白 潔，何 靈，周 建，趙紅斌，張全華

（1.蘭州軍區(qū)總醫(yī)院安寧分院檢驗(yàn)科；2.蘭州軍區(qū)總醫(yī)院骨研所，甘肅蘭州730070）

·實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理·

傳染病四項(xiàng)不同檢測(cè)方法的臨床應(yīng)用價(jià)值對(duì)比分析

白 潔1，何 靈1，周 建2，趙紅斌2，張全華1

（1.蘭州軍區(qū)總醫(yī)院安寧分院檢驗(yàn)科；2.蘭州軍區(qū)總醫(yī)院骨研所，甘肅蘭州730070）

目的 通過(guò)三種方法檢測(cè)傳染病四項(xiàng)，探討它們?cè)跈z測(cè)傳染病四項(xiàng)中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 2014年8月至2014年12月在本院門診體檢人群中隨機(jī)選取標(biāo)本480例，采用全自動(dòng)酶免分析法，膠體金免疫檢測(cè)法，化學(xué)發(fā)光免疫分析法分別進(jìn)行傳染病四項(xiàng)的檢測(cè)，比較分析三種檢測(cè)方法的結(jié)果差異。結(jié)果 通過(guò)對(duì)480例體檢者的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，化學(xué)發(fā)光法的特異性、敏感性、陽(yáng)性率和重復(fù)性均高于ELISA法和膠體金法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 對(duì)三種傳染病四項(xiàng)的檢測(cè)方法的結(jié)果進(jìn)行分析，其中化學(xué)發(fā)光法極具優(yōu)勢(shì)，檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率、特異性、敏感性均高于其他兩種方法，它的檢測(cè)結(jié)果具有重要價(jià)值，對(duì)有效治療方案的提出具有指導(dǎo)意義。

全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析法； 膠體金免疫檢測(cè)法； 化學(xué)發(fā)光分析法； 傳染病四項(xiàng)檢測(cè)

傳染病四項(xiàng)是指：乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg），梅毒螺旋體抗體（抗-TP），人類免疫缺陷病毒（HIV），丙型肝炎病毒抗體（抗-HCV）。長(zhǎng)期攜帶乙肝病毒可引發(fā)肝硬化、肝衰竭等病癥，嚴(yán)重時(shí)甚至危及感染者的生命［1］。梅毒是經(jīng)典的性傳播疾病之一，其傳染性強(qiáng)，危害性大，感染后可引起全身各組織器官的損害［2］。艾滋病是目前全球15～59歲人群的首位致死原因。這四種傳染病具有相同的傳播途徑，即血液傳播、性傳播及母嬰傳播。為了解上述疾病在人群中的感染情況，以便采取早期預(yù)防控制措施，減少疾病發(fā)生?，F(xiàn)有多種檢測(cè)方法應(yīng)用于傳染病四項(xiàng)的檢測(cè)，包括酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、膠體金免疫檢測(cè)法、化學(xué)發(fā)光免疫分析法（CLIA）等。本文采用這三種方法對(duì)480例門診體檢人群傳染病四項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較分析。

材料和方法

1 標(biāo)本來(lái)源

隨機(jī)收集2014年8月至2014年12月在本院門診體檢者的標(biāo)本480例；靜脈采血4mL，分離血清后用三種方法分別進(jìn)行傳染病四項(xiàng)檢測(cè)。

2 儀器與試劑

采用的儀器為煙臺(tái)艾德康A(chǔ)DDCAER600全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀，配套試劑為廈門英科新創(chuàng)生產(chǎn)的乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、梅毒螺旋體抗體（抗-TP）、人類免疫缺陷病毒（HIV）、丙型肝炎病毒抗體（抗-HCV）ELISA試劑盒；北京科美生物CHEMCLIN600全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀及其配套試劑；質(zhì)控品則采用北京康徹思坦公司生產(chǎn)的產(chǎn)品。操作及結(jié)果判斷嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行。

3 方法

3.1 方法學(xué)比對(duì) 對(duì)收集的血清標(biāo)本，用三種方法（ELISA、CLIA、膠體金法）檢測(cè)傳染病四項(xiàng)，操作及結(jié)果判斷嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書的要求進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)在3d內(nèi)完成。

3.2 各指標(biāo)敏感性和特異性的比較 以金標(biāo)法檢測(cè)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)全自動(dòng)酶免法以及化學(xué)發(fā)光方法的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，比較兩種方法的敏感性和特異性。

3.3 重復(fù)性試驗(yàn) ①陰陽(yáng)對(duì)照檢測(cè)：在性能評(píng)價(jià)過(guò)程中，每次試驗(yàn)均設(shè)立陰陽(yáng)性質(zhì)控對(duì)照；②對(duì)ELISA和CLIA兩種檢測(cè)方法的重復(fù)性比較，除高濃度HBsAg比較外，其余指標(biāo)結(jié)果的比較均顯示CLIA的重復(fù)性高于ELISA且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3.4 檢測(cè)結(jié)果判定 ELISA法：HbsAg OD值S/C.O.≥1為陽(yáng)性，S/C.O.＜1為陰性，抗-HCV OD值S/C.O.≥1為陽(yáng)性，S/C.O.＜1為陰性，HIVOD值S/C.O.≥1為陽(yáng)性，S/C.O.＜1為陰性，抗-TPOD值S/C.O.≥1為陽(yáng)性，S/C.O.＜1為陰性。膠體金法：HBsAg、抗-TP、HIV、抗-HCV，陽(yáng)性時(shí)在檢測(cè)線及對(duì)照線處各出現(xiàn)一條紫紅色反應(yīng)線，陰性時(shí)僅在對(duì)照線處出現(xiàn)一條紫紅色反應(yīng)線?；瘜W(xué)發(fā)光法：樣品值＞臨界值為陽(yáng)性，樣品值＜臨界值為陰性。

4 確診方法

初篩HIV陽(yáng)性時(shí)送省疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證檢測(cè)，抗-TP陽(yáng)性者全部用明膠顆粒凝集試驗(yàn)進(jìn)一步檢查確證結(jié)果。

5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

所有數(shù)據(jù)均用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析處理，用χ2檢驗(yàn)組間率比較，當(dāng)P＜0.05時(shí)，表示差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 三種方法檢測(cè)結(jié)果比較

對(duì)收集的480例標(biāo)本均采用全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析法、膠體金免疫檢測(cè)法、全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析法三種方法進(jìn)行檢測(cè)，三種方法在傳染病四項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性率存在顯著性差異，膠體金法陽(yáng)性率稍低，其余兩種儀器檢測(cè)結(jié)果比較，化學(xué)發(fā)光法的檢測(cè)陽(yáng)性率略高于ELASA法，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 三種方法檢測(cè)的陽(yáng)性率結(jié)果

2 檢測(cè)結(jié)果分析

以膠體金法檢測(cè)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行ELISA以及化學(xué)發(fā)光方法的檢測(cè)結(jié)果分析，計(jì)算兩種方法的敏感性和特異性，結(jié)果見(jiàn)表2。對(duì)表2結(jié)果進(jìn)行χ2檢驗(yàn)得出，化學(xué)發(fā)光法的靈敏度和特異度高于ELISA方法（P＜0.01）。

表2 全自動(dòng)酶免法和免疫發(fā)光法兩種方法的敏感性和特異性的比較

3 重復(fù)性試驗(yàn)

化學(xué)發(fā)光法不同濃度重復(fù)性試驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果，見(jiàn)表3。

表3 重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果

討 論

獲得性免疫缺陷綜合征已成為人類第四大死亡原因［3］。乙型肝炎是我國(guó)法定乙類傳染病，具有傳染性強(qiáng)感染率高人群普遍易感等特點(diǎn)［4］。因此，臨床上極需要一種簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確、快速的檢測(cè)方法。ELISA法是抗-HIV檢測(cè)最常用的初篩檢測(cè)方法［5］，但其敏感性高，易會(huì)導(dǎo)致部分假陽(yáng)性，而膠體金法檢測(cè)抗-HIV的敏感性低，易導(dǎo)致部分假陰性?；瘜W(xué)發(fā)光法的敏感性和特異性略高于ELISA和膠體金法。因此，正確選擇抗-HIV的篩查實(shí)驗(yàn)變得尤為重要。本文對(duì)臨床應(yīng)用較普遍的三種方法做了比對(duì)，從表1中可以看出，三種檢測(cè)方法相比較，膠體金法陽(yáng)性率稍低，其余兩種儀器檢測(cè)結(jié)果比較化學(xué)發(fā)光法略高于ELISA法。雖然梅毒公認(rèn)的確診實(shí)驗(yàn)是明膠凝集試驗(yàn)，其特異性好，靈敏度高，但試劑較貴，檢測(cè)時(shí)需將標(biāo)本作系列稀釋，不利于大批量標(biāo)本檢測(cè)，且以肉眼判斷結(jié)果，原始數(shù)據(jù)無(wú)法保存。全自動(dòng)酶免法的應(yīng)用實(shí)現(xiàn)了免疫檢測(cè)自動(dòng)化，具有靈敏度高，檢測(cè)快速，結(jié)果穩(wěn)定，零污染，試劑穩(wěn)定性好，高效率，應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)［6］，顯示了良好的應(yīng)用前景?；瘜W(xué)發(fā)光法是將化學(xué)發(fā)光或生物發(fā)光體系與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測(cè)微量抗原或抗體的一種新型標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)。其檢測(cè)原理與放射免疫（RIA）和酶免疫（EIA）相似，不同之處是借助發(fā)光底物自身的發(fā)光強(qiáng)度直接進(jìn)行測(cè)定?；瘜W(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)的靈敏度和可測(cè)范圍遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于ELISA，且操作簡(jiǎn)便，反應(yīng)時(shí)間短，結(jié)果穩(wěn)定，誤差小，安全性好［7］?；瘜W(xué)發(fā)光法可通過(guò)不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品來(lái)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，能精確地進(jìn)行定性定量檢測(cè)，大幅度減少了批內(nèi)、批間的誤差［8］。

膠體金法，具有簡(jiǎn)單，快速，方便，實(shí)用，無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn)，但成本也高于ELISA。用膠體金檢測(cè)時(shí)，加樣量應(yīng)足量，由于濃度低時(shí)會(huì)出現(xiàn)先陰后陽(yáng)的現(xiàn)象。另外，作為一種定性檢測(cè)方法它不能準(zhǔn)確反應(yīng)其濃度的變化［9］，且靈敏度較 ELISA、化學(xué)發(fā)光法低。從表2和表3可以看出化學(xué)發(fā)光法的靈敏度和特異度，重復(fù)性均高于全自動(dòng)酶免法。化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)傳染病四項(xiàng)的靈敏度要明顯高于酶聯(lián)免疫法。

總之，三種檢測(cè)方法在傳染病四項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果的比較中，化學(xué)發(fā)光法具有更高的優(yōu)越性，可明顯提高傳染病四項(xiàng)的陽(yáng)性檢出率，并能準(zhǔn)確地進(jìn)行定性和定量分析。而全自動(dòng)酶免法的應(yīng)用具有靈敏度高，檢測(cè)快速，結(jié)果穩(wěn)定，零污染，高效率，應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)［10］，同樣對(duì)檢測(cè)結(jié)果有著重要的價(jià)值。因此，這兩種方法的聯(lián)合使用使得檢測(cè)結(jié)果更為準(zhǔn)確、有效，并可早期發(fā)現(xiàn)病情從而更好地為臨床提供診斷依據(jù)。

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（潘子昂編輯）

Com parative Analysis of Clinical Application Value of Four Different Detection M ethods for Infectious Diseases

BAIJie，HE Ling，ZHOU Jian，ZHAO Hong-bing，ZHANG Quan-hua
（Clinical Laboratory of Anning Hospital，General Hospital of Lanzhou M ilitary Region，Lanzhou 730070，China）

Objective To investigate the clinical application value of three methods for detecting infectious diseases by four-panel test，and to explore the clinical application of the automatic enzyme immunoassay analyzer and chemiluminescence analyzer in the detection of infectious diseases.Methods A total of 480 random ly selected healthy specimens collected in our hospital from August 2014 to December 2014.Automatic enzyme immunoassay analyzer，colloidal gold method，chemiluminescence immunoassay analyzer were used to detect infectious diseases four panel；the difference between the results of three kinds of detection methodswas analyzed.Results The specificity，sensitivity，positive rate，the repeatability were higherwith chemiluminescence than ELISA and colloidal gold method，the difference was statistically significant（P＜0.05）.Conclusion The results of four panel testswith three assays in detection of infectious diseases were analyzed.Chemiluminescence method had highest positive rate，specificity，the sensitivity among all threemethods.

Automatic ELISA； Colloidal gold； CLIA； Infectious disease four-panel test

10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2016.06.027

2015-07-17；

2015-09-23

張全華。E-mail：13919935618@qq.com