付宏亮

（山西省臨汾市醫(yī)院，山西 臨汾 041000）

rhG-CSF對大鼠急性缺血性腦梗死的保護及治療作用機制研究

付宏亮

（山西省臨汾市醫(yī)院，山西 臨汾 041000）

目的 分析rhG-CSF對大鼠急性缺血性腦梗死的保護及治療作用機制。方法 選取健康雌性SD大鼠12只，采用線拴法建立大鼠急性缺血性腦梗死模型（MCAO），分別納入研究組和對照組，研究組皮下注射rhG-CSF。TTC染色、流式細胞儀及免疫組織化學方法檢測梗死體積、凋亡細胞、CD34+細胞及神經(jīng)上皮干細胞蛋白的表達。結果 研究組大鼠腦梗死灶體積明顯小于對照組，且Garcia神經(jīng)功能評分更高，腦梗死部位出現(xiàn)CD34+細胞及nestin陽性細胞浸潤。結論 rhG-CSF可以減輕大鼠急性缺血性腦梗死程度，減小腦梗死體積，其機理可能是rhG-CSF對缺血神經(jīng)元具有保護作用，減少細胞凋亡，并動員骨髓干細胞，促進神經(jīng)細胞再生。

急性缺血性腦梗死；重組人粒細胞集落刺激因子；CD34+細胞；nestin陽性細胞

在臨床上，急性缺血性腦梗死非常常見，具有比較高的致殘率和致死率，嚴重影響著人們的身體健康和生活質量，甚至生命安全［1］。隨著急性缺血性腦梗死發(fā)病率的逐年升高，如何提高腦卒中患者的療效、改善其預后成為臨床不斷研究的重要問題之一。近年來，不斷有研究認為人重組粒細胞集落刺激因子（rhG-CSF）有被應用在急性缺血性腦梗死治療中的可能性，且對于縮小急性缺血性腦梗死患者的梗死面積、恢復急患者的神經(jīng)功能等具有一定的作用。本研究通過進行分組研究，rhG-CSF對大鼠急性缺血性腦梗死的保護及治療作用機制進行研究，以期能夠提供一定的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般材料

選取健康雌性SD大鼠13只，參照Koizumi等建立的方法建立MCAO模型。將其分別納入研究組和對照組，各6只。按Garcia等的方法對大鼠術后進行神經(jīng)功能評分，采用TTC染色、流式細胞儀及免疫組織化學方法檢測梗死體積、凋亡細胞、CD34+細胞及nestin的表達。

1.2 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料以“±s”表示，采用t檢驗；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 兩組Garcia神經(jīng)功能評分在不同時間點的對比（見表1）

表1 兩組Garcia神經(jīng)功能評分在不同時間點的對比（±s）

表1 兩組Garcia神經(jīng)功能評分在不同時間點的對比（±s）

注：#與24 h、48 h的Garcia神經(jīng)功能評分相比，P＜0.05；△與對照組Garcia神經(jīng)功能評分相比，P＜0.05

組別只數(shù)24 h48 h1 w研究組69.15±2.199.17±2.0212.66±0.85#△對照組69.10±2.219.20±2.1111.62±0.45#

2.2 兩組在急性缺血性腦梗死后大鼠腦梗死體積上的對比（見表2）

表2 兩組在急性缺血性腦梗死后大鼠腦梗死體積上的對比（±s）

表2 兩組在急性缺血性腦梗死后大鼠腦梗死體積上的對比（±s）

注：#與24 h、48 h的腦梗死體積相比，P＜0.05；△與對照組腦梗死體積相比，P＜0.05

組別只數(shù)24 h48 h1 w研究組6270.48±27.44△270.65±36.87△98.45±22.45#△對照組6276.59±30.41274.14±41.25155.21±28.47#

2.3 兩組在急性缺血性腦梗死后神經(jīng)細胞、新生血管內皮細胞增殖上的對比

研究組大鼠的手術側腦組織在給藥后24 h有CD34+單個核細胞存在，且在給藥后48 h、1 w，所檢測到的CD34+單個核細胞出現(xiàn)浸潤且數(shù)量增加趨勢明顯，而對照組大鼠未發(fā)生這種情況。

對照組nestin只在個別區(qū)域（如室管膜區(qū)、室管膜下區(qū)等）有所表達，且表達呈低水平狀態(tài)，呈稀疏排列。表達nestin的細胞在腦梗死后24 h稍微有所增加，在腦梗死后48 h持續(xù)增加，在腦梗死后1 w時達到最大數(shù)量。研究組nestin陽性細胞1 w時，在梗死灶周圍（CD34+細胞分布區(qū)）檢測到有一定數(shù)量的存在。所具有的規(guī)律為：表達nestin的細胞如果距離梗死灶比較近，則數(shù)量會比較多，反之，數(shù)量會比較少。

3 討 論

急性缺血性腦梗死后，自身動員和修復的效率很低，在局部無法產(chǎn)生顯著性的效果［2-3］。骨髓干細胞動員可以使外周血干細胞的數(shù)量得以明顯的增加，繼而對腦組織的自然修復過程可以起到良好的促進作用。通過進行分組研究，筆者對rhG-CSF大鼠急性缺血性腦梗死的保護機制有一定的推測，即：（1）當局灶性腦梗死發(fā)生時，人重組粒細胞集落刺激因子（rhG-CSF）對受損細胞起到保護作用，使腦細胞壞死得以減少，對神經(jīng)修復速度起到良好的促進作用。（2）作為骨髓干細胞的強有力動員劑，人重組粒細胞集落刺激因子（rhG-CSF）可以對骨髓干細胞起到調動作用，經(jīng)破壞的血腦屏障，到達腦梗死及其周圍，這樣可以往神經(jīng)細胞及血管內皮細胞分化，對神經(jīng)細胞、血管的再生起到促進作用，使腦梗死的體積得以縮小，對腦梗死后神經(jīng)功能的修復起到良好的促進作用。

此外，還有研究認為，骨髓干細胞接受動員后，能夠同腦組織彼此發(fā)揮作用，進而增加自分泌和旁分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子，可以對受到損傷的神經(jīng)元的再生起到良好的促進作用，可以使神經(jīng)元的病理狀態(tài)得以有效的改善，有助于保護缺血后神經(jīng)損傷，并對此加以有效的修復［4-5］。

本次研究中研究組大鼠腦梗死灶體積明顯小于對照組，且Garcia神經(jīng)功能評分更高，腦梗死部位出現(xiàn)CD34+細胞及nestin陽性細胞浸潤。

綜上所述，rhG-CSF可以減輕大鼠急性缺血性腦梗死程度，減小腦梗死體積，其機理可能是rhG-CSF對缺血神經(jīng)元具有保護作用，減少細胞凋亡，并動員骨髓干細胞，促進神經(jīng)細胞再生。

［1］ 程元元，劉瑞珍，任建宏，等.rhG-CSF聯(lián)合胞磷膽堿處理對大鼠腦缺血再灌注后Bcl-2，Bax的影響［J］.中國醫(yī)療前沿，2012，（02）:16-17.

［2］ 方 立，王雪晶，荊 婧，等.rhG-CSF對大鼠缺血缺氧神經(jīng)元巨自噬水平的影響［J］.鄭州大學學報（醫(yī)學版），2013，（11）:42-46.

［3］ 田 沈，林佳才，張朝東.RhG-CSF對糖尿病及非糖尿病大鼠缺血性腦卒中預后及神經(jīng)生長因子表達的影響［J］.華西藥學雜志，2012，（08）:61-63.

［4］ 鄧文靜，李東瑞，楚廣磊，滕軍放.重組人粒細胞集落刺激因子對腦缺血再灌注大鼠的神經(jīng)保護和血管再生作用［J］.中國實用神經(jīng)疾病雜志，2015，（08）:15-17.

［5］ 辛國棟，鮑月寧.重組人粒細胞集落刺激因子佐治急性腦梗死40例療效觀察［J］.疑難病雜志，2011，（01）:62-64.

本文編輯：吳宏艷

R743.3

B

ISSN.2095-6681.2016.16.121.02

付宏亮（1980-），男，臨汾人，碩士研究生，主治醫(yī)師，研究方向：腦血管病