田文洪，王曉燕，莫志芳，蔡艷霞

（深圳市福田區(qū)人民醫(yī)院血液科，廣東 深圳 518033）

質(zhì)譜技術(shù)在診斷急淋中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病中的應(yīng)用研究

田文洪，王曉燕，莫志芳，蔡艷霞

（深圳市福田區(qū)人民醫(yī)院血液科，廣東 深圳 518033）

目的 研究質(zhì)譜技術(shù)在診斷急淋中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病中的應(yīng)用價值。方法 選取我院2015年1月～12月收治的急性淋巴白細胞（ALL）患者20例作為研究對象，及健康體檢者10名為研究對象，應(yīng)用SELDI-TOF-MS質(zhì)譜技術(shù)檢測其腦脊液建立蛋白質(zhì)指紋模型圖，并分析差異蛋白。結(jié)果 與對照組比較，單純ALL組發(fā)現(xiàn)有8個差異顯著的蛋白峰，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；與單純ALL組比較，ALL合并CNSL組發(fā)現(xiàn)有11個差異顯著的蛋白峰，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。對差異蛋白建立決策樹模型，用此模型診斷ALL合并CNSL，敏感性85.71%（6/7），特異性為91.30%（21/23）。結(jié)論 應(yīng)用SELDI-TOF-MS質(zhì)譜技術(shù)建立急淋中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病患者腦脊液蛋白質(zhì)指紋模型圖，發(fā)現(xiàn)差異蛋白，有助于疾病診斷。

急淋中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病；質(zhì)譜技術(shù)；蛋白質(zhì)指紋圖譜；診斷

研究表明［1］，中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病（CNSL）是ALL復發(fā)的主要根源之一，因此，早期診斷CNSL，并及早給予干預(yù)措施有助于改善患者預(yù)后。隨著蛋白質(zhì)組學的發(fā)展，采用現(xiàn)代先進科學儀器，如質(zhì)譜，發(fā)現(xiàn)一些與腫瘤的惡性轉(zhuǎn)化、細胞增殖、抑制凋亡等相關(guān)的蛋白在病理狀態(tài)下會出現(xiàn)異常，對疾病診斷及預(yù)后判斷具有重要價值。本文以此為背景，研究質(zhì)譜技術(shù)在診斷急淋中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病中的應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2015年1月～12月收治的ALL患者20例作為研究對象，根據(jù)是否合并CNSL分為兩組：單純ALL組13例，男8例，女5例，年齡29～58歲，平均年齡（39.5±7.06）歲；ALL合并CNSL組7例，男4例，女3例，年齡31～54歲，平均年齡（41.1±6.42）歲。所有患者均符合WHO制定的診斷標準，并經(jīng)骨髓形態(tài)學、免疫組化等檢查確診。同期接收的腦脊液及生化檢查無異常的健康體檢者10名為對照組，男6名，女4名，年齡30～60歲，平均年齡（40.8±7.47）歲。三組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 標本采集及檢測方法

腰椎穿刺抽取腦脊液標本，3000 r/min離心處理10 min，取上清液，置于-20℃冰箱內(nèi)保存。取腦脊液標本，冰浴解凍后與等體積U9裂解液充分混勻。將處理好的樣品加入到弱陽離子交換型蛋白質(zhì)芯片（WCX2，Ciphergen Biosystems 公司）的每一個孔中。置于振蕩器中反復震蕩沖洗后，吹干。使用Protein Chip Biology System（PBSò-c）質(zhì)譜儀進行測定。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析處理，計量資料以“±s”表示，采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

與對照組比較，單純ALL組發(fā)現(xiàn)有8個差異顯著的蛋白峰，差異有統(tǒng)計學意（P＜0.05）；與單純ALL組比較，ALL合并CNSL組發(fā)現(xiàn)有11個差異顯著的蛋白峰，差異有統(tǒng)計學意（P＜0.05）。見表1。對差異蛋白建立決策樹模型，用此模型診斷ALL合并CNSL，敏感性85.71%（6/7），特異性為91.30%（21/23）。

表1 不同組別之間蛋白質(zhì)峰比較（±s）

表1 不同組別之間蛋白質(zhì)峰比較（±s）

注：與單純ALL組比較，#P＜0.05

M/Z單純ALL組（n=13）ALL合并CNSL組（n=7）對照組（n=10）P 5903.20213.52±3.452.09±0.86#39.76±6.84#0.000 2217.3365.81±1.693.46±1.12#7.98±2.03#0.029 6436.6667.03±2.472.51±0.63#12.50±4.72#0.004 4306.7895.38±1.1613.49±4.67#1.27±0.65#0.000 10252.581.19±0.450.34±0.12#3.48±0.87#0.013 7771.52618.64±4.938.97±3.42#49.08±12.64#0.000 2018.0904.92±1.121.34±0.74#5.56±0.930.007 11660.208.93±3.0214.80±5.69#4.39±2.84#0.000 2956.2014.56±1.901.24±0.41#4.78±0.960.005 9351.7795.45±1.291.78±0.42#9.47±2.80#0.000 2194.8826.41±1.623.06±1.38#6.82±1.750.010

3 討 論

白血病是造血干細胞惡性克隆的白血病細胞增殖失控、在骨髓或者其他造血組織中大量累積、浸潤，抑制正常造血細胞功能的一種惡性克隆性血液系統(tǒng)疾病，任何年齡均可發(fā)病，ALL是最常見的成人急性白血病之一，據(jù)統(tǒng)計［2］，其在我國人群中的發(fā)病率高達5～6/10萬人次。隨著白血病發(fā)病機制研究的深入，化療方案可以最大限度的殺滅體內(nèi)白血病細胞，對于無高危因素存在的ALL患者有效率可高達70%［3］。但是對于存在高危因素的患者，如ALL患者合并CNSL時，會導致病情進展加快、髓外浸潤范圍廣等，化療方案治療有效率不足50%，患者死亡率高。目前，除根據(jù)患者腦脊液常規(guī)細胞學涂片法結(jié)果外，因該病缺乏靈敏的實驗室數(shù)據(jù)檢測指標，導致對CNSL的早期診斷造成一定的困難。

本文研究表明，應(yīng)用SELDI-TOF-MS質(zhì)譜技術(shù)檢測急淋中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病腦脊液建立蛋白質(zhì)指紋模型圖，與單純ALL組比較，ALL合并CNSL組發(fā)現(xiàn)有11個差異顯著的蛋白峰，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），為ALL合并CNSL診斷有積極的臨床意義。但是本研究中，對差異蛋白建立決策樹模型，用此模型診斷ALL合并CNSL，敏感性85.71%（6/7），特異性為91.30%（21/23），低于文獻報道［4］，可能與本研究納入例數(shù)較少有關(guān)。

綜上所述，應(yīng)用SELDI-TOF-MS質(zhì)譜技術(shù)建立急淋中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病患者腦脊液蛋白質(zhì)指紋模型圖，發(fā)現(xiàn)差異蛋白，有助于疾病診斷。

［1］ Patel JP，G6nen M，F(xiàn)igueroa ME，et a1.Prognostic relevance of integrated genetic profi ling in acute myeloid leukemia［J］.N Engl J Med，2012，366（12）:1079-1089.

［2］ 劉育欣，王婷婷，肖玉玲，等.不同臨床分類的急性白血病患者病原學數(shù)據(jù)分析［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學，2016，43（10）:185-187，192.

［3］ 趙 玥，孫雪靜，萬歲桂，等.急性髓系白血病細胞免疫表型與疾病復發(fā)的關(guān)系［J］.白血病，淋巴瘤，2011，20（5）:307-309.

［4］ 何愛麗，白 菊，黃 辰.等.急性髓系白血病血清標志物初步篩選及臨床意義［J］.中國實驗血液學雜志，2010，18（5）:1132-1137.

本文編輯：劉帥帥

項目類別：非資助【2013年度深圳市科技計劃項目（醫(yī)療衛(wèi)生類）】

項目編號：201303157

項目名稱：質(zhì)譜技術(shù)在診斷急淋中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病中的應(yīng)用研究

R733.7

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ISSN.2095-6681.2016.16.125.02