曾　帥,周德慶,劉　楠,*

(1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所,山東青島 266071；2.上海海洋大學(xué)食品學(xué)院,上海 201306;)

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幾種因素對(duì)大孔樹脂純化羊棲菜多酚效果的影響

曾帥1,2,周德慶1,劉楠1,*

(1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所,山東青島 266071；2.上海海洋大學(xué)食品學(xué)院,上海 201306;)

以新鮮羊棲菜為研究對(duì)象,比較4種大孔吸附樹脂對(duì)羊棲菜多酚的吸附與解吸效果,篩選出其中最適合分離純化羊棲菜多酚的大孔吸附樹脂。研究了pH、流速、樣品濃度、洗脫劑濃度4種因素對(duì)大孔吸附樹脂純化羊棲菜多酚的影響。結(jié)果表明,AB-8型大孔吸附樹脂對(duì)羊棲菜多酚吸附率和解吸率最高,在條件為pH 5,吸附流速1.5 BV/h,樣品濃度70 μg/mL，洗脫劑乙醇濃度70%,洗脫流速1.5 BV/h及洗脫劑用量90 mL下,經(jīng)樹脂純化后的羊棲菜多酚含量從溶劑萃取初步分離的31.24%提高至62.15%。

大孔吸附樹脂,純化,羊棲菜,多酚

羊棲菜(Sargassumfusiforme),也稱玉海草、鹿角尖等,屬褐藻門。羊棲菜富含多種功能性物質(zhì),如褐藻酸、多酚類化合物、甘露醇、褐藻多糖硫酸酯、維生素、碘、β-胡蘿卜素和牛磺酸等[1],日本稱其為“長(zhǎng)壽菜”,用它為原料來開發(fā)保健品、調(diào)味品及方便食品等多種產(chǎn)品[2],具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

近年來,葡萄多酚和茶多酚等多酚類物質(zhì)受到廣泛關(guān)注[3],而對(duì)羊棲菜多酚的研究中,存在多酚提取量較低、粗提液中多酚純度不高等問題,影響羊棲菜多酚在食品、醫(yī)療及化妝品等領(lǐng)域的應(yīng)用。羊棲菜多酚是一類重要的褐藻多酚化合物,褐藻多酚對(duì)自由基有較顯著的清除能力[4],可以作為天然的抗氧化劑與自由基清除劑應(yīng)用于醫(yī)藥、化妝品及保健食品等領(lǐng)域[5]。此外,現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明,褐藻多酚還具有化學(xué)防御[6]、抑菌[7]、抗凝血[8]、延緩衰老[9]、抗高血糖[10]、抗腫瘤[11]及促進(jìn)睡眠[12]等多種生物活性功能。開展優(yōu)化羊棲菜多酚分離純化工藝研究對(duì)擴(kuò)大其在食用、藥用和保健等方面的應(yīng)用具有重要意義。

溶劑萃取法和沉淀分離法作為傳統(tǒng)的植物多酚分離純化方法,存在一些不足,如成本高,純化純度較低等[13]。大孔吸附樹脂具有諸多優(yōu)點(diǎn),如選擇性強(qiáng)[14]、穩(wěn)定性高、吸附容量大[15]、吸附條件溫和、純化純度較高及再生簡(jiǎn)便[16]等,能彌補(bǔ)這些不足。近年來,大孔吸附樹脂越來越廣泛應(yīng)用于動(dòng)植物原料中活性物質(zhì)的分離純化。

本研究先對(duì)羊棲菜多酚進(jìn)行溶劑萃取初步分離,然后再選用4種大孔吸附樹脂對(duì)羊棲菜多酚進(jìn)行進(jìn)一步純化,能避免樹脂因雜質(zhì)較多而出現(xiàn)堵塞及污染等問題,提高多酚的純化效率。篩選出其中最適合分離純化羊棲菜多酚的大孔吸附樹脂,通過動(dòng)態(tài)吸附和解吸實(shí)驗(yàn)研究pH、流速、樣品濃度、洗脫劑濃度等幾種因素對(duì)大孔吸附樹脂純化羊棲菜多酚的影響,為羊棲菜多酚的分離純化應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐中提供一定的數(shù)據(jù)參考。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

新鮮羊棲菜浙江省溫州市洞頭縣樂雁美食坊公司;AB-8 大孔吸附樹脂天津南開大學(xué)化工廠;DA-201大孔吸附樹脂天津市海光化工有限公司;HP-20大孔吸附樹脂日本三菱化學(xué)株式會(huì)社;D141大孔吸附樹脂成都中蘭晨光化工研究院;Folin-Ciocalteau試劑上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司;沒食子酸等國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

HW·SY21-K恒溫水浴鍋北京長(zhǎng)風(fēng)儀器儀表公司;KQ-300VDE電子天平北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;T6新悅-可見分光光度計(jì)北京普析通用儀器有限公司;RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上海亞榮生化儀器廠;TYS-200高速多功能粉碎機(jī)浙江省永康市紅太陽(yáng)機(jī)電有限公司;STARTER3100 pH計(jì)奧豪斯儀器有限公司。

1.2樣品處理

將新鮮羊棲菜在自然條件下風(fēng)干,然后經(jīng)粉碎再過40目篩,得到的羊棲菜粉末含水量為3.6%±0.02%(干基),存放于4 ℃冰箱備用。

1.3羊棲菜多酚含量的測(cè)定

以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品,采用福林酚法[17]繪制羊棲菜多酚含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算羊棲菜多酚含量。

1.4羊棲菜多酚樣品的制備

準(zhǔn)確稱取1.0000 g羊棲菜粉于帶塞三角瓶中,用體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇溶液以1∶55 g·mL-1料液比在70 ℃下水浴4.5 h,浸提2次,得到羊棲菜多酚粗提物,在45 ℃下減壓旋蒸,得褐色膏狀物,取羊棲菜多酚樣品浸膏20 g,溶于100 mL去離子水中,按1∶1(V/V)分別通過正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取[14],得到各自溶劑萃取液,在45 ℃下減壓蒸干,使其含水量與羊棲菜粉末樣品一致,然后稱其質(zhì)量,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算各自羊棲菜多酚含量,用萃取效果最佳的溶劑對(duì)羊棲菜多酚粗提物進(jìn)行初步分離,將得到的羊棲菜多酚膏狀物用去離子水溶解,作為樣品液。

1.5大孔吸附樹脂預(yù)處理

用無水乙醇將4種大孔吸附樹脂浸泡24 h,然后用去離子水進(jìn)行反復(fù)清洗,直至無白色混濁現(xiàn)象,并無乙醇味。再進(jìn)行酸堿處理,依次加入4倍體積5% HCl、去離子水和5% NaOH浸泡3 h后,用去離子水沖洗至中性。

1.6大孔吸附樹脂的篩選

稱取經(jīng)預(yù)處理的AB-8、DA-201、HP-20及D141四種大孔吸附樹脂各1 g,分別加入錐形瓶中,分別加入50 mL一定質(zhì)量濃度C0(μg/mL)經(jīng)萃取分離的羊棲菜多酚樣品液。在25 ℃下水浴振蕩24 h,測(cè)定上清液中羊棲菜多酚質(zhì)量濃度Ce(μg/mL)。過濾得到的吸附樹脂,用去離子水洗滌兩次,再裝入加有50 mL無水乙醇的錐形瓶中。在相同的條件下進(jìn)行樹脂解吸,測(cè)定解吸液中羊棲菜多酚的質(zhì)量濃度Cd(μg/mL)。

根據(jù)以下公式計(jì)算4種大孔吸附樹脂對(duì)羊棲菜多酚的吸附量、吸附率及解吸率,從而篩選出最合適的大孔吸附樹脂。

吸附量(μg/g)=(C0-Ce)×V0/m

(1)

吸附率(%)=(C0-Ce)/C0×100

(2)

解吸率(%)=Cd/(C0-Ce)×100

(3)

式中,C0:經(jīng)初步分離的羊棲菜多酚樣品液初始質(zhì)量濃度,μg/mL;Ce:樹脂吸附平衡時(shí)樣品液中羊棲菜多酚的質(zhì)量濃度,μg/mL;Cd:樹脂解吸后解吸液中羊棲菜多酚的質(zhì)量濃度,μg/mL;V0:羊棲菜多酚樣品液的體積,mL;m:樹脂質(zhì)量,g。

1.7羊棲菜多酚的靜態(tài)吸附曲線

采用SPSS22.0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。計(jì)數(shù)資料用以卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料用以t值檢驗(yàn)，以P＜0.05判定組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

稱取1 g篩選的最合適樹脂于錐形瓶中,加入50 mL 50 μg/mL經(jīng)初步分離的羊棲菜多酚樣品液,在25 ℃下水浴振蕩吸附,分別在2、4、6、8、10、12和24 h取上清液,測(cè)羊棲菜多酚質(zhì)量濃度,用公式(1)計(jì)算吸附量,繪制對(duì)羊棲菜多酚的樹脂靜態(tài)吸附曲線。

1.8幾種因素對(duì)羊棲菜多酚純化效果影響研究

1.8.1pH對(duì)樹脂吸附羊棲菜多酚的影響用0.5 mol/L HCl溶液和0.5 mol/L NaOH溶液將50 mL 50 μg/mL經(jīng)初步分離的羊棲菜多酚樣品液調(diào)成不同的pH(3、4、5、6、7、8、9),以1.0 BV/h的速度過柱(以20 mL的篩選最適樹脂濕法上柱),測(cè)定過柱后樣品液中羊棲菜多酚質(zhì)量濃度,按照公式(2)計(jì)算吸附率。

1.8.2吸附流速對(duì)樹脂吸附羊棲菜多酚的影響用0.5 mol/L HCl溶液將50 mL 50 μg/mL經(jīng)初步分離的羊棲菜多酚樣品液調(diào)pH為5,分別以0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5和4.0 BV/h過柱,測(cè)定過柱后樣品液中羊棲菜多酚質(zhì)量濃度,按照公式(2)計(jì)算吸附率。

1.8.3樣品液濃度對(duì)樹脂吸附羊棲菜多酚的影響用0.5 mol/L HCl溶液將50 mL不同質(zhì)量濃度(50、60、70、80、90、100、110 μg/mL)經(jīng)初步分離的羊棲菜多酚樣品液調(diào)pH為5,以1.5 BV/h過柱,測(cè)定過柱后樣品液中羊棲菜多酚質(zhì)量濃度,按照公式(2)計(jì)算吸附率。

1.8.4洗脫劑濃度對(duì)樹脂解吸羊棲菜多酚的影響用0.5 mol/L HCl溶液將50 mL 70 μg/mL經(jīng)初步分離的羊棲菜多酚樣品液調(diào)pH為5,以1.5 BV/h過柱,測(cè)定過柱后樣品液中羊棲菜多酚質(zhì)量濃度。將柱中的吸附樹脂轉(zhuǎn)入錐形瓶中,分別加入50 mL 60%、70%、80%及90%的乙醇溶液,于25 ℃下水浴振蕩解吸,并在2、4、6、8、10、12和24 h取解吸液,測(cè)定羊棲菜多酚質(zhì)量濃度。

1.8.5洗脫流速對(duì)樹脂解吸羊棲菜多酚的影響用0.5 mol/L HCl溶液將50 mL 70 μg/mL經(jīng)初步分離的羊棲菜多酚樣品液調(diào)pH為5,以1.5 BV/h過柱,測(cè)定過柱后樣品液中羊棲菜多酚質(zhì)量濃度。再用50 mL 70%的乙醇溶液分別以0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5和4.0 BV/h過柱進(jìn)行解吸,測(cè)定解吸液中羊棲菜多酚的質(zhì)量濃度,根據(jù)公式(3)計(jì)算解吸率。

1.9數(shù)據(jù)處理

采用Excel和SPSS 17.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行作圖分析和統(tǒng)計(jì)分析,定義p<0.05時(shí)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果與分析

2.1羊棲菜多酚含量的測(cè)定

以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品,采用福林酚法繪制羊棲菜多酚含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為:Y=0.0161X+0.014,R2=0.9997,表明線性關(guān)系良好。

2.2羊棲菜多酚樣品的制備

采用溶劑萃取對(duì)羊棲菜多酚粗提物進(jìn)行初步分離,除去一些大分子蛋白及其他雜質(zhì),得到相對(duì)較為純凈的羊棲菜多酚樣品,避免下一步純化中樹脂因雜質(zhì)較多而出現(xiàn)堵塞及污染等問題,提高多酚的純化效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。

由圖1可知,羊棲菜多酚粗提物分別經(jīng)四種溶劑萃取后,乙酸乙酯相中多酚含量最多,達(dá)到31.24%,根據(jù)相似相溶原理,溶劑乙酸乙酯更適合萃取羊棲菜多酚。因此,以乙酸乙酯萃取相中的羊棲菜多酚作為下一步樹脂分離純化的樣品。

圖1　溶劑分別萃取后各相質(zhì)量及多酚含量測(cè)定結(jié)果Fig.1　Each phase quality after solvent extraction respectively and polyphenols content determination results注:圖中所標(biāo)不同字母表示相互之間差異顯著(p<0.05),相同字母表示差異不顯著(p>0.05)。圖2同。

2.3大孔吸附樹脂的篩選

不同大孔吸附樹脂的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)有所差異,因此吸附分離的效果也不一樣。AB-8、DA-201、HP-20及D141四種大孔吸附樹脂對(duì)羊棲菜多酚的吸附與解吸效果如圖2所示。

大孔吸附樹脂對(duì)目標(biāo)物質(zhì)的吸附與解吸效果由極性、結(jié)構(gòu)和比表面積等多種因素綜合決定。由圖2可知,AB-8吸附樹脂對(duì)羊棲菜多酚的吸附率和解吸率均高于其他三種樹脂,可能是因?yàn)锳B-8吸附樹脂同羊棲菜多酚的極性較為接近,且具有適合的表面結(jié)構(gòu)和較高的比表面積,因此選擇AB-8吸附樹脂對(duì)羊棲菜多酚進(jìn)行進(jìn)一步的純化。

圖2　4種大孔吸附樹脂對(duì)羊棲菜多酚吸附與解吸效果Fig.2　Adsorption and desorption effect of four kindsmacroporous adsorption resin to Sargassum fusiforme polyphenols注:圖中大寫字母表示吸附率差異性,小寫字母表示解吸率差異性。

2.4羊棲菜多酚的靜態(tài)吸附曲線

由圖3可知,AB-8樹脂對(duì)羊棲菜多酚的吸附具有一定的時(shí)間依賴性。0～8 h內(nèi)AB-8吸附樹脂對(duì)羊棲菜多酚的吸附量隨時(shí)間增加而增大,0～2 h和6～8 h吸附曲線上升明顯,其中6～8 h吸附速度仍較快,表明AB-8樹脂在吸附量較高時(shí)并不是理想的單分子層,可能是因?yàn)檠驐硕喾又械姆恿u基和苯環(huán)結(jié)構(gòu)使其能夠以氫鍵和疏水鍵發(fā)生分子間締合,因此AB-8樹脂對(duì)羊棲菜多酚的吸附量有所增加。8 h后吸附量緩慢上升,12 h達(dá)到較為穩(wěn)定的狀態(tài),表明基本達(dá)到吸附平衡。

圖3　AB-8吸附樹脂對(duì)羊棲菜多酚的靜態(tài)吸附曲線Fig.3　AB-8 adsorption resin for Sargassum fusiforme polyphenols static adsorption curve

2.5幾種因素對(duì)羊棲菜多酚純化效果影響研究

2.5.1pH對(duì)AB-8樹脂吸附羊棲菜多酚的影響pH不同,溶液中化合物的電離狀態(tài)也不同,一般情況下,分子狀態(tài)的吸附質(zhì)在吸附過程中更易于被吸附劑吸附。羊棲菜多酚樣品液pH對(duì)AB-8樹脂吸附羊棲菜多酚的影響如圖4所示。

由圖4可知,當(dāng)羊棲菜多酚樣品液pH在3～5之間,AB-8樹脂對(duì)羊棲菜多酚的吸附率緩慢上升,可能是由于羊棲菜多酚具有酚羥基結(jié)構(gòu),顯弱酸性,在弱酸性環(huán)境中以分子狀態(tài)存在,因此吸附效果較好。而當(dāng)羊棲菜多酚樣品液pH大于5后,吸附率呈下降趨勢(shì),可能是因?yàn)閜H升高促進(jìn)鹽結(jié)構(gòu)的形成,不利于吸附。所以選擇5作為樹脂吸附羊棲菜多酚最合適的pH。

圖4　樣品液pH對(duì)AB-8樹脂吸附羊棲菜多酚的影響Fig.4　The effect of sample liquid pH for AB-8 resin adsorption Sargassum fusiforme polyphenols

2.5.2吸附流速對(duì)AB-8樹脂吸附羊棲菜多酚的影響由圖5可知,樣品液吸附流速越慢,吸附效果越好,其中在0.5、1.0和1.5 BV/h吸附流速下,AB-8樹脂對(duì)羊棲菜多酚的吸附率都在80%以上,而當(dāng)吸附流速超過2.0 BV/h,吸附率下降較明顯,因?yàn)榱魉龠^快,樹脂來不及完全吸附樣品液中的羊棲菜多酚。吸附流速慢有利于樣品溶液中的羊棲菜多酚在AB-8樹脂床中充分?jǐn)U散和吸附,但流速太慢會(huì)延長(zhǎng)生產(chǎn)周期,因?yàn)闃渲搀w積為20 mL,樣品液體積為50 mL,當(dāng)吸附流速為1.0 BV/h,吸附時(shí)間便會(huì)比1.5 BV/h的吸附時(shí)間延長(zhǎng)50 min;當(dāng)吸附流速為0.5 BV/h,吸附時(shí)間便會(huì)比1.5 BV/h的吸附時(shí)間延長(zhǎng)200 min。綜合考慮選擇1.5 BV/h的吸附流速。

圖5　吸附流速對(duì)AB-8樹脂吸附羊棲菜多酚的影響Fig.5　The effect of adsorption velocity for AB-8 resin adsorption Sargassum fusiforme polyphenols

2.5.3樣品濃度對(duì)AB-8樹脂吸附羊棲菜多酚的影響由圖6可知,AB-8樹脂對(duì)羊棲菜多酚的吸附具有一定的濃度依賴性。隨著羊棲菜多酚樣品濃度的增大,AB-8樹脂對(duì)羊棲菜多酚的吸附率也隨之提高,當(dāng)樣品液濃度為70 μg/mL時(shí),吸附率達(dá)到最大。繼續(xù)增大樣品液濃度,吸附率呈逐漸下降趨勢(shì),因?yàn)殡S著樣品液濃度的增大,與其競(jìng)爭(zhēng)吸附的雜質(zhì)也增多,多酚在樹脂內(nèi)部的擴(kuò)散能力會(huì)隨之降低,并且樣品液濃度過高時(shí),會(huì)出現(xiàn)些許絮狀物或沉淀,導(dǎo)致樹脂一定程度的堵塞,吸附能力下降。因此,在后續(xù)的吸附實(shí)驗(yàn)中,選擇70 μg/mL作為羊棲菜多酚樣品液濃度。

圖6　樣品濃度對(duì)AB-8樹脂吸附羊棲菜多酚的影響Fig.6　The effect of sample concentration for AB-8 resin adsorption Sargassum fusiforme polyphenols

2.5.4洗脫劑濃度對(duì)AB-8樹脂解吸羊棲菜多酚的影響由圖7可知,四種濃度的乙醇洗脫液對(duì)AB-8吸附樹脂的解吸趨勢(shì)大致相同,70%乙醇解吸液中羊棲菜多酚濃度最高,解吸效果最好,可能是由于不同體積分?jǐn)?shù)的乙醇溶液,極性大小不同,而70%乙醇的極性與羊棲菜多酚極性較為相近。60%乙醇解吸液中羊棲菜多酚濃度最低,80%和90%乙醇溶液對(duì)AB-8樹脂解吸羊棲菜多酚的影響幾乎一致,故選擇70%為洗脫劑濃度。

圖7　乙醇濃度對(duì)AB-8樹脂解吸羊棲菜多酚的影響Fig.7　The effect of ethanol concentration for AB-8 resindesorption Sargassum fusiforme polyphenols

2.5.5洗脫流速對(duì)AB-8樹脂解吸羊棲菜多酚的影響由圖8可知,洗脫流速越大,AB-8樹脂對(duì)羊棲菜多酚的解吸率越低,尤其在洗脫流速大于2.0 BV/h后,解吸率下降更為明顯。當(dāng)洗脫流速為0.5、1.0和1.5 BV/h時(shí),解吸率比較接近,且均在90%以上,但流速太慢會(huì)延長(zhǎng)生產(chǎn)周期,因?yàn)闃渲搀w積為20 mL,若洗脫液體積為50 mL,當(dāng)洗脫流速為1.0 BV/h,洗脫時(shí)間便會(huì)比1.5 BV/h的洗脫時(shí)間延長(zhǎng)50 min;當(dāng)洗脫流速為0.5 BV/h,洗脫時(shí)間便會(huì)比1.5 BV/h的洗脫時(shí)間延長(zhǎng)200 min。綜合考慮時(shí)間與解吸率因素,選擇1.5 BV/h的洗脫流速較為合適。

圖8　洗脫流速對(duì)AB-8樹脂解吸羊棲菜多酚的影響Fig.8　The effect of elution velocity for AB-8 resin desorption Sargassum fusiforme polyphenols

2.5.6洗脫劑用量對(duì)AB-8樹脂解吸羊棲菜多酚的影響由圖9可知,10～70 mL洗脫液中的多酚含量較高,當(dāng)洗脫劑乙醇溶液用量達(dá)到40 mL時(shí),AB-8樹脂中羊棲菜多酚開始被大量洗脫下來,當(dāng)洗脫劑用量達(dá)到90 mL時(shí),洗脫液中羊棲菜多酚濃度已接近零,可認(rèn)為已經(jīng)基本洗脫完全,無拖尾現(xiàn)象。因此,用90 mL乙醇溶液進(jìn)行洗脫最合適。

圖9　洗脫劑用量對(duì)AB-8樹脂解吸羊棲菜多酚的影響Fig.9　The effect of eluent dosage for AB-8 resin desorption Sargassum fusiforme polyphenols

2.6純化后羊棲菜多酚含量的測(cè)定

在上述最佳吸附和解吸條件下,用AB-8吸附樹脂對(duì)經(jīng)初步分離的羊棲菜多酚樣品液進(jìn)行分離純化,收集前90 mL洗脫液,在45 ℃下減壓旋蒸,得褐色膏狀物,使其含水量與羊棲菜粉末樣品一致,然后稱其質(zhì)量,按照1.3的方法對(duì)羊棲菜多酚含量進(jìn)行測(cè)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示。

由表1可知,經(jīng)AB-8吸附樹脂純化后的羊棲菜多酚含量達(dá)到62.15%,而溶劑萃取初步分離后羊棲菜多酚含量?jī)H為31.24%,有明顯提高。

表1　AB-8吸附樹脂對(duì)羊棲菜多酚的分離純化效果

3　結(jié)論

通過比較4種大孔吸附樹脂對(duì)羊棲菜多酚的吸附與解吸效果,篩選出AB-8型吸附樹脂為最適合分離純化羊棲菜多酚的大孔吸附樹脂。通過動(dòng)態(tài)吸附和解吸實(shí)驗(yàn)研究了幾種因素對(duì)大孔吸附樹脂純化羊棲菜多酚的影響,得出最佳動(dòng)態(tài)吸附條件為pH5,吸附流速1.5 BV/h,樣品液濃度70 μg/mL;最佳動(dòng)態(tài)洗脫條件為洗脫劑乙醇濃度70%,洗脫流速1.5 BV/h及洗脫劑用量90 mL。在最優(yōu)條件下,經(jīng)AB-8樹脂吸附分離得到的樣品中,羊棲菜多酚含量從溶劑萃取初步分離的31.24%提高至62.15%,具有較好的工業(yè)生產(chǎn)應(yīng)用價(jià)值。

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Factors affecting polyphenol purification of macroporous resin fromSargassumfusiforme

ZENG Shuai1,2,ZHOU De-qing1,LIU Nan1,*

(1.Yellow Sea Fishery Research Institute,Chinese Academy of Fishery Science,Qingdao 266071,China;2.College of Food Science & Technology,Shanghai Ocean University,Shanghai 201306,China)

To screen suitable polyphenol purifying macroporous resin from freshSargassumfusiforme,comparison of polyphenol adsorption and desorption capabilities was made among 4 macroporous resins. Effects of 4 factors,namely pH,flow rate,sample concentration and eluent concentration,were studied. The highest polyphenol adsorption and desorption rates were observed in resin AB-8 under the condition of pH 5,adsorption flow rate 1.5 BV/h,sample concentration 70 μg/mL,eluent ethanol concentration 70%,elution flow rate 1.5 BV/h and the dosage of eluent 90 mL. The polyphenols content increased from 31.24% of preliminary separation to 62.15%.

macroporous adsorption resin;purification;Sargassumfusiforme;polyphenols

2016-03-04

曾帥(1991-)，男，在讀碩士研究生，研究方向：海洋功能食品，E-mail：naxiaozizengshuai@163.com。

劉楠(1982-)，女，博士，研究方向：海洋功能食品，E-mail：liunan@ysfri.ac.cn。

中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)(20603022015001);青島市市南區(qū)科技發(fā)展資金項(xiàng)目(2014-14-008-SW)。

TS254.1

B

1002-0306(2016)18-0297-05

10.13386/j.issn1002-0306.2016.18.048