崔治中/山東農(nóng)業(yè)大學(xué)

原種雞場(chǎng)ALV凈化技術(shù)和推廣進(jìn)展

崔治中/山東農(nóng)業(yè)大學(xué)

一、種雞場(chǎng)凈化技術(shù)和程序

（一）以零檢出為目標(biāo)的原種雞場(chǎng)核心群的凈化程序

（1）每只留種母雞收集6～8蛋孵化，出殼后胎糞p27檢測(cè)，淘汰p27陽性雛雞及其種雞。

（2）每只母雞的后代一籠飼養(yǎng)至6～8周齡，相鄰籠間用隔板相隔，保證不能相互接觸。

（3）在6～8周齡，采血于細(xì)胞培養(yǎng)上分離病毒，淘汰陽性雞的所有同胞雛雞及相應(yīng)母雞；小群飼養(yǎng)陰性母雞。

（4）在開產(chǎn)初期及留種前2次種蛋p27檢測(cè)，淘率陽性雞及同一小群母雞。

（5）在開產(chǎn)初期及留種前2次采血分離病毒，淘汰陽性雞及同一小群母雞。

（6）公雞在性成熟后2次采血及采精液分離病毒，淘汰陽性雞。

（7）嚴(yán)格檢測(cè)所有弱毒疫苗，絕對(duì)保證無外源性ALV污染。

不論單一品系的原種雞場(chǎng)還是具有多個(gè)配套系的原種雞場(chǎng)，所謂原種雞場(chǎng)是指不再從其他來源引進(jìn)新的種雞、僅從現(xiàn)有的雞群中選育的在種源上封閉繁種育種的雞場(chǎng)。對(duì)這樣的雞場(chǎng)（群）才需要或值得采用這一最嚴(yán)格的凈化程序。

1.出殼雛雞胎糞檢測(cè)和淘汰陽性雞。在出殼前，將每只種雞的種蛋置于同一出殼紙袋中，用棉拭子逐只采集1日齡雛雞胎糞，置于小試管中。在對(duì)一只母雞的雛雞采集完胎糞后，必須更換手套，或徹底洗手消毒。用ALVp27抗原ELISA檢測(cè)試劑盒做對(duì)1日齡胎糞檢測(cè)P27抗原。要注意，同一只母雞所產(chǎn)雛雞中，有一只陽性就應(yīng)淘汰同紙袋中的其他雛雞，同時(shí)淘汰相應(yīng)種雞。

對(duì)選留的雛雞，以母雞為單位，同一母雞的雛雞放于一個(gè)籠中隔離飼養(yǎng)。每個(gè)籠間不可直接接觸，包括避免直接氣流的對(duì)流。飼養(yǎng)期間要采取避免橫向傳播的各種措施。

對(duì)選留雞選用的所有弱毒疫苗，必須經(jīng)嚴(yán)格檢測(cè)，絕對(duì)保證沒有外源性ALV污染。

2.六周齡育雛后期采集血漿分離、檢測(cè)病毒血癥和淘汰陽性雞。

育雛期結(jié)束時(shí)，按育種規(guī)程對(duì)后備雞做性狀觀察，淘汰在性狀上不合格個(gè)體。對(duì)保留的雞逐只采集血漿，接種DF-1細(xì)胞分離病毒。培養(yǎng)9天后用ALVp27抗原ELISA檢測(cè)試劑盒逐空檢測(cè)p27抗原或用IFA逐空檢測(cè)感染細(xì)胞。淘汰陽性后備雞。在同一母雞的同一飼養(yǎng)籠中，有一只陽性就應(yīng)淘汰同籠中的其他后備雞。

對(duì)經(jīng)以上選留的后備種雞，可適當(dāng)合群維持小群隔離飼養(yǎng)。例如，每群20～50只左右，可根據(jù)后備種雞的總體數(shù)量視條件而定。

3. 23～25周齡留種雞開產(chǎn)初期檢測(cè)和淘汰。初產(chǎn)期屬于雞群禽白血病病毒排毒高峰期，因此逐只取初生3枚蛋一一編號(hào)，對(duì)蛋清用ALVp27抗原ELISA檢測(cè)試劑盒做P27抗原檢測(cè)，淘汰陽性雞。公雞可采集精液檢測(cè)P27抗原，淘汰陽性雞。

其余雞隨即采集血漿接種DF-1細(xì)胞分離病毒，培養(yǎng)9天后用ALVp27抗原ELISA檢測(cè)試劑盒逐空檢測(cè)p27抗原或用IFA逐空檢測(cè)感染細(xì)胞。淘汰陽性種雞。

同一小群中，如有一只為陽性，淘汰該群所有雞（在感染嚴(yán)重的雞群，這一條在凈化的第一世代可酌情處理）。

4.40～45周齡留種前檢測(cè)和淘汰。取2～3枚種蛋對(duì)蛋清做P27抗原檢測(cè)，淘汰陽性雞。公雞可采集精液檢測(cè)P27抗原或分離病毒，淘汰陽性雞。

其余雞隨即采集血漿接種DF-1細(xì)胞分離病毒，培養(yǎng)9天后用ALVp27抗原ELISA檢測(cè)試劑盒逐空檢測(cè)p27抗原或用IFA逐空檢測(cè)感染細(xì)胞。

淘汰陽性種母雞和種公雞。（特別注意，可引起垂直傳播）。

5.種蛋的選留和孵化。在經(jīng)上面“四”項(xiàng)留種前檢測(cè)淘汰陽性雞后，每只母雞僅選用1只檢測(cè)陰性公雞的精液授精。按規(guī)定時(shí)間留足種蛋，每只母雞的種蛋均標(biāo)號(hào)。在出殼前，將每只母雞的種蛋置于標(biāo)有母雞號(hào)的一個(gè)專用紙袋中，置于出雛箱中出雛。

6.第二世代雞的檢測(cè)和淘汰。

對(duì)經(jīng)上述“1”到“5”步檢測(cè)淘汰后種雞的出殼的雛雞，作為凈化后第二世代雞。繼續(xù)按“1”到“5”的程序，實(shí)施第二世代的檢測(cè)和凈化。第三世代后可按此程序繼續(xù)循環(huán)進(jìn)行。

7. 檢測(cè)陽性閾值的調(diào)整。在全群不再檢測(cè)出陽性，或陽性率很低時(shí)，可酌情調(diào)整在ELISA中判定陽性的p/s閾值，從嚴(yán)淘汰。

8.凈化程序啟動(dòng)時(shí)期的選擇。

以上程序?yàn)橐粋€(gè)世代的全部過程，但各雞場(chǎng)可以根據(jù)凈化計(jì)劃實(shí)施開始的時(shí)期不同，可以從不同的階段開始。

作為剛起始凈化過程的種雞群，多數(shù)都選擇從種雞的檢測(cè)和淘汰開始。

9.凈化狀態(tài)的維持。實(shí)施上述完整的對(duì)核心群雞逐一檢測(cè)和淘汰的程序，工作量很大、成本也很高。根據(jù)國外成功的經(jīng)驗(yàn)，當(dāng)一個(gè)核心群連續(xù)3～4個(gè)世代都檢測(cè)不出ALV感染雞后，可轉(zhuǎn)入維持期。在進(jìn)入維持期后，就不需再對(duì)每只后備雞逐一做上面所有檢測(cè)步驟?？筛臑閷?duì)一定比例雞的定期抽檢，例如5%左右。而且也不一定要用細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒，僅僅采用操作上比較簡單的檢測(cè)胎糞和蛋清的p27抗原。當(dāng)然，在這方面我們還沒有直接經(jīng)驗(yàn)，還有待于今后逐漸摸索和成熟。

（二）引進(jìn)的祖代或父母代種雞場(chǎng)的凈化

這類種雞場(chǎng)對(duì)ALV的凈化只是廣義含義上的凈化。實(shí)際上，他們只需要做到選擇凈化的種源和監(jiān)控并維持引進(jìn)種雞群的凈化狀態(tài)。

對(duì)新的供應(yīng)商育種公司，可要求對(duì)其曾祖代雞群或祖代雞群采集一定數(shù)量血清樣品（100～200份）檢測(cè)抗體，確認(rèn)都為陰性，或更有可操作性的是要求其提供初產(chǎn)種蛋檢測(cè)其蛋清p27抗原（100～200個(gè)）及出殼雛雞的胎糞p27抗原。

（三）小型自繁自養(yǎng)黃羽肉雞或地方品種的種雞群的凈化

鑒于現(xiàn)在我國大多數(shù)自繁自養(yǎng)黃羽肉雞或地方品種的種雞群都已不同程度的感染了ALV-J和其他亞群外源性ALV，有的已發(fā)生臨床病理表現(xiàn)并造成明顯經(jīng)濟(jì)損失。這類公司的規(guī)模和經(jīng)濟(jì)實(shí)力還不夠大，更沒有技術(shù)力量和條件做細(xì)胞培養(yǎng)分離病毒。

這時(shí)可采用相對(duì)簡化的檢測(cè)淘汰程序作為過渡期。在這類種雞場(chǎng)，可僅對(duì)雛雞出殼后做胎糞p27抗原檢測(cè)及對(duì)種蛋蛋清做p27抗原檢測(cè)?；蛘吒唵蔚刂粰z測(cè)種雞種蛋蛋清p27抗原。但這只能作為不得已的過渡期，長遠(yuǎn)下去也會(huì)被市場(chǎng)所淘汰。

二、禽白血病凈化示范及其成功推廣的啟示

禽白血病是我國規(guī)模化養(yǎng)殖業(yè)第一個(gè)通過病原凈化實(shí)現(xiàn)有效的防控的疫病。白羽肉雞近10年沒有顯著的病例報(bào)告；蛋用型雞2013年后沒有典型病例報(bào)告；黃羽肉雞已有一個(gè)育種公司基本實(shí)現(xiàn)凈化，多個(gè)公司在ALV凈化方面取得顯著進(jìn)展；地方品種雞：有待推廣。

禽白血病凈化進(jìn)展也能給我國其他動(dòng)物疫病防控的帶來很多啟示，而且很多發(fā)達(dá)國家已經(jīng)以凈化為主要手段防控動(dòng)物疾病，包括：牛結(jié)核病、牛布氏桿菌病、?？谔阋?、羊布氏桿菌病、羊藍(lán)舌病、豬偽狂犬病、豬口蹄疫、豬瘟、雞白痢、高致病性禽流感。

另外，值得我們關(guān)注的是，近幾年世界獸醫(yī)界發(fā)表的“SCI”論文中估計(jì)有一半來自中國獸醫(yī)界，世界獸醫(yī)界發(fā)表的最杰出的“SCI”論文，也幾乎都來自中國。但中國的動(dòng)物疫病發(fā)病狀況是世界上最嚴(yán)重的，動(dòng)物死亡率也是最高的。

這說明什么？養(yǎng)殖業(yè)既需要有疫病充滿“SCI”精神的杰出的獸醫(yī)科學(xué)家和學(xué)者，但更需要大量的能面對(duì)和解決現(xiàn)實(shí)問題的有“工匠”技藝的獸醫(yī)專家和學(xué)者。各級(jí)主管部門要鼓勵(lì)高校和科研單位深入畜牧場(chǎng)多為行業(yè)服務(wù)。（本文根據(jù)會(huì)議錄音及資料整理，未經(jīng)專家本人審閱，如有出入，以專家意見為準(zhǔn)。）