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        甘草黃酮納米乳的制備及其穩(wěn)定性研究

        2016-11-01 20:49:26孟子嫣星星巴哈努爾劉俊峰
        畜牧與飼料科學(xué) 2016年3期
        關(guān)鍵詞:油相蒸餾水甘油

        王 娜 ,孟子嫣 ,星星·巴哈努爾 ,劉俊峰 ,2

        (1.塔里木大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,新疆 阿拉爾 843300;2.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)塔里木畜牧科技重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,新疆 阿拉爾 843300)

        甘草黃酮納米乳的制備及其穩(wěn)定性研究

        王 娜1,孟子嫣1,星星·巴哈努爾1,劉俊峰1,2

        (1.塔里木大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,新疆 阿拉爾 843300;2.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)塔里木畜牧科技重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,新疆 阿拉爾 843300)

        [目的]通過(guò)繪制偽三元相圖優(yōu)選處方的方法,制備了甘草黃酮納米乳并對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)價(jià)。[方法]以EL-40、Span-80為表面活性劑,肉豆蔻酸異丙酯(IPM)為油相,組成混合溶液,以甘油為助表面活性劑制備甘草黃酮納米乳,將甘草黃酮納米乳應(yīng)用高溫、高濕、恒溫加速試驗(yàn)檢驗(yàn)其穩(wěn)定性。[結(jié)果]納米乳處方為:0.2 g甘草黃酮、1.2 g EL-40、0.3 g Span-80、0.5 g 甘油、0.5 g IPM、4.0 g 蒸餾水,經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證甘草黃酮納米乳仍為澄清透明納米乳狀液,未出現(xiàn)分層現(xiàn)象,性質(zhì)穩(wěn)定。[結(jié)論]該方法操作簡(jiǎn)單,納米乳穩(wěn)定性良好。

        甘草黃酮;納米乳;偽三元相圖;穩(wěn)定性評(píng)價(jià)

        新疆的甘草資源非常豐富,甘草黃酮(Glycyrrhiza flavonoids,GF)是從特定品種甘草根及根莖提取到的一類生物活性較強(qiáng)的物質(zhì),現(xiàn)代中藥學(xué)研究發(fā)現(xiàn)其具有抗衰老、抗?jié)儭⒔獐d、治療糖尿病、抑制血小板聚積、抗貧血、抗心律不齊、消炎、鎮(zhèn)咳祛痰、鎮(zhèn)痛、抗病毒、增強(qiáng)免疫機(jī)能和抗腫瘤等作用[1]。但是,目前對(duì)甘草黃酮的研究多限于粗制品,應(yīng)用價(jià)值較低。

        納米乳(nano emulsion)又稱微乳(microemulsion),是由水相、油相、表面活性劑和助表面活性劑按照一定比例篩選形成的一種粒徑在1~100 nm之間且熱力學(xué)穩(wěn)定的分散體系[2]。納米乳作為新型藥物載體能提高甘草黃酮的溶解度,并能延緩甘草黃酮在體內(nèi)的釋放及作用時(shí)間,提高藥效,且甘草黃酮在納米乳中比在一般乳狀液中具有更高的擴(kuò)散性和皮膚滲透性,使用效果明顯[3-6]。該試驗(yàn)旨在通過(guò)繪制偽三元相圖優(yōu)選處方的方法,制備水包油型(O/W型)甘草黃酮納米乳,并對(duì)其穩(wěn)定性進(jìn)行評(píng)價(jià)。

        1 材料和方法

        1.1 試劑與儀器 蓖麻油聚氧乙烯醚-40(EL-40)、Span-80、Tween-80、RH-40 (德 國(guó) BASF 公司);肉豆蔻酸異丙酯(IPM,廣州澤欣貿(mào)易有限公司);霍霍巴油、液體石蠟、甘油、丙二醇、丙三醇和1,3-丁二醇(西安三浦精細(xì)化工);甘草黃酮、蒸餾水(新疆生產(chǎn)建設(shè)畜牧科技兵團(tuán)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室制備)。BS214S1/10000電子天平 (德國(guó) Satorius公司);BCD-208K型冰箱(青島海爾股份有限公司);HH-6型數(shù)顯恒溫水浴鍋 (國(guó)華電器有限公司);HJ-3型恒溫磁力攪拌器 (江蘇金壇醫(yī)療器械廠);SKP02.420型電熱恒溫培養(yǎng)箱 (黃石恒豐醫(yī)療器械有限公司);TGL-16B臺(tái)式高速離心機(jī)(湖南星科科學(xué)儀器有限公司)。

        1.2 方法

        1.2.1 表面活性劑的選擇[7]:篩選出非離子表面活性劑 EL-40、RH-40、Tween-80、Span-80,判斷其對(duì)甘草黃酮的溶解性。稱取適量的甘草黃酮,分別加入到以上4種表面活性劑中,攪拌并觀察其顏色變化和沉淀,判斷甘草黃酮溶解度大小,對(duì)表面活性劑進(jìn)行初步篩選。

        1.2.2 油相的選擇[8-10]:固定最佳表面活性劑,量取一定量的IPM、霍霍巴油、液體石蠟、花生油分別與已篩選的最佳表面活性劑均勻混合,然后逐滴加入蒸餾水,并不停攪拌,觀察乳液是否透明,篩選出最佳油相。

        1.2.3 助表面活性劑的選擇[11-13]:分別利用甘油、丙二醇、丙三醇、1,3-丁二醇、正丁醇作為助表面活性劑。將已選出的表面活性劑和助表面活性劑按照一定的質(zhì)量比(即 Km=4∶1、2∶1、1∶1、1∶2)混合均勻,選出最佳助表面活性劑。

        1.2.4 偽三元相圖的繪制[13-14]:室溫下,將篩選出的混合表面活性劑和油相分別按質(zhì)量比為9.8∶0.2、9.7∶0.3、9.5∶0.5、9∶1、8.5∶1.5、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、3∶7、2∶8、1∶9 均勻混合,然后逐滴加入蒸餾水,并不斷攪拌,直到形成透明、澄清的納米乳。記錄由渾濁變澄清或由澄清變渾濁時(shí)的臨界點(diǎn)水量,并計(jì)算體系中各成分的質(zhì)量百分比。利用Origin Pro 8.0軟件繪制偽三元相圖,確定表面活性劑和油相的比例和甘草黃酮納米乳區(qū)域。

        1.3 甘草黃酮納米乳處方的確定及制備 稱取一定量的甘草黃酮與表面活性劑、助表面活性劑和油相按比例混合均勻,逐滴加入蒸餾水,并不斷攪拌,直到乳液澄清透明。

        1.4 甘草黃酮納米乳的穩(wěn)定性研究

        1.4.1 高濕度試驗(yàn):將甘草黃酮納米乳放于密閉器皿中,于25℃、相對(duì)濕度75%和90%條件下分別放置,5 d和10 d后觀察其是否有分層和渾濁現(xiàn)象。

        1.4.2 高溫試驗(yàn):將甘草黃酮納米乳放于密閉器皿中,于40、60、80℃分別放置,5 d和10 d后觀察其是否有分層和渾濁現(xiàn)象。

        1.4.3 高速離心試驗(yàn):將甘草黃酮納米乳置于高速離心機(jī)中于3 500 r/min離心30 min,觀察其是否有分層和渾濁現(xiàn)象。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 表面活性劑的選擇 由表1可知,甘草黃酮在EL-40和Span-80中的溶解性較好,溶液顏色較深且沉淀較少。而在Tween-80和RH-40中幾乎不溶,溶液顏色較淺并有大量沉淀。因此,該試驗(yàn)初步選擇EL-40和Span-80為表面活性劑,將甘草黃酮溶于其中,進(jìn)而溶入納米乳中。

        2.2 油相的選擇 由表2可知,甘草黃酮溶于IPM與EL-40所形成的納米乳,并且可以與EL-40和Span-80復(fù)配,且形成的納米乳區(qū)較大。因此,該試驗(yàn)初步選擇IPM為油相,并與最佳表面活性劑混合。

        表1 表面活性劑的篩選結(jié)果

        表2 油相的篩選結(jié)果

        表3 助表面活性劑的篩選結(jié)果

        2.3 助表面活性劑的選擇及Km的確定 由表3可知,以甘油、丙三醇、1,3-丁二醇為助表面活性劑,IPM為油相,并分別與EL-40和Span-80進(jìn)行復(fù)配,其結(jié)果為以甘油為助表面活性劑形成的納米乳相對(duì)于丙三醇和1,3-丁二醇形成的納米乳性質(zhì)更加穩(wěn)定,故該試驗(yàn)選擇甘油為助表面活性劑,與表面活性劑混合成為最佳混合表面活性劑。

        2.4 甘草黃酮納米乳的穩(wěn)定性考察 將甘草黃酮納米乳分別進(jìn)行高濕度試驗(yàn)、高溫試驗(yàn)、恒溫加速試驗(yàn),其結(jié)果仍保持澄清透明,未見(jiàn)分層和渾濁現(xiàn)象。

        2.5 甘草黃酮納米乳的制備 納米乳的配方最終會(huì)影響納米乳分散體系的形成和穩(wěn)定性,由偽三元相圖考察所得結(jié)果選擇各組分最佳比例,確定以EL-40/Span-80/甘油/IPM/蒸餾水為體系的納米乳處方為:0.2 g 甘草黃酮、1.2 g EL-40、0.3 g Span-80、0.5 g甘油、0.5 g IPM、4.0 g蒸餾水(見(jiàn)圖 1)。 在室溫下將EL-40、Span-80與甘油及IPM充分混合均勻,再加入甘草黃酮,充分?jǐn)嚢?,然后在攪拌的過(guò)程中緩慢滴加蒸餾水,過(guò)濾(孔徑=450 nm)即得橙色、澄清透明的甘草黃酮納米乳,密封避光保存。

        圖1 EL-40/Span-80/甘油/IPM/蒸餾水為體系的偽三元相圖

        3 討論

        甘草黃酮是從甘草中提取出的萜類、脂溶性化合物,甘草黃酮在常溫下存放性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑[14]。該試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),甘草黃酮在一些表面活性劑中的溶解度大于在水中的溶解度,所以可先將其溶于表面活性劑中,進(jìn)而溶入納米乳中。EL-40屬于非離子表面活性劑中應(yīng)用最多的聚氧乙烯類表面活性劑,能與大多數(shù)藥物配伍,低毒,生物相容性好;Span-80能提高甘草黃酮在納米乳中的分散性;常用的助表面活性劑為短鏈醇,也有試驗(yàn)采用混合表面活性劑制備納米乳[15],但是甘草黃酮在這些助表面活性劑中溶解性較差,而甘油的揮發(fā)性較小,有利于甘草黃酮的溶解,因此該試驗(yàn)采用甘油為助表面活性劑;IPM不易氧化水解和酸敗。該試驗(yàn)應(yīng)用納米技術(shù)將甘草黃酮制成由EL-40/Span-80/甘油/IPM/蒸餾水為體系形成的O/W型甘草黃酮納米乳,其質(zhì)量穩(wěn)定、黏度低,能夠提高藥物的溶解度,減少藥物在體內(nèi)的酶解,使被包容的藥物分散度增加,并能靶向促進(jìn)藥物在體內(nèi)體外的吸收,從而使其生物利用度提高。

        [1]張明發(fā),沈雅琴.甘草及其有效成分抗脂肪肝和抗肥胖的研究進(jìn)展[J].藥物評(píng)價(jià)研究,2015,38(4):439-447.

        [2]于力,張鈞壽,周建平.納米乳的研究及其在制劑學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用[J].藥學(xué)進(jìn)展,2006,30(11):491-497.

        [3]蘭瑩.復(fù)方酮康唑納米乳的制備及其藥效學(xué)研究[D].楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2012.

        [4]寇賀紅.10%丁香酚納米乳的研制[D].楊凌:西北農(nóng)林科技大學(xué),2006.

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        Preparation of Glycyrrhiza Flavonoids Nano Emulsion and Evaluation of Its Stability

        WANG Na1,MENG Zi-yan1,Xingxing·Bahanuer1,LIU Jun-feng1,2
        (1.College of Animal Science,Tarim University,Alaer 843300,China;2.Key Laboratory of Tarim Animal Husbandry Science and Technology,Xinjiang Production and Construction Corps,Alaer 843300,China)

        [Objective] To prepare Glycyrrhiza flavonoids nano emulsion by drawing the pseudo ternary phase diagram optimization prescription and to evaluate its stability. [Methods] The EL-40 and Span-80,isopropyl myristate (IPM),and glycerol were used as surfactant,oil phase,and cosurfactant respectively.They were mixed to prepare Glycyrrhiza flavonoids nano emulsion.The accelerated test in the conditions of high temperature,high humidity and constant temperature was conducted respectively to evaluate the stability of the Glycyrrhiza flavonoids nano emulsion. [Results] The determined prescription was as following:0.2 g of Glycyrrhiza flavonoids,1.2 g of EL-40,0.3 g of Span-80,0.5 g of glycerol,0.5 g IPM,and 4.0 g distilled water.The prepared Glycyrrhiza flavonoids nano emulsion was clear and transparent without layer,and it was evaluated as stable in accelerated test. [Conclusion]The developed technology in this study for preparation of Glycyrrhiza flavonoids nano emulsion is simple to operate and the nano emulsion exhibits good stability.

        Glycyrrhiza flavonoids;nano emulsion;pseudo ternary phase diagram;stability evaluation

        R944.1

        A文章順序編號(hào)1672-5190(2016)03-0022-03

        2016-03-07

        項(xiàng)目來(lái)源:大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(2014029)。

        王娜(1993—),女,碩士研究生,主要研究方向?yàn)楂F醫(yī)藥理與毒理學(xué)。

        劉俊峰(1980—),男,副教授,碩士,主要研究方向?yàn)楂F醫(yī)藥理與毒理學(xué)。

        (責(zé)任編輯:慕宗杰)

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