陳　帥，王慧竹，薛健飛，鐘方麗#，李玲麗

（1.吉林化工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院，吉林吉林　132022；2.沈陽(yáng)藥科大學(xué)藥學(xué)院，沈陽(yáng)　110016）

梔子金花丸HPLC指紋圖譜及其與體外抗氧化活性的相關(guān)性分析

陳帥1，2＊，王慧竹1，薛健飛1，鐘方麗1#，李玲麗1

（1.吉林化工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院，吉林吉林132022；2.沈陽(yáng)藥科大學(xué)藥學(xué)院，沈陽(yáng)110016）

目的：建立梔子金花丸指紋圖譜，并分析與其體外抗氧化活性之間的相關(guān)性，為梔子金花丸的質(zhì)量控制提供依據(jù)。方法：采用高效液相色譜法（HPLC）。色譜柱為Sinochrom ODS-BP C18（200 mm×4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相為0.2%磷酸溶液（含3 mmol/L庚烷磺酸鈉溶液）-乙腈（梯度洗脫），檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm，流速為0.8 ml/min，柱溫為38℃，進(jìn)樣量為10μl。采用國(guó)家藥典委員會(huì)“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)軟件”（2012.130723版）對(duì)12批梔子金花丸液相圖譜進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)，以黃芩苷為參照峰，對(duì)各指紋共有峰進(jìn)行歸屬。采用1，1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除試驗(yàn)考察12批梔子金花丸的體外抗氧化活性，并對(duì)其指紋圖譜與體外抗氧化活性之間的譜-效關(guān)系進(jìn)行研究。結(jié)果：建立了梔子金花丸指紋圖譜，12批次梔子金花丸指紋圖譜與對(duì)照?qǐng)D譜相似度均在0.9以上（S1、S2、S3、S12除外）；標(biāo)記了30個(gè)共有峰，并全部歸屬到各成方藥材中；體外抗氧化試驗(yàn)結(jié)果顯示，不同批次梔子金花丸抗氧化能力存在差異；譜-效關(guān)系結(jié)果顯示，13個(gè)共有峰與抗氧化活性呈正相關(guān)，17個(gè)共有峰呈負(fù)相關(guān)，在已知成分中發(fā)揮抗氧化活性的成分主要集中在金銀花、黃芩和大黃3味藥材中。結(jié)論：所建立的指紋圖譜及其與抗氧化活性的譜-效關(guān)系可為該藥的質(zhì)量控制提供參考。

梔子金花丸；指紋圖譜；高效液相色譜法；抗氧化

梔子金花丸始載于《宣明論方》，是由梔子、黃芩、黃連等8味藥組成的中藥制劑，具有涼血解毒、清熱瀉火等功效，常用于治療口舌生瘡、牙齦腫痛、咽喉腫痛等癥［1］。目前梔子金花丸標(biāo)準(zhǔn)中除去對(duì)各味藥材的定性鑒別外，在含量測(cè)定項(xiàng)下僅以梔子苷的含量作為梔子金花丸的定量測(cè)定指標(biāo)，對(duì)其他成方藥材的質(zhì)量未作要求。梔子金花丸中主要含有梔子苷［2］、黃芩苷［3］、番瀉苷A、番瀉苷B［4］、芒果苷［5］、小檗堿、大黃素、大黃酚［6］等活性成分。目前關(guān)于梔子金花丸的質(zhì)量控制研究主要集中在多指標(biāo)定量和薄層色譜鑒別方面［7-8］，但這些研究均無法體現(xiàn)梔子金花丸發(fā)揮藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)及化學(xué)成分的整體性，不能使其質(zhì)量得到全面的控制。

指紋圖譜技術(shù)因其在評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量時(shí)具有整體性和模糊性的特點(diǎn)，被廣泛用于中藥材及其中藥制劑的質(zhì)量控制；而且，隨著檢測(cè)要求的不斷提高，通過建立指紋圖譜可以比較全面地掌握藥品信息，將其納入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)已成現(xiàn)行趨勢(shì)［9］。中藥藥效的發(fā)揮有賴于多個(gè)成分的協(xié)同作用，指紋圖譜雖能標(biāo)示中藥中的多種成分，但這些化學(xué)成分的標(biāo)示與中藥藥效的發(fā)揮可能不完全一致，因此僅僅研究中藥的化學(xué)指紋圖譜遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。只有將中藥的化學(xué)指紋圖譜與中藥的藥效緊密結(jié)合起來，建立具有實(shí)際意義的譜-效關(guān)系，才能為中藥質(zhì)量控制提供更科學(xué)的依據(jù)［10］。為了更好地控制梔子金花丸的質(zhì)量，保證其藥效，筆者選擇其抗氧化活性為藥效指標(biāo)，對(duì)3個(gè)企業(yè)生產(chǎn)的12批梔子金花丸的指紋圖譜與抗氧化活性關(guān)系進(jìn)行初步研究，為科學(xué)評(píng)價(jià)其質(zhì)量提供依據(jù)。

1　材料

1.1儀器

1260型高效液相色譜儀（包括四元低壓梯度泵、在線真空脫氣機(jī)、DAD檢測(cè)器、Chemstation色譜工作站）購(gòu)自美國(guó)Agilent公司；AUY220型分析天平（日本島津精密儀器分析公司）。

1.2藥品、對(duì)照品與試劑

12批梔子金花丸（規(guī)格均為6 g/袋）具體來源見表1。梔子苷對(duì)照品、黃芩苷對(duì)照品、漢黃芩苷對(duì)照品、黃芩素對(duì)照品、漢黃芩素對(duì)照品、大黃素對(duì)照品（成都曼斯特生物科技有限公司，批號(hào)：MUST-15022411、MUST-13112909、MUST-14052312、MUST-14062204、MUST-13053012、MUST-20140107，純度：均≥98%）；1，1-二苯基-2-三硝基苯肼［DPPH，梯希愛（上海）化成工業(yè)發(fā)展有限公司，批號(hào)：2175918，純度：＞97%］；乙腈（色譜純，天津市永大化學(xué)試劑有限公司，批號(hào)：20130617）；維生素C（VC）原料藥（天津市北辰方正化學(xué)試劑廠，批號(hào)：20150402，純度：99%）；其余試劑均為分析純。

表1　不同批次梔子金花丸樣品編號(hào)及生產(chǎn)廠家Tab 1　The numbers of different batches of ZZJHW and their manufacturers

1.3藥材

梔子（批號(hào)：20150421）、黃芩（批號(hào)：20141016）、大黃（批號(hào)：20150608）、黃連（批號(hào)：20150805）、黃柏（批號(hào)：20141101）、金銀花（批號(hào)：20150616）、知母（批號(hào)：20141015）、天花粉（批號(hào)：20140903）均由吉林市吉林大藥房提供，經(jīng)吉林化工學(xué)院鐘方麗教授鑒定均符合2015年版《中國(guó)藥典》（一部）標(biāo)準(zhǔn)。

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件

色譜柱為Sinochrom ODS-BP C18（200 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相A為0.2%磷酸溶液（含3 mmol/L庚烷磺酸鈉溶液），流動(dòng)相B為乙腈（梯度洗脫程序：0～8 min，5%～12%B；8～20 min，12%～20%B；20～29 min，20%～23%B；29～35 min，23%～29%B；35～40 min，29%～32%B；40～46 min，32%～32%B；46～50 min，32%～49%B；50～58 min，49%～ 50%B；58～62 min，50%～60%B；62～65 min，60%～87%B；65～70 min，87%～90%B；70～75 min，90%B）；流速為0.8 ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm；柱溫為38℃；進(jìn)樣量為10 μl。

2.2溶液的制備

2.2.1混合對(duì)照品溶液精密稱取梔子苷對(duì)照品、黃芩苷對(duì)照品、漢黃芩苷對(duì)照品、黃芩素對(duì)照品、漢黃芩素對(duì)照品、大黃素對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解，制成梔子苷、黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、大黃素質(zhì)量濃度分別為328、270、74.8、214、95.8、41.4 μg/ml的混合對(duì)照品溶液。

2.2.2供試品溶液取梔子金花丸粉末約6.0 g，精密稱定，置圓底燒瓶中，加入75%甲醇60 ml，回流提取2次，第1次1 h、第2次40 min；濾渣再用75%乙醇提取1次，時(shí)間為30 min；合并3次濾液，減壓回收溶劑，置于100 ml量瓶中，流動(dòng)相稀釋并定容，搖勻，4℃條件避光保存。進(jìn)樣前用0.45 μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3缺味陰性對(duì)照溶液按2015版《中國(guó)藥典》（一部）［1］中規(guī)定的梔子金花丸處方比例，分別配制不含梔子、黃芩、大黃、黃連、黃柏、金銀花、知母、天花粉以及不含黃連和黃柏2味藥材的缺味陰性樣品處方，并按梔子金花丸成方工藝制備，分別按“2.2.2”項(xiàng)下方法處理，即得各缺味陰性對(duì)照溶液。

2.2.4單味藥材溶液按2015年版《中國(guó)藥典》（一部）［1］中規(guī)定的梔子金花丸處方比例，以6.0 g為處方總量，計(jì)算各單味藥材的質(zhì)量，分別按“2.2.2”項(xiàng)下方法處理，即得各單味藥材溶液。

2.3方法學(xué)考察

2.3.1專屬性實(shí)驗(yàn)精密吸取混合對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 μl，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，記錄色譜圖。通過比較保留時(shí)間和在線紫外光譜，確定供試品溶液的色譜圖中6、15、19、22、25、28號(hào)峰分別為梔子苷、黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、大黃素峰。其中因15號(hào)（黃芩苷）色譜峰比較穩(wěn)定且信號(hào)強(qiáng)，故選其為參照峰。在此系統(tǒng)中15號(hào)峰理論板數(shù)不低于60 000，其余各峰與相鄰峰的分離度均大于1.5，表明該條件下方法專屬性良好。

2.3.2精密度試驗(yàn)取同一份供試品溶液（按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備的S4供試品溶液），按“2.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，以黃芩苷峰為參照。結(jié)果，各共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD均小于0.5%，相對(duì)峰面積RSD均小于2.3%，表明儀器精密度良好。

2.3.3穩(wěn)定性試驗(yàn)取S4供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件分別在0、2、6、8、12、24 h進(jìn)樣，以黃芩苷峰為參照。結(jié)果各共有峰相對(duì)保留時(shí)間RSD均小于1.8%，相對(duì)峰面積RSD均小于2.1%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.3.4重復(fù)性試驗(yàn)取S4供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以黃芩苷峰為參照。結(jié)果，各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間RSD均小于1.2%，相對(duì)峰面積RSD均小于3.0%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.4指紋圖譜的研究

2.4.1指紋圖譜的建立取12批梔子金花丸樣品適量，按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，并按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，記錄75 min內(nèi)的色譜圖，以色譜峰出現(xiàn)率100%記錄共有峰。結(jié)果顯示，30個(gè)色譜峰為各樣品所共有，共有峰的總面積占總峰面積的85%以上，以混合對(duì)照品（梔子苷、黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、大黃素）進(jìn)行峰定位，色譜圖見圖1。

2.4.2指紋圖譜分析將經(jīng)過積分處理的樣品色譜圖“AIA文件”導(dǎo)入國(guó)家藥典委員會(huì)“中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)”軟件（2012.130723版），以樣品S4的圖譜為參照?qǐng)D譜，設(shè)定時(shí)間窗為0.3 min，采用中位數(shù)法，按Mark峰進(jìn)行自動(dòng)匹配，生成對(duì)照指紋圖譜。指紋圖譜詳見圖2，相似度評(píng)價(jià)結(jié)果見表2。

圖1　梔子金花丸S4樣品和混合對(duì)照品的HPLC圖譜Fig 1　HPLC chromatograms of ZZJHW sample of S4 and mixed control

圖212　批梔子金花丸的HPLC指紋圖譜及對(duì)照?qǐng)D譜Fig 2　HPLC fingerprint chromatogram and reference fingerprint of 12batches of ZZJHW

表2　12批梔子金花丸相似度結(jié)果Tab 2　The similarity results of 12batches of ZZJHW

由表2可見，12批樣品中除S1、S2、S3、S12外，其余批次樣品與對(duì)照指紋圖譜間相似度均在0.9以上。這表明梔子金花丸成方制劑不同批次間相似度較好、質(zhì)量比較穩(wěn)定。

2.5色譜峰的歸屬

取“2.2.3”項(xiàng)下得到的各缺味陰性溶液及單味藥材溶液10 μl，按“2.1”項(xiàng)下條件進(jìn)樣，記錄色譜圖，見圖3。對(duì)比各吸收峰的保留時(shí)間及在線紫外光譜圖，可以得到梔子金花丸圖譜中的25個(gè)特征峰在8味藥材中的歸屬，其中1號(hào)色譜峰為金銀花提供，2、3、4、16號(hào)色譜峰為梔子提供，7、18號(hào)色譜峰為知母提供，9、11、14、15、17、18、19、20、21、22、24、25、26、27號(hào)色譜峰為黃芩提供，13號(hào)色譜峰為黃連提供，10、12、23、28、29、30號(hào)色譜峰為大黃提供，5號(hào)色譜峰為梔子和知母共同提供。因此在本試驗(yàn)確定的色譜條件下得到的梔子金花丸指紋圖譜能夠基本反映制劑中的主要化學(xué)成分。

圖3　各單味藥材及缺味陰性溶液色譜圖Fig 3　Chromatogram of single herb and negative solution

2.6體外抗氧化試驗(yàn)[11-12]

2.6.1DPPH溶液的制備取DPPH 10.0 mg，精密稱定，置于25 ml棕色量瓶中，加無水乙醇適量，超聲使其完全溶解，定容，作為貯備液。精密吸取上述貯備液6.0 ml，置于50 ml棕色量瓶中，無水乙醇定容，搖勻，即得。

2.6.2DPPH自由基清除率的測(cè)定精密量取按“2.2.2”項(xiàng)下方法制備的12批供試品溶液各2.0 ml，置于25 ml量瓶中，無水乙醇定容，搖勻。精密吸取上述溶液0.6、0.8、1.0、1.5、2.0 ml，分別置于10 ml棕色量瓶中，再分別加入4.0 ml DDPH溶液，無水乙醇定容，搖勻，避光放置40 min。在517 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度Ai（供試品溶液+DPPH溶液），同法測(cè)得Aj（供試品溶液+無水乙醇溶液）和Ac（無水乙醇溶液+DPPH溶液）。以相同質(zhì)量濃度的VC作為陽(yáng)性對(duì)照。計(jì)算DPPH自由基清除率：清除率（%）=［1-（Ai-Aj）］/Ac×100%。以藥物質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、清除率為縱坐標(biāo)進(jìn)行對(duì)數(shù)回歸，根據(jù)回歸方程計(jì)算半數(shù)抑制濃度（IC50）。不同批次梔子金花丸及VC抗氧化能力結(jié)果見圖4。

圖4　不同批次梔子金花丸及VC抗氧化能力比較Fig 4　Comparison of antioxidant ability between different batches of ZZJHW and VC

由圖4可見，不同批次梔子金花丸的體外抗氧化能力有明顯差別，其中樣品S7的IC50最大，表明其抗氧化能力最弱；樣品S8的IC50最小，表明其抗氧化能力最強(qiáng)，但弱于VC。

2.7指紋圖譜與抗氧化活性譜-效關(guān)系分析

為了研究梔子金花丸指紋圖譜中各共有峰對(duì)抗氧化活性的貢獻(xiàn)大小，以12批次梔子金花丸各共有峰的峰面積作為X矩陣，以各批藥材的IC50作為Y變量，利用SIMCA 13.5進(jìn)行偏相關(guān)分析，并建立IC50預(yù)測(cè)值與實(shí)際值之間的回歸模型，結(jié)果見圖5。

圖5　各共有峰與IC50之間的相關(guān)性Fig 5　The correlation between common peak and antioxidant activity IC50

由圖5可知，指紋圖譜中30個(gè)共有峰對(duì)藥物體外抗氧化活性貢獻(xiàn)程度存在差異，其中有13個(gè)共有峰與抗氧化活性呈正相關(guān)，1、25、28號(hào)峰與IC50正相關(guān)性比較大。但由于試驗(yàn)條件原因，未能對(duì)1號(hào)峰定性，即在已知成分中與IC50正相關(guān)關(guān)系比較大的為漢黃芩素和大黃素。在17個(gè)共有峰與抗氧化活性呈負(fù)相關(guān)的色譜峰中，3、16號(hào)峰與IC50相關(guān)性比較大，但由于試驗(yàn)條件原因，未能對(duì)3、16號(hào)色譜峰定性。

通過建立IC50預(yù)測(cè)值與實(shí)際值之間的關(guān)系，驗(yàn)證偏相關(guān)分析所建模型的合理性，見圖6。

圖6　抗氧化活性IC50預(yù)測(cè)值與實(shí)際值之間的關(guān)系Fig 6　The relationship between the predicted value and the actual value of antioxidant activity IC50

從圖6可以看出，12批梔子金花丸均勻地分布于回歸線兩側(cè)，表明12批梔子金花丸抗氧化活性的實(shí)際值與預(yù)測(cè)值間呈良好的線性關(guān)系（r=0.981 5），同時(shí)驗(yàn)證了譜-效關(guān)系分析過程中所建立的偏相關(guān)模型的合理性。

3　討論

中藥制劑多為復(fù)方制劑，化學(xué)組成比較復(fù)雜，為盡可能在同一張色譜圖上顯示更多的信息，本試驗(yàn)在供試品溶液制備過程中對(duì)多種提取方法進(jìn)行了考察和優(yōu)化，并分別對(duì)提取溶劑（甲醇、乙醇）、提取方式（超聲、加熱回流）及提取時(shí)間進(jìn)行了考察。最終選用75%甲醇回流提取2次，第1次1 h、第2次40 min；濾渣再用75%乙醇回流提取1次，時(shí)間為30 min。結(jié)果表明，經(jīng)此方法制備的供試品溶液不僅色譜峰強(qiáng)度較好而且數(shù)量較多，并且試驗(yàn)過程操作簡(jiǎn)便。

在流動(dòng)相的選擇上，筆者分別考察了用0.1%磷酸溶液-甲醇、0.2%磷酸溶液-乙腈、0.2%磷酸溶液（含3 mmol/L庚烷磺酸鈉溶液）-乙腈等作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫。結(jié)果顯示，當(dāng)采用0.2%磷酸溶液（含3 mmol/L庚烷磺酸鈉溶液）-乙腈洗脫時(shí)，得到的色譜峰峰形和分離度較好、基線較平，故在本試驗(yàn)中以其為流動(dòng)相。在檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇上，筆者分別在220、230、240、254、278、300、326 nm 7個(gè)波長(zhǎng)下分別記錄并比較HPLC圖，結(jié)果在254 nm波長(zhǎng)下檢測(cè)到的色譜峰數(shù)量較多、強(qiáng)度適中，并且基線平穩(wěn)，所以選定254 nm作為梔子金花丸指紋圖譜測(cè)定的檢測(cè)波長(zhǎng)。除此之外，筆者還分別對(duì)柱溫、流速、進(jìn)樣量進(jìn)行了優(yōu)化，通過比較色譜圖，最終確定柱溫為38℃、流速為0.8 ml/min、進(jìn)樣量為10 μl。在缺味陰性溶液的制備過程中，由于黃連和黃柏均含有小檗堿，為了對(duì)其進(jìn)行定性分析，除了制備正常的缺味陰性溶液外，還制備了同時(shí)缺黃連和黃柏的陰性溶液。

通過對(duì)不同批次的梔子金花丸的色譜圖比較分析，確定了30個(gè)共有峰，并以黃芩苷峰作為參照計(jì)算了各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積，并進(jìn)行了方法學(xué)研究，利用國(guó)家藥典委員會(huì)的指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)軟件對(duì)12批樣品色譜圖進(jìn)行了相似度評(píng)價(jià)。通過研究指紋圖譜與各批次藥品抗氧化活性之間的譜-效關(guān)系，首次聯(lián)合評(píng)價(jià)了指紋圖譜共有模式中的30個(gè)共有峰與活性的關(guān)系。結(jié)果顯示，梔子金花丸中抗氧化活性的成分主要集中在金銀花、黃芩和大黃3味藥材中，而梔子、知母中含有的一些化學(xué)成分與梔子金花丸的抗氧化活性呈負(fù)相關(guān)。但本研究未對(duì)指紋圖譜共有模式中與抗氧化活性相關(guān)性較大的化學(xué)成分進(jìn)行定性及定量，缺少對(duì)活性成分與藥效之間的量-效關(guān)系研究，這也將成為筆者今后研究工作的重點(diǎn)。

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（編輯：林靜）

Analysis of the Relationship of HPLC Fingerprint of Zhizi Jinhua Pills with Its in vitro Antioxidant Activity

CHEN Shuai1，2，WANG Huizhu1，XUE Jianfei1，ZHONG Fangli1，LI Lingli1
（1.School of Chemistry and Pharmaceutical Engineering，Jilin Institute of Chemical Technology，Jilin Jilin 132022，China；2.School of Pharmacy，Shenyang Pharmaceutical University，Shenyang 110016，China）

OBJECTIVE：To establish fingerprint of Zhizi jinhua pills（ZZJHW）and analyze the relationship of it with in vitro antioxidant activity，in order to provide the basis for the quality control of them.METHODS：HPLC method was adopted.The separation was performed on a Sinochrom ODS-BP C18（200 mm×4.6 mm，5 μm）column with mobile phase consisted of 0.2%acetic acid（containing 3 mmol/L sodium heptanesulfonate solution）-acetonitrile（gradient elution）at the detection wavelength of 254 nm and flow rate of 0.8 ml/min.The column temperature was controlled at 38℃，and injection volume was 10 μl.The“Chromatographic Fingerprint Similarity Evaluation System for TCM”（2012.130723 edition）issued by Chinese Pharmacopoeia Commission was used to evaluate the similarity of the 12 batches of ZZJHW using baicalin as reference peak so as to attribute the common peak of fingerprint.DPPH free radical scavenging assay was used to investigate the in vitro antioxidant activity of 12 batches of ZZJHW，and the relationship between its fingerprint and antioxidant activity was studied.RESULTS：The fingerprint of 12 batches of ZZJHW was established and the similarity between the fingerprint of ZZJHW with their reference fingerprint were all above 0.9 （except S1，S2，S3，S12）.30 common peaks were marked，all of which were assigned to the herbs.Antioxidant experiment result showed the differences in the antioxidant capacity among different batches of ZZJHW；spectrum effect relationship showed that 13 common peaks were positively related with oxidation activity and 17 common peaks negatively related with it；among known components，oxidation activity components were mainly from Lonicera japonica，Scutellaria baicalensis and Rheum palmatum.CONCLUSIONS：The spectrum effect relationship of established fingerprint with its antioxidant activity can provide reference for the quality control of ZZJHW.

Zhizi jinhua pills；Fingerprint；HPLC；Antioxidation

R927.1

A

1001-0408（2016）22-3077-04

10.6039/j.issn.1001-0408.2016.22.16

＊講師，碩士。研究方向：中藥制劑分析。E-mail：chenshuai2011 @163.com

教授，博士。研究方向：天然產(chǎn)物化學(xué)及應(yīng)用。電話：0432-62183130。E-mail：fanglizhong@sina.com

2016-01-10

2016-04-14）