柳施一　熊永興　劉義梅　陳科力

摘要：按照2010版《中國藥典》所規(guī)定的方法測定不同商品菊花（Chrysanthemum morifolium Ramat）中綠原酸、木犀草苷、3，5-O-二咖啡?；鼘幩?個指標(biāo)性成分的含量。結(jié)果表明，除2份儲存較久的樣品外，其余29份樣品的綠原酸、木犀草苷、3，5-O-二咖啡?；鼘幩岬暮糠秶謩e是0.20%～0.95%、0.11%～0.66%、0.66%～2.51%，27份樣品的3個指標(biāo)性成分含量均達(dá)到藥典標(biāo)準(zhǔn)。不同商品菊花3個指標(biāo)性成分存在較大差異，各地朵菊的質(zhì)量明顯好于餅菊，亳菊的3，5-O-二咖啡?；鼘幩岷孔罡撸０拙?個成分的總體含量較高。

關(guān)鍵詞：菊花（Chrysanthemum morifolium Ramat）；含量測定；綠原酸；木犀草苷；3，5-O-二咖啡?；鼘幩?/p>

中圖分類號：S682.1+1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）08-2102-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.08.047

Abstract： Methods that determining the contents of three index components， namely chlorogenic acid；galuteolin and 3，5-O-dicaffeoylquinic acid of Chrysanthemi Flos samples derives from different origins and merchandises were in accordance with the rules of Chinese Pharmacopoeia 2010 Edition. The results showed that in all the samples that had been tested， the composition of chlorogenic acid；galuteolin and 3，5-O-dicaffeoylquinic acid were 0.20%～0.95%， 0.11%～0.66%， 0.66%～2.51% respectively， except for two samples which had been stored for too long to reach the standard of Pharmacopoeia， and the contents of three index components in 27 samples all reached the standard of Pharmacopoeia. There are diversities between the different merchandises of Chrysanthemi flos， the quality of ‘Duoju significantly better than that of ‘Bingju in respective areas， the content of 3，5-O-dicaffeoylquinic acid in Dendranthema morifolium （Ramat.） Tzvel. cv.‘boju was the highest of all， the overall content of three index components in ‘Fubaiju was high.

Key words： Chrysanthemum morifolium Ramat；content determination；chlorogenic acid；galuteolin；3，5-O-dicaffeoylquinic acid

菊花（Chrysanthemum morifolium Ramat）為菊科多年生草本植物，具有散風(fēng)清熱、平肝明目、清熱解毒的功效，為大宗中藥材之一?，F(xiàn)代研究表明，菊花具有抗菌、抗炎、抗氧化、舒血管、降血脂、抗腫瘤、驅(qū)鉛等多種藥理作用[1]。2010版《中國藥典》規(guī)定菊花藥材需要測定綠原酸、木犀草苷、3，5-O-二咖啡?；鼘幩岬暮縖2]，其中綠原酸有保護(hù)心血管、抗氧化、抗菌抗病毒、降脂降血糖、保肝等作用[3-5]，木犀草苷有殺菌消炎、解熱鎮(zhèn)痛等作用[6]，咖啡?；鼘幩犷愌苌镉锌寡趸茸饔肹7]。中國菊花資源分布廣泛，產(chǎn)地自然環(huán)境差異大，各產(chǎn)地的栽培品種、采收時間、加工方法、貯藏條件等因素的差別都會使菊花的化學(xué)成分含量有所不同[8-11]。因此，本研究采用HPLC法對31份不同商品菊花樣品進(jìn)行了3個指標(biāo)性成分含量測定，為菊花藥材質(zhì)量評價及臨床用藥選擇提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗材料 試驗材料經(jīng)湖北中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院生藥教研室陳科力教授鑒定為菊科植物菊（Chrysanthemum morifolium）的干燥頭狀花序，樣品分裝密封后于4 ℃下低溫貯存，具體信息見表1。

1.1.2 儀器 高效液相色譜儀（戴安U-3000）；高頻臺式LCD超聲波清洗器（上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司，SK250H）；搖擺式粉碎機(jī)（廣州旭朗機(jī)械設(shè)備有限公司，HK-10B）；數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱（上海博迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠，GZX-9070MBE）；分樣篩（一號篩，浙江上虞縣紗篩廠）；萬分之一分析天平（德國賽多利斯集團(tuán)，BP61S）；十萬分之一分析天平（德國賽多利斯集團(tuán)，BP101D）；微孔濾膜（津隆，0.45 μm）。

1.1.3 試劑 綠原酸對照品（批號：110753-201314，中國食品藥品檢定研究院）；木犀草苷對照品（批號：111720-200501，中國藥品生物制品檢定所）；3，5-O-二咖啡?；鼘幩釋φ掌罚ㄅ枺?11782-201204，中國食品藥品檢定研究院）；磷酸（分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；甲醇（分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；乙腈（色譜純，美國天地）；水為雙蒸水。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件 色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；檢測波長：348 nm；流速：1 mL/min；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣量：5 μL。

流動相：以乙腈為流動相A，以0.1%磷酸緩沖溶液為流動相B，按表2中的條件進(jìn)行梯度洗脫。理論板數(shù)按3，5-O-二咖啡?；鼘幩岱逵嬎銘?yīng)不低于8 000。

1.2.2 對照品溶液的制備 取綠原酸對照品、木犀草苷對照品、3，5-O-二咖啡?；鼘幩釋φ掌愤m量，精密稱定后置于棕色量瓶中，加70%甲醇制成每1 mL含綠原酸35 μg、木犀草苷25 μg、3，5-O-二咖啡?；鼘幩?0 μg的混合溶液，即得（10 ℃以下保存）。

1.2.3 供試品溶液的制備 精密稱取菊花樣品粉末（過一號篩）約0.25 g，置于具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇25 mL，稱定重量，超聲處理（功率300 W，頻率45 kHz）40 min，冷卻后再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻后濾過，取續(xù)濾液，即得。

2 結(jié)果與分析

2.1 系統(tǒng)適用性試驗

吸取所制備的對照品混合溶液、供試品溶液各5 μL，按“1.2.1”色譜條件進(jìn)樣，得到各自的色譜圖（圖1和圖2）。結(jié)果表明，在該條件下色譜峰分離良好。

2.2 線性關(guān)系考察

分別精密稱取綠原酸、木犀草苷、3，5-O-二咖啡?；鼘幩徇m量，配成對照品母液（綠原酸125.6 μg/mL、木犀草苷90.0 μg/mL、3，5-O-二咖啡?；鼘幩?20.8 μg/mL），分別吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL至10 mL的棕色容量瓶中，加70%甲醇至刻度搖勻即得，分別精密吸取5 μL進(jìn)樣，在上述色譜條件下重復(fù)進(jìn)樣2次，測定峰面積，對各成分的各濃度與對應(yīng)的峰面積平均值進(jìn)行回歸處理，得回歸方程分別為綠原酸Y=1.129 8X+0.465 7，r=0.999 5；木犀草苷Y=0.810 4X+1.005 7，r=0.999 6；3，5-O-二咖啡?；鼘幩醂=0.979 4X+1.233 4，r=0.999 5。結(jié)果表明，綠原酸在6.28～37.68 μg/mL、木犀草苷在4.5～27.0 μg/mL、3，5-O-二咖啡?；鼘幩嵩?1.04～66.24 μg/mL濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.3 樣品含量測定

取各供試品溶液，按上述色譜分離條件，進(jìn)樣5 μL，測定綠原酸、木犀草苷、3，5-O-二咖啡?；鼘幩岱迕娣e，計算各成分含量，結(jié)果見表3。

3 結(jié)論與討論

2010版《中國藥典》中規(guī)定綠原酸（C16H18O9）不得少于0.20%，木犀草苷（C21H20O11）不得少于0.080%，3，5-O-二咖啡?；鼘幩幔–25H24O12）不得少于0.70%[1]。32份商品樣品中來自市場的杭白菊餅花（17號）和懷菊（29號）2個商品樣品的3個成分含量明顯偏低，這2個樣品通過觀察發(fā)現(xiàn)是屬于儲存期過久的陳貨，來自廣西玉林藥材市場的29號商品含水量較高，而且有霉點(diǎn)，說明儲存期過長、含水量過高會影響質(zhì)量。其他來自不同產(chǎn)地的31份菊花商品樣品的3個指標(biāo)性成分綠原酸、木犀草苷、3，5-O-二咖啡?；鼘幩岬暮糠秶謩e是0.20%～0.95%、0.11%～0.66%、0.66%～2.51%，27份樣品的3項指標(biāo)均達(dá)到藥典標(biāo)準(zhǔn)，其中福白菊胎花的綠原酸和木犀草苷含量、亳菊的3，5-O-二咖啡酰基奎寧酸含量遠(yuǎn)超過藥典標(biāo)準(zhǔn)。

同一產(chǎn)地不同加工方法的藥材含量相差較大，如殺青后烘干的福白菊朵花3個成分含量明顯高于曬干的餅花；包裝銷售的桐鄉(xiāng)產(chǎn)的杭白菊朵花和小洋菊朵花的3個成分含量也較高，杭白菊餅花樣品的綠原酸和3，5-O-二咖啡?；鼘幩岷康陀谒幍洌浼庸し椒ㄒ部赡苁墙档秃康囊粋€原因。

由于不同產(chǎn)地菊花商品的樣品不足，代表性不足，本研究不能完全反映不同產(chǎn)地菊花商品的區(qū)別。但從31個樣品來看，菊花傳統(tǒng)產(chǎn)地的亳菊、貢菊、杭菊（浙江桐鄉(xiāng)菊花）等品種的菊花藥材質(zhì)量較好并且較穩(wěn)定。特別引起注意的是，亳菊的3，5-O-二咖啡?；鼘幩岬暮渴?1個樣品中最高的，這與傳統(tǒng)認(rèn)為亳菊是優(yōu)質(zhì)藥菊的觀點(diǎn)是一致的。福白菊各項指標(biāo)成分的總含量在31個樣品中總體較高。麻城福白菊是湖北省麻城市以福田河鎮(zhèn)為中心地區(qū)所產(chǎn)的菊花，有悠久的栽培種植歷史[12，13]，其栽培的主流菊花品種是本地培育的品種，稱為“本地花”，由于其口感和品質(zhì)較好，近年來其種植規(guī)模不斷擴(kuò)大。菊花胎花是目前出現(xiàn)的菊花高端產(chǎn)品，福白菊胎花中，3種不同胎花商品樣品的質(zhì)量差異十分顯著，其具體原因還要深入研究。福白菊朵花中，編號4、5、6號分別是第一、二、三批采摘的菊花，從含量測定結(jié)果看，第一、二批采摘的朵花樣品中綠原酸和3，5-O-二咖啡酰基奎寧酸的含量較高，遠(yuǎn)高于第三批采摘的樣品。第三批采摘的菊花，一般屬于三水花，接近或處于打霜期，其質(zhì)量一般有大幅度下降。因此，菊花商品應(yīng)當(dāng)根據(jù)其品質(zhì)劃分等級，使優(yōu)質(zhì)優(yōu)價，促進(jìn)菊花生產(chǎn)的良性發(fā)展。

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