亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        E鈣黏蛋白和基質(zhì)金屬蛋白酶-9在盆底器官脫垂患者宮骶韌帶中的表達(dá)及相關(guān)性分析

        2016-10-11 08:28:19莉武漢大學(xué)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科湖北武漢430060
        關(guān)鍵詞:胞外基質(zhì)盆底韌帶

        王 紅 洪 莉武漢大學(xué)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,湖北武漢 430060

        E鈣黏蛋白和基質(zhì)金屬蛋白酶-9在盆底器官脫垂患者宮骶韌帶中的表達(dá)及相關(guān)性分析

        王紅洪莉
        武漢大學(xué)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,湖北武漢430060

        目的 探討E鈣黏蛋白和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)在盆底器官脫垂(POP)患者子宮骶韌帶中的表達(dá)情況,并分析兩者的相關(guān)性。方法 選取2015年1月~2016年1月武漢大學(xué)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科子宮全切患者55例,分為三組,其中輕度POP組(POPⅠ~Ⅱ度)15例,重度POP組(POPⅢ~Ⅳ度)22例,正常組(非POP患者)18例,采用蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)三組患者子宮骶韌帶組織中E-鈣黏蛋白和MMP-9的表達(dá)情況,比較分析兩者在各組的相關(guān)性。結(jié)果 輕度POP組及重度POP組的E-鈣黏蛋白表達(dá)顯著低于正常組(P<0.01),而MMP-9的表達(dá)高于正常組(P<0.05或P<0.01),并且E-鈣黏蛋白的降低和MMP-9的升高隨POP嚴(yán)重程度加重而加大;E-鈣黏蛋白和MMP-9在輕度和重度POP組的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.5612,P=0.0295;r=-0.6221,P=0.002)。結(jié)論E-鈣黏蛋白降低和MMP-9的升高可能是POP發(fā)病機(jī)制之一,二者可能共同參與了POP的發(fā)生發(fā)展。

        盆底器官脫垂;E-鈣黏蛋白;基質(zhì)金屬蛋白酶-9;相關(guān)性分析

        [Abstract]Objective To investigate expression of E-cadherin and matrix metalloproteinase-9(MMP-9)in uterosacral ligament of women with pelvic organ prolapse and analyze the correlation between the two proteins.Methods Fifty-five patients undergoing hysterectomy were selected from January 2015 to January 2016 in the Department of Gynecology and Obstetrics of Renmin Hospital of Wuhan University,then they were divided into three groups:the mild group(POPⅠ-Ⅱ,15 cases),the severe group(POPⅢ-Ⅳ,22 cases)and control group(without POP,18 cases).Western blot was used to detect E-cadherin and MMP-9 of the uterosacral ligament tissues taken from patients of the three groups,then the differences and correlation of the expression of both proteins were analyzed among the three groups.Results The level of E-cadherin in the mild group and the severe group was lower(P<0.01)and MMP-9 was higher than those of the control group(P<0.05 or P<0.01),the decrease of E-cadherin and the rise of MMP-9 increased with severity increase of POP.There was a significant negative correlation between the two proteins in the mild group and the severe group(r=-0.5612,P=0.0295;r=-0.6221,P=0.002).Conclusion The down-regulation of E-cadherin and up-regulation of MMP-9 in uterosacral ligament tissues may be one of the pathogenesis of POP.The both proteins may paticipate in the pathogenesis of POP.

        [Key words]Pelvic organ prolapse;E-cadherin;Matrix metalloproteinase-9;Correlation analysis

        盆腔器官脫垂(Pelvic organ prolapse,POP)是由于盆底支持功能減弱和盆底固有肌及韌帶功能缺陷等引起的一組疾病,主要包括子宮脫垂、陰道前壁膨出、陰道后壁膨出等。POP是中老年婦女的多發(fā)病,研究表明在國(guó)內(nèi)約有30%的中老年婦女有著不同程度的盆底器官脫垂[1]。其癥狀有陰道腫物膨出、疼痛、局部潰瘍及其引起的婦科炎癥等,在很大程度上影響了中老年婦女的生活質(zhì)量。相關(guān)調(diào)查研究顯示,在美國(guó)每年用于POP手術(shù)治療的費(fèi)用高達(dá)10億美元[2],給患者帶來嚴(yán)重的精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),研究POP的發(fā)病機(jī)制具有重要的理論和臨床價(jià)值。相關(guān)的流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn),其發(fā)病主要與分娩、年齡、肥胖、慢性腹壓增加及絕經(jīng)等因素相關(guān)[3]。然而,POP發(fā)病具體的分子機(jī)制尚未完全明了,缺乏充分的病因?qū)W理論解釋POP的發(fā)病,許多研究證實(shí)POP發(fā)病與細(xì)胞內(nèi)骨架及細(xì)胞外基質(zhì)(Extra cellular matrix,ECM)的代謝密切相關(guān)[4-6]。本研究中,選取E鈣黏素(E-cadherin)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)兩項(xiàng)細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)成分,檢測(cè)它們?cè)赑OP患者子宮骶韌帶中的表達(dá)情況,并分析兩者關(guān)系,旨在進(jìn)一步闡明POP發(fā)病的相關(guān)分子機(jī)制。

        1 資料與方法

        1.1一般資料

        選取2015年1月~2016年1月在武漢大學(xué)人民醫(yī)院(以下簡(jiǎn)稱“我院”)行子宮全切術(shù)患者55例,其中患POP行子宮全切術(shù)的患者37例作為POP組,并以同期因子宮腺肌癥、子宮肌瘤或功能性子宮出血等良性疾?。ň蠢奂皩m骶韌帶),而無POP或尿失禁行子宮全切術(shù)的患者18例作為正常組。根據(jù)國(guó)際尿控協(xié)會(huì)(International Continence Society,ICS)1996年公布的POP-Q分類法對(duì)POP進(jìn)行分度,以POPⅠ~Ⅱ度患者作為輕度POP組(此組患者切除子宮的主要指征為CINⅡ或Ⅲ,且合并輕度POP),共15例;POPⅢ~Ⅳ度患者作為中度POP組,共22例。各組患者均為陰道分娩和絕經(jīng)者,既往無激素使用史,無明顯的盆腔炎癥、無糖尿病或高血壓等疾病、無各種慢性疾病。參與本研究的所有患者均知情同意并簽署知情同意書,且本研究已經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審查批準(zhǔn)。

        1.2樣本來源

        在各組患者行子宮全切術(shù)中,切取距離宮頸約0.5 cm處的宮骶韌帶組織,長(zhǎng)約0.5 cm。用PBS清洗血液、剪去脂肪等組織,并用液氮短期保存,以備后期提取組織總蛋白。

        1.3實(shí)驗(yàn)方法

        1.3.1組織總蛋白提取將各組液氮凍存的組織取出并編號(hào),用研缽研磨,加入裂解液充分裂解,離心后提取上清,并使用蛋白濃度測(cè)定試劑盒(碧云天生物技術(shù)研究所)測(cè)總蛋白濃度,然后加入上樣緩沖液煮沸,放入-20℃冰箱保存,以備后期Western blot檢測(cè)蛋白表達(dá)。1.3.2 Western blot檢測(cè)蛋白表達(dá) 運(yùn)用Western blot檢測(cè)E-cadherin和MMP-9在各組患者宮骶韌帶中的表達(dá)情況。主要的操作步驟包括:配膠(分離膠10%)、上樣、電泳、轉(zhuǎn)膜(PVDF膜)、封閉、一抗孵育、二抗孵育、掃描分析。主要的試劑及器材:E-鈣黏蛋白小鼠抗人單克隆抗體 (Abcam,USA),MMP-9和GAPDH兔抗人單克隆抗體 (Abcam,USA)、Tris-HCL緩沖鹽溶液(TBS)、奧德賽掃描儀(Odyssey,Li-cor,USA)。

        1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,兩組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料用率表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn);采用Pearson相關(guān)性檢驗(yàn)進(jìn)行相關(guān)性分析;以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1三組患者基本參數(shù)比較

        收集記錄與POP相關(guān)的主要因素,如年齡、體重指數(shù)(BMI)、陰道分娩次數(shù)。三組3個(gè)指標(biāo)比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。見表1。

        表1 各組患者基本參數(shù)比較(x±s)

        2.2三組患者宮骶韌帶組織中E-鈣黏蛋白及MMP-9的表達(dá)情況

        正常組、輕度POP組和重度POP組三組宮骶韌帶組織中E-鈣黏蛋白表達(dá)分別為37.91±3.41、32.65± 3.36和26.11±3.24,兩兩比較,差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。正常組、輕度POP組和重度POP組三組MMP-9蛋白分別為24.38±2.94、27.61±2.40和31.09± 3.59,兩兩比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.0)。見圖1。

        圖1 E-鈣黏蛋白和MMP-9在三組中的表達(dá)

        2.3三組患者宮骶韌帶組織中E-鈣黏蛋白和MMP-9表達(dá)的相關(guān)性分析

        根據(jù)E-鈣黏蛋白和MMP-9在各組的表達(dá)量繪制散點(diǎn)圖,采用Pearson相關(guān)性檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn),在正常組中E-鈣黏蛋白表達(dá)與MMP-9無明顯相關(guān)性(r=0.377,P=0.123),而在輕度POP組合重度POP組,兩蛋白的表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.5612,P=0.0295;r=-0.6221,P=0.002)。見圖2。

        圖2 三組患者宮骶韌帶組織中E-cadherin和MMP-9表達(dá)的相關(guān)性分析

        3 討論

        女性的盆底組織受復(fù)雜的生物力學(xué)和雌激素影響,妊娠、分娩等引起的腹壓變化以及雌激素的撤退都將引起POP的發(fā)生和發(fā)展。盆底的韌帶和肌肉是維持盆底器官正常解剖位置的基礎(chǔ),而子宮主骶韌帶是提供力學(xué)抗性的關(guān)鍵結(jié)構(gòu),其主要成分是肌肉和膠原纖維,任何原因引起的盆底肌肉和膠原纖維的斷裂和退行性變化都能引起盆底支持結(jié)構(gòu)的松弛,進(jìn)而導(dǎo)致POP或者壓力性尿失禁(Stress urinary incontinence,SUI)[7]。

        鈣黏蛋白是一組存在于細(xì)胞表面的糖蛋白,它可以通過鈣依賴型的分子機(jī)制發(fā)揮其保持細(xì)胞間黏附的作用。E-鈣黏蛋白屬于鈣黏蛋白家族的一員,廣泛存在于各類上皮細(xì)胞之中,主要介導(dǎo)同型細(xì)胞間的黏附反應(yīng),還可以通過與細(xì)胞內(nèi)的配合基連環(huán)蛋白αβ和γ發(fā)揮細(xì)胞骨架的作用,其表達(dá)的丟失將使細(xì)胞失去極性并和周圍細(xì)胞分離。近年來E-鈣黏蛋白的研究主要集中在腫瘤的轉(zhuǎn)移、侵入等方面[8-9]。在MMPs家族中,MMP-2和MMP-9是主要成員,并與細(xì)胞外基質(zhì)的重塑修復(fù)關(guān)系密切。然而,E-鈣黏蛋白與MMP-9關(guān)系密切,在Llorens等[10]的研究中證實(shí)了E-鈣黏蛋白能夠調(diào)節(jié)MMP-9的表達(dá),能夠抑制腫瘤細(xì)胞或者宿主細(xì)胞產(chǎn)生基質(zhì)金屬蛋白酶,并且有效減少腫瘤細(xì)胞周圍的基質(zhì)以及基底膜中的各種細(xì)胞外基質(zhì)的降解,并且在一項(xiàng)大鼠腎間質(zhì)纖維化的研究中也得到了類似的結(jié)果[11]。在盆底支持組織中主要的細(xì)胞成分是肌肉細(xì)胞和成纖維細(xì)胞,已經(jīng)證實(shí)了成纖維細(xì)胞合成、分泌的彈性纖維和膠原蛋白是保持盆底支持組織強(qiáng)度和韌性的關(guān)鍵成分[12-13]。膠原蛋白是細(xì)胞外基質(zhì)的主要成分,在盆底支持組織中發(fā)揮重要的作用。而MMP-9又稱為明膠酶,主要功能是分解細(xì)胞外基質(zhì),降解膠原蛋白并改變膠原蛋白的性狀。許多研究已經(jīng)證實(shí),MMPs作為細(xì)胞外基質(zhì)重要的降解酶,在組織的修復(fù)、血管發(fā)生、凋亡、腫瘤植入和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要的作用[14-16]。MMP-9在盆底組織的細(xì)胞外基質(zhì)的合成和降解中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用,一旦盆底結(jié)締組織受到炎癥、細(xì)胞因子、機(jī)械力等刺激時(shí),便會(huì)刺激MMP-9的合成,引起富含膠原的組織的可塑性和完整性遭到破壞[17],進(jìn)而導(dǎo)致POP或SUI的發(fā)生發(fā)展。

        在本研究中,POP患者盆底宮骶韌帶中的E-鈣黏蛋白較非POP患者是顯著降低的,然而MMP-9的含量則是升高的。MMP-9的過度升高將極大地增加細(xì)胞外基質(zhì)的降解,膠原蛋白減少,引起成纖維細(xì)胞的功能缺陷,從而導(dǎo)致POP的發(fā)生和發(fā)展。前面提到E-鈣黏蛋白可以結(jié)合細(xì)胞內(nèi)的配合基連環(huán)蛋白αβ和γ,起到細(xì)胞骨架的作用,它的減少也可能會(huì)引起成纖維細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性,并且其黏附作用的降低對(duì)盆底結(jié)締組織的穩(wěn)定性也有負(fù)性作用。從本研究中E-鈣黏蛋白和MMP-9的相關(guān)性分析可以看出兩者在輕度POP組和重度POP組中呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)性。曾有報(bào)道把表達(dá)E-鈣黏蛋白的基因片段轉(zhuǎn)染進(jìn)前列腺腺癌細(xì)胞中,發(fā)現(xiàn)MMP-2的表達(dá)降低,腫瘤的侵襲能力也降低[18],并且E-鈣黏蛋白的下調(diào)會(huì)導(dǎo)致MMP-9活性升高[10]。在Munshi等[19]的一項(xiàng)關(guān)于口腔角質(zhì)化的研究中也發(fā)現(xiàn)了E-鈣黏蛋白能夠降低MMP-9的合成,另一項(xiàng)類似的研究也顯示在大鼠角質(zhì)細(xì)胞中E-鈣黏蛋白的表達(dá)降低與MMP-9的表達(dá)升高密切相關(guān)[20]。在胎盤植入時(shí)E-鈣黏蛋白可以通過調(diào)節(jié)MMP-2與MMP-9 mRNA的表達(dá)和MMP-2與MMP-9的明膠活性來參與其中[21]。然而,同時(shí)也有研究顯示MMP-9作為蛋白激酶參與E-鈣黏蛋白的分解[22],并且MMP-9是表皮生長(zhǎng)因子受體依賴型的E-鈣黏蛋白減少的調(diào)節(jié)者,其表達(dá)升高能夠單獨(dú)造成E-鈣黏蛋白和黏附節(jié)點(diǎn)的喪失[23]。E-鈣黏蛋白與MMP-9的負(fù)相關(guān)性在本研究中也得到了證實(shí),這種負(fù)相關(guān)性在POP分度越高的患者中表現(xiàn)越明顯,E-鈣黏蛋白與MMP-9可能存在因果關(guān)系,在POP的發(fā)病和發(fā)展中這兩者的相關(guān)性可能存在重要意義。

        綜上所述,在POP患者的盆底骶韌帶中E-鈣黏蛋白的表達(dá)降低,MMP-9表達(dá)升高,兩者呈負(fù)相關(guān),推測(cè)兩者可能存在因果關(guān)系,在本研究中并不能得出何者是因何者是果,兩者間可能存在相聯(lián)系的細(xì)胞因子或者信號(hào)分子,是POP發(fā)病機(jī)制之一。然而,兩者具體的關(guān)系以及通過何種途徑相聯(lián)系在POP發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮作用,還需要更多更深入的研究,以期在POP的預(yù)防和治療上尋找新的靶點(diǎn)。

        [1]Peng P,Zhu L,Lang JH,et al.Unilateral sacrospinous ligament fixation for treatment of genital prolapse[J].Chin Med J(Engl),2010,123(15):1995-1998.

        [2]王靜怡,朱蘭.成年女性盆腔臟器脫垂流行病學(xué)研究進(jìn)展[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志,2011,27(2):95-98.

        [3]Medvedev AE,Piao W,Shoenfelt J,et al.Role of TLR4 tyrosine phosphorylation in signal transduction and endotoxin tolerance[J].J Biol Chem,2007,282(22):16042-16053.

        [4]Ruiz-Zapata AM,Kerkhof MH,Zandieh-Doulabi B,et al. Functional characteristics of vaginal fibroblastic cells from premenopausal women with pelvic organ prolapse[J].Mol Hum Reprod,2014,20(11):1135-1143.

        [5]Roman S,Mangera A,Osman NI,et al.Developing a tissue engineered repair material for treatment of stress urinary incontinence and pelvic organ prolapse-which cell source?[J].Neurourol Urodyn,2014,33(5):531-537.

        [6]Dviri M,Leron E,Dreiher J,et al.Increased matrix metalloproteinases-1,-9 in the uterosacral ligaments and vaginal tissue from women with pelvic organ prolapse[J].Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol,2011,156(1):113-117.

        [7]Uustal FE,Wingren G,Kjolhede P.Factors associated with pelvic floor dysfunction with emphasis on urinary and fecal incontinence and genital prolapse:an epidemiological study[J].Acta Obstet Gynecol Scand,2004,83(4):383-389.

        [8]Zhang L,Kim S,Ding W,et al.Arsenic sulfide inhibits cell migration and invasion of gastric cancer in vitro and in vivo[J].Drug Des Devel Ther,2015,9(4):5579-5590.

        [9]Fan HX,Wang S,Zhao H,et al.Sonic hedgehog signaling may promote invasion and metastasis of oral squamous cell carcinoma by activating MMP-9 and E-cadherin expression[J].Med Oncol,2014,31(7):41.

        [10]Llorens A,Rodrigo I,Lopez-Barcons L,et al.Down-regulation of E-cadherin in mouse skin carcinoma cells enhances a migratory and invasive phenotype linked to matrix metalloproteinase-9 gelatinase expression[J].Lab Invest,1998,78(9):1131-1142.

        [11]程紅新,楊曉萍,蔣雅紅,等.E-鈣黏蛋白和MMP-9在腎間質(zhì)纖維化大鼠腎組織中的表達(dá)及其意義[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,10(13):961-963.

        [12]Watt FM,F(xiàn)ujiwara H.Cell-extracellular matrix interactions in normal and diseased skin[J].Cold Spring Harb Perspect Biol,2011,3(4):962-969.

        [13]Parsonage G,F(xiàn)iler AD,Haworth O,et al.A stromal address code defined by fibroblasts[J].Trends Immunol,2005,26(3):150-156.

        [14]Sternlicht MD,Werb Z.How matrix metalloproteinases regulate cell behavior[J].Annu Rev Cell Dev Biol,2001,17(1):463-516.

        [15]Nabeshima K,Inoue T,Shimao Y,et al.Matrix metalloproteinases in tumor invasion:role for cell migration[J]. Pathol Int,2002,52(4):255-264.

        [16]Pepper MS.Role of the matrix metalloproteinase and plasminogen activator-plasmin systems in angiogenesis[J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol,2001,21(7):1104-1117.[17]Amalinei C,Caruntu ID,Giusca SE,et al.Matrix metalloproteinases involvement in pathologic conditions[J].Rom J Morphol Embryol,2010,51(2):215-228.

        [18]Luo J,Lubaroff DM,Hendrix MJ.Suppression of prostate cancer invasive potential and matrix metalloproteinase activity by E-cadherin transfection[J].Cancer Res,1999,59(15):3552-3556.

        [19]Munshi HG,Ghosh S,Mukhopadhyay S,et al.Proteinase suppression by E-cadherin-mediated cell-cell attachment in premalignant oral keratinocytes[J].J Biol Chem,2002,277(41):38159-38167.

        [20]Murphy G,Cawston TE,Reynolds JJ.An inhibitor of collagenase from human amniotic fluid.Purification,characterization and action on metalloproteinases[J].Biochem J,1981,195(1):167-170.

        [21]Liu G,Zhang X,Lin H,et al.Effects of E-cadherin on mouse embryo implantation and expression of matrix metalloproteinase-2 and-9[J].Biochem Biophys Res Commun,2006,343(3):832-838.

        [22]Symowicz J,Adley BP,Gleason KJ,et al.Engagement of collagen-binding integrins promotes matrix metalloproteinase-9-dependent E-cadherin ectodomain shedding in ovarian carcinoma cells[J].Cancer Res,2007,67(5):2030-2039.

        [23]Cowden DK,Symowicz J,Ning Y,et al.Matrix metalloproteinase 9 is a mediator of epidermal growth factor-dependent e-cadherin loss in ovarian carcinoma cells[J]. Cancer Res,2008,68(12):4606-4613.

        Expressions of E-cadherin and matrix metalloproteinase-9 and correlation in uterosacral ligament of women with pelvic organ prolapse

        WANG HongHONG Li
        Department of Gynecology and Obstetrics,Renmin Hospital of Wuhan University,Hubei Province,Wuhan430060,China

        R711.2

        A

        1673-7210(2016)08(b)-0098-04

        2016-05-04本文編輯:任念)

        武漢大學(xué)醫(yī)學(xué)部協(xié)同創(chuàng)新項(xiàng)目(523-266078)。

        王紅(1983.9-),女,武漢大學(xué)人民醫(yī)院婦產(chǎn)科專業(yè)2012級(jí)在讀碩士研究生;研究方向:腹腔鏡在婦科腫瘤中的應(yīng)用。

        洪莉(1970-),醫(yī)學(xué)博士,教授;研究方向:盆底功能障礙性疾病和婦科腫瘤。

        猜你喜歡
        胞外基質(zhì)盆底韌帶
        盆底肌生物電刺激在產(chǎn)婦盆底肌松弛護(hù)理中的應(yīng)用
        盆底儀在陰道分娩后尿潴留治療中的應(yīng)用
        三角韌帶損傷合并副舟骨疼痛1例
        脫細(xì)胞外基質(zhì)制備與應(yīng)用的研究現(xiàn)狀
        注意這幾點(diǎn)可避免前交叉韌帶受損
        保健與生活(2021年6期)2021-03-16 08:29:55
        兩種盆底修復(fù)系統(tǒng)在盆底重建手術(shù)治療中的效果比較
        關(guān)于經(jīng)絡(luò)是一種細(xì)胞外基質(zhì)通道的假說
        距跟外側(cè)韌帶替代法治療跟腓韌帶缺失的慢性踝關(guān)節(jié)外側(cè)不穩(wěn)
        盆底三維超聲在盆底器官脫垂女性中的應(yīng)用效果
        水螅細(xì)胞外基質(zhì)及其在發(fā)生和再生中的作用
        亚洲欧美日韩中文字幕一区二区三区| 人妻在线中文字幕视频| 有码视频一区二区三区| 亚洲va中文字幕无码一二三区 | 国产熟女露脸91麻豆| 99热爱久久99热爱九九热爱| 欧美一片二片午夜福利在线快| 少妇高潮无码自拍| 99久久精品一区二区国产| 亚洲av无码av在线播放| 荡女精品导航| 男女在线免费视频网站| 精品露脸熟女区一粉嫩av| 久久香蕉国产线看观看精品yw| 91av手机在线观看| 日本久久一区二区三区高清| 久久九九精品国产av| 乱色熟女综合一区二区三区| 久久av高潮av喷水av无码 | 亚洲国产综合在线亚洲区亚洲av | 亚洲毛片一区二区在线| 国产av永久无码天堂影院| 亚洲另类欧美综合久久图片区| 亚洲无人区乱码中文字幕| 中文字幕亚洲无线码在线一区 | 18禁男女爽爽爽午夜网站免费| 人妻丝袜中文字幕久久| 久久精品国产亚洲av四叶草| 丰满少妇三级全黄| 日本亚洲欧美在线观看| 国产一区二区三区不卡在线播放| 国产欧美日韩一区二区加勒比| 又色又污又爽又黄的网站| www久久久888| 久久精品日本不卡91| 国产精品免费看久久久8| 日本高清不在线一区二区色| 91精品国产九色综合久久香蕉| 亚洲av无码国产精品永久一区| 人人看人人做人人爱精品| 色婷婷亚洲一区二区在线|