謝愛玲張玉榮劉小慶

載脂蛋白E基因多態(tài)性與動脈粥樣硬化性腦梗死關系的Meta分析

謝愛玲①張玉榮①劉小慶①

目的：采用Meta分析的方法探討載脂蛋白E（ApoE）基因多態(tài)性與動脈粥樣硬化性腦梗死的關系。方法：雙人獨立全面檢索在中國人群中開展的載脂蛋白E基因多態(tài)性與動脈粥樣硬化性腦梗死關系的文獻，采用固定或隨機效應模型合并效應值計算95%置信區(qū)間，繪制森林圖并進行異質(zhì)性檢驗。結果：共納入12篇符合要求文獻，研究發(fā)現(xiàn)與攜帶ε3/ε3野生基因型的個體相比，攜帶ε4基因型的個體動脈粥樣硬化性腦梗死的風險顯著增加（OR=3.06，95%CI：1.66，5.64），并未發(fā)現(xiàn)攜帶ε2基因型會降低動脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風險（OR=1.20，95%CI：0.89，1.64）。結論：攜帶ApoE ε4基因型的個體是動脈粥樣硬化性腦梗死的高危人群。

載脂蛋白E； 動脈粥樣硬化性腦梗死； Meta分析

First-author’s address：The Third People’s Hospital of J i’nan，J i’nan 250101，China

動脈粥樣硬化性腦梗死又稱缺血性腦卒中，是一種嚴重威脅人類生命及生存質(zhì)量的疾病之一，它是在腦動脈粥樣硬化的基礎上，腦血管發(fā)生閉塞或血栓，導致腦組織血供不足引發(fā)缺血、缺氧性壞死，并出現(xiàn)相應神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和體的急性腦血管病［1］，約占整個腦梗死患者的40%～60%［2］。近年來的流行病學調(diào)查發(fā)現(xiàn)動脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)病具有年輕化趨勢［3］。脂質(zhì)代謝異常是導致動脈粥樣硬化并進而引發(fā)動脈粥樣硬化性腦梗死的重要途徑［4］。載脂蛋白E（ApoE）是人體內(nèi)參與脂蛋白代謝，維持膽固醇平衡的重要酶類，其活性受基因多態(tài)性的影響［5］。載脂蛋白E基因位于人體19號染色體上，具有ε2、ε3、ε4三種等位基因型，導致人群中出現(xiàn)六種ApoE表型（ε2/ε2、ε2/ε3、ε2/ε4、ε3/ε3，ε3/ε4，ε4/ε4）［6］。雖然多數(shù)研究發(fā)現(xiàn)攜帶ε4等位基因型的個體罹患動脈粥樣硬化性腦梗死的危險增加，但是少數(shù)研究并未發(fā)現(xiàn)相關關系，且以往研究的樣本量較小，缺乏統(tǒng)計把握度。本次研究擬通過Meta分析的方法系統(tǒng)梳理以往開展的ApoE基因型與動脈粥樣硬化性腦梗死關系的研究，以期在更大樣本量的基礎上了解ApoE基因型與動脈粥樣硬化的關系提供依據(jù)。

1　資料與方法

1.1文獻檢索方法 本次研究共檢索了3個期刊數(shù)據(jù)庫，分別為一個外文數(shù)據(jù)庫Medline和兩個中文數(shù)據(jù)庫萬方和CNKI。其中在Medline的檢索方式為基本檢索檢索式如下：（"atherosclerotic cerebral infarction"［All Fields］ OR "stroke"［All Fields］） AND （"Apolipoprotein E"［All Fields］ OR "ApoE"［All Fields］）AND （"Chinese"［All Fields］ OR "China"［All Fields］），在CNKI及萬方的檢索方式為高級檢索，檢索式為“腦梗死”和“載脂蛋白E”。檢索過程由雙人獨立檢索完成，對于存在歧義的文獻經(jīng)小組討論后決定是否為符合要求文獻，待納入所有符合要求的文獻完后，研究者對納入文獻的參考文獻進行了二級檢索，以保證查全率。文獻檢索的截止日期為2015 年10月8日。

1.2文獻的篩選過程及質(zhì)量評價

1.2.1文獻的納入及排除標準 （1）納入標準：公開發(fā)表在國內(nèi)外期刊，語言為中文或者英文；探討了載脂蛋白E基因多態(tài)性與動脈粥樣硬化性腦梗死的關系；載脂蛋白E的基因型頻率達到Hardy-Weinberg平衡；能夠得到載脂蛋白E基因多態(tài)性與動脈粥樣硬化性腦梗死的OR值及其95%CI，或者通過計算能得到OR及其95%CI。（2）排除標準：學位論文；病例組為非動脈粥樣硬化性腦梗死或未明確定義腦梗死的類型；未提供載脂蛋白E基因多態(tài)性與動脈粥樣硬化性腦梗死的OR值及其95%CI，或者通過計算也不能得到OR及其95%CI；動物試驗性文獻；重復文獻。

1.2.2文獻的質(zhì)量評價 采用Newcastle-Ottawa Scale（NOS）對所有的納入文獻從以下3個方面進行質(zhì)量評價：（1）研究對象的選擇（病例與對照、暴露組與非暴露組的選擇）；（2）研究對象的可比性（病例與對照的可比性、暴露組與非暴露組的可比性）；（3）結局與暴露的確定性（病例是否診斷明確、暴露是否明確）。NOS量表總分為9分，其中研究對象的選擇部分占4分，研究對象的可比性占1分，結局與暴露的確定性占3分。文獻質(zhì)量的詳細評價標準詳見以下網(wǎng)站：http：//www.ohri.ca/ programs/clinical_epidemiology/oxford.asp。本文將文獻質(zhì)量得分大于7分者視為高質(zhì)量文獻。

1.3資料的提取 對所有符合納入要求的文獻均提取研究者姓名、開展研究的時間、研究的設計類型、病例組及對照組人數(shù)（樣本量）、病例組及對照組ApoE各基因型頻率、研究的效應強度OR值或者RR值及其95%CI。

1.4統(tǒng)計學處理 為了增加統(tǒng)計把握度本次研究在分析前先對各類基因型進行了合并，具體分為三類：第一類為ε3/ε3野生型，作為參照類；第二類為攜帶ε2基因型但未攜帶ε4基因型的個體包括ε2/ε2、ε2/ε3兩種類型；第三類為攜帶ε4基因型的個體包括ε2/ε4、ε3/ε4、ε4/ε4三種類型。納入分析的研究中有些并未直接提供效應值，因此在合并前先通過非條件Logistic回歸計算ApoE基因型與動脈粥樣硬化性腦梗死的效應強度（OR值或者RR值）。待得到所有的OR值及其95%CI后對所有文獻的效應值進行異質(zhì)性檢驗，若異質(zhì)性檢驗P值小于0.01且I2≥50%則提示各個研究間存在異質(zhì)性，宜采用隨機效應模型合并OR、RR值及其95%CI，反之則采用固定效用模型合并OR、RR值及其95%CI。通過Egger檢驗檢查有無發(fā)表偏倚，若Egger檢驗P＜0.05則提示存在發(fā)表偏倚，反之則判定為不存在發(fā)表偏倚。本次研究的所有統(tǒng)計分析由Stata 11.0統(tǒng)計分析軟件完成。

2　結果

2.1文獻納入情況 在Medline共檢索到44篇相關文獻，經(jīng)閱讀題目及摘要排除主題不相關文獻及動物實驗文獻31篇，剩余13篇確定為待讀文獻，經(jīng)全文閱讀后發(fā)現(xiàn)所有13篇文獻均為明確定義腦梗死類型，予以排除。在萬方數(shù)據(jù)庫共檢索到128篇相關文獻，其中學位論文及會議論文27篇予以排除，在剩下的101篇期刊文獻中經(jīng)閱讀題目及摘要排除動物試驗、綜述性文獻、主題不相關文獻30篇，剩余71篇文獻確定為待讀文獻，經(jīng)全文閱讀后最終納入11篇文獻為待合并文獻。在CNKI共檢索到118篇相關文獻，經(jīng)過檢查全部文獻均與萬方數(shù)據(jù)庫重復。通過查閱納入文獻的參考文獻，補充納入1篇符合要求文獻。最終本次Meta分析共納入12篇文獻，納入文獻的基本特征見表1。

2.2文獻合并情況

2.2.1攜帶ε2基因型的合并結果 納入研究的12篇文獻均探討了病例組相比對照組攜帶ε2基因型的優(yōu)勢比，12篇均未發(fā)現(xiàn)攜帶ε2基因型會增加腦動脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風險。異質(zhì)性檢驗發(fā)現(xiàn)I2=0，P=0.564，可以認為12項研究之間不存在異質(zhì)性，宜采用固定效應模型合并OR值及其95%CI。文獻合并后提示與ε3/ε3野生型的個體相比，攜帶ε2基因型的突變個體其腦動脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風險并未顯著增加（OR=1.20，95%CI：0.89，1.64），具體合并結果見圖1。Egger檢驗P=0.239，提示不存在發(fā)表偏倚。

表1　納入文獻的基本特征

圖1　ApoE ε 2基因型與動脈粥樣硬化性腦梗死關系的森林圖

2.2.2攜帶ε4基因型的合并結果 納入研究的12篇文獻均探討了病例組相比對照組攜帶ε4基因型的優(yōu)勢比，12篇文獻中有9片發(fā)現(xiàn)攜帶ε4基因型會顯著增加個體腦動脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風險，另外3篇文獻雖然提示攜帶ε4基因型可能是腦動脈粥樣硬化性腦梗死的危險因素，但差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。異質(zhì)性檢驗發(fā)現(xiàn)I2=81.2%，P＜0.001，認為12項研究之間存在較大的異質(zhì)性，宜采用隨機效應模型合并OR值及其95%CI。文獻合并后提示與ε3/ε3野生型的個體相比，攜帶ε4基因型的突變個體其腦動脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風險顯著增加（OR=3.06，95%CI：1.66，5.64），具體合并結果見圖2。Egger檢驗P=0.682，提示不存在發(fā)表偏倚。

圖2　ApoE ε 4基因型與動脈粥樣硬化性腦梗死關系的森林圖

3　討論

本次研究通過Meta分析的方法系統(tǒng)梳理了ApoE基因多態(tài)性與動脈粥樣硬化性腦梗死的關系，發(fā)現(xiàn)攜帶ε4基因型的個體動脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風險顯著增加，而本次研究并未發(fā)現(xiàn)攜帶ε2基因型會降低動脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風險。攜帶ε4基因型的個體動脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風險顯著的原因如下：首先，在人體內(nèi)載脂蛋白E的是做為乳糜微粒（CM）殘粒、大顆粒極低密度脂蛋白（VLDL）受體的配體而發(fā)揮其生物學效應的。攜帶ε4基因型的個體其體內(nèi)載脂蛋白E的活性水平顯著增加，乳糜微粒（CM）殘粒、大顆粒極低密度脂蛋白（VLDL）在人體內(nèi)的代謝速率加快，大顆粒極低密度脂蛋白分解為低密度脂蛋白（LDL）的速率增加，相應的LDL受體會出現(xiàn)反饋性合成降低，肝臟對LDL的內(nèi)吞速度下降，血漿中總膽固醇水平及低密度脂蛋白水平增高［7］。其次，以往研究發(fā)現(xiàn)攜帶ε4基因型的個體，其小腸吸收膽固醇的效率增加［8］。血漿中總膽固醇水平及低密度脂蛋白水平增加均為動脈粥樣硬化的重要危險因素。

以往雖然有Meta分析探討了載脂蛋白E基因多態(tài)性與腦梗死的關系，但是并未區(qū)分腦梗死的具體類型。不同類型的腦梗死具有不同的病因機制，如動脈粥樣硬化性腦梗死的病理基礎為腦動脈出現(xiàn)的粥樣化病變；心源性腦梗死較多的為心臟內(nèi)血栓脫落后隨血液循環(huán)進入腦動脈導致腦動脈阻塞；腔隙性腦梗死的病理基礎則為高血壓等疾病導致的腦動脈血管發(fā)生閉塞性改變。因此理論上載脂蛋白E基因多態(tài)性與不同類型的腦梗死之間的關聯(lián)強度可能會存在較大差異。動脈粥樣硬化性腦梗死是腦梗死的重要類型，其病理基礎是腦動脈出現(xiàn)的粥樣改變。由于載脂蛋白E與人體內(nèi)脂類及膽固醇水平密切相關，而兩者又是動脈粥樣硬化的重要危險因素，因此探討載脂蛋白E基因多態(tài)性與動脈粥樣硬化性腦梗死的關系顯得尤為合理。本次研究首次在中國人群中采用Meta分析的方法探討了載脂蛋白E基因多態(tài)性與動脈粥樣硬化性腦梗死的關系，發(fā)現(xiàn)攜帶ε4基因型的個體動脈粥樣硬化性腦梗死的發(fā)生風險顯著增加，提示對于攜帶ε4基因型的個體應該注意控制飲食中的脂肪及膽固醇的攝入水平。

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Meta Analysis of Relationship between ApoE Gene Polymorphisms and Atherosclerotic Cerebral Infarction/

XIE Ai-ling，ZHANG Yu-rong，LIU Xiao-qing.//Medical Innovation of China，2016，13（26）：100-103

Objective：To examine the relationship between ApoE gene polymorphisms and risk of Atherosclerotic cerebral infarction （ACI） by Meta analysis.Method：Two researchers independently reviewed the literature which examined the relationship between ApoE gene polymorphisms and risk of ACI.We used fix or random effect models to combine the odds ratio and 95% confidence intervals.Forest plots were used to show each study’s effect and the combined effect while funnel plot and egger test were used to test the heterogeneity. Result：A total of 11 case-control studies were included into the final analysis.Compared with the ε3/ε3 wild genotype， individuals with ε4 genotype had significant higher risk of AIC （OR=3.06，95%CI：1.66，5.64）. However，we didn’t find individuals with ε2 genotype had reduced risk of ACI （OR=1.20，95%CI：0.89，1.64）. Conclusion：Individuals with ApoE ε4 genotype may at particularly high risk of ACI.

ApoE； Atherosclerotic cerebral infarction； Meta-analysis

10.3969/j.issn.1674-4985.2016.26.027

2016-03-10） （本文編輯：蔡元元）

①濟南市第三人民醫(yī)院 山東 濟南 250101

謝愛玲