周孝瓊　李炳貴　陳慧芳

摘要：為比較不同劑量艾葉水煮醇提液對肉兔生長性能的影響，采用24只斷奶質(zhì)量相當?shù)墓枮I白兔，研究不同劑量艾葉水煮醇提液對肉兔采食量、日增質(zhì)量、料肉比等生長性能的影響。為探討其作用機理測定了每只肉兔免疫球蛋白IgG的含量，并比較各組肉兔空腸絨毛形態(tài)特征。與對照組相比，劑量為3.0 mL/只的末質(zhì)量、平均日增質(zhì)量、料肉比差異均極顯著（P<0.05），空腸絨毛高度差異顯著（P

關(guān)鍵詞：艾葉；水煮醇提液；肉兔；生長性能；免疫球蛋白

中圖分類號： S816.73 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2016）07-0295-03

艾草是菊科多年生草本植物，普遍生長于路旁、荒野、草地，易采集且價格低廉。艾葉是傳統(tǒng)中藥，其味辛溫，歸肝、脾、胃三經(jīng)，具有理氣血、逐寒濕、調(diào)經(jīng)、安胎、止血、防治多種疾病等功能[1]。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)分析和開發(fā)研究表明，艾葉具有抗菌、抗病毒[2]、抗腫瘤[3-4]、抗炎、抗氧化[5]等藥理活性。艾葉不僅是人類的常用中藥，也是畜禽及水生動物良好的飼料和飼料添加劑，具有促進動物生長、提高生產(chǎn)性能、改善動物產(chǎn)品品質(zhì)、防治疾病等作用。艾葉富含營養(yǎng)成分，粗脂肪含量4.4%、粗纖維含量19.3%、粗灰分含量7.4%、粗蛋白質(zhì)含量13.6%[6]。氨基酸的組成比較全面，谷氨酸、賴氨酸、組氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、香鮮味氨酸占總氨基酸的75%～90%[7]。在蛋雛雞日糧中添加適量大蒜和艾葉可提高雞的質(zhì)量、日增質(zhì)量，并降低料肉比，在添加之初對蛋雛雞的質(zhì)量和日增質(zhì)量沒有明顯影響，之后影響逐漸增大[8]。在蛋種雞的基礎(chǔ)日糧中添加艾葉粉，可提高產(chǎn)蛋率、種蛋受精率、受精蛋孵化率、受精蛋健雛率[9]。艾葉在肉兔中的應(yīng)用報道較少，僅限于粉劑在飼料中直接添加。本試驗研究艾葉水煮醇提液對肉兔生長性能的影響，并探討其作用機理，為中藥添加劑的現(xiàn)代化應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

選取健康的30日齡斷奶哈爾濱白兔，雌雄各半，質(zhì)量為（0.50±0.05） kg。1.2 主要試劑和藥品

艾葉購自安徽億源中藥飲片科技有限公司，批號20140901。兔免疫球蛋白G（IgG）、ELISA檢測試劑盒購自上海雅浦生物科技有限公司，批號2014/11（96T）。

1.3 主要儀器

VARIOSKAN FLASH型全自動多功能酶標儀（美國熱電公司），RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠），RM2015型輪轉(zhuǎn)式切片機（上海萊卡有限公司）。

1.4 艾葉水煮醇提液的制備

100 g艾葉經(jīng)蒸餾水浸泡30 min后，分別用10、8、6倍量的蒸餾水煮3次，同時收集蒸餾液備用，將3次的水煎液混合，用4層紗布過濾，濃縮至100 mL。冷卻后醇提2次并調(diào)節(jié)pH值、過濾，加10 mL蒸餾成分，用蒸餾水稀釋至100 mL，使含藥量為1 g/mL。

1.5 生長性能試驗

將24只肉兔隨機分為A、B、C、D組，每組6只，公母各半。A、B、C組分別為艾葉水煮醇提液的高劑量組（4.0 mL/只）、中劑量組（3.0 mL/只）、低劑量組（2.0 mL/只），D組為對照組。A組每只每天通過灌胃方式直接灌服4.0 mL艾葉水煮醇提液，B組灌服3.0 mL艾葉水煮醇提液和1.0 mL生理鹽水，C組灌服2.0 mL艾葉水煮醇提液和2.0 mL生理鹽水，D組灌服4.0 mL生理鹽水。試驗期間使用配合飼料飼喂，籠養(yǎng)，每籠6只，每天定時加料2次，自由采食、飲水，每天傍晚定時給藥，連續(xù)30 d。試驗期內(nèi)固定專人記錄試驗數(shù)據(jù)，觀察采食情況。每天定時記錄兔的質(zhì)量和耗料量。試驗結(jié)束后，分別計算兔的平均日增質(zhì)量、料肉比等。

1.6 免疫球蛋白檢測

分別在給藥前（0 d）以及給藥后10、20、30 d的傍晚，每只兔心臟采血2 mL，靜置后以3 000 r/min離心5 min，取血清分別進行兔免疫球蛋白G（IgG）ELISA檢測。采用間接ELISA抗體檢測法，向預(yù)先包被兔免疫球蛋白G捕獲抗體的包被微孔中依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，進行溫育并徹底洗滌。采用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化為最終的黃色，顏色深淺與兔免疫球蛋白濃度呈正相關(guān)。采用酶標儀在 450 nm 波長下測定吸光度，通過分光光度計測出D值，從而得到免疫球蛋白濃度。

1.7 空腸絨毛高度和隱窩深度測定

試驗結(jié)束，肉兔屠宰后迅速剖開腹腔，在生理鹽水中每只肉兔取一段空腸腸管，采用常規(guī)方法制作石蠟組織切片。從組織切片中選取完整、伸展良好的絨毛和隱窩各5個，分別在顯微鏡下測定絨毛高度和隱窩深度，并計算其比值。

1.8 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 18.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進行方差分析，并對各組試驗數(shù)據(jù)的差異顯著性進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 對肉兔生長性能的影響

肉兔的生長性能情況見表1。

由表1可知，A、B、C組的平均日增質(zhì)量分別比D組提高11.51%、13.96%、4.90%。A組與D組差異顯著（P<005），B組與D組差異極顯著（P0.05）。結(jié)果顯示，3.0 mL/只對提高日增質(zhì)量的效果最好。A組的料肉比為3.59 ∶ 1，B組的料肉比為325 ∶ 1，C組的料肉比為3.29 ∶ 1，D組的料肉比為 3.64 ∶ 1?？梢?，肉兔每增質(zhì)量1 kg，A組比D組節(jié)省飼料 0.046 kg，B組、C組分別可節(jié)省0.38、0.34 kg。A、B、C試驗組分別比D組降低1.27%、10.55%、9.33%。結(jié)果顯示，3.0 mL/只 的藥量對降低料肉比的效果最好。

2.2 兔免疫球蛋白G（IgG）ELISA檢測

兔免疫球蛋白G（IgG）ELISA檢測結(jié)果見表2。用藥 30 d 后，A、B、C組的免疫球蛋白水平分別提高114.25%、167.59%、149.68%，而D組（對照組）的免疫球蛋白水平提高113.08%。與對照組相比，B組用藥10、20、30 d時差異顯著（P

2.3 空腸絨毛高度（VH）和隱窩深度（CD）

各組肉兔的空腸絨毛高度和隱窩深度測定結(jié)果見表3。

由表3可知，與對照組相比，3 mL/只濃度的空腸絨毛高度和隱窩深度差異極顯著（P

3 結(jié)論與討論

3.1 對生長性能的影響

黃賀儒研究發(fā)現(xiàn)，試驗組在基礎(chǔ)日糧中用艾葉粉替代20%稻谷糠，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組肉用兔的日增質(zhì)量比對照組提高14.40%（P<0.01），飼料報酬提高11.10%（P0.05）。隨著艾葉水煮醇提液給藥量的增加，其對生長性能的提高呈正態(tài)分布，而不是線性分布。孫蓉等研究表明，艾葉可發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用，與降低血中PGE水平、調(diào)節(jié)體內(nèi)SOD及NO水平有關(guān)，但其發(fā)揮藥效作用的同時伴隨有肝毒副作用[10]。艾葉功效的發(fā)揮與毒性的表達、劑量、用藥時間密切相關(guān)[11]；因此，使用艾葉時必須嚴格控制劑量。

3.2 對免疫球蛋白的影響

孔祥峰等進行了9種中藥提取物對雛雞新城疫抗體水平影響的研究，發(fā)現(xiàn)中草藥免疫增強劑對機體的細胞免疫和體液免疫功能具有增強或調(diào)節(jié)作用，可提高機體的抗病力和抵抗力，減少疾病的發(fā)生，進而促進生長[12]。李慧峰等研究表明，秦皮、黃連等具有提高機體免疫力的作用，可促進免疫細胞生長[13]。本試驗中，用藥30 d后A、B、C組的免疫球蛋白水平分別提高114.25%、167.59%、149.68%，而D組（對照組）提高113.08%?？梢?，艾葉水煮醇提液可提高肉兔的免疫球蛋白水平，進而提高機體抵抗力，減少疾病的發(fā)生，提高肉兔的生長性能。

3.3 對空腸絨毛高度和隱窩深度的影響

小腸是消化吸收的重要場所，小腸絨毛高度的增加有助于提高動物機體的消化吸收能力[14]。小腸絨毛高度與隱窩深度的比值是衡量小腸上皮細胞更新速度、小腸消化吸收能力的重要指標[15]。本試驗中，劑量為3.0 mL/只的B組與對照組相比差異極顯著，表明艾葉水煮醇提液可提高肉兔小腸絨毛高度和小腸上皮細胞的更新速度，有助于提高其消化吸收能力，從而提高家兔的生長性能。

參考文獻：

[1]汪國華，張文惠，崔 峻. 艾葉研究近況[J]. 江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，1998，10（4）：192-193.

[2]Wang W，Zhang X K，Wu N，et al. Antinicrobial activities of essential oil from Artemisia argyi leaves[J]. Journal of Forestry Research，2006，17（4）：332-334.

[3]Lee H G，Yu K A，Oh W K，et al. Inhibitory effect of jaceosidin isolated from Artemisia argyi on the function of E6 and E7 oncoproteins of HPV 16[J]. Journal of Ethnopharmacology，2005，98（3）：339-343.

[4]Shoem A，Hamilton B，Dairkee S H，et al. In vitro anticancer activity of twelve Chinese Med icinal herbs[J]. Phytotherapy Research，2005，19（7）：649-651.

[5]Kim M J，Kim D H，Lee K W，et al. Jaceosidin induces apoptosis in ras-transformed human breast epithelial cells through generation of reactive oxygen species[J]. Annals of the New York Academy of Sciences，2007，1095：483-495.

[6]黃賀儒. 艾葉粉代替稻谷糠飼喂肉用兔的試驗效果[J]. 廣西畜牧獸醫(yī)，2003，19（1）：9-10.

[7]王艷榮，何 云，苗志國，等. “綠色”飼料添加劑——艾葉的研究進展[J]. 糧食與飼料工業(yè)，2009（10）：38-40.

[8]趙興華，何 欣，劉廷玉. 大蒜和艾葉對蛋雛雞生長性能和免疫功能的影響[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī)，2011（15）：75-77.

[9]杜森有. 種雞飼料中添加艾葉粉對蛋質(zhì)量的影響[J]. 飼料研究，2008（2）：50-51.

[10]孫 蓉，馮 群，黃 偉，等. 基于鎮(zhèn)痛作用的艾葉不同組分藥效與毒副作用機制研究[J]. 中藥藥理與臨床，2013，29（6）：76-80.

[11]王惠君，王文泉，盧 誠，等. 艾葉研究進展概述[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（8）：15-19，44.

[12]孔祥峰，胡元亮，李祥瑞，等. 9種中藥成分對新城疫Ⅳ系疫苗免疫雛雞血清中血凝抑制抗體水平的影響[J]. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報，2004，35（4）：468-472.

[13]李慧峰，單明輝，李子平. 復(fù)方中藥免疫增強劑的初步篩選及其毒性作用研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（31）：15297-15298.

[14]顧憲紅，張宏福，佘銳萍，等. 斷奶日齡對仔豬腸黏膜形態(tài)的影響[J]. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報，2001，32（4）：306-313.

[15]晁洪雨，李福昌. 日糧ADF水平對肉兔氮代謝、小腸組織學(xué)結(jié)構(gòu)和二糖酶活性的影響[J]. 中國獸醫(yī)學(xué)報，2008，28（5）：604-607.