn)Th0細(xì)胞向Th2細(xì)胞的分化，抑制其向Th1分化。IL-10 主要生物學(xué)功能是限制和終止炎癥反應(yīng),調(diào)控免疫細(xì)胞的分化和增殖[10]。在BV及VVC狀態(tài)下陰道局部Th1細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ、IL-12濃度下降,提示Th1介導(dǎo)陰道局部細(xì)胞免疫受到抑制，陰道活化及產(chǎn)生細(xì)胞因子的能力減弱，活化吞噬細(xì)胞的能力降低,使得其殺傷已被吞噬的病原體的能力減弱，機(jī)體細(xì)胞免疫功能低下,病原微生物易于在下生殖道繁殖,致使產(chǎn)生炎癥反應(yīng)。而陰道局部Th2細(xì)胞因子IL-4、IL-12無明顯變化，提示Th2介導(dǎo)體液免疫與下生殖道感染關(guān)系不明顯。本研究還顯示，VVC組Th1細(xì)胞因子IL-2、IFN-γ、IL-12濃度明顯低于BV組,提示VVC患者陰道局部免疫功能受抑制更為明顯。

綜上所述,BV、 VVC等下生殖道感染的發(fā)生與陰道局部免疫功能紊亂密切相關(guān),Th1細(xì)胞因子減少,Th2細(xì)胞因子無明顯變化,破壞了Th1/ Th2原有的平衡,機(jī)體免疫下降,病原微生物繁殖而發(fā)病。因此,積極改善陰道局部免疫狀態(tài),維護(hù)陰道微生態(tài)和免疫功能的正常,對(duì)預(yù)防和治療下生殖道感染疾病有重要意義。

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(收稿：2016-04-27)

*西安市衛(wèi)生局科研項(xiàng)目(2013056)

生殖道感染 陰道 細(xì)胞因子類

R711.31

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2016.10.009