雷玉明

河西學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，甘肅 張掖 734000；甘肅河西走廊特色資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 張掖 734000

鄭天翔

(河西學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，甘肅 張掖 734000)

王玉萍

(甘肅省金塔縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，甘肅 金塔 735300)

楊芳蘭

(甘肅省武威市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，甘肅 武威 733000)

柴文玉

(甘肅省酒泉市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，甘肅 酒泉 735000)

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4種殺菌劑對(duì)玉米大斑凸臍孺孢病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定

雷玉明

河西學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，甘肅 張掖 734000；甘肅河西走廊特色資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，甘肅 張掖 734000

鄭天翔

(河西學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，甘肅 張掖 734000)

王玉萍

(甘肅省金塔縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，甘肅 金塔 735300)

楊芳蘭

(甘肅省武威市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，甘肅 武威 733000)

柴文玉

(甘肅省酒泉市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，甘肅 酒泉 735000)

采用室內(nèi)生長(zhǎng)速率法測(cè)定了4種殺菌劑對(duì)玉米大斑凸臍孺孢病菌(Exserohilumturcicum)的毒力。篩選出的2種有明顯抑菌作用的藥劑70%甲基硫菌靈WP和70%噁霉福美雙WP，在5.0μg/mL和10.0μg/mL時(shí)抑菌菌率均達(dá)100%，在1.25μg/mL和2.5μg/mL時(shí)抑菌菌率分別達(dá)90.48%～99.05%和90.95%～99.29%，抑菌效果顯著，其EC50分別為0.5322μg/mL和0.4892μg/mL。

殺菌劑;毒力測(cè)定;EC50;玉米;凸臍孺孢病菌

玉米大斑病是當(dāng)今世界上玉米主要葉部病害之一，又稱玉米條斑病、玉米煤紋病。該病廣泛發(fā)生于美洲、歐洲、亞洲和大洋洲的冷涼玉米種植區(qū),有時(shí)還會(huì)引起其他病害如玉米根腐、莖腐等[1]。據(jù)報(bào)道，在嚴(yán)重流行的年份和地區(qū)，導(dǎo)致玉米減產(chǎn)50%，甚至更多[2,3],美國在1951年、1952年、1961年大發(fā)生，曾造成每公頃減產(chǎn)4350多kg[4]。為此，國外玉米產(chǎn)區(qū)對(duì)此病已進(jìn)行了廣泛而深入的研究。我國自20世紀(jì)70年代以后，隨著感病雜交種的推廣及栽培制度的改變，該病的危害逐年加重，1974年東北三省發(fā)病面積近200萬hm2，減產(chǎn)達(dá)20%；20世紀(jì)80年代，由于感病雜交種被淘汰，此病得以控制[5]。然而，隨著玉米制種產(chǎn)業(yè)的迅速興起，一些感病玉米自交系、雜交種的親本材料在制種區(qū)的出現(xiàn)，玉米大斑病1號(hào)生理小種已躍居為優(yōu)勢(shì)種，加之近10多年制種玉米大面積連作，種子包衣品種單一，生長(zhǎng)期葉面防治難度大，藥劑單一，造成這一病害在制種玉米田發(fā)生呈逐年提高趨勢(shì)，成為嚴(yán)重威脅制種玉米的主要問題。為此，本研究對(duì)玉米大斑病菌藥劑篩選試驗(yàn)，以期為玉米種子包衣、田間藥劑噴霧提供科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1供試材料

1.1.1供試品種與病原菌

供試品種種子由北京德農(nóng)種業(yè)張掖分公司、張掖市金秋種子公司、敦煌種業(yè)股份有限公司玉門市種子公司提供。供試的玉米大斑凸臍孺孢病病菌[Exserohilumturcicum(Pass.) Leonard et Suggs]由河西學(xué)院農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院植物病理實(shí)驗(yàn)室從玉米種子中分離得到。

1.1.2供試藥劑

70%甲硫福美雙可濕性粉劑(thiophanate-methyl·thiram)、70%噁霉福美雙可濕性粉劑(hymexazol·thiram)、70%甲基硫菌靈(thiophanate-methyl)和70%噁霉靈可濕性粉劑(hymexazol)均為青島瀚生生物科技股份有限公司產(chǎn)品。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1培養(yǎng)基的制備

采用PDA培養(yǎng)基,參照植病研究方法[6]制作,分別量取49mL培養(yǎng)基分裝在100mL三角燒瓶中滅菌后備用。

1.2.2藥劑抑制試驗(yàn)

將供試4種原藥由高濃度向低濃度稀釋，先用無菌水配制10.00μg/mL的母液，依次向低濃度稀釋獲得5.00、2.50、1.67、1.25、1.00μg/mL的系列梯度藥液備用。將配成的6個(gè)濃度梯度藥劑，分別定量加入到滅菌后冷卻至50℃左右的PDA培養(yǎng)基內(nèi)，充分混合均勻后倒入直徑為90mm的培養(yǎng)皿，配制成含有一定濃度的帶毒PDA平板，以不添加藥劑的PDA平板為對(duì)照(CK)，重復(fù)3次[6～8]。

將活化好的供試菌用滅菌的打孔器(Ф6mm)制取菌碟，在無菌條件下移至系列濃度的平板中央，每皿接菌餅1個(gè)，3次重復(fù)，設(shè)無藥培養(yǎng)基平板接菌為對(duì)照(CK)，將其放入28℃培養(yǎng)條件下培養(yǎng)4d。采用十字交叉測(cè)法菌落直徑，按下式計(jì)算菌落生長(zhǎng)抑制率:

菌落生長(zhǎng)抑制率= [(對(duì)照菌落直徑-處理菌落直徑) / (對(duì)照菌落直徑-6)]×100%

1.2.3藥劑毒力測(cè)定

將1.2.2中選出的藥劑，按1.2.2中的測(cè)定方法，以目前生產(chǎn)上普遍使用的70%甲基硫菌靈為對(duì)照。根據(jù)濃度梯度下菌落生長(zhǎng)抑制率的值，將菌落生長(zhǎng)抑制率換算成抑制機(jī)率值y，藥劑濃度對(duì)數(shù)x，機(jī)率值按回歸法求得不同殺菌劑對(duì)應(yīng)菌株的劑量的回歸方程y=a+bx，并由回歸方程計(jì)算各藥劑對(duì)相應(yīng)抑制中濃度EC50值及相關(guān)系數(shù)r值[8]。

2　結(jié)果與分析

2.1藥劑對(duì)玉米大斑凸臍孺孢病菌抑菌作用

由表1可見，供試的4種藥劑抑菌作用隨濃度的升高，抑菌率也在上升，但受試4種殺菌劑在不同濃度條件下對(duì)凸臍孺孢病菌的相對(duì)抑菌率存在明顯的差異。70%甲硫福美雙和70%噁霉福美雙在濃度為5.00μg/mL和10.00μg/mL時(shí)抑菌菌率均達(dá)100%，效果較顯著，在濃度1.25μg/mL和2.50μg/mL時(shí)抑菌菌率分別達(dá)90.48%～99.05%和90.95%～99.29%，抑菌效果明顯，且二者抑菌作用較為接近。濃度在1.0μg/mL時(shí)抑菌菌率分別為83.33%和85.74%，抑菌作用開始減弱；70%甲基硫菌靈和70%噁霉靈濃度在10.00μg/mL時(shí)抑菌菌率分別為78.57%和80.95%，抑菌作用與70%甲硫福美雙和70%噁霉福美雙在濃度在1.00μg/mL時(shí)抑菌作用相當(dāng)，濃度在5.00μg/mL和1.00μg/mL時(shí)抑菌率分別為67.86%～9.52%和69.05～11.90%，抑菌作用明顯下降，效果較差。以上結(jié)果表明，在同一濃度條件下，70%甲硫福美雙和70%噁霉福美雙對(duì)大斑凸臍孺孢病菌抑菌效果明顯高于70%甲基硫菌靈和70%噁霉靈，效果顯著，可作為生產(chǎn)上推廣使用的有效藥劑。

表1　不同濃度殺菌劑對(duì)玉米大斑凸臍孺孢病菌抑菌活性測(cè)定結(jié)果

2.2有效藥劑的毒力測(cè)定

從表2結(jié)果可見，70%甲硫福美雙和70%噁霉福美雙對(duì)病菌具有較強(qiáng)抑菌效果，Ec50分別0.5322μg/mL和0.4892μg/mL，而甲基硫菌靈抑菌效果較差，EC50可達(dá)14.8868μg/mL。結(jié)果表明甲硫福美雙和噁霉福美雙毒力強(qiáng)于甲基硫菌靈。

從毒力回歸方程看，70%甲硫福美雙和70%噁霉福美雙回歸方程斜率值分別為5.9949和6.0820，均高于甲基硫菌靈加歸方程斜率值3.2204，表明玉米大斑凸臍孺孢病菌對(duì)甲硫福美雙和噁霉福美雙敏感度越高。

從相關(guān)系數(shù)R看，70%甲硫福美雙和70%噁霉福美雙、70%甲基硫菌靈對(duì)玉米大斑凸臍孺孢病菌機(jī)率值與其濃度的相關(guān)系數(shù)較高，分別達(dá)0.9841、0.9966和0.9823，表明抑制百分率的機(jī)率值與其濃度間有顯著的線性關(guān)系，可以用該回歸方程在供試濃度范圍內(nèi)進(jìn)行預(yù)測(cè)。綜上所述，認(rèn)為70%甲硫福美雙和70%噁霉福美雙是防治玉米大斑病的有效藥劑。

表2　甲硫福美雙、噁霉福美雙對(duì)玉米大斑凸臍孺孢病菌毒力測(cè)定

3　討論

我國從20世紀(jì)70年代起對(duì)玉米大斑病菌生理分化進(jìn)行了監(jiān)測(cè)，目前大斑病菌生理分化已呈現(xiàn)復(fù)雜化，現(xiàn)已命名5個(gè)生理小種，分別為0、1、23、23N和2N[9]，不同地區(qū)間報(bào)道出現(xiàn)的優(yōu)勢(shì)生理小種不同，是造成不同地區(qū)玉米大斑病呈加重趨勢(shì)的重要原因。目前甘肅河西地區(qū)制種玉米大斑病成逐年加重趨勢(shì)，而制種玉米親本材料大多數(shù)都來源于東北、華北、中原地區(qū)，使甘肅河西制種玉米區(qū)大斑病菌生理小種復(fù)雜化，引起病菌對(duì)藥劑產(chǎn)生抗藥性，造成70%甲基硫菌靈等藥劑用藥量增大，防治效果降低。藥劑室毒力測(cè)定表明，復(fù)配藥劑用藥量低，抑菌效果明顯。因此，制種玉米區(qū)可采用70%甲硫福美雙、70%噁霉福美雙2種藥劑進(jìn)行葉面噴霧防治。建議最小稀釋倍數(shù)為100～150倍液。

[1]高衛(wèi)東,戴法超.玉米大斑病研究的新進(jìn)展[J].植物病理學(xué)報(bào),1993,23(3):193～195.

[2]Perkins J M,Pederson W L.Disease development and yield losses associated with northern leaf blight on corn[J].Plant disease,1987,71:940～943.

[3]Mllstrup A J,Miles S A.The effects of some lea blights of corn on grain yield[J].Phytopathology,1957,47:331～336.

[4]Carson M L,Van Dyke C G.Effect of Light andTemperature on Expression of Partial Resistance of Maize toExserohilumturcicum[J].Plant disease,1994,78:519～522.

[5]劉紀(jì)麟.玉米育種學(xué)[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1994.

[6]方中達(dá).植病研究方法[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1998：151～154.

[7]陳年春.農(nóng)藥生物測(cè)定技術(shù)[M].北京:北京農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社，1990：95～102.

[8]孫廣宇，宗兆鋒.植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002：142～144.

[9]紀(jì)偉波，何海軍，趙松濤，等.黑龍江玉米大斑病菌生理分化研究[J].玉米科學(xué)，2010，18(1)：128～130，134.

2015-12-28

甘肅省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新項(xiàng)目(GNCX-2013-10)；甘肅省科技重大專項(xiàng)(0801NKDA016)。

雷玉明(1964-)，男，碩士，教授，主要從事植物病理研究，zyymlei@163.com。

S482.2

A

1673-1409(2016)21-0008-04

[引著格式]雷玉明,鄭天翔，王玉萍，等.4種殺菌劑對(duì)玉米大斑凸臍孺孢病菌的室內(nèi)毒力測(cè)定[J].長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自科版) ，2016，13(21)：8～11.