蘆 鑫,宋國(guó)輝,張麗霞,孫 強(qiáng),黃紀(jì)念,*
(1.河南省農(nóng)科院農(nóng)副產(chǎn)品加工研究所,河南鄭州 450002;2.河南省農(nóng)產(chǎn)品生物活性物質(zhì)工程技術(shù)研究中心,河南鄭州 450002)
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膜分離應(yīng)用于花生根中白藜蘆醇初級(jí)純化
蘆鑫1,2,宋國(guó)輝1,2,張麗霞1,2,孫強(qiáng)1,2,黃紀(jì)念1,2,*
(1.河南省農(nóng)科院農(nóng)副產(chǎn)品加工研究所,河南鄭州 450002;2.河南省農(nóng)產(chǎn)品生物活性物質(zhì)工程技術(shù)研究中心,河南鄭州 450002)
為利用花生根中白藜蘆醇資源,將膜分離應(yīng)用于花生根提取液中白藜蘆醇的初級(jí)純化,以膜通量和膜滲透性、白藜蘆醇和水溶性糖截留率為評(píng)價(jià)指標(biāo),考察由超濾和納濾組成膜分離系統(tǒng)的工藝參數(shù)與影響因素。結(jié)果如下:超濾膜UE030和納濾膜NF4適宜于花生根提取液中白藜蘆醇的分離純化;提取液pH會(huì)顯著影響納濾膜對(duì)白藜蘆醇的截留能力;操作壓力會(huì)顯著影響納濾膜通量和滲透性,但對(duì)白藜蘆醇和水溶性糖的截留率無(wú)顯著影響;最佳膜分離工藝為花生根提取液經(jīng)過(guò)1 MPa、400 r/min、UE030超濾后,透過(guò)液調(diào)節(jié)至pH6.0,采用3 MPa,400 r/min攪拌,NF4納濾后,水溶性糖濃度從(1.1832±0.0718) mg/mL下降到(0.0475±0.0007) mg/mL,白藜蘆醇濃度為(4.4730±0.0129) μg/mL,回收率為55.84%±0.16%。以上結(jié)果證明,膜分離可用于白藜蘆醇的初級(jí)分離純化,促進(jìn)從花生根中制備白藜蘆醇的工業(yè)化發(fā)展。
超濾,納濾,花生根,白藜蘆醇
白藜蘆醇(又名芪三酚),化學(xué)名為3,4′,5-三羥基二苯乙烯(3,4′,5-trihydroxyl-trans-stilbene),是含有芪類結(jié)構(gòu)的非黃酮多酚類化合物,具有抑制癌細(xì)胞、降低血脂、預(yù)防心血管疾病、抗氧化、延緩衰老等有益功能,具有開發(fā)價(jià)值[1]。研究發(fā)現(xiàn),花生中白藜蘆醇含量較高,且在根、莖、殼、果、葉均有分布,其中根中含量最高[2]。我國(guó)花生資源豐富,2015年我國(guó)花生產(chǎn)量為1700萬(wàn)t,進(jìn)而會(huì)產(chǎn)生大量的花生根、莖、殼、葉等加工副產(chǎn)物,目前,花生加工副產(chǎn)物加工程度低,僅作為飼料、燃料使用,浪費(fèi)資源且污染環(huán)境。因此,已有從花生根、莖中提取白藜蘆醇的研究[3]。較從虎杖、桑葚、買麻藤、野鮮槐等植物中提取分離白藜蘆醇,從花生根莖中提取白藜蘆醇具有成本低、原料充足、不與藥爭(zhēng)源、附加值高,更具產(chǎn)業(yè)化開發(fā)潛力[4]。
雖然從花生根中制備白藜蘆醇取得了一定進(jìn)展[5],但是提取液中白藜蘆醇濃度低,如何在溫和條件下,高效、快捷、廉價(jià)、規(guī)?;姆蛛x濃縮白藜蘆醇是亟待解決的問(wèn)題[6]。人們嘗試采用大孔樹脂吸附花生根中提取液中白藜蘆醇,該種方法具有處理量大、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn),但是白藜蘆醇回收率較低且使用有機(jī)溶劑,仍需進(jìn)行改進(jìn)[6-7]。
膜分離是指在分子水平上不同粒徑分子的混合物在通過(guò)半透膜時(shí),實(shí)現(xiàn)選擇性分離的技術(shù),它包括微濾、超濾、納濾和反滲透。由于膜分離兼有分離、濃縮、純化的功能,且高效、節(jié)能、環(huán)保、條件溫和、易于放大與控制等優(yōu)點(diǎn),因此,已應(yīng)用于食品中蛋白、多糖、功能成分的濃縮、分離、純化[8-10]。目前,尚未有文獻(xiàn)報(bào)道采用膜分離初步分離純化花生根提取液中白藜蘆醇,因此,本研究以白藜蘆醇截留率、水溶性糖截留率和膜通量為評(píng)價(jià)指標(biāo),分析多種超濾膜、納濾膜在分離純化花生根中白藜蘆醇的表現(xiàn),以便為花生根中白藜蘆醇提取分離提供新方法,推動(dòng)花生加工副產(chǎn)物的精深加工發(fā)展。
1.1材料與儀器
花生根2014年10月采于河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)田,清洗、干燥后,粉碎過(guò)40目篩,低溫避光保存;白藜蘆醇純度>99%,沃凱化學(xué)試劑有限公司;甲醇色譜純,美國(guó)VBS公司;冰乙酸優(yōu)級(jí)純,阿拉丁試劑;甲醇、硫酸、苯酚等分析純,購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;UE001、UE003、UE005、UE010、UE020、UE030、UE050、NF3、NF4、NFM平膜購(gòu)自中科瑞陽(yáng)膜技術(shù)有限公司。
Ultimate 3000高效液相美國(guó)戴安公司;CTXNW-10B超聲波循環(huán)提取儀北京弘祥隆公司;Testcell C-70平膜裝置日本東電公司;UV-6300雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)上海美譜達(dá)儀器有限公司;DL-5-B離心機(jī)、TGL-16A離心機(jī)上海安亭科學(xué)儀器廠;XS205電子天平梅特勒-托利多儀器有限公司;UW420H電子天平日本島津儀器有限公司。
1.2實(shí)驗(yàn)方法
我是多么厭惡這些偽裝成白天鵝的長(zhǎng)舌婦。這時(shí),在我眼里倏地閃過(guò)一道奇異的光彩:“是的,你可以相信我,我和他們不一樣。”
1.2.1花生根中白藜蘆醇提取稱取一定量花生根,按1∶12(w/v)加入70%(v/v)的甲醇溶液后,倒入超聲波循環(huán)提取儀中,設(shè)定溫度40 ℃,800 r/min攪拌30 min,隨后采用40 kHz,功率強(qiáng)度1200 W的發(fā)散型超聲波和20 kHz、功率為1200 W的聚能型超聲波共同作用90 min,超聲作用方式為間歇式,即每次作用10 min后,兩次超聲處理間中止20 min。超聲提取完畢后,將提取液通過(guò)300目篩網(wǎng)過(guò)篩除去花生根,將提取液倒入棕色瓶中,低溫備用。
花生根提取液的pH為6.28,密度為0.825 g/mL,白藜蘆醇濃度為(6.7885±0.0562) μg/mL,水溶性糖濃度為(1.1832±0.0718) mg/mL。
1.2.2膜分離處理花生根提取液膜分離處理花生根提取液的工藝由先超濾后納濾組成。在超濾階段,選擇合適的處理?xiàng)l件達(dá)到白藜蘆醇透過(guò)超濾膜,雜質(zhì)被截留;在納濾階段,選擇合適的條件實(shí)現(xiàn)白藜蘆醇被截留濃縮。因此,需要篩選出適宜的超濾膜、納濾膜,并確定操作條件。
1.2.2.1膜過(guò)濾的操作流程參照Lai的方法,稱取165 g花生根提取液,裝入平膜裝置的腔體內(nèi),隨后裝入直徑為7.5 cm的平膜片,旋緊密封螺絲后,放置到磁力攪拌器上,連接高壓氮?dú)馄?并將透過(guò)液接收瓶放置到電子天平上,該天平已經(jīng)連接至計(jì)算機(jī),以每隔1 min的速度記錄透過(guò)液質(zhì)量變化,以便計(jì)算膜通量和膜滲透性(見(jiàn)公式1和2)。打開氮?dú)馄块y門,調(diào)節(jié)操作壓力,將攪拌速度設(shè)定為400 r/min,開始膜過(guò)濾,當(dāng)透過(guò)液質(zhì)量達(dá)到140 g時(shí),終止膜過(guò)濾,分別從透過(guò)液和截留液中取5 mL溶液用于檢測(cè)白藜蘆醇與水溶性糖,計(jì)算截留率(見(jiàn)公式3)和回收率(見(jiàn)公式4)[11]:
JA=M×A-1×(t2-t1)-1
(1)
PM=JA/P
(2)
式(1)中,JA為膜通量(kg·m-2·h-1),A為有效膜面積(m2),M為累積質(zhì)量(kg),t1為透過(guò)液質(zhì)量達(dá)到0.01 kg的時(shí)刻(h),t2為透過(guò)液質(zhì)量達(dá)到0.02 kg的時(shí)刻(h)。式(2)中PM為膜滲透性(kg·m-2·h-1·bar-1),P為操作壓力(bar)。
(3)
R=[(Cp×Vp)/Cf×Vf]×100
(4)
式(3)和(4)中,Ro和R分別為某種物料成分的截留率和回收率,Cp和Cf分別為透過(guò)液和料液中某種物料成分濃度,Vp和Vf分別為透過(guò)液與料液體積。
1.2.2.2超濾膜的確定以白藜蘆醇和水溶性糖截留率、膜通量、滲透性為評(píng)價(jià)指標(biāo),采用操作壓力為1 MPa,濃縮率85%(透過(guò)液質(zhì)量與原料液質(zhì)量百分比),攪拌速度400 r/min,觀察UE001、UE003、UE005、UE010、UE020、UE030、UE050超濾膜表現(xiàn),確定最佳的超濾膜。
1.2.2.3納濾膜的確定以超濾膜的透過(guò)液為原料液,采用操作壓力為3 MPa,濃縮率85%,攪拌速度400 r/min,觀察NF3、NF4、NFM納濾膜表現(xiàn),確定最佳的納濾膜。
1.2.2.4納濾料液pH的確定料液pH和操作壓力也是影響納濾膜表現(xiàn)重要因素,因此需要對(duì)料液pH和操作壓力對(duì)納濾膜截留白藜蘆醇的影響進(jìn)行分析。固定操作壓力為3 MPa,攪拌速度為400 r/min,調(diào)節(jié)提取液pH到4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0,考察pH對(duì)納濾膜NF4的截留白藜蘆醇的影響。
1.2.2.5納濾操作壓力的確定固定pH為6.0,攪拌速度為400 r/min,調(diào)節(jié)操作壓力1、2、3 MPa,考察操作壓力對(duì)納濾膜NF4表現(xiàn)的影響。
1.2.3白藜蘆醇的高效液相測(cè)定參考Xiong等人[6]的方法,采用C18反相柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)的Ultimate 3000色譜儀進(jìn)行檢測(cè),流動(dòng)相為甲醇-水-乙酸(27∶70∶3,v/v/v),流速為1.0 mL/min,柱溫設(shè)定為30 ℃,進(jìn)樣量為10 μL,303 nm進(jìn)行檢測(cè)。以5.44~380.8 μg/mL白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液做標(biāo)線,建立工作曲線為y=0.8645x-1.6139(R2=0.9999),式中x為白藜蘆醇濃度,y為峰面積。檢測(cè)花生根提取液中白藜蘆醇時(shí),采用0.45 μm微濾膜進(jìn)行過(guò)濾后,轉(zhuǎn)移入色譜樣品瓶進(jìn)行檢測(cè)。
圖1 不同超濾膜處理花生根提取液的表現(xiàn)圖Fig.1 The performance of various ultrafiltration membranes in treating extract of peanut roots
1.2.4水溶性糖測(cè)定提取液中水溶性糖測(cè)定采用硫酸苯酚法,以葡萄糖為標(biāo)品,測(cè)定波長(zhǎng)為490 nm。
1.2.5數(shù)據(jù)處理無(wú)特殊說(shuō)明,所有實(shí)驗(yàn)平行測(cè)定3次,采用SAS9.2進(jìn)行Duncan算法的單因素方差分析,顯著水平為0.05,高度顯著水平為0.01。圖中同一曲線上或表中同一行帶有相同小寫字母的數(shù)據(jù)在0.05水平上無(wú)顯著差異。
2.1超濾膜種類對(duì)分離白藜蘆醇的影響
不同孔徑的超濾膜分離花生根提取液中白藜蘆醇情況如圖1所示。膜通量是反映膜過(guò)濾料液的重要指標(biāo),高膜通量的膜可以在單位時(shí)間內(nèi)處理更多的料液,從而縮短工藝時(shí)間,提高生產(chǎn)效率。膜滲透性是表示相同壓力差驅(qū)動(dòng)下,膜過(guò)濾料液能力的指標(biāo)。高膜滲透性的膜可以在降低操作壓力下,實(shí)現(xiàn)料液的高效處理,這不但有利于延長(zhǎng)膜壽命,也有利于降低設(shè)備投資。超濾膜UE001至UE050膜孔徑逐漸增加,即截留分子量逐漸增加(截留分子量從1000增加到50000),其膜通量與膜滲透性總體呈逐漸增加趨勢(shì),但膜UE030和UE050無(wú)顯著性差異,產(chǎn)生以上現(xiàn)象的原因是:UE系列超濾膜的膜通量是在水溶液體系下測(cè)定,而本實(shí)驗(yàn)中花生根提取液是甲醇溶液,溶液極性會(huì)影響膜表面性質(zhì),導(dǎo)致膜孔徑發(fā)生變化,這可能造成UE030與UE050在膜通量上無(wú)顯著差異的原因。由圖1(a)和(b)可知,UE030具有最高的膜通量與膜滲透性。
分析白藜蘆醇截留率發(fā)現(xiàn),從UE001到UE030伴隨膜孔徑增加,白藜蘆醇截留率逐漸下降;而從UE030到UE050,白藜蘆醇截留率稍有上升。超濾分離純化的機(jī)理是以壓力差為推動(dòng)力,利用物質(zhì)大小差異,通過(guò)膜孔徑篩分實(shí)現(xiàn)大分子溶質(zhì)與小分子溶質(zhì)的分離[12]。這就是伴隨著膜孔徑增加,白藜蘆醇更容易通過(guò)超濾膜進(jìn)入透過(guò)液,白藜蘆醇截留率下降的原因。
觀察水溶性糖截留情況發(fā)現(xiàn),UE系列超濾膜可以有效除去花生根提取液中的水溶性糖。伴隨著膜孔徑增加,水溶性糖截留率從UE001的95.86%±0.8871%下降到UE050的73.0629%±2.0592%。以上結(jié)果表明,花生根提取液中的水溶性糖以多糖為主,目前尚無(wú)相關(guān)報(bào)道,其性質(zhì)有待后續(xù)研究。
綜合膜通量、膜滲透性、白藜蘆醇和水溶性糖截留率,UE030適宜作為一級(jí)超濾花生根提取液的工具膜,當(dāng)采用操作壓力1 MPa,攪拌速度為400 r/min,濃縮80%,UE030膜通量、膜滲透性、白藜蘆醇截留率、水溶性糖截留率分別為(49.1662±3.0722) kg·m-2·h-1,(4.9166±0.3072) kg·m-2·h-1·bar-1,0.26%±0.02%,81.62%±0.65%,其透過(guò)液中,白藜蘆醇濃度為(6.7794±0.0131) μg/mL,水溶性糖濃度為(0.3187±0.0244) mg/mL,白藜蘆醇回收率為84.64%±0.16%。
2.2納濾膜種類對(duì)分離白藜蘆醇的影響
表1 不同納濾膜處理花生根提取液情況
納濾膜材質(zhì)不同會(huì)影響溶質(zhì)的分離效果,因此本實(shí)驗(yàn)中考察3種納濾膜處理一級(jí)超濾膜的透過(guò)液,其膜透過(guò)性與對(duì)白藜蘆醇和水溶性糖分離效果。如表1所示,NFM具有最高的膜通量與膜滲透性,而NF3與NF4無(wú)顯著差異。三種膜對(duì)水溶性糖都具有較高截留率,其中NF3和NF4對(duì)水溶性糖的截留率為84%以上,而三種膜在白藜蘆醇的截留率上存在顯著差異,其中NF3的截留率最高,而NF4截留率最低,產(chǎn)生以上差異的原因與納濾分離機(jī)理有關(guān),納濾膜的分離效果受孔徑的分子篩作用與膜電荷性共同決定[12]。在提取液體系中,水溶性糖是非電解質(zhì),而白藜蘆醇會(huì)受體系pH的影響發(fā)生解離,形成白藜蘆醇離子,因此,水溶性糖的截留主要受納濾膜孔徑的分子篩效應(yīng)的影響,而白藜蘆醇除受分子篩作用外,還與膜電荷性質(zhì)的影響。膜電荷性會(huì)產(chǎn)生Donnan效應(yīng),且高膜電荷性會(huì)引起強(qiáng)Donnan效應(yīng)。Donnan抑制溶液中離子通過(guò)膜,從而阻礙白藜蘆醇的進(jìn)入透過(guò)液[11]。由此推斷,NF3具有較強(qiáng)的Donnan效應(yīng)阻礙白藜蘆醇進(jìn)入透過(guò)液。
綜合膜通量、膜滲透性、白藜蘆醇和水溶性糖截留率,NF4適宜作為二級(jí)超濾花生根提取液的工具膜,當(dāng)采用操作壓力3 MPa,攪拌速度為400 r/min,濃縮85%時(shí),透過(guò)液中白藜蘆醇和水溶性糖濃度分別為(4.2010±0.1150) μg/mL和(0.0481±0.0007) mg/mL,白藜蘆醇回收率為52.51%±1.34%。
2.3pH對(duì)納濾膜NF4分離白藜蘆醇的影響
表2 壓力對(duì)納濾膜NF4分離花生根提取液的影響
由于納濾膜的活性表面由聚酰胺或聚酰胺與其他物質(zhì)組成的混合物構(gòu)成,因此納濾膜是兩性化合物,存在等電點(diǎn)(pI),納濾膜的等電點(diǎn)取決于材料中氨基與羰基的比例,一般在4~6之間[13-14]。當(dāng)溶液pH低于膜的pI,膜電荷為正,反之為負(fù);并且隨著pH遠(yuǎn)離pI,膜電荷強(qiáng)度增加[14-15]。伴隨著膜表面電荷強(qiáng)度增加,相同電荷間排斥力增加,造成孔徑增加,膜結(jié)構(gòu)變得疏松,從而導(dǎo)致pH10時(shí)有高膜通量與膜滲透性。同理由于孔徑增加造成水溶性糖截留率在pH8~10下降。白藜蘆醇通過(guò)納濾膜受分子篩與膜電荷的共同作用,因此截留率變化比較復(fù)雜。當(dāng)pH4~6,由于接近膜的pI值,膜表面電荷接近中性,Donnan效應(yīng)減弱,有利于白藜蘆醇的透過(guò);而當(dāng)pH繼續(xù)增加時(shí),膜表面負(fù)電荷濃度增加,而白藜蘆醇也解離成為白藜蘆醇負(fù)離子,由于同性相斥,阻礙白藜蘆醇通過(guò)納濾膜,導(dǎo)致截留率增加。
圖2 pH對(duì)納濾膜NF4分離花生根提取液的影響Fig.2 The effect of pH on separating extract of peanut roots by nanofiltration membrane NF4
為減少白藜蘆醇損失,適宜的處理?xiàng)l件為pH6,在此條件下,白藜蘆醇的截留率和回收率為34.02%±0.19%和55.92%±0.27%,透過(guò)液中白藜蘆醇和水溶性糖濃度分別為(4.4730±0.0129) μg/mL和(0.0475±0.0007) mg/mL。
2.4壓力對(duì)納濾膜NF4分離白藜蘆醇的影響
壓力是驅(qū)動(dòng)納濾進(jìn)行的驅(qū)動(dòng)力,壓力低不利于推動(dòng)溶液通過(guò)納濾膜,導(dǎo)致膜通量較低,降低膜處理能力;壓力過(guò)高雖然會(huì)產(chǎn)生高膜通量,但會(huì)破壞膜結(jié)構(gòu),降低膜壽命,因此需要采用適當(dāng)壓力。由表2所示,伴隨壓力增加,NF4膜的膜通量逐漸增加,滲透性逐漸減小,而白藜蘆醇和水溶性糖截留率無(wú)顯著變化。由于水溶性糖截留率無(wú)顯著變化,初步判斷操作壓力1~3 MPa不會(huì)影響膜孔徑。為獲得較高的膜通量,操作壓力以3 MPa為宜。
本研究表明,膜技術(shù)可以應(yīng)用于花生根中白藜蘆醇分離純化工藝中,該方法較傳統(tǒng)分離方式,具有條件溫和、工藝簡(jiǎn)單、節(jié)能綠色且處理量大的優(yōu)點(diǎn)?;ㄉ崛∫航?jīng)過(guò)1 MPa,400 r/min,UE030超濾后,透過(guò)液調(diào)節(jié)至pH6.0,采用3 MPa,400 r/min攪拌,NF4納濾后,水溶性糖濃度從(1.1832±0.0718) mg/mL下降到(0.0475±0.0007) mg/mL,白藜蘆醇濃度為(4.4730±0.0129) μg/mL,白藜蘆醇回收率為55.84%±0.16%,這為白藜蘆醇的后續(xù)分離純化提供高品質(zhì)原料。
目前,該工藝的不足有兩點(diǎn):白藜蘆醇回收率較低,主要原因是部分白藜蘆醇存在于二級(jí)納濾的截留液中;納濾透過(guò)液的白藜蘆醇濃度低,需要進(jìn)行濃縮處理。針對(duì)以上問(wèn)題,未來(lái)研究可以探索增加濃縮率、循環(huán)納濾、更換其他納濾膜等方法以提高回收率,將反滲析應(yīng)用于納濾透過(guò)液中白藜蘆醇的濃縮中。另外,為推動(dòng)膜分離花生根中白藜蘆醇的工業(yè)化應(yīng)用,卷式膜分離條件也會(huì)進(jìn)行研究。
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Application of membrane separation on preliminary purification of resveratrol from extract of peanut root
LU Xin1,2,SONG Guo-hui1,2,ZHANG Li-xia1,2,SUN Qiang1,2,HUANG Ji-nian1,2,*
(1.Institute of Agricultural Processing,Henan Academy of Agricultural Sciences,Zhengzhou 450002,China;2.Henan Engineering Research Centre of Bioactive Substances in Agricultural Products,Zhengzhou 450002,China)
To utilize resveratrol resource in peanut roots,membrane separation had been employed in the preliminary separation of resveratrol in crude extract of peanut roots. Process parameters and influencing factors of a sequential membrane separation system consisting of ultrafiltration and nanofiltration were investigated through comprehensively considering performances of permeate flux,permeability,rejections of resveratrol and soluble sugar. Results showed that ultrafiltration membrane UE030 and nanofiltration membrane NF4 were suitable to separate resveratrol from crude extract of peanut root. pH of extract of peanut root had a significant influence to the performance of nanofiltration membrane on rejection of resveratrol. Operational pressure would remarkably affect permeate flux and permeability of nanofiltration membrane,but insignificantly affect rejections of resveratrol and soluble sugar. The optimal process of membrane separation was as follows:crude extract of peanut root was firstly ultrafiltrated by UE030 under 1 MPa,400 r/min,then the permeate of ultrafiltration was nanofiltrated by NF4 under 3 MPa,400 r/min,finally the concentration of soluble sugar decreased from(1.1832±0.0718) mg/mL to(0.0475±0.0007) mg/mL,the concentration and recovery of resveratrol were(4.4730±0.0129) ug/mL and(55.84%±0.16%),respectively. It could be concluded that membrane separation manages to preliminarily separate and purify resveratrol from peanut roots,which promoted the development of commercial production of resveratrol from peanut roots.
ultrafiltration;nanofiltration;peanut root;resveratrol
2016-03-04
蘆鑫(1981-),男,博士研究生,助理研究員,研究方向:油料蛋白加工研究,E-mail:xinlu1981@foxmail.com。
黃紀(jì)念(1971-),男,研究員,研究方向:農(nóng)產(chǎn)品加工,E-mail:hjinian@sina.com。
河南省資助留學(xué)回國(guó)人員科研項(xiàng)目;UNU-Krin獎(jiǎng)學(xué)金項(xiàng)目。
TS229
B
1002-0306(2016)18-0282-05
10.13386/j.issn1002-0306.2016.18.045