楊麗蓉　趙紅磊　張筱

（濰坊市食品藥品檢驗檢測中心，山東 濰坊261205）

頂空氣相色譜法同時測定原料藥中多種殘留溶劑的應(yīng)用研究

楊麗蓉趙紅磊張筱

（濰坊市食品藥品檢驗檢測中心，山東 濰坊261205）

目的：建立頂空氣相色譜法同時測定原料藥中有機溶劑殘留量的方法。方法：采用頂空氣相色譜法，DB-1701毛細管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm），檢測器為氫火焰離子化檢測器，氮氣為載氣，測定原料藥中的殘留溶劑，用外標法計算。結(jié)果：在此色譜條件下，各有機溶劑能得到有效分離，在所考察的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，r=0.997 1～0.999 6，精密度介于1.05%～2.57%（n=5）之間，加標平均回收率為96.9%～100.8%。結(jié)論：該方法能較好地應(yīng)用于原料藥中多種溶劑殘留量的同時測定，能有效地縮短檢驗時間，提高檢驗效率。

殘留溶劑；頂空氣相色譜法；原料藥

藥品中的殘留溶劑系指在原料藥或輔料的生產(chǎn)中，以及在制劑制備過程中使用的，但在工藝過程中未能完全除去的有機溶劑［1］。藥物殘留溶劑分析是化學合成藥質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)［2-5］。殘留溶劑的測定方法常采用氣相色譜法［6-10］，頂空氣相色譜法不僅能減少對色譜系統(tǒng)的污染，且能富集待測物，提高檢測靈敏度［11］。本文嘗試用頂空氣相色譜法同時測定奧美拉唑和馬來酸氯苯那敏原料藥中的多種殘留溶劑，取得了較好效果。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

島津GC-2010型氣相色譜儀；DANI HSS8650型頂空進樣器。

1.2 試藥的種類及選擇

N，N-二甲基甲酰胺（DMF），甲醇，乙腈，丙酮和四氫呋喃為色譜純，甲苯和二氯甲烷為分析純；樣品為奧美拉唑原料藥和馬來酸氯苯那敏原料藥。乙腈、丙酮和二氯甲烷為弱極性試劑，四氫呋喃為中極性試劑，甲醇和乙腈為強極性試劑，以這6種試劑代表常見原料藥中的殘留溶劑。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件及色譜柱的選擇

鑒于選擇的溶劑包含強極性和弱極性，所以選擇中極性色譜柱。色譜柱采用 DB-1701毛細管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm），程序升溫，起始溫度為50℃，維持7 min，以每分鐘15℃的速度升溫至110℃，再以每分鐘20℃的速度升溫至190℃；檢測器為氫火焰離子化檢測器（FID），進樣口溫度為180℃，檢測器溫度為250℃，載氣為氮氣，流速為1.0 mL/min，氫氣流速為40.0 mL/min，空氣流速為500.0 mL/min，尾吹流速為60.0 mL/min。頂空進樣，頂空瓶孵育溫度為95℃，孵育時間30 min，定量環(huán)溫度110℃，傳輸線溫度130℃，分流比10∶1。

2.2 溶液的制備

2.2.1 對照品溶液的制備分別精密稱取甲醇301.22 mg，乙腈40.56 mg，丙酮 503.17 mg，四氫呋喃145.32 mg，二氯甲烷60.36 mg，甲苯90.28 mg，分別置10 mL容量瓶中，用N，N-二甲基甲酰胺稀釋至刻度，作為對照品貯備液。精密量取各對照品貯備液5.00 mL置同一50 mL量瓶中，用N，N-二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻，作為混合對照品貯備液。

2.2.2 供試品溶液的制備精密稱取奧美拉唑原料藥和馬來酸氯苯那敏原料藥各約0.5 g，分別置20 mL頂空瓶中，精密加入N，N-二甲基甲酰胺5.00 mL，密封，作為供試品溶液。

2.3 方法學考察

2.3.1 專屬性試驗為確保頂空瓶中達到氣液平衡，試驗考察了95℃時不同孵育時間（15，30，45 min）對結(jié)果的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，孵育30 min時各對照品峰面積與孵育45 min時峰面積大小一致，而且大于孵育15 min時的對照品峰面積，這表明在95℃條件下孵育30 min即能達到氣液平衡，因此試驗采用95℃孵育30 min的頂空條件。

分別取空白溶劑、混合對照品溶液、供試品溶液按“2.1”色譜條件測定，各殘留溶劑的分離度均符合要求。供試品溶液色譜圖中無干擾峰，專屬性良好。氣相色譜圖見圖1～4。

圖1 混合對照品溶液氣相色譜圖

圖2 空白溶劑氣相色譜圖

圖3 奧美拉唑原料藥氣相色譜圖

圖4 馬來酸氯苯那敏原料藥氣相色譜圖

2.3.2 線性關(guān)系試驗精密量取混合對照品貯備液 0.50，1.00，2.00，3.00，6.00，10.00 mL，分別置50 mL容量瓶中，用N，N-二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻，做為標準曲線的對照品溶液。分別精密量取5.00 mL置20 mL頂空瓶中，密封。按“2.1”項下的色譜條件測定。以質(zhì)量濃度X （μg/mL）對峰面積Y線性回歸，回歸方程見表1。2.3.3精密度考察取同一對照品溶液5.00 mL，置于不同20 mL頂空瓶中，按“2.1”方法測定，以相對標準偏差（RSD）進行精密度考察。結(jié)果如下：甲醇 1.95%，乙腈 2.57%，丙酮 1.86%，四氫呋喃1.05%，二氯甲烷 2.02%，甲苯2.17%（n=5），表明精密度良好。

表1 回歸方程與線性范圍

2.3.4 回收率分別精密量取各對照品貯備液0.40，0.50，0.60 mL分別置 100 mL量瓶中，用N，N-二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻，分別作為80%，100%，120%濃度水平的溶液。分別稱取奧美拉唑、馬來酸苯那敏原料藥各9份于不同頂空瓶（20 mL）中，每份約0.5 g，分別精密加入5.00 mL上述3個濃度水平的溶液，每個水平平行3份。照“2.1”的色譜條件測定，計算回收率。結(jié)果如下：甲醇，丙酮，二氯甲烷，乙腈，四氫呋喃，甲苯的平均回收率分別為100.4%，100.5%，99.2%，96.9%，99.3%，100.8%，RSD分別為 2.1%，2.0%，1.9%，2.5%，2.9%，3.0%（n=9），表明方法回收率良好。

2.3.5 檢測限取對照品貯備液適量，逐步稀釋，根據(jù)“2.1”的色譜條件進行測定，按信噪比 S/N 為 3∶1考察，結(jié)果甲醇，丙酮，二氯甲烷，乙腈，四氫呋喃，甲苯的最低檢測限分別為：0.10，0.05，0.20，0.04，0.14，0.96 μg/mL，能滿足檢驗要求。

2.3.6 穩(wěn)定性考察取混合對照品儲備液3.00 mL 置50 mL容量瓶中，用N，N-二甲基甲酰胺稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取5.00 mL置20 mL頂空瓶中，密封。按“2.1”項下的色譜條件測定峰面積，與放置12，24，36，48 h分別測定的峰面積的RSD（n=5）均小于5%，說明日內(nèi)與日間穩(wěn)定性均良好。

2.3.7 樣品測定用“2.1”所述色譜條件對奧美拉唑原料藥樣品和馬來酸氯苯那敏原料藥樣品進行殘留溶劑測定，結(jié)果見表2。

表2 樣品中殘留溶劑的測定結(jié)果（n=3） （g/g）

3 討論

本文以極性不同6種殘留溶劑為代表，以兩種不同的原料藥為樣本，建立檢測方法，同時測定不同原料藥中的各種殘留溶劑。通過試驗確定了樣品95℃孵育30 min即能達到氣液平衡，能最大限度地檢測出樣品中的殘留溶劑。試驗還考察了方法的線性關(guān)系、精密度、回收率和檢測限，結(jié)果如下：甲醇在30～ 300 μg/mL、丙酮在50～500 μg/mL、二氯甲烷在60～ 601 μg/mL、乙睛在4.0～40.3 μg/mL、四氫呋喃在7.2～72.4 μg/mL、甲苯在9.6～ 96.1 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，精密度介于1.05% ～ 2.57%（n=5）之間，加標平均回收率為96.9% ～ 100.8%，甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙腈、四氫呋喃、甲苯的最低檢測限分別為：0.10，0.05，0.20，0.04，0.14，0.96 μg/mL。試驗還以奧美拉唑與馬來酸氯苯那敏為代表樣品進行了殘留溶劑的測定，結(jié)果良好。試驗結(jié)果表明，該方法能較好地應(yīng)用于原料藥中多種溶劑殘留量的同時測定，能有效地縮短檢驗時間，提高檢驗效率。

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Headspace Gas Chromatography for Simultaneous Determination of Several Residual Solvents in API

Yang Lirong，Zhao Honglei，Zhang Xiao（Weifang Center for Food and Drug Control，Shandong Weifang 261061，China）

Objective：To establish a headspace gas chromatography method for simultaneous determination of several residual solvents in API.Methods：Headspace gas chromatography was performed using nitrogen as carrier gas and FID detectors.Residual solvents were separated by DB-1701 capillary column（30 m×0.25 mm×0.25 μm）and calculated by external standard method.Results：Residual solvents were effectively separated by the method.Good linear relationship was observed within the investigated concentration range（r=0.997 1～ 0.999 6）.The precision ranged from 1.05%to 2.57%（n=5），while the mean spike recovery rate was 96.9%～ 100.8%.Conclusion：The developed method may be used for simultaneous determination of various residual solvents in API，by which the test may be shortened effectively and the test efficiency may increase.

Residual Solvents；Headspace Gas Chromatography；API

10.3969/j.issn.1672-5433.2016.09.003

2016-05-10）

楊麗蓉，女，藥師。研究方向：化學藥品檢驗。通訊作者E-mail：165617610@qq.com