程樹(shù)林，余文博，周文浩，龔志勇

（川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科，四川 南充 637000）

嗜鉻粒蛋白A與去勢(shì)抵抗性前列腺癌的相關(guān)性研究

程樹(shù)林，余文博，周文浩，龔志勇

（川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院泌尿外科，四川 南充 637000）

目的探討嗜鉻粒蛋白A（CgA）與去勢(shì)抵抗性前列腺癌（CR PC）的相關(guān)性。方法選取2011年1月-2012年8月于川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院經(jīng)前列腺穿刺活檢證實(shí)為前列腺癌的75例組織標(biāo)本，以免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)CgA在穿刺標(biāo)本中的表達(dá)情況，分析CgA表達(dá)率與前列腺癌各臨床病理參數(shù)的關(guān)系，并比較CgA表達(dá)陽(yáng)性組與陰性組發(fā)展至CR PC的差異。結(jié)果75例前列腺癌穿刺標(biāo)本中，36例CgA表達(dá)陽(yáng)性（48.0%）。CgA的表達(dá)與PSA水平、Gleason評(píng)分以及臨床分期有關(guān)（P<0.05），CgA陽(yáng)性組發(fā)展至CR PC的發(fā)生率明顯高于CgA陰性組（P<0.01）。結(jié)論CgA與CR PC的發(fā)生密切相關(guān)。監(jiān)測(cè)CgA的表達(dá)情況，對(duì)前列腺癌的內(nèi)分泌治療效果的預(yù)測(cè)可能有一定的臨床指導(dǎo)意義。

前列腺癌；嗜鉻粒蛋白A；去勢(shì)抵抗；神經(jīng)內(nèi)分泌分化

在歐美地區(qū)，前列腺癌（prostate cancer，PCa)已成為威脅男性健康的第一大惡性腫瘤。近年來(lái)，我國(guó)前列腺癌的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)[1]。由于早期前列腺癌缺乏典型臨床表現(xiàn)，部分患者就診時(shí)已失去根治性治療的機(jī)會(huì)，或者因年齡較大、合并心肺疾病等因素導(dǎo)致根治性治療風(fēng)險(xiǎn)較大，需要選擇去勢(shì)治療。但多數(shù)患者在2～3年后發(fā)展為去勢(shì)抵抗性前列腺癌（castration resistant prostate cancer，CRPC）[2]。目前的研究認(rèn)為，CRPC的發(fā)生可能與前列腺癌的神經(jīng)內(nèi)分泌分化（neuroendocrine differentiation，NED）和雄激素受體等因素有關(guān)[3]。

嗜鉻粒蛋白A（CgA）是判斷NED最敏感的標(biāo)記物，本研究采用免疫組化方法，檢測(cè)75例穿刺活檢的前列腺癌組織中CgA的表達(dá)情況，以探討前列腺癌CgA表達(dá)率與PCa各臨床病理參數(shù)及CRPC發(fā)生的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1臨床資料

選取2011年1月-2012年8月于川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院前列腺穿刺活檢證實(shí)為前列腺癌的75例組織標(biāo)本，所有患者均有完整詳細(xì)的臨床隨訪資料?；颊吣挲g61～79歲，中位年齡72歲；活檢前前列腺特異性抗原（prostate specific antigen，PSA）水平15～1200ng/ml，平均125ng/ml。所有患者均選擇了最大限度雄激素阻斷治療（包括手術(shù)去勢(shì)58例和藥物去勢(shì)治療17例）。由于多數(shù)患者在治療2～3年后發(fā)展至CRPC[2]，因此，本次研究以3年為隨訪期限，共有32例發(fā)展至CRPC。

1.2免疫組織化學(xué)法染色

兔抗人單克隆抗體嗜鉻粒蛋（Chromogranin A，CgA）購(gòu)自Santa Cruz公司，LSAB試劑盒購(gòu)自博士德公司。主要實(shí)驗(yàn)步驟：石蠟包埋組織，5μm連續(xù)切片，HE染色復(fù)查。石蠟切片脫蠟、水洗、抗原修復(fù)、羊血清封閉、滴加一抗、PBS漂洗、滴加二抗（室溫孵育）、DAB顯色、蘇木精染色、中性樹(shù)膠封片。查閱文獻(xiàn)[4]，用PBS代替一抗作陰性對(duì)照，正常胰腺組織胰島細(xì)胞為神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞，恒定表達(dá)CgA，因此作陽(yáng)性細(xì)胞對(duì)照組。免疫組織化學(xué)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：CgA的陽(yáng)性表達(dá)為棕黃色顆粒，主要位于細(xì)胞漿中。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，分析CgA表達(dá)率與PCa各臨床病理參數(shù)的關(guān)系，并比較CgA表達(dá)陽(yáng)性組與陰性組發(fā)展至CRPC的差異。用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1免疫組織化學(xué)染色結(jié)果

在前列腺癌組織中，CgA陽(yáng)性表達(dá)主要位于細(xì)胞漿中，鏡下觀察到棕黃色顆粒為陽(yáng)性表達(dá)（見(jiàn)圖1）。在本組75例前列腺癌中，有36例腫瘤標(biāo)本呈CgA陽(yáng)性表達(dá)（見(jiàn)圖2），陽(yáng)性率為48.0%。

圖1　CgA在前列腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)（×400）

圖2　正常胰腺組織胰島細(xì)胞CgA陽(yáng)性（×200）

2.2CgA與PCa患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系

從表1可見(jiàn)，CgA的表達(dá)與PSA水平、Gleason評(píng)分以及臨床分期有關(guān)，PSA及Gleason評(píng)分更高組或臨床分期較晚組的CgA陽(yáng)性表達(dá)率更高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但與年齡分段比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

表1　CgA與PCa患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.3CgA與CRPC發(fā)生的相關(guān)性

在本組36例CgA表達(dá)陽(yáng)性病例中共有24例發(fā)展為CRPC，39例CgA陰性表達(dá)病例中，8例發(fā)展為CRPC。CgA陽(yáng)性組發(fā)展為CRPC的發(fā)生率明顯高于CgA陰性組（P<0.01，見(jiàn)表2），而且兩變量間Pearson列聯(lián)系數(shù)為0.423，提示前列腺癌CgA陽(yáng)性與CRPC的發(fā)生具有相關(guān)性。

表2　CgA與CRPC的相互關(guān)系

3 討論

正常的前列腺組織中存在著幾種類型的上皮細(xì)胞，包括神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞、基底細(xì)胞和腔分泌細(xì)胞。神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞因?yàn)榫哂袃?nèi)分泌和神經(jīng)功能而得名，通過(guò)自分泌和旁分泌作用于正常前列腺腺泡和管腔，對(duì)前列腺上皮生長(zhǎng)、分化發(fā)揮著重要作用[5]。研究者發(fā)現(xiàn)，幾乎所有的前列腺癌均存在不同程度的NED細(xì)胞。前列腺癌的神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞致密核心胞質(zhì)顆粒儲(chǔ)存著肽類激素和前激素，如CgA、NSE及Syn等[6-8]。

CgA是一種分子量為68 kD的酸性糖蛋白，最初從牛腎上腺髓質(zhì)嗜鉻顆粒中提取，幾乎所有的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤中均可檢測(cè)到CgA，它可以調(diào)節(jié)激素的分泌，從而影響腫瘤的發(fā)展。CgA是前列腺癌組織中神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞最敏感的標(biāo)記物，高達(dá)84%[9]。本研究結(jié)果顯示，CgA的表達(dá)與PSA水平、Gleason評(píng)分以及臨床分期有關(guān)，與ATHER的觀點(diǎn)一致，進(jìn)一步證實(shí)前列腺癌的神經(jīng)內(nèi)分泌分化與PCa的進(jìn)展及患者的不良預(yù)后有關(guān)[10]。

同時(shí)，前列腺癌NED細(xì)胞可能通過(guò)旁分泌、自分泌作用促進(jìn)腫瘤細(xì)胞去勢(shì)抵抗性增殖[11]。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察期內(nèi)CgA陽(yáng)性組發(fā)展為CRPC的發(fā)生率明顯高于CgA陰性組，提示前列腺癌CgA的表達(dá)與CRPC的發(fā)生具有相關(guān)性。監(jiān)測(cè)CgA的表達(dá)情況，可能對(duì)前列腺癌的內(nèi)分泌治療效果的預(yù)測(cè)有一定的臨床指導(dǎo)意義。

本組例數(shù)較少，隨訪時(shí)間短，進(jìn)一步的研究需加大病例數(shù)和延長(zhǎng)隨訪時(shí)間。同時(shí)，發(fā)展為CRPC后再次行前列腺穿刺并檢測(cè)CgA，與治療初CgA是否陽(yáng)性或染色強(qiáng)度是否增加進(jìn)行比較，結(jié)果可能更有說(shuō)服力。

[1]韓蘇軍,張思維,陳萬(wàn)青,等.中國(guó)前列腺癌發(fā)病現(xiàn)狀和流行趨勢(shì)分析[J].臨床腫瘤學(xué)雜志,2013,18(4):330-334.

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（張西倩編輯）

Study on correlation between chromogranin A and castration resistant prostate cancer

Shu-lin Cheng，Wen-bo Yu，Wen-hao Zhou，Zhi-yong Gong
（Department of Urology，Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College，Nanchong，Sichuan 637000，China）

Objective To investigate the relationship between chromogranin A（CgA）and castration resistant prostate cancer（CRPC）.MethodsA total of 75 cases of prostate cancer specimens were stained by immunohistochemistry，and the relationship between CgA expression and CRPC were analyzed.Results Among 75 cases，36 cases were CgA positive（48.0%）.CgA expression was significantly associated with Gleason score，serum prostate specific antigen and disease stage（P＜0.05）.The incidence of CRPC in CgA positive group was significantly higher than that in CgA negative group（P＜0.05）.Conclusions The results suggest that CgA is associated with CRPC.Monitoring the expression of CgA may be helpful for the treatment of prostate cancer patients who receive endocrine therapy.

prostate cancer；Chromoanin A；castration resistant prostate cancer；neuroendocrine differentiation

R 737.14

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2016.20.006

1005-8982（2016）20-0027-03

2016-02-10

龔志勇，E-mail：gzy0404@sina.cn，Tel：13990717621