楊　麗　陳志芳　杜　蓉新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科，新疆烏魯木齊　830054

新疆烏魯木齊市新市區(qū)婦女生殖道人乳頭瘤狀病毒感染基因分型研究

楊麗陳志芳杜蓉▲
新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科，新疆烏魯木齊830054

目的 探討新疆烏魯木齊市新市區(qū)HPV感染情況、型別分布、與宮頸病變的相關(guān)性。方法 采用機(jī)會(huì)抽樣方法對(duì)新疆烏魯木齊市新市區(qū)1989名女性行高危型人乳頭瘤狀病毒（HPV）分型檢測(cè)、液基細(xì)胞涂片，分析HPV感染情況、型別分布、與宮頸病變的相關(guān)性。結(jié)果 新疆烏魯木齊市新市區(qū)女性HPV陽(yáng)性率為27.95%，高危型HPV感染率為19.36%，以HPV-16、18、58和56型HPV陽(yáng)性者最多。新疆烏魯木齊市新市區(qū)女性HPV檢出率在≤30歲、＞30～40歲、＞40～50歲、＞50歲4個(gè)年齡段差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.01），其中，＞30～40歲年齡組HPV感染率最高，多重感染在各年齡階段差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05）。HSIL/宮頸癌患者HPV-16感染高于ASCUS/LSIL患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論HPV分型檢測(cè)對(duì)宮頸病變的早期診斷與預(yù)后有重要意義。HPV-16、18、58和56相關(guān)的感染與宮頸癌前病變關(guān)系密切，這在新疆地區(qū)疫苗的制備上有特殊及重大意義。

人乳頭瘤病毒；分型；宮頸病變；維吾爾族

［Abstract］Objective To investigate the cervical human papillomavirus（HPV）infection，type distribution and the correlation with cervical lesions in the Xinshi areas of Urumqi City，Xinjiang.Methods Opportunity sampling method was used to investigate a total of 1989 women received liquid-based cytology test and HPV types test in Xinshi area of U-rumqi City，Xinjiang.HPV infection，type distribution and the correlation with cervical lesions were analyzed.Results The positive rate of HPV was 27.95%in women of Xinshi areas in Urumqi City，Xinjiang.The detection rate of highrisk genotypes of HPV was 19.36%，genotypes of HPV-16，18，58，56 were common in high-risk of HPV.The HPV positive rates of the different age groups（aged≤30，＞30-40，＞40-50 and＞50）was statistically significant（P＜0.01）；the HPV infection rate was the highest in＞30-40 years old age group.There was no difference in multiple infections among different age groups（P＞0.05）.The HPV-16 infection rate in patients with HSIL/cervical cancer was significantly higher than that in patients with ASCUS/LSIL（P＜0.05）.Conclusion HPV typing detection has important significance in the early diagnosis and prognosis of cervical lesions.HPV-16，18，58 and 56 related infections are closely related with precancerous lesions of uterine cervix.This has a special and significant meaning in the generation of the vaccine in Xinjiang.

［Key words］Human papillomavirus；Genotype；Cervical lesion；Uygurs

宮頸癌是全球女性病死率第2位的惡性腫瘤，全球每年新發(fā)病例超過50萬(wàn)例，其中超過80%發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家［1］。20世紀(jì)70年代，Zur Hausen［2］首次提出人乳頭瘤狀病毒（HPV）和宮頸癌之間的聯(lián)系。研究已證實(shí)，HPV DNA是99.7%宮頸癌的致病原因［3］，高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件［4］。

隨著HPV與宮頸癌關(guān)系的明確，全球?qū)m頸癌的防治研究出現(xiàn)了重要的兩大突破：一方面，高危型HPV檢測(cè)成為宮頸癌初篩的最佳手段［5］；另一方面，HPV預(yù)防性疫苗的誕生使得宮頸癌的預(yù)防成為可能［6］。新疆部分地區(qū)文化水平落后，生活條件差，早婚早孕多產(chǎn)，故宮頸癌發(fā)病率明顯高于全國(guó)［7］。但目前以較大城市為人群基礎(chǔ)的HPV感染狀況調(diào)查資料仍然較少。本研究采用HPV基因分型檢測(cè)試劑盒，利用導(dǎo)流雜交技術(shù)檢測(cè)新疆烏魯木齊新市區(qū)人群HPV感染情況、型別分布，包括與年齡相關(guān)的HPV型別、與宮頸病變的相關(guān)性分析。為確定適合新疆地區(qū)的宮頸癌篩查方案及積極推進(jìn)HPV疫苗的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。

1　資料與方法

1.1一般資料

2013年1月～2014年1月采用機(jī)會(huì)抽樣方法選擇新疆烏魯木齊市新市區(qū)19～69歲有性生活史的智力正常的女性作為研究對(duì)象，納入研究對(duì)象共1989名，平均年齡為（35.4±7.3）歲。漢族1044名，維吾爾族945名。所有對(duì)象均為智力正常的非月經(jīng)期婦女，檢查前3 d內(nèi)沒有陰道用藥及24 h內(nèi)無(wú)性生活。所有研究對(duì)象均為自愿接受宮頸癌篩查。合格對(duì)象簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①急性生殖道炎癥及妊娠的婦女；②既往宮頸上皮內(nèi)瘤變病史、接受過治療；③近期陰道用藥及用過激素類藥物。

1.2方法

1.2.1取樣步驟與要求先用棉拭子將陰道或子宮頸口過多的分泌物擦拭干凈，再用宮頸刷緊貼子宮頸口稍用力順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5圈，然后放入專用細(xì)胞保存液的試管中。以上標(biāo)本于4℃保存，1周內(nèi)測(cè)定。

1.2.2宮頸液基細(xì)胞學(xué)檢查方法 （TCT）TCT診斷標(biāo)準(zhǔn)采用2001年TBS（the 2001 Bethesda system）分級(jí)系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞學(xué)診斷［8］。

1.2.3HPV分型檢測(cè)使用凱普HPV 21分型檢測(cè)試劑盒，以組織病理學(xué)診斷結(jié)果為最終確診結(jié)果。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有原始數(shù)據(jù)均需反復(fù)核對(duì)，錄入后復(fù)查。所有數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1新疆烏魯木齊市新市區(qū)婦女生殖道感染HPV基因型分布情況

1989名婦女 HPV總陽(yáng)性率為 27.95%（556/ 1989），單一感染435例，多重感染121例。高危型HPV感染率為19.36%（385/1989），低危型HPV感染率為2.51%（50/1989），高危型HPV陽(yáng)性人群中以16、18、58和56亞型HPV陽(yáng)性者最多，占高危型HPV陽(yáng)性者總數(shù)的百分比依次為 45.71%（172/385）、17.14%（66/385）、11.69%（45/385）和6.23%（24/385），4種型別占高危型陽(yáng)性人數(shù)的百分比為79.74%。見表1。

表1　新疆烏魯木齊市新市區(qū)婦女宮頸感染HPV基因型分布

2.2新疆烏魯木齊市新市區(qū)婦女不同年齡段HPV亞型感染情況

將1989名婦女按年齡分組，分為≤30歲、＞30～40歲、＞40～50歲、＞50歲4個(gè)年齡段。各年齡段患者HPV、高危型HPV（HR-HPV）感染情況及多重HPV感染情況見表2。各年齡段HPV檢出率分別是21.98%、38.47%、24.27%、12.44%。經(jīng)檢驗(yàn)≤30歲、＞30～40歲、＞40～50歲及＞50歲以上四組的HPV陽(yáng)性率差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=77.57，P＜0.01），＞30～40歲年齡組 HPV感染率明顯高于≤30歲、＞40～50歲及＞50歲組，統(tǒng)計(jì)學(xué)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=30.21，P＜0.01；χ2=34.73，P＜0.01；χ2=48.70，P＜0.01）。而≤30歲、＞40～50歲的患者HPV感染率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.49，P＞0.05），這兩組HPV感染率均高于＞50歲以上人群，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.79，P＜0.05，χ2=12.14，P＜0.05）。＞40～50歲年齡段患者感染HR-HPV的構(gòu)成比最高，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=16.65，P＜0.01）。4個(gè)年齡段患者感染HPV多重感染率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=3.46，P＞0.05）。

表2　新疆烏魯木齊市新市區(qū)婦女各年齡組HPV感染情況［n（%）］

2.3新疆烏魯木齊市新市區(qū)婦女不同程度宮頸病變HPV亞型感染情況

556例HPV陽(yáng)性患者中，宮頸正常/炎癥組313例，ASCUS/LSIL組 217例，HSIL/宮頸癌組 26例。ASCUS/LSIL組高危HPV感染率為49.77%，HSIL/宮頸癌組的高危HPV感染率為100%，兩組比較，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=23.68，P＜0.01）。正?；?qū)m頸炎前3位 HPV基因型依次為 HPV-16、18、58；ASCUS/LSIL前 3位HPV基因型依次為 HPV-16、31、58；HSIL/宮頸癌組前3位HPV基因型依次為HPV-16、18、58。HSIL/宮頸癌組的 HPV-16感染率高于ASCUS/LSIL組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=5.00，P＜0.05）。其他各型的檢出率與宮頸病變嚴(yán)重程度均不相關(guān)（P＞0.05）。ASCUS/LSIL組多重HPV感染率為30.87%，HSIL/宮頸癌組的多重 HPV感染率為3.84%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=0.557，P＞0.05）。見表3。

表3　新疆烏魯木齊市新市區(qū)婦女不同程度宮頸病變HPV亞型感染情況［n（%）］

3　討論

宮頸癌是可以預(yù)防及治愈的癌癥，宮頸癌前病變的早期篩查及早期干預(yù)是有效降低宮頸癌發(fā)病率的重要措施［9］。1943年P(guān)apanicoaou提出的宮頸巴氏涂片五級(jí)分類法不足之處是假陰性率及誤診率過高［10］。1988年50位病理學(xué)家在美國(guó)馬里蘭州Bethesda城召開會(huì)議提出采用描述性診斷報(bào)告，1991年修改，2001年再次討論并推出2001 TBS診斷法。目前我國(guó)廣泛采用薄層液基細(xì)胞涂片進(jìn)行宮頸癌的篩查［11］。

2005年，HPV檢測(cè)被推薦作為子宮頸癌篩查手段［12］。研究HPV區(qū)域流行情況、感染特點(diǎn)及其與子宮頸病變的關(guān)系，對(duì)于HPV臨床數(shù)據(jù)長(zhǎng)期監(jiān)控、疫苗研發(fā)及子宮頸癌防治相關(guān)政策制訂有重大意義。

3.1烏魯木齊市新市區(qū)女性HPV感染率及亞型分布特征

HPV感染因地理位置及種族的不同，型別感染有明顯的差異［13］。本次調(diào)查結(jié)果顯示，新疆城市新市區(qū)HPV感染率為27.95%。周艷秋等［14］研究報(bào)道篩查人群中HPV感染率為14%～28%。新疆是我國(guó)宮頸癌高發(fā)地區(qū)，可能與新疆女性人群HPV感染逐年升高有關(guān)。HPV的感染可能受多因素的影響，除了種族因素，地域因素、經(jīng)濟(jì)、社會(huì)、收入等因素也可能產(chǎn)生重要的作用。

HPV感染亞型通常呈現(xiàn)地域性差異，比如中國(guó)人群感染率較高的HPV-52和HPV-58，在歐洲、美國(guó)和非洲國(guó)家則屬于低感染亞型［15-16］。在我國(guó)HPV-16、18占據(jù)了所有亞型的69.9%［17-18］。本次研究發(fā)現(xiàn)HPV-16及HPV-18仍然是新疆烏魯木齊市女性感染的常見類型，與上述文獻(xiàn)結(jié)論一致。但同時(shí)發(fā)現(xiàn)HPV-58及56亞型陽(yáng)性率較高，可能與新疆獨(dú)特的生活背景及地域存在一定的關(guān)系。僅僅針對(duì)HPV-16及18的疫苗能否預(yù)防新疆大部分人群的感染，仍待考察，對(duì)于HPV-58及56的感染仍然不能忽視，這在新疆疫苗的制備上仍然有特殊及重大的意義。

3.2新疆烏魯木齊市女性HPV感染的年齡特征

HPV感染在年齡的分布上有一定的規(guī)律及差異。有研究發(fā)現(xiàn)，通常在青春期有較大比例的感染，在中年時(shí)期出現(xiàn)高峰，不同的地區(qū)隨年齡的變化感染率不同［19］。本研究結(jié)果中，不同年齡段的HPV陽(yáng)性率差異顯著，＞30～50歲年齡組HPV感染率明顯高于其余各年齡組，各組的多重感染率相比無(wú)顯著區(qū)別?？赡苡捎谠撃挲g段婦女處于性生活活躍期，且此階段的女性容易出現(xiàn)再婚及多個(gè)性伴侶等情況，極易導(dǎo)致HPV感染率上升。新疆烏魯木齊市女性HPV感染的年齡出現(xiàn)的單峰分布具體原因，還需擴(kuò)大研究人群進(jìn)一步進(jìn)行論證。

3.3HPV與新疆烏魯木齊市新市區(qū)女性宮頸病變的關(guān)系

本研究結(jié)果顯示，HSIL/宮頸癌組高危HPV感染率較ASCUS/LSIL組高。高危HPV基因亞型感染與宮頸病變的關(guān)系即隨著宮頸病變級(jí)別的升高，高危型HPV亞型感染陽(yáng)性率增加；在烏魯木齊市新市區(qū)女性宮頸病變中常見的高危HPV基因亞型依次是HPV-16、18、58。目前臨床上對(duì)于多個(gè)基因型的HPV同時(shí)感染可使宮頸病變程度增加仍存在著較大爭(zhēng)議。HSIL/宮頸癌組患者兩種以上HPV亞型感染率低于其他兩組，多重感染率隨著宮頸病變的級(jí)別增高并未出現(xiàn)上升趨勢(shì)，此結(jié)果與Munoz等［20］的研究結(jié)果相同，與Smith等［19］的研究結(jié)果不同。這與不同地域及不同種族的多重感染率不同有關(guān)，所以HPV多重感染促進(jìn)宮頸癌的發(fā)展及病變進(jìn)展的機(jī)制可能較為復(fù)雜，尚需多地區(qū)、大樣本的調(diào)查才能得出一定的結(jié)論。

綜上所述，新疆烏魯木齊市女性HPV的感染率較高，HPV常見亞型依次為HPV-16、18、58、56亞型；新市區(qū)＞30～40歲的女性較易感染HPV，多重感染在各年齡階段無(wú)差異；隨著宮頸病變程度升高，高危型HPV陽(yáng)性率增加。建議在新疆女性中密切隨訪及監(jiān)測(cè)HPV，尤其是中青年女性HPV-16、18、58、56亞型出現(xiàn)陽(yáng)性［21］，應(yīng)該縮短篩查時(shí)間，同時(shí)充分意識(shí)危險(xiǎn)因素對(duì)宮頸癌的協(xié)同作用。本文HPV亞型的研究為新疆制備針對(duì)維吾爾族女性的疫苗提供了科學(xué)證據(jù)。

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Study on genotyping of genital tract HPV infection in women from Xinshi areas of Urumqi City，Xinjiang

YANG LiCHEN ZhifangDU Rong▲
Department of Gynaecology，the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University，Xinjiang Uygur Autonomous Region，Urumqi830054，China

R737.33

A

1674-4721（2016）08（b）-0012-04

2016-05-13本文編輯：程銘）

新疆維吾爾自治區(qū)自然科學(xué)基金項(xiàng)目（2014211C055）。