·論著·

2005—2014年CHINET志賀菌耐藥性監(jiān)測

許云敏1， 杜 艷1， 單 斌1， 王傳清2， 薛建昌2， 張 泓3， 王 春3， 徐英春4， 張小江4，孫自鏞5， 簡 翠5， 汪 復6， 朱德妹6， 楊 青7， 倪語星8， 孫景勇8， 胡志東9， 李 金9，卓 超10， 蘇丹虹10， 張朝霞11， 季 萍11， 俞云松12， 林 潔12， 魏蓮花13， 吳 玲13， 徐元宏14，沈繼錄14， 胡云建15， 艾效曼15， 褚云卓16， 謝 軼17， 康 梅17， 韓艷秋18， 郭素芳18， 賈 蓓19，黃文祥19

目的 了解2005年1月—2014年12月中國不同地區(qū)19所醫(yī)院臨床分離志賀菌屬的構成、分布及耐藥性。方法 收集19所教學醫(yī)院臨床分離的志賀菌屬，按照統(tǒng)一方案，采用紙片擴散法或自動化儀器法進行藥敏試驗，按美國臨床和實驗室標準化協(xié)會（CLSI ）2014年版標準判讀結果，采用WHONET5.6進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。結果 共收集到各醫(yī)院臨床分離志賀菌屬1 110株。其中宋內志賀菌檢出率48.4%，福氏志賀菌檢出率46.2%。10年間，志賀菌屬所測試藥物中對氨芐西林耐藥率最高（83.3%～97.6%），其次是甲氧芐啶-磺胺甲唑（55.6%～92.3%%）、頭孢曲松（0～58.3%）、氨芐西林-舒巴坦（18.7%～64.4%）、阿莫西林-克拉維酸（6.8%～100%）、氯霉素（0～60%）、環(huán)丙沙星（6.8%～46.2%）。成人分離株對環(huán)丙沙星、頭孢曲松的的耐藥率分別為41.1%和25.5%，而兒童分離株對兩者耐藥率分別為17.2%和54.0%。結論 10年間，臨床分離的志賀菌屬以宋內志賀菌和福氏志賀菌為主，上述分離株對喹諾酮類抗菌藥物耐藥率相對較低，對氨芐西林和甲氧芐啶-磺胺甲唑耐藥率高；成人分離株對環(huán)丙沙星的耐藥率高于兒童，對頭孢曲松、氯霉素和阿莫西林-克拉維酸的耐藥率低于兒童分離株。藥敏試驗結果提示臨床上常規(guī)使用氨芐西林和甲氧芐啶-磺胺甲唑治療志賀菌感染可能會導致治療失敗。

志賀菌；抗菌藥物；細菌耐藥性監(jiān)測

細菌性痢疾（菌?。┦怯芍举R菌引起的一種急性腸道傳染病，在世界范圍內引起的發(fā)病率和死亡率居感染性腹瀉之首位［1］。每年造成100萬人死亡，尤其是發(fā)展中國家5歲以下兒童［2］。據(jù)不完全統(tǒng)計，我國每年約有50萬例發(fā)生志賀菌感染［3］?，F(xiàn)將2005—2014年CHINET志賀菌的耐藥性監(jiān)測結果報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 菌株收集 收集2005年1月1日—2014年12月31日中國不同地區(qū)19所CHINET成員醫(yī)院臨床分離志賀菌，剔除同一患者相同部位分離的重復菌株，各醫(yī)院按統(tǒng)一方案進行細菌對抗菌藥物的敏感性試驗。

1.1.2 培養(yǎng)基和抗菌藥物 藥敏試驗用MH瓊脂培養(yǎng)基，抗菌藥物紙片為英國OXOID公司或美國BBL公司。

1.2 方法

1.2.1 藥敏試驗 按美國臨床和實驗室標準化協(xié)會（CLSI）推薦的紙片擴散法或自動化儀器法進行藥敏試驗［4］。質控菌株為大腸埃希菌ATCC25922和銅綠假單胞菌ATCC 27853。

1.2.2 統(tǒng)計方法 采用WHONET 5.6和SPSS 17軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 細菌

2.1.1 菌株來源 2005年1月—2014年12月，共收集1 110株志賀菌屬細菌，分離自糞便標本1 064株，占95.9%，其他46株，占4.1%。住院收集427株，占38.5%；門診683株，占61.5%。兒童分離到894株，占80.5%；成人216株，占19.5%。

2.1.2 細菌分布 10年間志賀菌的分離率2005 年 最 低（14/1 110，1.3%），2006年最高（297/ 1 110，26.8%），以后逐漸回落、起伏，總體變化不大。全年均有散發(fā)病例。1 110株志賀菌屬檢出宋內志賀菌537株，占48.4%，福氏志賀菌514株，占46.3%，鮑氏志賀菌27株，占2.4%，其他32株，占2.9%。537株宋內志賀菌，2006年分離最多（175/537，32.6%），2005年最少（2/537，0.4%）。福氏志賀菌2006年分離最多（118/514，23.0%），2005年及2014年分離最少（11/514，2.1%）。

2.2 志賀菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率分析

分離的1 110株志賀菌屬細菌對氨芐西林耐藥率最高（83.3%～97.6%），其次是甲氧芐啶-磺胺甲唑（55.6%～92.3%）、頭孢曲松（0～58.3%）、氨芐西林-舒巴坦（18.7%～64.4%）、阿莫西林-克拉維酸（4.9%～100%）、氯霉素（0～60%）、環(huán)丙沙星（6.8%～46.2%）。分離自門診患者的菌株除對甲氧芐啶-磺胺甲唑的耐藥率高于住院患者外（P＜0.05），對其余抗菌藥物的耐藥率均低于住院患者，且除氨芐西林外，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。成人分離株對環(huán)丙沙星、頭孢曲松、氯霉素和阿莫西林-克拉維酸的耐藥率分別為41.1%、25.5%、18.2%和0，而兒童分別為17.2%、54.0%、35.0%和17.8%。差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。其余抗菌藥物兩者差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1～3。

表1 志賀菌屬對抗菌藥物耐藥率和敏感率Table 1 Susceptibility of Shigella isolates to antimicrobial agents by year from 2005 to 2014 （%）

表2 門診與住院患者志賀菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 2 Susceptibility of the Shigella isolates from outpatients versus those from inpatients to antimicrobial agents

表3 成人與兒童分離的志賀菌對抗菌藥物耐藥率和敏感率Table 3 Susceptibility of the Shigella isolates from children versus those from adults to antimicrobial agents

相比較，福氏志賀菌對抗菌藥物的耐藥率高于宋內志賀菌，見表4。在門診患者和住院患者分離菌株對抗菌藥物耐藥率比較中，住院患者福氏志賀菌對頭孢曲松、氨芐西林-舒巴坦和環(huán)丙沙星的耐藥率分別為69.2%、68.0%和42.6%，門診患者為46.4%、57.0%和29.2%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其余抗菌藥物兩者差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表5；住院患者宋內志賀菌對阿莫西林-克拉維酸和頭孢曲松的耐藥率為23.1%和50.0%，門診患者為6.1%和35.2%，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其余抗菌藥物兩者差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表6。

表4 福氏志賀菌和宋內志賀菌對抗菌藥物耐藥率和敏感率Table 4 Susceptibility of Shigella flexneri and Shigella sonnei to antimicrobial agents

表5 門診與住院患者福氏志賀菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 5 Susceptibility of the Shigella flexneri isolates from outpatients versus those from inpatients to antimicrobial agents

表6 門診與住院患者宋內志賀菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 6 Susceptibility of the Shigella sonnei strains from outpatients and those from inpatients to antimicrobial agents

3 討論

志賀菌屬細菌是引起人類菌痢的主要腸道病原菌之一，一年四季均可發(fā)病，以夏秋季節(jié)發(fā)病率最高。偶可因食用了被污染的水和食物而引起暴發(fā)流行?；純撼？梢鹬卸拘跃?，若搶救不及時，往往造成死亡。志賀菌屬分為痢疾、福氏、鮑氏和宋內志賀菌4個血清群，其流行病學差異明顯：發(fā)達國家以宋內志賀菌流行為主，而發(fā)展中國家，尤其亞洲國家志賀菌的感染以福氏志賀菌為主［5］，我國20世紀90年代菌痢86%由福氏志賀菌引起，其中主要是福氏2a型［6］。4種志賀菌中，痢疾志賀菌引起的菌痢較為嚴重，其他志賀菌感染則相對較輕，具有自限性，很少致死。

本次研究顯示我國志賀菌感染以宋內志賀菌為主，福氏志賀菌次之，與國外報道相同［7］。國內不同地區(qū)的菌種報道有所差異：如杭州蕭山以宋內志賀菌為主［6］，浙江嘉善以福氏志賀菌為主［8］，云南昆明以福氏志賀菌為主［9］。10年間以福氏志賀菌為主的感染時間較長，但分離總數(shù)以宋內志賀菌為主，2種菌群排名每2～3年交替一次?？赡芘c不同地區(qū)經濟發(fā)展及生活習慣的差異有關。

本文中志賀菌對所檢測的抗菌藥物氨芐西林耐藥率最高（83.8%～97.6%），其次是甲氧芐啶-磺胺甲唑、頭孢曲松、氨芐西林-舒巴坦、氯霉素；對環(huán)丙沙星敏感，耐藥率低，耐藥率與國內同類研究相似［8-10］。氨芐西林、甲氧芐啶-磺胺甲唑和四環(huán)素是志賀菌的常規(guī)治療藥物［7］，但本研究結果顯示氨芐西林和甲氧芐啶-磺胺甲唑已不適用于志賀菌的經驗治療。該菌對環(huán)丙沙星耐藥率較其他抗菌藥物低。喹諾酮類抗菌藥物可作為治療志賀菌感染的首選藥物。門診患者分離株除對甲氧芐啶-磺胺甲唑耐藥率高于住院患者外（P＜0.05），對其余抗菌藥物的平均耐藥率均低于住院患者（P＜0.05）。成人對環(huán)丙沙星的耐藥率高于兒童（P＜0.05），對頭孢曲松、氯霉素和阿莫西林-克拉維酸的耐藥率低于兒童（P＜0.05）。有研究顯示，體外藥物敏感試驗對頭孢曲松敏感的，實際臨床治療中也有療效［11］。本組細菌對頭孢曲松耐藥率為（0～58.3%），尤其在兒童患者中耐藥率高（54.0%），加之喹諾酮類抗菌藥物在兒童中的使用限制，將增大兒童感染者的治療難度。

及時合理的抗菌藥物治療，不僅能縮短發(fā)熱和腹瀉的時間，并且能夠減少并發(fā)癥的出現(xiàn)［6］。不規(guī)范、不合理的抗菌藥物治療可能導致多重耐藥菌株的出現(xiàn)，為預防多重耐藥志賀菌出現(xiàn)，評估抗菌藥物選擇合理性及優(yōu)化治療過程十分重要［12］。同時，今后需要更進一步加強志賀菌流行的血清型別分布和變化趨勢研究，為我國痢疾防控策略的制定提供參考，并為解釋志賀菌不同血清群的區(qū)域流行差異提供新的思路。

［1］劉桂榮，曲梅，張新，等.北京地區(qū)宋內志賀菌分子流行病學特征分析［J］.中國熱帶醫(yī)學，2013，13（8）：950-963.

［2］LI S， SUN Q， WE X， et al. Genetic characterization ofShigella flexneri Isolates in Guizhou Province，China［J］. Plos One，2015，10（1）：e0116708.

［3］蘇文莉，李紹娟，楊超杰，等. 北京、上海、沈陽三市福氏志賀菌4c生物學特性及多位點序列分型分析的研究［J］. 軍事醫(yī)學，2014，38（4）：290-293.

［4］Clinical and Laboratory Standards Institute．Performance standardsfor antimicrobial susceptibility testing［S］：Twentyfourth formational supplement，2014，M100-S24．

［5］AZMIL IJ， Khajanchi1 BK， AKTER F， et al， Fluoroquinolone resistance mechanisms of Shigella flexneri isolated in Bangladesh［J］. PLoS One， 2014，9（7）：1-7.

［6］戚雅萍，傅丹青，陳棋炯，等.蕭山區(qū)宋內氏志賀菌脈沖場凝膠電泳分型分析中國衛(wèi)生檢驗雜志，2014， 24（6）：829-830.

［7］US. Department of Health and Human Services，CDC. FoodNet Surveillance Report for 2008（Final Report）［R］. Atlanta，Georgia：CDC，F(xiàn)oodborne Diseases Active Surveillance Network（FoodNet），2010.

［8］杜曉云.小兒志賀菌感染細菌學分析［J］.中國高等醫(yī)學教育，2014，（4）：128-129

［9］蔣鴻超，黃海林，蘇敏.小兒細菌性痢疾147例志賀菌菌型及耐藥性分析［J］.兒童醫(yī)學雜志，2013，19（2）：43-46.

［10］厲小玉，岳美娜，王云橋，等. 2008-2012年杭州市兒童感染性腹瀉的志賀菌和沙門菌變遷及耐藥性分析［J］. 疾病監(jiān)測，2014，29（5）：364-368.

［11］JAIN SK， GUPTA A， GLANZ B， et al .Antimicrobial-resistant Shigella sonnei： limited antimicrobial treatment options for children andchallenges of interpreting in vitro azithromycin susceptibility［J］. Pediatr Infect Dis J， 2005，24（6）：494-499.

［12］GUPTA S， MISHRA B， MURALIDHARAN S， et al. Ceftriaxone resistant Shigella flexneri， an emerging problem［J］. Indian J Med Sci， 2010，64（12）：556-59.

Antibiotic resistance profile of Shigella isolates in hospitals across China：results of CHINET Antimicrobial Resistance Surveillance Program 2005-2014

XU Yunmin， DU Yan， SHAN Bin， WANG Chuanqing，XUE Jianchang， ZHANG Hong， WANG Chun ， XU Yingchun， ZHANG Xiaojiang， SUN Ziyong， JIAN Cui， WANG FU， ZHU Demei， YANG Qing， NI Yuxing，SUN Jingyong， HU Zhidong， LI Jin， ZHUO Chao， SU Danhong， ZHANG Zhaoxia， JI Ping， YU Yunsong， LIN Jie， WEI Lianhua， WU Ling， XU Yuanhong， SHEN Jilu， HU Yunjian， AI Xiaoman， CHU Yunzhuo， XIE Yi， KANG Mei， HAN Yanqiu， GUO Sufang， JIA Bei，HUANG Wenxiang. （First Affiliated Hospital of Kunming Medical University， Kunming 650032， China）

Objective To investigate distribution and resistance profile of clinical Shigella isolates in hospitals across China from January 2005 through December 2014. Methods The Shigella isolates were collected for antimicrobial susceptibility testing by means of a unified protocol using Kirby-Bauer method and MIC determination. The results were analyzed according to CLSI 2014 breakpoints. Results A total of 1 110 Shigella strains were isolated from nineteen hospitals. The proportion of Shigella sonnei and Shigella flexneri were 48.4% and 46.2%， respectively. Over the 10-year period， the highest resistance rate was to ampicillin （83.3%-97.6%）， followed by trimethoprim-sulfamethoxazole （55.6%-92.3%）， ceftriaxone （0-58.3%）， ampicillin-sulbactam （18.7%-64.4%）， amoxicillin-clavulanic acid （6.8%-100%）， chloramphenicol （0-60%）， and ciprofloxacin （6.8%-46.2%）. Overall， 41.1% and 25.5% of the strains isolated from adults were resistant to ciprofloxacin and ceftriaxone， respectively. However， only 17.2% and 54.0% of the strains from children were resistant to ciprofloxacin and ceftriaxone， respectively. Conclusions In the 10-year period，most Shigella isolates were Shigella sonnei and Shigella flexneri in the hospitals across China. The Shigella isolates showed relatively low resistance rate to quinolones， but higher resistance rate to ampicillin and trimethoprim-sulfamethoxazole. The strains from adults had higher resistance rate to ciprofloxacin than the strains from children， but lower resistance rate to ceftriaxone， chloramphenical and amoxicillin-clavulanic acid than the strains from children. The treatment with ampicillin and trimethoprim-sulfamethoxazole may result in failure in Shigella infections.

Shigella； antimicrobial agent； bacterial resistance surveillance

R378.22

A

1009-7708（2016）02-0160-05

10.16718/j.1009-7708.2016.02.008

2015-03-26

2015-08-25

1. 昆明醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院，昆明 650032；

2. 復旦大學附屬兒科醫(yī)院；

3. 上海交通大學附屬兒童醫(yī)院；

4. 北京協(xié)和醫(yī)院；

5. 華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院；

6. 復旦大學附屬華山醫(yī)院；

7. 浙江大學附屬第一醫(yī)院；

8. 上海交通大學醫(yī)學院附屬瑞金醫(yī)院；

9. 天津醫(yī)科大學總醫(yī)院；

10. 廣州醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院；

11. 新疆醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院；

12. 浙江大學醫(yī)學院附屬邵逸夫醫(yī)院；

13. 甘肅省人民醫(yī)院；

14. 安徽醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院；

15. 北京醫(yī)院；

16. 中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院；

17. 四川大學華西醫(yī)院；

18. 內蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院；

19. 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院。

許云敏（1979—），女，碩士，主管檢驗師，主要從事臨床微生物學檢驗和細菌耐藥性監(jiān)測。

單斌，E-mail：shanbin6@139.com。