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        杜仲茶對兔血清SOD和G-SH的活性影響

        2016-09-20 08:59:00鄭海燕
        中國畜牧獸醫(yī)文摘 2016年8期
        關(guān)鍵詞:歧化酶超氧化物杜仲

        鄭海燕

        (開州區(qū)臨江畜牧站,重慶 405400)

        杜仲茶對兔血清SOD和G-SH的活性影響

        鄭海燕

        (開州區(qū)臨江畜牧站,重慶 405400)

        通過對兔血清中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱苷肽(G-SH)活性的影響研究。表明杜仲茶能顯著提高兔血清中超氧化物歧化酶(SOD)和增加谷胱苷肽(G-SH)活性,對防止衰老、預(yù)防和緩解老年疾病癥狀具有作用。這對杜仲資源的開發(fā)有著重要意義!

        杜仲茶 SOD G-SH 活性

        1 前言

        杜仲(Eucommia ulmoides Oliv)屬杜仲科,落葉喬木,是我國傳統(tǒng)的一種名貴中藥材。據(jù)《本草綱目》中記載,杜仲具有補(bǔ)肝、腎、強(qiáng)筋骨、降壓、抗衰老、益腰膝之功效。長期以來,人們都以杜仲皮入藥,但是皮的來源數(shù)量有限,剝皮也對杜仲樹造成傷害,對樹木生長影響極大,由于皮不能持續(xù)性,產(chǎn)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床需要。近年來的研究表明,杜仲葉與皮具有相似的化學(xué)成分和藥理作用,葉可代皮供藥用,這為杜仲開發(fā)拓展了新的渠道。為充分利用榮昌豐富的杜仲資源,我們開發(fā)了杜仲葉和茶葉炒制的杜仲茶,本課題以兔為試驗動物,研究杜仲茶對血清超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱苷肽(G-SH)活性的影響,從而證明其消除自由基、防衰老的保健作用,這對杜仲葉開發(fā)和利用[5]具有理論和現(xiàn)實意義。

        2 材料與方法

        2.1 主要藥品

        SOD試劑盒和G-SH試劑盒:購自南京建成生物工程研究所;冰乙酸、無水乙醇、氯化鈉均為分析純。

        2.2 主要儀器

        722型分光光度計(上海分析儀器廠);420恒溫水箱(上海分析儀器廠);離心機(jī)(上海精宏實驗設(shè)備有限公司);5mL一次性注射器、5mL滅菌離心管等均由生化實驗室提供。

        2.3 杜仲茶的制備

        杜仲葉采自榮昌縣直升鎮(zhèn)道觀村5組,茶葉鮮葉由榮昌興榮茶葉有限公司提供。按杜仲葉:茶葉1:9的比例炒制。

        稱取杜仲茶葉50g,分別用1000、500、500ml 85℃的蒸餾水分三次提取,每次30min紗布過濾,合并濾液,冰箱冷藏備用,當(dāng)日用完。

        2.4 試驗動物和分組

        2.4.1 試驗動物

        選成年新西蘭大白兔18只,體重1500~2000g,雌雄各半,由榮昌安富榮華兔場提供。

        2.4.2 分組方法

        18只家兔,采用隨機(jī)分組法分為3組,每組6只。第一組:對照組,自由采食兔顆粒飼料,自由飲水;第二組:自由飲用組,自由采食兔顆粒料,自由飲用杜仲茶提取液。第三組:灌服組,自由采食顆粒料,每天每只兔灌服杜仲提取液50ml。

        2.4.3 兔子采血

        預(yù)飼5d,飲用后每隔5d耳靜脈采血一次,連續(xù)采血5次,自配肝素作抗凝劑,離心分離血清,測定SOD和G-SH的含量。

        2.5 血清中超氧化物歧化酶(SOD)和還原性谷胱甘肽(G-SH)活性測定方法

        2.5.1 血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性測定

        依南京建成生物工程研究所提供SOD試劑盒配制方法見表1。

        表1 SOD試劑盒配制方法

        混勻,室溫放置10min,于波長550nm處,1cm光徑比色環(huán),蒸餾水調(diào)零,比色。

        SOD活力(U/ml)=(對照管吸光度-測定管吸光度)/對照管吸光度 ÷50%×反應(yīng)體系的稀釋倍數(shù)×樣品測試前的稀釋倍數(shù)

        2.5.2 血清谷胱苷肽(G-SH)活性測定方法

        依南京建成生物工程研究所提供G-SH試劑盒配制方法見表2。

        表2 G-SH試劑盒配制方法

        混勻,靜置5min,420nm處,1cm光徑,蒸餾水調(diào)零比色,測各管OD值。

        G-SH含量(gG-SH/L)= 測定管吸光度 /(標(biāo)準(zhǔn)管吸光度-空白管吸光度)×準(zhǔn)管濃度(20μmol/L)×G-SH分子量(307)×稀釋倍數(shù)

        2.6 數(shù)據(jù)處理

        應(yīng)用SPSSⅡ軟件對SOD和G-SH的活性進(jìn)行顯著性t檢驗,比較組間差異性。

        3 試驗結(jié)果

        3.1 杜仲茶對兔SOD活性的影響

        杜仲茶對兔SOD活性的影響,見表3所示,和對照組比較,自由飲用組和灌服組在試驗十天內(nèi)其兔血清SOD活性差異不顯著,但可以看出試驗組是逐步升高,當(dāng)試驗十五日后,自由飲服和灌服組都和對照差異顯著,說明杜仲茶提取液顯著地提高了兔血清SOD活性,20日后SOD活性與組間內(nèi)比較,兔血清SOD活性差異不顯著,說明SOD活性的增加是有一定的限度,在20日升到最高。

        雖然自由飲服組和灌服組其SOD活性沒有多大差異,但是灌服組開初活性的增長要高些,這和我們試驗中我們觀察到兔子在自由飲服開始時,不習(xí)慣茶的苦味,飲的太少有關(guān)。

        3.2 杜仲茶對兔子G-SH活性影響

        杜仲茶對兔G-SH活性的影響,見表4所示,從表4結(jié)果看出,杜仲茶對G-SH的影響,自由飲用組和灌服組都不能顯著地使G-SH的活性增加,自由飲用組和灌服組內(nèi)也變化不明顯。但我們可以從試驗的結(jié)果來看,對G-SH活性的改善是顯而易見的,增加不顯著可能與我們試驗的時間太短有關(guān)。

        表3 杜仲茶對SOD活性的影響

        表4 杜仲茶對G-SH活性的影響

        4 分析與討論

        人休細(xì)胞衰老死亡主要原因,是在于細(xì)胞內(nèi)氧化還原產(chǎn)生超氧陰離子自由基(O2.-)、羥自由基和過氧化氫等,降低了血液及組織中SOD和G-SH活性,提高脂質(zhì)過氧化物水平。也已證明,過氧化損傷也是心臟毒性的主要原因?,F(xiàn)已證明超氧物歧化酶(SOD)是生物內(nèi)重要的氧自由基清除劑,隨著年齡的增加其活性逐步下降,檢查老年人高血壓、冠心病、肺心病、糖尿病、自身免疫性疾病及惡性腫瘤患者的SOD值,均與正常老年值有極顯著差異。G-SH也是體還原體系中重要的組成部分,它和保護(hù)細(xì)胞通透性,防止水分的流失,以及重金屬離子的解毒都起著重要作用。

        通過試驗看出,杜仲茶對于促進(jìn)血液中SOD的活性十分明顯,G-SH的活性也有增加的現(xiàn)象,表明了長期飲用杜仲茶具有保護(hù)細(xì)胞膜完整性,促進(jìn)人體皮膚、骨骼和肌肉中蛋白質(zhì)膠原合成和分解,促進(jìn)代謝,預(yù)防衰老具有重要的保健作用。對一些老年性疾病的緩解也有一定的效果。此試驗結(jié)果也驗證了美國宇航局將杜仲葉飲料作為宇航員飲品的作用。

        在此次試驗中,由于時間的關(guān)系,沒有說明是否長期飲用杜仲茶對G-SH的生成具有誘導(dǎo)作用,這還待以后研究。

        5 結(jié)論

        通過自由飲用和灌服的方式對家兔飼喂杜仲茶,結(jié)果顯示杜仲茶既能夠提高兔血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性,又能增強(qiáng)還原性谷胱苷肽(G-SH)的活性,這對于防止衰老和緩解老年性病癥有著一定作用,同時也能夠變廢為寶,為充分利用和開發(fā)杜仲葉資源提供重要依據(jù)。

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