李守國，李九智，王晨宇，文彬

(新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院，烏魯木齊830000)

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維吾爾族人群TRPV5基因多態(tài)性與腎結(jié)石數(shù)量及復發(fā)的關(guān)系

李守國，李九智，王晨宇，文彬

(新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院，烏魯木齊830000)

目的探討維吾爾族人群中瞬時受體電位香草酸亞型5(TRPV5)基因多態(tài)性與腎結(jié)石的多發(fā)及復發(fā)的相關(guān)性。方法 選擇腎結(jié)石患者366例，均為維吾爾族，包括單發(fā)結(jié)石(只含有1個腎結(jié)石)患者198例、多發(fā)結(jié)石(含有2個及2個以上腎結(jié)石)患者168例。抽取患者靜脈血，提取DNA，采用TaqMan技術(shù)檢測TRPV5基因rs4236480位點基因多態(tài)性。以6個月內(nèi)發(fā)生2次或2次以上腎結(jié)石癥狀為復發(fā)性腎結(jié)石，以6個月內(nèi)未再發(fā)生腎結(jié)石者為非復發(fā)性腎結(jié)石，分析TRPV5基因rs4236480位點多態(tài)性與腎結(jié)石數(shù)量及發(fā)作次數(shù)的關(guān)系。結(jié)果 366例患者中出現(xiàn)TRPV5基因野生型CC 224例、突變型CT 136例、突變型TT 6例。TT+CT基因型患者多發(fā)腎結(jié)石的發(fā)生率高于CC基因型患者 (P<0.05)。TRPV5基因rs4236480位點多態(tài)性與含鈣腎結(jié)石患者的發(fā)作次數(shù)無明顯關(guān)系(P>0.05)。結(jié)論 TRPV5基因rs4236480位點發(fā)生TT+CT基因型突變的維吾爾族患者發(fā)生多發(fā)腎結(jié)石的風險高于CC基因型維吾爾族患者，TRPV5基因rs4236480位點多態(tài)性與維吾爾族人群腎結(jié)石復發(fā)無關(guān)。

瞬時受體電位香草酸亞型5；含鈣腎結(jié)石；維吾爾族

鈣是腎結(jié)石的主要成分。研究發(fā)現(xiàn)，基因多態(tài)性是腎結(jié)石形成及復發(fā)的危險因素。瞬時受體電位香草酸亞型5(TRPV5)通道可調(diào)控鈣離子轉(zhuǎn)運及重吸收，與尿鈣的重吸收有關(guān)[1,2]。研究發(fā)現(xiàn)，TRPV5基因rs4236480位點多態(tài)性與腎結(jié)石的形成有關(guān),攜帶至少一個該位點等位基因T的患者發(fā)生多發(fā)結(jié)石的可能性高于攜帶野生型C等位基因患者。2014年3月～2015年6月，我們對新疆地區(qū)維吾爾族人群含鈣腎結(jié)石患者的TRPV5基因rs4236480位點單核苷酸多態(tài)性進行檢測，分析其與含鈣腎結(jié)石的多發(fā)及復發(fā)的相關(guān)性。現(xiàn)報告如下。

1　資料與方法

1.1臨床資料選擇我院泌尿外科收治的腎結(jié)石患者366例，男256例、女118例，年齡(43.3±16.0)歲。均為維吾爾族患者。單發(fā)結(jié)石(只含有1個腎結(jié)石)198例，多發(fā)結(jié)石(含有2個及2個以上腎結(jié)石)168例。經(jīng)對結(jié)石成分分析，均為含鈣腎結(jié)石患者。尿液尿酸(41.5±22.8)mg/dL，尿鈣(12.1±7.7)mg/dL，尿肌酐(82.3±53.3)mg/dL，血尿酸(7.2±1.4)mg/dL，血鈣(9.1±0.6)mg/dL，血肌酐(1.3±0.8)mg/dL。排除以下患者：無法區(qū)分是首次腎結(jié)石還是復發(fā)腎結(jié)石；有腎小管酸中毒史；甲狀旁腺功能亢進；腎功能衰竭；痛風；慢性腹瀉；癌癥。對患者隨訪6個月，以6個月內(nèi)發(fā)生2次或2次以上腎結(jié)石癥狀并接受治療者為復發(fā)性腎結(jié)石，以6個月內(nèi)未再發(fā)生腎結(jié)石者為非復發(fā)性腎結(jié)石。

1.2TRPV5基因rs4236480位點多態(tài)性檢測抽取患者靜脈血，提取DNA，保存于-80 ℃?zhèn)溆谩２捎肨aqMan技術(shù)進行基因型測定，反應(yīng)在ABI PRISM 9700HT實時定量儀上進行。反應(yīng)結(jié)束后由系統(tǒng)讀取樣品孔中的終點熒光，應(yīng)用其分析軟件確定基因型，包括野生型CC型、突變型CT型、TT型。

1.3統(tǒng)計學方法采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。應(yīng)用SHEsis軟件比較各基因型及等位基因的差異，率的比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1TRPV5基因rs4236480位點多態(tài)性野生基因型CC 224例，突變型CT 136例、TT 6例。

2.2TRPV5基因rs4236480位點多態(tài)性與腎結(jié)石數(shù)量及發(fā)作次數(shù)的關(guān)系單發(fā)結(jié)石TT、CT、CC基因型發(fā)生率分別為0、16.0%、38.0%，多發(fā)結(jié)石以上各基因型發(fā)生率分別為1.6%、21.0%、23.0%；復發(fā)結(jié)石TT、CT、CC基因型發(fā)生率分別為0.8%、14.0%、19.0%，非復發(fā)結(jié)石以上各基因型發(fā)生率分別為0.8%、23.0%、42.0%。TT+CT基因型患者多發(fā)腎結(jié)石的發(fā)生率高于CC基因型患者 (P<0.05)。TRPV5基因rs4236480位點多態(tài)性與腎結(jié)石發(fā)作次數(shù)無明顯關(guān)系(P>0.05)。見表1。

表1　366例含鈣腎結(jié)石患者TRPV5基因rs4236480位點多態(tài)性與結(jié)石數(shù)量及發(fā)作次數(shù)的關(guān)系(例)

3　討論

近年來，腎結(jié)石的患病率顯著升高。腎結(jié)石的危險因素眾多，包括家族遺傳、環(huán)境、膳食攝入、飲水不足及高鈣尿癥等。遺傳和環(huán)境相關(guān)危險因素均可影響體內(nèi)鈣離子水平，進而導致含鈣腎結(jié)石的形成[3]。鈣是腎結(jié)石的主要組成成分，草酸鈣結(jié)石及磷酸鈣結(jié)石中近80%的成分由鈣組成[4]。

近年來，隨著對全基因組關(guān)聯(lián)(GWAS)的深入研究，在不同人群中發(fā)現(xiàn)了與尿路結(jié)石轉(zhuǎn)歸有重要關(guān)聯(lián)的基因單核苷酸多態(tài)性，尤其是控制鈣離子通道基因的相關(guān)研究。例如，鈣敏感受體基因突變與含鈣腎結(jié)石的高復發(fā)有關(guān)[5]，控制鈣通道的主要亞基基因多態(tài)性與腎結(jié)石復發(fā)有關(guān)[6]，維生素D受體水平及其基因多態(tài)性與特發(fā)性高鈣尿癥有關(guān)[7]。

TRPV5能夠影響鈣的重吸收。TRPV5通道在腎遠曲小管及集合管的上皮細胞中表達，維持著鈣離子內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定[8,9]。TRPV5在腎小管中表達，控制著鈣離子重吸收的通道[10]。小鼠試驗中敲除TRPV5基因后出現(xiàn)嚴重的高鈣尿癥，表明TRPV5基因可以降低尿鈣重吸收，增加尿鈣的排泄。研究發(fā)現(xiàn)，TRPV5基因多態(tài)性影響鈣離子儲存。TRPV5基因中682區(qū)C堿基可突變?yōu)門堿基，導致翻譯時密碼子絲氨酸轉(zhuǎn)變成脯氨酸,表現(xiàn)為高鈣尿癥、多尿癥、尿pH值下降[11]。

TRPV5基因多態(tài)性首次在非裔美國人群中報道， 其4個非同義單核苷酸多態(tài)性位點A8V、R154H、A563T和L712F中，只有A563T與鈣離子重吸收顯著相關(guān)，其他3個位點未發(fā)現(xiàn)與腎結(jié)石的相關(guān)性[10]。在我國臺灣地區(qū)漢族人群中，TRPV5基因多態(tài)性T等位基因與多發(fā)腎結(jié)石顯著相關(guān)[12]，這與本研究新疆維吾爾族人群的研究結(jié)果相一致。TRPV5基因多態(tài)性與不同結(jié)石數(shù)量及發(fā)作次數(shù)相關(guān)的研究尚未發(fā)現(xiàn)。本研究結(jié)果表明，TRPV5基因rs4236480位點多態(tài)性與多發(fā)腎結(jié)石顯著相關(guān)，TT+CT基因型患者可致多發(fā)腎結(jié)石的風險高于CC基因型的患者，提示TRPV5基因多態(tài)性可使攜帶TT+CT突變基因的維吾爾族患者腎結(jié)石數(shù)量增多，導致多發(fā)腎結(jié)石的發(fā)生率升高。但本研究尚未發(fā)現(xiàn)TRPV5基因rs4236480位點多態(tài)性與含鈣腎結(jié)石維吾爾族患者的發(fā)作次數(shù)存在明顯相關(guān)性，可能與病例資料數(shù)量相對較少有關(guān)，也可能與人群遺傳因素的差異或腎結(jié)石多基因遺傳的復雜性有關(guān)。

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新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院院內(nèi)項目(20140304)。

文彬(E-mail: wenbin1960@126.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.30.019

R692.4；R394

B

1002-266X(2016)30-0060-02

2016-01-19)