陳 斌，劉立賢，張占俠，陳 葉，劉偉娟，李勇軍，車俊國(guó)

(石家莊市動(dòng)物園管理處，河北石家莊 050200)

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納豆芽孢菌劑消除小天鵝轉(zhuǎn)群應(yīng)激的研究

陳 斌，劉立賢，張占俠，陳 葉，劉偉娟，李勇軍，車俊國(guó)

(石家莊市動(dòng)物園管理處，河北石家莊 050200)

[目的]在小天鵝放養(yǎng)初期飼喂納豆芽孢菌劑，研究納豆芽孢菌劑消除小天鵝轉(zhuǎn)群應(yīng)激的臨床效果。[方法]在轉(zhuǎn)群小天鵝精飼料中加入納豆芽孢菌劑，納豆芽孢菌劑為精料量的10%，觀察小天鵝的精神狀態(tài)、體態(tài)行動(dòng)、喙的顏色、羽毛色澤及成活率等。[結(jié)果]飼喂納豆芽孢菌劑16 d后，小天鵝的體質(zhì)、糞便、采食量等指標(biāo)顯著改善，圈養(yǎng)及外放后未見死亡。[結(jié)論]納豆芽孢菌劑能起到改善小天鵝轉(zhuǎn)群應(yīng)激反應(yīng)和降低死亡率的作用。

納豆芽孢菌劑；小天鵝；轉(zhuǎn)群應(yīng)激

在動(dòng)物園游禽的培育中，籠養(yǎng)幼禽長(zhǎng)大到成年放養(yǎng)的這一轉(zhuǎn)群過渡階段，由于環(huán)境轉(zhuǎn)換、飼料改換等因素會(huì)誘發(fā)游禽產(chǎn)生嚴(yán)重的應(yīng)激反應(yīng)[1]，出現(xiàn)消化不良、腹瀉、感染等癥狀，導(dǎo)致游禽體質(zhì)下降，甚至出現(xiàn)死亡[2]。據(jù)調(diào)查，小天鵝的死亡率在30%以上，最高時(shí)達(dá)100%。游禽應(yīng)激反應(yīng)的各種癥狀，除了細(xì)菌性感染癥狀外，還存在著腸道消化環(huán)境紊亂、飼料消化率低、病原菌感染、營(yíng)養(yǎng)不良、腸道菌群紊亂等現(xiàn)象[3]。筆者采用添加納豆芽孢菌劑飼喂小天鵝的方法，消除轉(zhuǎn)群應(yīng)激對(duì)機(jī)體的危害。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)時(shí)間與試驗(yàn)地點(diǎn)2015年3月18日至4月4日，在石家莊市動(dòng)物園天鵝湖湖心島進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2試驗(yàn)動(dòng)物小天鵝隸屬雁形目(Anseriformes)鴨科(Anatidae)天鵝屬(Cygnus),共7只，約1歲，已斷翅。試驗(yàn)前共8只小天鵝，為2014年引進(jìn)，至試驗(yàn)時(shí)約1歲，引進(jìn)后斷翅，在籠舍內(nèi)越冬，未出現(xiàn)死亡。3月3日8只小天鵝轉(zhuǎn)入天鵝湖湖心島，露天圈養(yǎng)，3月12日(試驗(yàn)前)有1只小天鵝因發(fā)病死亡，參與試驗(yàn)的小天鵝為7只。

1.3方法

1.3.1精飼料配方。精飼料配方組成如下：玉米面61.81%、魚粉 5.15%、酵母粉 3.30%、磷酸氫鈣 7.00%、豆粕7.42%、麩皮 14.42%、多維 0.08%、鹽 0.31%、痢菌凈 0.51%。

1.3.2納豆芽孢菌劑。納豆芽孢菌劑是枯草屬納豆芽孢桿菌以非菌數(shù)生長(zhǎng)方式深層發(fā)酵后的全部活性發(fā)酵產(chǎn)物。在發(fā)酵過程中，主要以納豆芽孢桿菌含量作為目標(biāo)有效成分的檢測(cè)指標(biāo)[4]。納豆芽孢菌劑中對(duì)養(yǎng)殖動(dòng)物可以起到一定生理功效的成分主要包括γ-多聚谷氨酸、納豆激酶、小肽分子和納豆芽孢桿菌活菌[5]。納豆芽孢桿菌的成分組成如下：γ-多聚谷氨酸25 mg/g、納豆激酶2 000 CFU/g、小肽類30 mg/g、納豆芽孢桿菌活菌數(shù)3×108個(gè)/g。

1.3.3飼料及飼喂管理。飲用清潔水，精飼料的飼喂量約400 g/只，青綠飼料自由采食，自由飲水。從3月18日開始，對(duì)7只參試小天鵝投喂納豆芽孢菌劑，混合精飼料投喂，投喂量為精料量的10%。

1.3.4觀測(cè)指標(biāo)。觀察試驗(yàn)期間小天鵝體質(zhì)、糞便、采食量等臨床變化。最后，對(duì)死亡小天鵝進(jìn)行剖檢。

2　結(jié)果與分析

2.1體質(zhì)的變化健康的小天鵝活潑好動(dòng)、體況良好，不易捕捉、反抗有力，喙基部為亮黃色。試驗(yàn)前小天鵝不活潑，人接近時(shí)不能做出明顯反應(yīng)，及時(shí)逃跑；少有鳴叫，叫聲細(xì)弱；縮頭委身，羽毛凌亂；容易捕捉，反抗無力；喙基部為淺黃色，其中3只近乎白色。試驗(yàn)后，小天鵝體質(zhì)改善情況。試驗(yàn)第12天(3月30日)，小天鵝體質(zhì)明顯改善。精神活潑，人接近時(shí)能迅速逃跑；鳴叫洪亮，挺胸抬頭，毛色油亮，喙的基部黃色亮麗，原來2只喙基部為白色的小天鵝，喙基部也開始變成淡黃色。試驗(yàn)第12天，由于飼養(yǎng)需要，進(jìn)行1次轉(zhuǎn)籠。捕捉時(shí)發(fā)現(xiàn)小天鵝反抗激烈，力量很大，不易捕捉。試驗(yàn)后動(dòng)物體質(zhì)明顯增強(qiáng)。

2.2糞便的變化試驗(yàn)前，飼養(yǎng)場(chǎng)地所見糞便均為水樣和稀粥樣，呈灰白色或綠色，8只小天鵝均出現(xiàn)不同程度的消化不良及腹瀉癥狀。試驗(yàn)后，糞便情況明顯改善。試驗(yàn)第10天(3月28日)后所有糞便成型，顏色為黃色，場(chǎng)地內(nèi)完全不見綠色和灰色稀便。這說明試驗(yàn)后小天鵝的消化功能得到明顯改善。

2.3采食量的變化試驗(yàn)第6天(3月24日)以前，沒有出現(xiàn)飼料剩余或剩余飼料很少。試驗(yàn)第6～12天(3月24日至30日)發(fā)現(xiàn)飼料逐漸出現(xiàn)剩余，剩余量越來越多，第12天剩余飼料占飼料量的20%。3月30日至4月4日，小天鵝臨床上未出現(xiàn)明顯變化，飼料剩余量無變化。

2.4外放情況試驗(yàn)第16天(4月4日)小天鵝標(biāo)記后外放天鵝湖，至6月28日未出現(xiàn)死亡。

2.5剖檢結(jié)果3月12日(試驗(yàn)前)死亡小天鵝的情況，雌性，體重2 kg，死前排綠色水便，喙基部白色；腹腔積液，腸道腫脹蒼白(圖1A)；肝臟腫大，彌漫性出血，有干酪樣壞死灶(圖1B)。

注：A.腹腔和腸道病變；B.肝臟病變。Note: A.Abdominal cavity and intestinal lesions;B.Hepatic pathological changes.圖1　死亡小天鵝的剖檢結(jié)果Fig.1　Autopsy results of dead little swan

3　討論與結(jié)論

(1)從飼喂納豆制劑前后小天鵝的行為、體態(tài)、毛色、喙基部色澤等來看，試驗(yàn)期間動(dòng)物體質(zhì)明顯增強(qiáng)。以前，外放前圈養(yǎng)階段動(dòng)物體質(zhì)會(huì)有所下降。小天鵝體質(zhì)迅速改善，這是蛋白質(zhì)沉積迅速改善的現(xiàn)象。蛋白質(zhì)沉積的改善，與納豆芽孢菌劑中的小肽類成分有關(guān)。賀光祖等[6]研究表明小肽可以不經(jīng)消化直接被腸上皮細(xì)胞吸收，加速機(jī)體對(duì)蛋白營(yíng)養(yǎng)的利用，非常有利于營(yíng)養(yǎng)不良動(dòng)物補(bǔ)充蛋白質(zhì)，用以修復(fù)受損組織，提高機(jī)體免疫。幼齡禽類在轉(zhuǎn)群中因應(yīng)激導(dǎo)致體質(zhì)下降時(shí)，小肽就成為幼禽的優(yōu)質(zhì)蛋白營(yíng)養(yǎng)源，有利于迅速恢復(fù)體質(zhì)。納豆激酶也起著不可忽視的作用。納豆芽孢桿菌在深層發(fā)酵大豆蛋白時(shí)，產(chǎn)生專門針對(duì)大豆中小分子量蛋白的消化酶。對(duì)于幼齡動(dòng)物而言，大豆蛋白中小分子量的“大豆球蛋白”和“β-伴大豆球蛋白”是導(dǎo)致幼齡動(dòng)物腸道產(chǎn)生過敏反應(yīng)的直接原因，也是即將進(jìn)入放養(yǎng)階段幼禽產(chǎn)生消化不良的原因之一[7]。納豆激酶能夠針對(duì)這種小分子量的球蛋白進(jìn)行水解，減少了腸道過敏反應(yīng)[8]，有助于腸胃正常消化吸收，也增強(qiáng)了蛋白質(zhì)的沉積。

(2)投喂納豆芽孢菌劑后，小天鵝首先表現(xiàn)出糞便狀況迅速改善。野生鳥類不同于家禽，對(duì)疾病和應(yīng)激更加耐受，一旦表現(xiàn)出不良狀態(tài)，往往器官病變較家禽更為嚴(yán)重，甚至是不可逆的，所以投喂納豆制劑后，糞便的改善速度慢于家禽。通過剖檢結(jié)果可以看出，死亡小天鵝的腸道蒼白，肝臟腫大，說明動(dòng)物在飼養(yǎng)中消化系統(tǒng)受損嚴(yán)重，外在表現(xiàn)最明顯的就是糞便異常。投喂納豆制劑，糞便迅速改善，可認(rèn)為是消化系統(tǒng)功能的快速恢復(fù)。這有利于營(yíng)養(yǎng)的吸收，抵御腸道致病菌的侵害。根據(jù)納豆芽孢菌劑的功效成分作用機(jī)理分析，糞便狀況出現(xiàn)迅速改善與γ-多聚谷氨酸的生理功效有關(guān)。γ-多聚谷氨酸具有與消化道粘膜上皮黏液凝膠層(糖蛋白)類似生理功能，可以在腸壁分泌黏液凝膠層不足的情況下，起到補(bǔ)充和替代作用，因此也將其稱為人工黏蛋白。腹瀉的小天鵝消化道粘膜上皮，因?yàn)槊庖叻磻?yīng)、腸腺分泌功能降低、食物機(jī)械磨損，均存在小腸絨毛萎縮以及黏液凝膠層不足的現(xiàn)象，γ-多聚谷氨酸迅速覆蓋受損小腸絨毛并黏附其表面，避免食物、胃酸和消化酶的直接接觸性刺激，使因這些刺激而收縮緊張腸道舒緩，進(jìn)而促使正常部位的小腸絨毛恢復(fù)吸收功能，因此減少了水分排泄而使糞便改善；γ-多聚谷氨酸的覆蓋也減少了致病菌如沙門氏菌、大腸桿菌等侵入粘膜上皮細(xì)胞，使得病原性的腹瀉因此減輕。此外，由于飼料中含有抗菌藥物痢菌凈，因此可以判定活菌成分與這種改善的關(guān)系不大。

(3) 飼料出現(xiàn)剩余現(xiàn)象的原因主要包括以下方面：一方面，改善消化系統(tǒng)功能會(huì)增強(qiáng)消化吸收能力，使得動(dòng)物所需營(yíng)養(yǎng)未變的情況下，飼料攝入量減少；另一方面，由于納豆芽孢菌劑添加量較大，也可能制劑本身提供一部分營(yíng)養(yǎng)，代替了原來飼料供給。這種狀況明顯出現(xiàn)在飼喂10 d后，應(yīng)該是消化系統(tǒng)功能改善的一個(gè)過程。

綜上所述，納豆芽孢菌劑針對(duì)幼禽在轉(zhuǎn)群應(yīng)激中出現(xiàn)的各種不良情況，如腸道消化環(huán)境紊亂、飼料消化率低、病原菌感染、營(yíng)養(yǎng)不良、腸道菌群紊亂等，另外，納豆芽孢菌劑的主要功效成分均為發(fā)酵產(chǎn)物，不受抗菌藥物的影響，在實(shí)際應(yīng)用中可以不考慮飼料中抗菌藥物的影響。

因此，納豆芽孢菌劑能起到消除幼禽轉(zhuǎn)群應(yīng)激的作用。

在小天鵝外放前圈養(yǎng)這段時(shí)間內(nèi)投喂納豆芽孢菌劑，能在短時(shí)間內(nèi)明顯提高體質(zhì)，改善消化吸收能力，減少應(yīng)激造成的不良反應(yīng)。

[1]王興金.動(dòng)物園人工湖鳥類管理探討[J].野生動(dòng)物，2012,33(5):294-296.

[2]王萬華,王志永,李勇軍.動(dòng)物園動(dòng)物的應(yīng)激及其管理[J].野生動(dòng)物，2009，30(6):318-320.

[3]張強(qiáng),趙鵬鵬,金學(xué)林,等.圈養(yǎng)珍稀野生動(dòng)物應(yīng)激性疾病及防治[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2011,32(2):129-133.

[4]董小英，唐勝球.納豆芽孢桿菌的制備及其對(duì)番鴨生產(chǎn)性能的影響[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011(22):129-131.

[5]耿春銀,張敏，孫健,等.納豆菌微生態(tài)制劑替代抗生素用于斷奶仔豬飼料的研究[J].中國(guó)飼料,2010(15):24-27．

[6]賀光祖,譚碧娥,肖昊，等.腸道小肽吸收利用機(jī)制及其營(yíng)養(yǎng)功能[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2015,27(4):1047-1054.

[7]劉海軍,李永明,徐子偉,等.大豆蛋白過敏對(duì)仔豬生長(zhǎng)和血液生化指標(biāo)的影響[J].浙江農(nóng)業(yè)科學(xué),2012(4):576-578.

[8]程守強(qiáng),梁鳳來,王仁靜,等.納豆激酶的研究進(jìn)展[J].微生物學(xué)雜志，2005,25(3):69-73.

Study on Eliminating Groupshift Stress Effect of Bacillus subtilis natto to Cygnus columbianus

CHEN Bin,LIU Li-xian,ZHANG Zhan-xia et al

(Shijiazhuang Zoo Management Office,Shijiazhuang,Hebei 050200)

[Objective]The aim was to study eliminating groupshift stress effect of Bacillus subtilis natto to Cygnus columbianus by adding Bacillus subtilis natto in feed in the initial stocking.[Method]In the initial stocking,adding Bacillus subtilis natto in feed with amount of concentrated feed 10%,the mental state,body weight,body condition action,beak color,plumage and survival rate of Cygnus columbianus was observed.[Result]After feeding Bacillus subtilis natto 16 days,body constitution,feces,feed intake and other clinical indicators of Cygnus columbianus were significantly improved,and was no death in captivity and outside.[Conclution]Bacillus subtilis natto can eliminate groupshift stress effect to Cygnus columbianus and reduce mortality.

Bacillus subtilis natto;Cygnus columbianus;Groupshift stress

石家莊市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(161500182A)。

陳斌(1980- )，男，河北保定人，獸醫(yī)師，碩士，從事野生動(dòng)物疾病預(yù)防與治療。

2016-07-14

S 864.5

A

0517-6611(2016)25-122-02