杜錦輝鄭皓云（.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 00050；.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)，內(nèi)蒙古 呼和浩特 00050）

·實(shí)驗(yàn)報(bào)告·

蒙藥如達(dá)潰瘍散的急性毒性實(shí)驗(yàn)研究*

杜錦輝1鄭皓云2
（1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050；2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050）

目的 觀察蒙藥如達(dá)潰瘍散的急性毒性反應(yīng)。方法 將12只昆明種小鼠隨機(jī)分為兩組，如達(dá)潰瘍散組一次性灌胃最大質(zhì)量濃度0.39 g/mL、最大體積0.8 mL；對照組予等體積蒸餾水。結(jié)果未測出如達(dá)潰瘍散的半數(shù)致死量，改為最大耐受量試驗(yàn)。如達(dá)潰瘍散高、中、低劑量組分別予0.39、0.26、0.13 g生藥mL，最大給藥體積0.8 mL；對照組予等體積蒸餾水，每天3次，間隔6 h，連續(xù)14 d，詳細(xì)觀察各組小鼠毒性反應(yīng)和死亡情況。結(jié)果 個(gè)別小鼠給藥后的前2 d出現(xiàn)大便呈黑褐色的現(xiàn)象，其他情況均正常，無死亡，解剖后觀察小鼠主要內(nèi)臟器官未見異常，各給藥組與空白對照組的小鼠臟器指數(shù)、體質(zhì)量均無顯著差異（P＞0.05），小鼠最大給藥量是46.8 g/kg，相當(dāng)于臨床人用劑量的468倍。結(jié)論 如達(dá)潰瘍散急性毒性低，是一安全性較好的藥物，臨床使用量安全系數(shù)較高，按規(guī)定劑量口服安全可靠。

如達(dá)潰瘍散 蒙藥 急性毒性 小鼠

【Abstract】Objective：To observe the acute toxicity of Mongolian medicine radix ulcer powder reaction.Methods：Preliminary experiment：12 Kunming mice were randomly divided into two groups，Radix ulcer powder group with maximum concentration of drug 0.39 g/mL，the maximum volume of 0.8 mL，disposable to mice fed，the control group with an equal volume of distilled water.No median lethal dose of Radix ulcer powder was measured （LD50），changing into maximum tolerance test.High，medium and low dose groups were given 0.39，0.26，0.13 g/ mL，the maximum volume of 0.8 mL；the control group received an equal volume of distilled water three times a day，interval 6 hours with a continuous observation of 14d on detailed mice toxicity and death.Results：2 days after administration，there were some individual mice with dark brown stool phenomena，while other cases were normal，without a death.No abnormalities were found in the major organs of the mice after dissection.In the comparison of the control group and other groups，there was no significant difference in the mouse organ index and body mass（P＞0.05）.The maximum dose in mice is 46.8 g/kg，equivalent to 468 times the clinical human dose.Conclusion：Acute toxicity of Radix ulcer powder is low，and safety，the clinical use of high safety coefficient，the prescribed dose is safe to take.

【Key words】Radix ulcer powder；Mongolian medicine；Acute toxicity；Mice

蒙醫(yī)學(xué)［1-3］認(rèn)為胃潰瘍的發(fā)生主要由于人體內(nèi)的三根與七素的相對平衡遭到了破壞，巴達(dá)干偏盛，并同希拉、赫依相搏，引起胃火衰敗，進(jìn)而使功能紊亂，是一種胃腑的聚合性慢性疾病，可歸蒙醫(yī)學(xué)“胃包如病”范疇。名老蒙醫(yī)都格爾扎布擅長消化系統(tǒng)疾病的診治，認(rèn)為治療胃包如病應(yīng)以祛巴達(dá)干為首，同時(shí)需護(hù)肝。都老所創(chuàng)立的如達(dá)潰瘍散有溫中和胃、降逆止嘔、解痙的功效，是臨床治療消化性潰瘍的良方。近幾年來，課題研究小組［4-10］在早期實(shí)驗(yàn)研究中，采用幽門結(jié)扎法、乙酸燒灼法及吲哚美辛注射法3種方法復(fù)制實(shí)驗(yàn)性胃潰瘍大鼠模型，進(jìn)行復(fù)方藥物的藥理研究，證明該藥物抗?jié)冏饔脵C(jī)制與增強(qiáng)胃黏膜保護(hù)因子、減少攻擊因子有關(guān)。通過實(shí)驗(yàn)客觀科學(xué)的評價(jià)藥物的毒性作用意義重大［11-12］，筆者參照《中藥、天然藥物急性毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》［11］和 《藥物單次給藥毒性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》［12］，對如達(dá)潰瘍散的急性毒性進(jìn)行研究、評價(jià)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物 如達(dá)潰瘍散方中木香、石榴、黑冰片、紅花、寒水石、瞿麥、土木香、梔子、砂仁、蓽拔按比例組成配備，原材料均購買于國醫(yī)堂藥店。實(shí)驗(yàn)前將所有藥物凈值、粉碎、研磨、過150目篩，并用蒸餾水調(diào)配成可供小鼠灌胃的最大濃度混懸液0.39 g生藥/mL。

1.2 實(shí)驗(yàn)動物 昆明種小鼠，雌雄各半，清潔級，體質(zhì)量18～22 g，6～8周齡，由北京市海淀區(qū)興隆實(shí)驗(yàn)動物養(yǎng)殖場提供，許可證號：SCXK（軍）2012-0004。動物購買后于內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)性飼養(yǎng)觀察3 d后開始試驗(yàn)。雌、雄分籠飼養(yǎng)，標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，自由進(jìn)食水。室溫（25±1）℃，相對濕度45%～60%。

1.3 預(yù)實(shí)驗(yàn) 12只小鼠隨機(jī)分為兩組，每組各6只，雌雄各半，灌胃前禁食12 h，自由飲水。給藥組灌胃如達(dá)潰瘍散方，質(zhì)量濃度為0.39 g/mL，可承受的最大容積0.8 mL，一次性給藥，對照組一次性給予0.8 mL蒸餾水。給藥后常規(guī)飼養(yǎng)，并連續(xù)觀察7 d。結(jié)果7 d內(nèi)小鼠均未出現(xiàn)死亡及其他異常情況，采用脊髓脫臼法處死全部小鼠，尸檢發(fā)現(xiàn)給藥組小鼠的心、肝、脾、肺、腎等臟器的顏色、質(zhì)地、體積等與對照組相比，未見明顯異常，未作鏡檢。預(yù)實(shí)驗(yàn)未測出如達(dá)潰瘍散的半數(shù)致死量，提示藥物安全，需測小鼠對如達(dá)潰瘍散的最大耐受量。

1.4 最大耐受量試驗(yàn) 40只小鼠稱體質(zhì)量后排序，查隨機(jī)數(shù)字表分為如達(dá)潰瘍散高、中、低劑量組、空白對照組，每組10只，分籠飼養(yǎng)，給藥前12 h，小鼠禁食不禁水。如達(dá)潰瘍散高、中、低劑量組灌胃質(zhì)量濃度分別為0.39、0.26、0.13 g生藥/mL，小鼠灌胃最大體積0.4 mL/10 g；空白對照組灌胃等體積蒸餾水。每日3次，間隔6 h，灌胃間隔期間禁食、不禁水，1 d足量給藥結(jié)束后連續(xù)觀察14 d。

1.5 觀察指標(biāo) 觀察給藥后小鼠的精神狀態(tài)、外觀、行為、活動、進(jìn)食量、飲水，分泌物，呼吸表現(xiàn)，排尿，糞便性狀等，記錄小鼠死亡及中毒情況，連續(xù)觀察14 d，試驗(yàn)1～7 d、14 d稱體質(zhì)量。解剖所有小鼠主要的器官組織，作大體觀察，如發(fā)現(xiàn)異常則對組織器官進(jìn)行病理學(xué)檢查，準(zhǔn)確稱量小鼠的心、肝、脾、肺、腎等器官，計(jì)算臟器系數(shù)。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 一般情況觀察 當(dāng)天給藥后，個(gè)別小鼠開始活動減少，如達(dá)潰瘍散各藥劑量組小鼠，飲水和進(jìn)食量與空白對照組比較偏低，第2天觀察發(fā)現(xiàn)小鼠恢復(fù)自主活動、正常飲水、進(jìn)食。如達(dá)潰瘍散各劑量組給藥后前2 d內(nèi)有部分小鼠出現(xiàn)不同程度的大便質(zhì)潤、呈黑褐色，給藥結(jié)束后，排便異常小鼠的大便隨著時(shí)間的推移逐漸恢復(fù)。除此之外，均正常。14 d觀察期內(nèi)，潰瘍散各劑量組小鼠與空白對照組比較，無顯著差異。

2.2 各組小鼠體質(zhì)量的比較 見表1。給藥后至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，潰瘍散各劑量組及空白對照組小鼠的體質(zhì)量均呈增長趨勢，組間比較無顯著差異 （P＞0.05）。

表1 各組小鼠體質(zhì)量比較（g，±s）

表1 各組小鼠體質(zhì)量比較（g，±s）

6 d 29.74±1.92 29.55±1.78 29.54±1.18藥物高劑量組 19.80±1.68 23.38±1.17 26.23±1.18 27.13±1.73 27.24±1.14 29.32±1.56組別 1 d空白對照組 19.98±0.94藥物低劑量組 9.87±1.10藥物中劑量組 19.85±0.49 2 d 3 d 4 d 23.64±1.10 26.97±1.53 27.31±1.23 23.62±1.19 26.64±0.96 27.26±1.55 23.56±0.72 26.59±1.04 27.16±1.12 5 d 27.64±1.88 27.33±1.48 27.28±1.79 7 d 14 d 30.36±1.51 35.95±1.55 30.32±0.85 35.83±1.69 30.22±1.28 35.74±1.91 30.13±1.50 35.43±1.75

2.3 各組小鼠臟器系數(shù)的影響 見表2。各給藥組同空白對照組比較，小鼠臟器系數(shù)并未出現(xiàn)明顯差異（P＞0.05）。

表2 各組小鼠臟器指數(shù)比較（%，±s）

表2 各組小鼠臟器指數(shù)比較（%，±s）

組別 n 心臟 肝臟 脾臟 肺臟 腎臟空白對照組 10藥物低劑量 10藥物中劑量組 10 0.57±0.05 5.16±0.47 0.39±0.10 0.63±0.05 5.06±0.55 0.44±0.13 0.61±0.07 5.27±0.35 0.39±0.19 0.67±0.09 0.78±0.05 0.68±0.08 0.82±0.06 0.64±0.11 0.80±0.15藥物高劑量組 100.59±0.06 5.39±0.51 0.42±0.120.63±0.10 0.81±0.11

3 討 論

本次急性毒性實(shí)驗(yàn)中，全部小鼠精神狀態(tài)良好、外觀、行為、攝食、飲水、小便、分泌物等均正常，未出現(xiàn)毒性反應(yīng)。小鼠給藥后的前2 d出現(xiàn)大便呈黑褐色的現(xiàn)象，考慮與服用藥物有關(guān)，與毒理因素?zé)o關(guān)，隨著時(shí)間的推移小鼠大便的顏色、質(zhì)地等逐漸恢復(fù)正常。各給藥組小鼠體質(zhì)量正常增加，不同劑量給藥組分別與對照組比較，均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。處死小鼠后，肉眼觀察小鼠主要器官（心臟、肝、脾、肺、腎、胃、睪丸、腎上腺等）均無明顯異常改變。各給藥組與對照組進(jìn)行比較，臟器指數(shù)無顯著差異（P＞0.05），提示如達(dá)潰瘍散對小鼠的上述器官無明顯損傷。本次實(shí)驗(yàn)如達(dá)潰瘍散的半數(shù)致死量未測出，其1 d最大給藥量為46.8 g/kg，相當(dāng)于成人（按60 kg計(jì)算）臨床推薦日用量0.1 g生藥/kg的468倍。查閱相關(guān)文獻(xiàn)［13-15］，按體質(zhì)量計(jì)算1 d內(nèi)小鼠最大給藥量為臨床用劑量100倍以上則較安全。如達(dá)潰瘍散對小鼠沒有明顯的急性毒性，如達(dá)潰瘍散的人日用劑量是安全的，該藥物的臨床使用量安全系數(shù)較好。

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T he Acute Toxicity Experiment of Radix Ulcer Powder in Mongolian Medicine

DU Jinhui，ZHENG HaoYun.Affiliated Hospital of Inner Mongolia Medical University，Inner Mongolia，Hohhot 010050，China.

·臨床觀察·

R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

1004-745X（2016）07-1548-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2016.08.028

內(nèi)蒙古教育廳基金項(xiàng)目（NJZY14136）

2016-03-26）