王燕紅，張學杰，樊守金

(山東師范大學 生命科學學院逆境植物重點實驗室，濟南 250014)

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溝稃草屬及其近緣屬植物穎片微形態(tài)特征研究

王燕紅，張學杰，樊守金*

(山東師范大學 生命科學學院逆境植物重點實驗室，濟南 250014)

通過掃描電鏡對溝稃草屬及其近緣屬共14屬20種2變種植物穎片微形態(tài)進行觀察。結果顯示：(1)溝稃草屬穎片脈間長細胞長筒形或短筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚；脈間短細胞單生，脈間栓細胞近圓形，脈間硅細胞缺失；脈上硅細胞單生，近圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞平行形至低圓屋頂形；脈上、脈間刺毛常見，有鉤毛，無微毛，有乳突，無大毛。(2)根據(jù)穎片微形態(tài)特征所構建的系統(tǒng)發(fā)育樹顯示，溝稃草屬與早熟禾族植物聚為一支，表明其親緣關系較近，支持將溝稃草屬置于早熟禾族中。(3)溝稃草屬與拂子茅屬、野青茅屬植物相距較遠，穎片微形態(tài)證據(jù)不支持將溝稃草屬作為廣義拂子茅屬的成員，其應該單獨成屬。

溝稃草屬；穎片；微形態(tài)；掃描電鏡

溝稃草屬(Aniselytron)為多年生草本植物，隸屬于禾本科(Poaceae)早熟禾亞科(Pooideae)，主要分布于中國、日本、馬來西亞、菲律賓、印度尼西亞、印度等地。經(jīng)荷蘭學者Korthof and Veldkamp[1]修訂，全世界有溝稃草屬植物兩種：溝稃草(Aniselytrontreutleri(Kuntze) Soják)和小穎溝稃草(AniselytronagrostoidesMerrill)，中國均有分布。

溝稃草屬是1907年Hackel[2]建立的屬，成立之初，命名為AulacolepisHack。1979年, 人們發(fā)現(xiàn)Aulacolepis在一冷杉類化石中使用, 因此，Soják[3], Raizada and Bennet[4]分別發(fā)表論文，以AniselytronMerr.作為溝稃草屬的屬名。由于對溝稃草屬特征難以把握，它在禾本科早熟禾亞科中的系統(tǒng)位置以及其是否應該獨立成屬一直存在著爭議。Clayton and Renvoize[5]、Shukla[6]和Noltie[7]把溝稃草屬作為廣義拂子茅屬(CalamagrostisAdans.s.l.)的成員，認為它與野青茅屬(Deyeuxia)、拂子茅屬(Calamagrostis)植物的親緣關系較近。《中國主要植物圖說(禾本科)》[8]和《中國植物志》[9]將溝稃草屬放在了剪股穎族(Agrostideae)中，《中國被子植物科屬綜論》[10]將其置于燕麥族(Aveneae)中，馬海英[11]、Gillespie等[12]、Soreng等[13]基于分子證據(jù)認為其應置于早熟禾族(Poeae)，《Flora of China》[14]采用了相同的處理，將其置于早熟禾族中。由此可見，溝稃草屬的系統(tǒng)分類存在分歧較多，仍需進一步研究。禾本科植物的穎片作為生殖器官在植物的進化中具有相當?shù)谋Ｊ匦院头€(wěn)定性，常被用作分類檢索的特征[15-16]。隨著技術的發(fā)展，掃描電鏡被廣泛用于植物微形態(tài)特征的研究中[17-19]。但目前，尚未見對溝稃草屬及其近緣屬植物穎片微形態(tài)特征的報道，將穎片微形態(tài)特征用于溝稃草屬系統(tǒng)位置的研究將是一個有意義的探討。本研究利用電鏡掃描技術，對溝稃草屬及其近緣屬植物穎片微形態(tài)特征進行比較研究，以期為溝稃草屬系統(tǒng)位置的確定提供更多的依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 實驗材料

供試材料全部取自臘葉標本，憑證標本(表1)均存放于山東師范大學植物標本室(SDNU)。我們選取溝稃草屬模式種——溝稃草及其相關屬共14屬20種2變種植物進行研究。

1.2 實驗方法

1.2.1 掃描電鏡觀察 試驗設置3個重復，每個重復取自不同單株，分別取1枚完整成熟的小穗，編號后置于三氯甲烷中浸泡24 h[20]。經(jīng)KH-5200B型超聲波清洗儀震蕩1 h 后，將小穗穎片剝下，外表面朝上粘于樣品臺上，置SC7620型離子濺射儀中噴金2 min，在SUPRATM55型掃描電子顯微鏡下(加速電壓15 kv)進行觀察。

表2 用于聚類分析的穎片微形態(tài)性狀

表3 穎片微形態(tài)性狀數(shù)據(jù)矩陣

1.2.2 微形態(tài)性狀聚類分析

參照Ellis[21]和陳守良等[22]的微形態(tài)性狀描述術語， 選取12個穎片微形態(tài)特征進行聚類分析，如表2所示。所有性狀均做無序處理，不詳或未知性狀以“？”表示，編碼結果如表3所示。選取苦竹(Pleioblastusamarus)作為外類群，運用PAUP*version 4.0b10對編碼數(shù)據(jù)矩陣進行鄰接法分析。

2 實驗結果

2.1 穎片微形態(tài)觀察結果

2.1.1 溝稃草屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形或短筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生，脈間栓細胞近圓形，脈間硅細胞缺失，脈上硅細胞單生，近圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞平行形至低圓屋頂形，脈上、脈間刺毛常見，有鉤毛，無微毛，有乳突，無大毛(圖版Ⅰ，1)。

2.1.2 早熟禾屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形或短筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞對生，脈間栓細胞新月形，脈間硅細胞圓形或半圓形，脈上硅細胞單生，半圓形或近圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞平行形至低圓屋頂形，脈上、脈間刺毛常見，鉤毛存在或缺失，無微毛，乳突存在或缺失，無大毛(圖版Ⅰ，2～4)。

2.1.3 羊茅屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形或短筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生或對生，脈間栓細胞新月形，脈間硅細胞近圓形，脈上硅細胞單生，近圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞平行形至低圓屋頂形，脈上刺毛常見，脈間缺失，無鉤毛，無微毛，有乳突，無大毛(圖版Ⅰ，5)。

2.1.4 黑麥草屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形或短筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生或對生，脈間栓細胞新月形，脈間硅細胞近圓形，脈上硅細胞單生，近圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞平行形至低圓屋頂形，脈上刺毛常見，脈間常見或缺失，鉤毛存在或缺失，無微毛，無乳突，無大毛(圖版Ⅰ，6～7)。

2.1.5 鼠茅屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形或短筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生或對生，脈間栓細胞新月形，脈間硅細胞近圓形，脈上硅細胞單生，近圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞平行形至低圓屋頂形，脈上、脈間刺毛缺失，無鉤毛，無微毛，無乳突，無大毛(圖版Ⅰ，8)。

2.1.6 粟草屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形或短筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生或對生，脈間栓細胞新月形，脈間硅細胞近圓形，脈上硅細胞單生，近圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞平行形至低圓屋頂形，脈上、脈間刺毛常見，無鉤毛，無微毛，無乳突，無大毛(圖版Ⅰ，9)。

2.1.7 野青茅屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生或對生，脈間栓細胞長方形或新月形，脈間硅細胞結節(jié)形、近圓形或近方形，脈上硅細胞單生，結節(jié)形、近圓形或近方形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞低圓屋頂形，脈上刺毛常見，脈間偶見或缺失，無鉤毛，無微毛，無乳突，無大毛(圖版Ⅰ，10～11)。

2.1.8 拂子茅屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生或對生，脈間栓細胞長方形或新月形，脈間硅細胞近圓形或半圓形，脈上硅細胞單生，近圓形或半圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞低圓屋頂形，脈上、脈間刺毛常見，有鉤毛，無微毛，有乳突，無大毛(圖版Ⅰ，12～14)。

2.1.9 剪股穎屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生或對生，脈間栓細胞長方形或新月形，脈間硅細胞近圓形或半圓形，脈上硅細胞單生，近圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞低圓屋頂形，脈上刺毛常見，脈間缺失，無鉤毛，無微毛，無乳突，無大毛(圖版Ⅰ，15～16)。

2.1.10 虉草屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生或對生，脈間栓細胞長方形，脈間硅細胞半圓形，脈上硅細胞單生，近圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞低圓屋頂形，脈上脈間刺毛常見，有鉤毛，無微毛，有乳突，無大毛(圖版Ⅰ，17)。

2.1.11 黃花茅屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生或對生，脈間栓細胞長方形，脈間硅細胞半圓形，脈上硅細胞單生，半圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞低圓屋頂形，脈上脈間刺毛常見，無鉤毛，無微毛，無乳突，無大毛(圖版Ⅰ，18)。

2.1.12 燕麥屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生或對生，脈間栓細胞新月形，脈間硅細胞近圓形，脈上硅細胞單生，近圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞低圓屋頂形，脈上刺毛偶見，脈間缺失，無鉤毛，無微毛，無乳突，無大毛(圖版Ⅰ，19～20)。

2.1.13 棒頭草屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生或對生，脈間栓細胞新月形，脈間硅細胞近圓形或半圓形，脈上硅細胞單生，近圓形或半圓形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞低圓屋頂形，脈上脈間刺毛常見，有鉤毛，無微毛，無乳突，無大毛(圖版Ⅰ，21)。

2.1.14 大明竹屬穎片微形態(tài)特征 脈間長細胞長筒形或短筒形，細胞壁波狀彎曲，顯著增厚，脈間短細胞單生或對生，脈間栓細胞新月形，脈間硅細胞竹節(jié)形，脈上硅細胞單生，竹節(jié)形，有氣孔器，氣孔副衛(wèi)細胞高圓屋頂形至三角形，脈上脈間刺毛常見，無鉤毛，有微毛，有乳突，有大毛(圖版Ⅰ，22)。

2.2 聚類結果

基于穎片微形態(tài)性狀構建的系統(tǒng)發(fā)育樹如圖1所示，所有的內類群植物形成兩大分支，分支Ⅰ的類群穎片大多具有以下特征:脈間長細胞為長筒形或短筒形，脈間栓細胞為近圓形或新月形，氣孔副衛(wèi)細胞為平行形至低圓屋頂形，脈上刺毛為常見或缺失，由溝稃草屬、早熟禾屬(Poa)、羊茅屬(Festuca)、鼠茅屬(Vulpia)、黑麥草屬(Lolium)及粟草屬(Milium)植物構成，主要對應于早熟禾族植物。分支Ⅱ的類群穎片大多具有以下特征: 脈間長細胞為長筒形，脈間栓細胞為長方形或新月形，氣孔副衛(wèi)細胞為低圓屋頂形，脈上刺毛為常見或偶見，由野青茅屬、剪股穎屬(Agrostis)、拂子茅屬、虉草屬(Phalaris)、黃花茅屬(Anthoxanthum)、棒頭草屬(Polypogon)、燕麥屬(Avena)植物構成，主要對應于剪股穎族、虉草族(Phalarideae)和燕麥族植物。

3 討 論

所研究植物的穎片在細胞類型上，由長細胞、短細胞、氣孔器細胞、刺毛、鉤毛、微毛、乳突、大毛等結構組成，但各類細胞在穎片的出現(xiàn)和分布情形是不一致的。長細胞和氣孔器細胞是各個類群必備的基本細胞，長細胞通常成長筒形或短筒形，細胞壁常顯著增厚，波狀彎曲，氣孔器副衛(wèi)細胞有平行形、低圓屋頂形、高圓屋頂形、三角形，有些種處于兩個形態(tài)類型間的過渡類型。短細胞、刺毛、鉤毛、微毛、乳突、大毛等屬于選擇性著生的細胞，在有的類群中分布不完全。脈間短細胞根據(jù)細胞是否硅質化分為脈間栓細胞和脈間硅細胞，栓細胞多為新月形或長方形，硅細胞為近圓形、半圓形、竹節(jié)形、結節(jié)形、長條形等，說明硅細胞有豐富的變異式樣。同種植物脈上硅細胞與脈間硅細胞形態(tài)大體相似。刺毛可生于脈上、脈間，脈上多為刺，脈間可為刺或鉤。在內類群植物中未發(fā)現(xiàn)微毛的存在，在外類群苦竹中發(fā)現(xiàn)微毛，內類群植物中多為單域乳突，外類群植物中含有紊序乳突。從大毛的著生位置看，大毛主要著生于穎片的中下部。這些細胞在穎片的差異成為本研究分析溝稃草屬系統(tǒng)位置的重要依據(jù)。

在基于穎片微形態(tài)特征構建的系統(tǒng)發(fā)育樹上，溝稃草屬植物位于分支Ⅰ中，分支Ⅰ主要對應于早熟禾族植物。耿以禮[8]和郭本兆[9]把溝稃草屬置于剪股穎族中，吳征鎰[10]將其置于燕麥族中，但在系統(tǒng)發(fā)育樹上，溝稃草屬和剪股穎族、燕麥族植物位于不同的分支，它們的親緣關系較遠。觀察它們的穎片微形態(tài)，溝稃草屬脈間長細胞為長筒形或短筒形，脈間短細胞單生，氣孔副衛(wèi)細胞為平行形至低圓屋頂形，而剪股穎族和燕麥族植物脈間長細胞為長筒形，脈間短細胞單生或對生，氣孔副衛(wèi)細胞為低圓屋頂形。Clayton and Renvoize[5]，Shukla[6]和Noltie[7]等把溝稃草屬作為廣義拂子茅屬的成員，認為它與野青茅屬、拂子茅屬植物的親緣關系較近，但在系統(tǒng)發(fā)育樹上，溝稃草屬和野青茅屬、拂子茅屬植物相聚較遠，因此，不支持將溝稃草屬作為廣義拂子茅屬的成員。穎片微形態(tài)研究結果顯示，溝稃草屬與早熟禾族植物親緣關系較近，與馬海英[11]、Gillespie等[12]、Soreng等[13]基于分子證據(jù)的研究結果一致，支持將溝稃草屬置于早熟禾族植物中。溝稃草屬及其近緣屬植物穎片微形態(tài)存在明顯的差異，可以作為分屬的參考依據(jù)，能為溝稃草屬系統(tǒng)位置的確定提供一定的理論依據(jù)。

圖1 基于穎片微形態(tài)特征構建的系統(tǒng)樹Fig. 1 Phylogenetic tree based on glume micromorphological characteristics

[1] KORTHOF H M, VELDKAMP J F. A revision ofAniselytronwith some new combinations inDeyeuxiain Southeast Asia ( Gramineae)[J].GardBullSingapore, 1984, 37(2): 213-224.

[2] HACKEL E. Gramineae novae Ⅱ[J].FeedesRepSpNov. 1907, 3: 241-245.

[4] RAIZADA M B， BENNET S S R. Nomenclatural changes in some flowering plants[J].IndianForester, 1981, 107(7): 432-437.

[5] CLAYTON W D, RENVOIZE S A. Genera Graminum: Grasses of the World[M]. Kew Bulletin Additional Series 13. London: Her Majesty’s Stationery Office. 1986.

[6] SHUKLA U. The grasses of northeastern India[M]. Jodphur: Scientific Publishers. 1996.

[7] NOLTIE H J. Flora of Bhutan[M]. Edinburgh: Royal Botanic Garden Edinburgh. 2000, 3 (2):608-617.

[8] 耿以禮. 中國主要植物圖說(禾本科)[M]. 北京: 科學出版社, 1959.

[9] 郭本兆, 盧生蓮, 孫永華, 等. 中國植物志(第九卷第三分冊)[M]. 北京：科學出版社，1987.

[10] 吳征鎰, 路安民, 湯彥承, 等. 中國被子植物科屬綜論[M]. 北京：科學出版社. 2003.

[11] 馬海英. 廣義拂子茅屬(禾本科)的系統(tǒng)學研究[D]. 北京: 中國科學院研究生院, 2005.

[12] GILLESPIE L J, ARCHAMBAULT A, SORENG R J,etal. A close phylogenetic relationship detected betweenPoasubg.Andinaeof Patagonia andHookerochloaandFestucellaof Australia (Poaceae, Pooideae, Poeae): evidence from nuclear and chloroplast DNA sequences and morphology[C]. XVII International Botanical Congress, Vienna, Austria Center, July 2005. 2005: 17-23.

[13] SORENG R J, PETERSON P M, ROMASCHENKO K,etal. A worldwide phylogenetic classification of the Poaceae (Gramineae)[J].JournalofSystematicsandEvolution, 2015, 53: 117-137.

[14] CHEN S L, SUN B X, LIU L,etal. Poaceae[M]//. In Flora of China. Beijing: Science Press & St. Louis: Missouri Botanical Garden Press. 2006, 22: 1-653.

[15] BUTZIN F. Zur Klassifizierung der Spelzenformen bei den Gramineen mit besonderer Berücksichtigung der begrannten Spelzen (On the Classification of the Glume Forms in the Gramineae, with Special Regard to Awned Glumes)[J].Willdenowia, 1969: 445-470.

[16] ADEL E G, EI-GHANI M, SHALABI L. Taxonomic significance of Glume morphology and leaf epidermal characteristics in some taxa of tribe Aveneae (Poaceae).NotulaeScientiaBiologicae,2013, 5(2), 144.

[17] 李密密, 舒 璞, 周義鋒, 等.中國薯蕷屬植物葉表皮微形態(tài)特征及其分類學意義[J].西北植物學報,2012, 32(11):2 232-2 242.

LI M M, SHU P, ZHOU Y F,etal. Micro-morphological characteristics of leaf epidermis and its taxonomic significance inDioscoreafrom China[J].ActaBotanicaBoreali-OccidentaliaSinica, 2012, 32(11): 2 232-2 242.

[18] 王悅云, 孫慶文, 楊 雯,等.中國淫羊藿屬藥用植物花粉特征及其分類學意義[J].西北植物學報,2015, 35(7):1 367-1 377.

WANG Y Y, SUN Q W, YANG W,etal. Pollen Characteristics and taxonomic significance of Chinese Epimedium Medicinal plant[J].ActaBotanicaBoreali-OccidentaliaSinica, 2015,35(7):1 367-1 377.

[19] 廖晨陽, 高 輝, 楊 潔. 中國傘形科狹義當歸屬果實表面微形態(tài)特征及其分類學研究[J].西北植物學報,2015,35(1):65-75.

LIAO C Y, GAO H, YANG J. Micromorphological characteristics of pericarp surface ofAngelicas.s.(Apiaceae) from China and its taxonomic significance[J].ActaBotanicaBoreali-OccidentaliaSinica, 2015, 35(1):65-75.

[21] ELLIS R P. A procedure for standardizing comparative leaf anatomy in the Poaceae. II. The epidermis as seen in surface view[J].Bothalia, 1979, 12(4): 641-671.

[22] 陳守良, 金岳杏, 吳竹君.禾本科葉片表皮微形態(tài)圖譜[M].南京：江蘇科學技術出版社.1993.

圖版 Ⅰ 掃描電鏡下溝稃草屬及其近緣屬植物穎片微形態(tài)1. 溝稃草； 2. 法氏早熟禾； 3. 久內早熟禾； 4. 硬質早熟禾； 5. 羊茅； 6. 多花黑麥草； 7. 黑麥草； 8. 鼠茅； 9. 粟草； 10. 異穎草； 11. 柔弱野青茅； 12. 拂子茅； 13. 假葦拂子茅； 14. 拂子茅(原變種)； 15. 多花剪股穎; 16. 華北剪股穎； 17. 虉草； 18. 藏黃花茅； 19. 光稃野燕麥； 20. 野燕麥； 21. 棒頭草； 22. 苦竹Plate Ⅰ SEM micrographs on glumes of Aniselytron and related generaFig.1. A. treutleri；Fig.2. P. faberi；Fig. 3. P. hisauchii；Fig. 4. P. sphondylodes；Fig. 5. F. ovina；Fig. 6. L. multiflorum；Fig. 7. L. perenne；Fig. 8. V. myuros；Fig. 9. M. effusum；Fig. 10. D. petelotii；Fig. 11. D. flaccida；Fig. 12. C. epigeios；Fig. 13. C. pseudophragmites；Fig. 14. C. epigeios var. epigeios；Fig. 15. A. micrantha；Fig.16. A. clavata；Fig. 17. P. arundinacea；Fig. 18. A. hookeri；Fig. 19. A. fatua var. glabrata；Fig. 20. A. fatua；Fig. 21. P. fugax；Fig. 22. P. amarus

(編輯:潘新社)

The Micromorphology of Glumes ofAniselytronand Its Related Genera

WANG Yanhong, ZHANG Xuejie, FAN Shoujin*

(Key Laboratory of Plant Stress Research, College of Life Science, Shandong Normal University, Ji’nan 250014, China)

The micromorphology of glumes for 20 species and 2 varieties belonging toAniselytronand its related genera of Poaceae was examined by scanning electron microscope. The results showed that: (1) the glumes ofAniselytronand its related genera were characterized by long tubular or short tubular intercostal long cells with markedly sinuous walls. Intercostal cork cells distributed solitary with the shape of subrotund and intercostal silica bodies were absent. The shapes of silica cells in costal zones were subrotund. Parallel-sides to low dome shaped subsidiary cells were found. Prickles were frequently occurred in both costal zones and intercostal zones. Hook-hairs and papillaes could be seen while no micro-hairs and macro-hairs were found. (2) A phylogenetic tree was constructed according to the characters of glumes micromorphology.Aniselytronand Poeae clustered together, which indicated that they have a close relationship and distantly related toCalamagrostisandDeyeuxia. (3) According to the micromorphology of the glumes, we draw the conclusion thatAniselytronshould not as a member ofCalamagrostiss. l. and should as an independent genus be placed in Poeae.

Aniselytron; glumes; micromorphology; SEM

1000-4025(2016)08-1608-07

10.7606/j.issn.1000-4025.2016.08.1608

2016-05-19;修改稿收到日期:2016-07-13

國家自然科學基金(31170173,31470298)；山東省自然科學基金(ZR2012CM012)；山東省科技攻關項目(2010GSF10205)

王燕紅(1987-)，女，在讀博士研究生，主要從事植物資源分類研究。

*通信作者:樊守金，博士，教授，博士研究生導師，主要從事植物資源分類研究。E-mail: fanshoujin007@163.com

Q944.5

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