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        艾葉水煮醇提液對肉兔生長性能的影響

        2016-10-20 15:26:31周孝瓊李炳貴陳慧芳
        江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2016年7期
        關(guān)鍵詞:免疫球蛋白生長性能艾葉

        周孝瓊 李炳貴 陳慧芳

        摘要:為比較不同劑量艾葉水煮醇提液對肉兔生長性能的影響,采用24只斷奶質(zhì)量相當(dāng)?shù)墓枮I白兔,研究不同劑量艾葉水煮醇提液對肉兔采食量、日增質(zhì)量、料肉比等生長性能的影響。為探討其作用機(jī)理測定了每只肉兔免疫球蛋白IgG的含量,并比較各組肉兔空腸絨毛形態(tài)特征。與對照組相比,劑量為3.0 mL/只的末質(zhì)量、平均日增質(zhì)量、料肉比差異均極顯著(P<0.05),空腸絨毛高度差異顯著(P

        關(guān)鍵詞:艾葉;水煮醇提液;肉兔;生長性能;免疫球蛋白

        中圖分類號: S816.73 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2016)07-0295-03

        艾草是菊科多年生草本植物,普遍生長于路旁、荒野、草地,易采集且價(jià)格低廉。艾葉是傳統(tǒng)中藥,其味辛溫,歸肝、脾、胃三經(jīng),具有理氣血、逐寒濕、調(diào)經(jīng)、安胎、止血、防治多種疾病等功能[1]?,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)分析和開發(fā)研究表明,艾葉具有抗菌、抗病毒[2]、抗腫瘤[3-4]、抗炎、抗氧化[5]等藥理活性。艾葉不僅是人類的常用中藥,也是畜禽及水生動物良好的飼料和飼料添加劑,具有促進(jìn)動物生長、提高生產(chǎn)性能、改善動物產(chǎn)品品質(zhì)、防治疾病等作用。艾葉富含營養(yǎng)成分,粗脂肪含量4.4%、粗纖維含量19.3%、粗灰分含量7.4%、粗蛋白質(zhì)含量13.6%[6]。氨基酸的組成比較全面,谷氨酸、賴氨酸、組氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、香鮮味氨酸占總氨基酸的75%~90%[7]。在蛋雛雞日糧中添加適量大蒜和艾葉可提高雞的質(zhì)量、日增質(zhì)量,并降低料肉比,在添加之初對蛋雛雞的質(zhì)量和日增質(zhì)量沒有明顯影響,之后影響逐漸增大[8]。在蛋種雞的基礎(chǔ)日糧中添加艾葉粉,可提高產(chǎn)蛋率、種蛋受精率、受精蛋孵化率、受精蛋健雛率[9]。艾葉在肉兔中的應(yīng)用報(bào)道較少,僅限于粉劑在飼料中直接添加。本試驗(yàn)研究艾葉水煮醇提液對肉兔生長性能的影響,并探討其作用機(jī)理,為中藥添加劑的現(xiàn)代化應(yīng)用提供依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)動物

        選取健康的30日齡斷奶哈爾濱白兔,雌雄各半,質(zhì)量為(0.50±0.05) kg。1.2 主要試劑和藥品

        艾葉購自安徽億源中藥飲片科技有限公司,批號20140901。兔免疫球蛋白G(IgG)、ELISA檢測試劑盒購自上海雅浦生物科技有限公司,批號2014/11(96T)。

        1.3 主要儀器

        VARIOSKAN FLASH型全自動多功能酶標(biāo)儀(美國熱電公司),RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠),RM2015型輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)(上海萊卡有限公司)。

        1.4 艾葉水煮醇提液的制備

        100 g艾葉經(jīng)蒸餾水浸泡30 min后,分別用10、8、6倍量的蒸餾水煮3次,同時(shí)收集蒸餾液備用,將3次的水煎液混合,用4層紗布過濾,濃縮至100 mL。冷卻后醇提2次并調(diào)節(jié)pH值、過濾,加10 mL蒸餾成分,用蒸餾水稀釋至100 mL,使含藥量為1 g/mL。

        1.5 生長性能試驗(yàn)

        將24只肉兔隨機(jī)分為A、B、C、D組,每組6只,公母各半。A、B、C組分別為艾葉水煮醇提液的高劑量組(4.0 mL/只)、中劑量組(3.0 mL/只)、低劑量組(2.0 mL/只),D組為對照組。A組每只每天通過灌胃方式直接灌服4.0 mL艾葉水煮醇提液,B組灌服3.0 mL艾葉水煮醇提液和1.0 mL生理鹽水,C組灌服2.0 mL艾葉水煮醇提液和2.0 mL生理鹽水,D組灌服4.0 mL生理鹽水。試驗(yàn)期間使用配合飼料飼喂,籠養(yǎng),每籠6只,每天定時(shí)加料2次,自由采食、飲水,每天傍晚定時(shí)給藥,連續(xù)30 d。試驗(yàn)期內(nèi)固定專人記錄試驗(yàn)數(shù)據(jù),觀察采食情況。每天定時(shí)記錄兔的質(zhì)量和耗料量。試驗(yàn)結(jié)束后,分別計(jì)算兔的平均日增質(zhì)量、料肉比等。

        1.6 免疫球蛋白檢測

        分別在給藥前(0 d)以及給藥后10、20、30 d的傍晚,每只兔心臟采血2 mL,靜置后以3 000 r/min離心5 min,取血清分別進(jìn)行兔免疫球蛋白G(IgG)ELISA檢測。采用間接ELISA抗體檢測法,向預(yù)先包被兔免疫球蛋白G捕獲抗體的包被微孔中依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,進(jìn)行溫育并徹底洗滌。采用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化為最終的黃色,顏色深淺與兔免疫球蛋白濃度呈正相關(guān)。采用酶標(biāo)儀在 450 nm 波長下測定吸光度,通過分光光度計(jì)測出D值,從而得到免疫球蛋白濃度。

        1.7 空腸絨毛高度和隱窩深度測定

        試驗(yàn)結(jié)束,肉兔屠宰后迅速剖開腹腔,在生理鹽水中每只肉兔取一段空腸腸管,采用常規(guī)方法制作石蠟組織切片。從組織切片中選取完整、伸展良好的絨毛和隱窩各5個(gè),分別在顯微鏡下測定絨毛高度和隱窩深度,并計(jì)算其比值。

        1.8 數(shù)據(jù)分析

        采用SPSS 18.0軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,并對各組試驗(yàn)數(shù)據(jù)的差異顯著性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 對肉兔生長性能的影響

        肉兔的生長性能情況見表1。

        由表1可知,A、B、C組的平均日增質(zhì)量分別比D組提高11.51%、13.96%、4.90%。A組與D組差異顯著(P<005),B組與D組差異極顯著(P0.05)。結(jié)果顯示,3.0 mL/只對提高日增質(zhì)量的效果最好。A組的料肉比為3.59 ∶ 1,B組的料肉比為325 ∶ 1,C組的料肉比為3.29 ∶ 1,D組的料肉比為 3.64 ∶ 1。可見,肉兔每增質(zhì)量1 kg,A組比D組節(jié)省飼料 0.046 kg,B組、C組分別可節(jié)省0.38、0.34 kg。A、B、C試驗(yàn)組分別比D組降低1.27%、10.55%、9.33%。結(jié)果顯示,3.0 mL/只 的藥量對降低料肉比的效果最好。

        2.2 兔免疫球蛋白G(IgG)ELISA檢測

        兔免疫球蛋白G(IgG)ELISA檢測結(jié)果見表2。用藥 30 d 后,A、B、C組的免疫球蛋白水平分別提高114.25%、167.59%、149.68%,而D組(對照組)的免疫球蛋白水平提高113.08%。與對照組相比,B組用藥10、20、30 d時(shí)差異顯著(P

        2.3 空腸絨毛高度(VH)和隱窩深度(CD)

        各組肉兔的空腸絨毛高度和隱窩深度測定結(jié)果見表3。

        由表3可知,與對照組相比,3 mL/只濃度的空腸絨毛高度和隱窩深度差異極顯著(P

        3 結(jié)論與討論

        3.1 對生長性能的影響

        黃賀儒研究發(fā)現(xiàn),試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中用艾葉粉替代20%稻谷糠,對照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組肉用兔的日增質(zhì)量比對照組提高14.40%(P<0.01),飼料報(bào)酬提高11.10%(P0.05)。隨著艾葉水煮醇提液給藥量的增加,其對生長性能的提高呈正態(tài)分布,而不是線性分布。孫蓉等研究表明,艾葉可發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用,與降低血中PGE水平、調(diào)節(jié)體內(nèi)SOD及NO水平有關(guān),但其發(fā)揮藥效作用的同時(shí)伴隨有肝毒副作用[10]。艾葉功效的發(fā)揮與毒性的表達(dá)、劑量、用藥時(shí)間密切相關(guān)[11];因此,使用艾葉時(shí)必須嚴(yán)格控制劑量。

        3.2 對免疫球蛋白的影響

        孔祥峰等進(jìn)行了9種中藥提取物對雛雞新城疫抗體水平影響的研究,發(fā)現(xiàn)中草藥免疫增強(qiáng)劑對機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫功能具有增強(qiáng)或調(diào)節(jié)作用,可提高機(jī)體的抗病力和抵抗力,減少疾病的發(fā)生,進(jìn)而促進(jìn)生長[12]。李慧峰等研究表明,秦皮、黃連等具有提高機(jī)體免疫力的作用,可促進(jìn)免疫細(xì)胞生長[13]。本試驗(yàn)中,用藥30 d后A、B、C組的免疫球蛋白水平分別提高114.25%、167.59%、149.68%,而D組(對照組)提高113.08%。可見,艾葉水煮醇提液可提高肉兔的免疫球蛋白水平,進(jìn)而提高機(jī)體抵抗力,減少疾病的發(fā)生,提高肉兔的生長性能。

        3.3 對空腸絨毛高度和隱窩深度的影響

        小腸是消化吸收的重要場所,小腸絨毛高度的增加有助于提高動物機(jī)體的消化吸收能力[14]。小腸絨毛高度與隱窩深度的比值是衡量小腸上皮細(xì)胞更新速度、小腸消化吸收能力的重要指標(biāo)[15]。本試驗(yàn)中,劑量為3.0 mL/只的B組與對照組相比差異極顯著,表明艾葉水煮醇提液可提高肉兔小腸絨毛高度和小腸上皮細(xì)胞的更新速度,有助于提高其消化吸收能力,從而提高家兔的生長性能。

        參考文獻(xiàn):

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