周孝瓊　李炳貴　陳慧芳

摘要：為比較不同劑量艾葉水煮醇提液對肉兔生長性能的影響，采用24只斷奶質(zhì)量相當(dāng)?shù)墓枮I白兔，研究不同劑量艾葉水煮醇提液對肉兔采食量、日增質(zhì)量、料肉比等生長性能的影響。為探討其作用機(jī)理測定了每只肉兔免疫球蛋白IgG的含量，并比較各組肉兔空腸絨毛形態(tài)特征。與對照組相比，劑量為3.0 mL/只的末質(zhì)量、平均日增質(zhì)量、料肉比差異均極顯著（P<0.05），空腸絨毛高度差異顯著（P

關(guān)鍵詞：艾葉；水煮醇提液；肉兔；生長性能；免疫球蛋白

中圖分類號： S816.73 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：1002-1302（2016）07-0295-03

艾草是菊科多年生草本植物，普遍生長于路旁、荒野、草地，易采集且價(jià)格低廉。艾葉是傳統(tǒng)中藥，其味辛溫，歸肝、脾、胃三經(jīng)，具有理氣血、逐寒濕、調(diào)經(jīng)、安胎、止血、防治多種疾病等功能[1]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)分析和開發(fā)研究表明，艾葉具有抗菌、抗病毒[2]、抗腫瘤[3-4]、抗炎、抗氧化[5]等藥理活性。艾葉不僅是人類的常用中藥，也是畜禽及水生動物良好的飼料和飼料添加劑，具有促進(jìn)動物生長、提高生產(chǎn)性能、改善動物產(chǎn)品品質(zhì)、防治疾病等作用。艾葉富含營養(yǎng)成分，粗脂肪含量4.4%、粗纖維含量19.3%、粗灰分含量7.4%、粗蛋白質(zhì)含量13.6%[6]。氨基酸的組成比較全面，谷氨酸、賴氨酸、組氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、香鮮味氨酸占總氨基酸的75%～90%[7]。在蛋雛雞日糧中添加適量大蒜和艾葉可提高雞的質(zhì)量、日增質(zhì)量，并降低料肉比，在添加之初對蛋雛雞的質(zhì)量和日增質(zhì)量沒有明顯影響，之后影響逐漸增大[8]。在蛋種雞的基礎(chǔ)日糧中添加艾葉粉，可提高產(chǎn)蛋率、種蛋受精率、受精蛋孵化率、受精蛋健雛率[9]。艾葉在肉兔中的應(yīng)用報(bào)道較少，僅限于粉劑在飼料中直接添加。本試驗(yàn)研究艾葉水煮醇提液對肉兔生長性能的影響，并探討其作用機(jī)理，為中藥添加劑的現(xiàn)代化應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物

選取健康的30日齡斷奶哈爾濱白兔，雌雄各半，質(zhì)量為（0.50±0.05） kg。1.2 主要試劑和藥品

艾葉購自安徽億源中藥飲片科技有限公司，批號20140901。兔免疫球蛋白G（IgG）、ELISA檢測試劑盒購自上海雅浦生物科技有限公司，批號2014/11（96T）。

1.3 主要儀器

VARIOSKAN FLASH型全自動多功能酶標(biāo)儀（美國熱電公司），RE-52AA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠），RM2015型輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)（上海萊卡有限公司）。

1.4 艾葉水煮醇提液的制備

100 g艾葉經(jīng)蒸餾水浸泡30 min后，分別用10、8、6倍量的蒸餾水煮3次，同時(shí)收集蒸餾液備用，將3次的水煎液混合，用4層紗布過濾，濃縮至100 mL。冷卻后醇提2次并調(diào)節(jié)pH值、過濾，加10 mL蒸餾成分，用蒸餾水稀釋至100 mL，使含藥量為1 g/mL。

1.5 生長性能試驗(yàn)

將24只肉兔隨機(jī)分為A、B、C、D組，每組6只，公母各半。A、B、C組分別為艾葉水煮醇提液的高劑量組（4.0 mL/只）、中劑量組（3.0 mL/只）、低劑量組（2.0 mL/只），D組為對照組。A組每只每天通過灌胃方式直接灌服4.0 mL艾葉水煮醇提液，B組灌服3.0 mL艾葉水煮醇提液和1.0 mL生理鹽水，C組灌服2.0 mL艾葉水煮醇提液和2.0 mL生理鹽水，D組灌服4.0 mL生理鹽水。試驗(yàn)期間使用配合飼料飼喂，籠養(yǎng)，每籠6只，每天定時(shí)加料2次，自由采食、飲水，每天傍晚定時(shí)給藥，連續(xù)30 d。試驗(yàn)期內(nèi)固定專人記錄試驗(yàn)數(shù)據(jù)，觀察采食情況。每天定時(shí)記錄兔的質(zhì)量和耗料量。試驗(yàn)結(jié)束后，分別計(jì)算兔的平均日增質(zhì)量、料肉比等。

1.6 免疫球蛋白檢測

分別在給藥前（0 d）以及給藥后10、20、30 d的傍晚，每只兔心臟采血2 mL，靜置后以3 000 r/min離心5 min，取血清分別進(jìn)行兔免疫球蛋白G（IgG）ELISA檢測。采用間接ELISA抗體檢測法，向預(yù)先包被兔免疫球蛋白G捕獲抗體的包被微孔中依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，進(jìn)行溫育并徹底洗滌。采用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化為最終的黃色，顏色深淺與兔免疫球蛋白濃度呈正相關(guān)。采用酶標(biāo)儀在 450 nm 波長下測定吸光度，通過分光光度計(jì)測出D值，從而得到免疫球蛋白濃度。

1.7 空腸絨毛高度和隱窩深度測定

試驗(yàn)結(jié)束，肉兔屠宰后迅速剖開腹腔，在生理鹽水中每只肉兔取一段空腸腸管，采用常規(guī)方法制作石蠟組織切片。從組織切片中選取完整、伸展良好的絨毛和隱窩各5個(gè)，分別在顯微鏡下測定絨毛高度和隱窩深度，并計(jì)算其比值。

1.8 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 18.0軟件對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，并對各組試驗(yàn)數(shù)據(jù)的差異顯著性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 對肉兔生長性能的影響

肉兔的生長性能情況見表1。

由表1可知，A、B、C組的平均日增質(zhì)量分別比D組提高11.51%、13.96%、4.90%。A組與D組差異顯著（P<005），B組與D組差異極顯著（P0.05）。結(jié)果顯示，3.0 mL/只對提高日增質(zhì)量的效果最好。A組的料肉比為3.59 ∶ 1，B組的料肉比為325 ∶ 1，C組的料肉比為3.29 ∶ 1，D組的料肉比為 3.64 ∶ 1。可見，肉兔每增質(zhì)量1 kg，A組比D組節(jié)省飼料 0.046 kg，B組、C組分別可節(jié)省0.38、0.34 kg。A、B、C試驗(yàn)組分別比D組降低1.27%、10.55%、9.33%。結(jié)果顯示，3.0 mL/只 的藥量對降低料肉比的效果最好。

2.2 兔免疫球蛋白G（IgG）ELISA檢測

兔免疫球蛋白G（IgG）ELISA檢測結(jié)果見表2。用藥 30 d 后，A、B、C組的免疫球蛋白水平分別提高114.25%、167.59%、149.68%，而D組（對照組）的免疫球蛋白水平提高113.08%。與對照組相比，B組用藥10、20、30 d時(shí)差異顯著（P

2.3 空腸絨毛高度（VH）和隱窩深度（CD）

各組肉兔的空腸絨毛高度和隱窩深度測定結(jié)果見表3。

由表3可知，與對照組相比，3 mL/只濃度的空腸絨毛高度和隱窩深度差異極顯著（P

3 結(jié)論與討論

3.1 對生長性能的影響

黃賀儒研究發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中用艾葉粉替代20%稻谷糠，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組肉用兔的日增質(zhì)量比對照組提高14.40%（P<0.01），飼料報(bào)酬提高11.10%（P0.05）。隨著艾葉水煮醇提液給藥量的增加，其對生長性能的提高呈正態(tài)分布，而不是線性分布。孫蓉等研究表明，艾葉可發(fā)揮鎮(zhèn)痛作用，與降低血中PGE水平、調(diào)節(jié)體內(nèi)SOD及NO水平有關(guān)，但其發(fā)揮藥效作用的同時(shí)伴隨有肝毒副作用[10]。艾葉功效的發(fā)揮與毒性的表達(dá)、劑量、用藥時(shí)間密切相關(guān)[11]；因此，使用艾葉時(shí)必須嚴(yán)格控制劑量。

3.2 對免疫球蛋白的影響

孔祥峰等進(jìn)行了9種中藥提取物對雛雞新城疫抗體水平影響的研究，發(fā)現(xiàn)中草藥免疫增強(qiáng)劑對機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫功能具有增強(qiáng)或調(diào)節(jié)作用，可提高機(jī)體的抗病力和抵抗力，減少疾病的發(fā)生，進(jìn)而促進(jìn)生長[12]。李慧峰等研究表明，秦皮、黃連等具有提高機(jī)體免疫力的作用，可促進(jìn)免疫細(xì)胞生長[13]。本試驗(yàn)中，用藥30 d后A、B、C組的免疫球蛋白水平分別提高114.25%、167.59%、149.68%，而D組（對照組）提高113.08%。可見，艾葉水煮醇提液可提高肉兔的免疫球蛋白水平，進(jìn)而提高機(jī)體抵抗力，減少疾病的發(fā)生，提高肉兔的生長性能。

3.3 對空腸絨毛高度和隱窩深度的影響

小腸是消化吸收的重要場所，小腸絨毛高度的增加有助于提高動物機(jī)體的消化吸收能力[14]。小腸絨毛高度與隱窩深度的比值是衡量小腸上皮細(xì)胞更新速度、小腸消化吸收能力的重要指標(biāo)[15]。本試驗(yàn)中，劑量為3.0 mL/只的B組與對照組相比差異極顯著，表明艾葉水煮醇提液可提高肉兔小腸絨毛高度和小腸上皮細(xì)胞的更新速度，有助于提高其消化吸收能力，從而提高家兔的生長性能。

參考文獻(xiàn)：

[1]汪國華，張文惠，崔 峻. 艾葉研究近況[J]. 江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1998，10（4）：192-193.

[2]Wang W，Zhang X K，Wu N，et al. Antinicrobial activities of essential oil from Artemisia argyi leaves[J]. Journal of Forestry Research，2006，17（4）：332-334.

[3]Lee H G，Yu K A，Oh W K，et al. Inhibitory effect of jaceosidin isolated from Artemisia argyi on the function of E6 and E7 oncoproteins of HPV 16[J]. Journal of Ethnopharmacology，2005，98（3）：339-343.

[4]Shoem A，Hamilton B，Dairkee S H，et al. In vitro anticancer activity of twelve Chinese Med icinal herbs[J]. Phytotherapy Research，2005，19（7）：649-651.

[5]Kim M J，Kim D H，Lee K W，et al. Jaceosidin induces apoptosis in ras-transformed human breast epithelial cells through generation of reactive oxygen species[J]. Annals of the New York Academy of Sciences，2007，1095：483-495.

[6]黃賀儒. 艾葉粉代替稻谷糠飼喂肉用兔的試驗(yàn)效果[J]. 廣西畜牧獸醫(yī)，2003，19（1）：9-10.

[7]王艷榮，何 云，苗志國，等. “綠色”飼料添加劑——艾葉的研究進(jìn)展[J]. 糧食與飼料工業(yè)，2009（10）：38-40.

[8]趙興華，何 欣，劉廷玉. 大蒜和艾葉對蛋雛雞生長性能和免疫功能的影響[J]. 黑龍江畜牧獸醫(yī)，2011（15）：75-77.

[9]杜森有. 種雞飼料中添加艾葉粉對蛋質(zhì)量的影響[J]. 飼料研究，2008（2）：50-51.

[10]孫 蓉，馮 群，黃 偉，等. 基于鎮(zhèn)痛作用的艾葉不同組分藥效與毒副作用機(jī)制研究[J]. 中藥藥理與臨床，2013，29（6）：76-80.

[11]王惠君，王文泉，盧 誠，等. 艾葉研究進(jìn)展概述[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（8）：15-19，44.

[12]孔祥峰，胡元亮，李祥瑞，等. 9種中藥成分對新城疫Ⅳ系疫苗免疫雛雞血清中血凝抑制抗體水平的影響[J]. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2004，35（4）：468-472.

[13]李慧峰，單明輝，李子平. 復(fù)方中藥免疫增強(qiáng)劑的初步篩選及其毒性作用研究[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（31）：15297-15298.

[14]顧憲紅，張宏福，佘銳萍，等. 斷奶日齡對仔豬腸黏膜形態(tài)的影響[J]. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2001，32（4）：306-313.

[15]晁洪雨，李福昌. 日糧ADF水平對肉兔氮代謝、小腸組織學(xué)結(jié)構(gòu)和二糖酶活性的影響[J]. 中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2008，28（5）：604-607.