王　玲，尹春燕，尉靈芝，肖延風

(西安交通大學第二附屬醫(yī)院兒科，陜西 西安 710004)

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肺炎合并膿毒癥兒童血清細胞因子變化及意義

王玲，尹春燕，尉靈芝，肖延風

(西安交通大學第二附屬醫(yī)院兒科，陜西 西安 710004)

目的檢測肺炎合并膿毒癥患兒外周血中白介素(IL)-2、IL-6、IL-8及IL-10等炎性因子水平，觀察免疫功能紊亂在兒童膿毒癥中的作用。方法選取2013年1月至2014年12月西安交通大學第二附屬醫(yī)院收治的52例肺炎合并膿毒癥患兒為肺炎合并膿毒癥組，同期收治的肺炎患兒50例為肺炎組，對102例患兒進行了詳細的病史詢問，體格檢查，外周血測查；檢測C反應蛋白(CRP)、IL-2、IL-6、IL-8及IL-10等細胞因子水平，并對檢測結果進行分析。結果肺炎合并膿毒癥組患兒外周血白細胞(WBC)計數(shù)、中性粒細胞比值以及血涂片桿狀粒細胞比例較肺炎組患兒均顯著升高，差異均有統(tǒng)計學意義(t值分別為6.89、4.78、2.42，均P<0.05)。肺炎合并膿毒癥組患兒外周血CRP較肺炎組患兒顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(t=8.76，P<0.01)。肺炎合并膿毒癥組患兒外周血IL-2、IL-6、IL-8較肺炎組患兒顯著升高(t值分別為9.34、7.45、5.05，均P<0.01)；而肺炎合并膿毒癥組患兒外周血IL-10與肺炎組患兒相比輕度升高，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結論IL-2、IL-6、IL-8及IL-10等因子在膿毒癥的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。

膿毒癥；肺炎；細胞因子；C反應蛋白

[Abstract]Objective To detect IL-2, IL-6, IL-8 and IL-10 levels in peripheral blood in children with pneumonia and sepsis so as to observe the role of immune dysfunction in child sepsis.Methods Fifty-two children with pneumonia and sepsis visiting the Second Affiliated Hospital of Xi’an Jiaotong University from January 2013 to December 2014 were selected aspneumonia and sepsis group, and 50 children with pneumonia visiting the same period were chosen as pneumonia group. The 102 children were demanded a detailed history, physical examination and peripheral blood examination. The levels of C-reactive protein (CRP), IL-2, IL-6, IL-8 and IL-10 in blood were detected and the results were analyzed.Results The peripheral white blood cell (WBC) count, neutrophil cell ratio and the ratio of rod-likeg ranulocytes in blood smear were significantly higher in children with pneumonia and sepsis than those in the pneumonia group, and the differences had statistical significance (tvalue was 6.89, 4.78, and 2.42, respectively, allP<0.05). The CRP of peripheral blood in the pneumonia and sepsis group was significantly higher than that in the pneumonia group with statistical significance (t=8.76,P<0.01).IL-2, IL-6 and IL-8 of peripheral blood were significantly higher in children with pneumonia and sepsis than those in children in the pneumonia group(tvalue was 9.34, 7.45 and 5.05, respectively,allP<0.01), but IL-10 in children with pneumonia and sepsis was slightly higher than that in the pneumonia group with no statistical significance (P>0.05).Conclusion IL-2, IL-6, IL-8 and IL-10 play an important role in the occurrence and development of sepsis.

[Key words]sepsis; pneumonia; cytokines;C-reactive protein (CRP)

膿毒癥是由感染所致的全身炎癥反應綜合征[1]，進一步發(fā)展可導致嚴重膿毒血癥、膿毒性休克及多器官功能不全，病情進展迅速、病死率極高，是危重患者死亡的主要原因。近年研究發(fā)現(xiàn)，膿毒癥患兒的免疫狀態(tài)在膿毒血癥發(fā)生、發(fā)展過程中處于免疫細胞過度激活和淋巴細胞受抑制的雙向異常或紊亂狀態(tài)。機體發(fā)生免疫功能紊亂，有害因子大量釋放，巨噬細胞抗原遞呈功能受損，難以對入侵微生物發(fā)生免疫反應，最終形成多器官功能不全綜合征。所以需要對膿毒癥患兒免疫功能紊亂進行進一步研究，以明確免疫功能紊亂在膿毒癥中的作用，并制定有效的治療方案，防止病情向休克及多臟器功能障礙方向進展。

1臨床資料及方法

1.1一般資料及分組

2013年1月至2014年12月西安交通大學第二附屬醫(yī)院兒科共收治52例診斷為肺炎合并膿毒癥的患兒為肺炎合并膿毒癥組，男25例，女27例；年齡2～14歲。選擇同期收治的肺炎患兒50例作為肺炎組，男26例，女24例；年齡2～13歲。對入院后的102例患兒進行了詳細的病史詢問，體格測查，外周血檢測。

1.2檢測方法

所有患兒入院后行血尿糞常規(guī)，胸部正位片，所有患兒入院24h內(nèi)采集靜脈血2mL，血清C反應蛋白(CRP)采用免疫透射比濁法測定，使用芬蘭OrionDia公司試劑及測定儀，正常值<5mg/L。化學發(fā)光分析儀為德國BRAHMS公司產(chǎn)品(Lumat LB 9507)；血常規(guī)采用全自動免疫化學分析儀(美國Beckman Coulter 公司產(chǎn)品)檢測，細胞因子采用酶聯(lián)免疫法測定，試劑盒為德國BRAHMS Diagostica GmbH 公司產(chǎn)品。

1.3膿毒血癥診斷標準

膿毒癥納入標準：存在可疑或已證實的感染，并伴有感染的全身系統(tǒng)表現(xiàn)。以下標準至少達2項，包括體溫或白細胞異常。①一般情況：中心溫度>38.5℃，或者<36℃；心率>90次/min，或超過正常年齡相關值的2個標準差以上；心動過速；意識障礙；明顯的水腫或體液正平衡(>20mL/kg，24h后)；無糖尿病情況下的高血糖(>140mg/dL或者7.7mmol/L)；②炎癥情況：白細胞(WBC)計數(shù)增多(>12×109)；WBC減少(<4×109)；WBC計數(shù)正常但有超過10%的幼稚白細胞；血漿CRP水平超過正常值的2個標準差；血漿降鈣素原水平超過正常值的2個標準差；③血流動力學情況：低血壓，低于正常年齡相關值的2個標準差；④臟器功能障礙情況：低血氧癥(PaO2/FiO2<300mmHg)；急性少尿(盡管已進行體液復蘇，但尿量<0.5mL·kg-1·h-1，持續(xù)至少2h)，尿素升高>0.5mg/dL或44.2μmol/L；凝血功能異常：國際化標準比值(INR)>1.5；或活化部分凝血活酶時間(APTT)>60s；腸梗阻(腸鳴音消失)；血小板減少(<100×109)；高膽紅素血癥(血漿總膽紅素>4mg/dL或70μmol/L)；⑤組織灌注：高乳酸血癥(>1mmol/L)，毛細血管充盈時間延長或花斑[2-3]。

1.4統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件對所有數(shù)據(jù)進行分析，計量資料以均數(shù)±標準差表示，兩組間比較采用t檢驗；采用α=0.05為檢驗水準，均為雙側(cè)檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2結果

2.1兩組患兒一般資料比較情況

肺炎合并膿毒癥組患兒的性別、年齡與肺炎組比較，結果顯示差異均無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)，見表1。

組別例數(shù)(n) 性別 男女年齡(歲)肺炎合并膿毒癥組5225(48.1)27(51.9)6.3±4.2肺炎組5026(52.0)24(48.0)7.4±3.4t/χ22.271.81P>0.05>0.05

2.2兩組患兒外周血象及血涂片桿狀粒細胞比例的比較情況

肺炎合并膿毒癥組患兒外周血WBC計數(shù)、中性粒細胞比值較肺炎組患兒顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(均P<0.01)；肺炎合并膿毒癥組患兒外周血單核細胞比值與肺炎組患兒相比差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；肺炎合并膿毒癥組患兒血涂片桿狀粒細胞比例較肺炎組患兒顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，見表2。

組別WBC(×109)中性粒細胞比值(%)單核細胞比值(%)血涂片桿狀粒細胞(%)肺炎合并膿毒癥組17.52±9.9573.24±15.617.24±5.6148.32±14.31肺炎組9.58±2.8956.13±8.346.34±3.3021.27±10.94t6.894.782.425.04P0.0000.0010.020.000

2.3兩組患兒外周血中炎性因子的比較結果

肺炎合并膿毒癥組患兒外周血CRP較肺炎組患兒顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；肺炎合并膿毒癥組患兒外周血IL-2、IL-6、IL-8較肺炎組患兒均顯著升高，差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.01)；而肺炎合并膿毒癥組患兒外周血IL-10與肺炎組患兒相比輕度升高，但經(jīng)比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

表3　　兩組患兒外周血中炎性因子的比較±S)

3討論

3.1外周血象及C反應蛋白的變化在膿毒血癥中的作用

膿毒癥被定義為由感染所致的全身炎癥反應綜合征，能夠誘發(fā)膿毒血癥休克和多器官功能不全(MODS)，其死亡率高，預后差[4]。據(jù)研究報道，膿毒癥的死亡率高達32.3%～55%，錯過合適的治療時機1h,患者的死亡率將上升5%～10%[5-6]。兒童的免疫力功能發(fā)育不全、且容易發(fā)生多臟器功能損傷。本研究發(fā)現(xiàn)，肺炎合并膿毒癥組患兒外周血WBC計數(shù)、中性粒細胞比例、血涂片桿狀細胞比例及CRP與肺炎組相比顯著升高。膿毒癥診斷指標WBC計數(shù)、中性粒細胞百分比、CRP等可用于對患者療效的監(jiān)測，但對其臟器功能的損害則無特異性，不利于監(jiān)測疾病進展及早期發(fā)現(xiàn)器官功能損傷[7]。因此，本研究進一步檢測了肺炎合并膿毒癥患兒外周血中IL-2、IL-6、IL-8及IL-10炎性因子水平，并與肺炎組進行了比較，觀察免疫功能紊亂在兒童膿毒癥中的作用。

3.2炎性因子在膿毒血癥中的作用

膿毒癥患者對感染所作出的系統(tǒng)反應是由巨噬細胞產(chǎn)生的細胞因子介導的，這些細胞因子與器官的受體結合后對組織的損傷及感染作出應答，機體對炎性因子及損傷所作出的炎性應答在不同物種間均高度保守，在外界有害因素的作用下，機體一旦識別出需要產(chǎn)生炎性應答時，組織及器官將會產(chǎn)生可溶性蛋白及前炎性因子而激活細胞防御反應，之后產(chǎn)生抗炎因子來衰減及阻止炎性反應的過度進展[8-9]。因此，膿毒癥的病理生理狀態(tài)可隨時間而變化，呈現(xiàn)一種序貫反應，最初表現(xiàn)為明顯的炎性反應，產(chǎn)生大量初始炎性因子，如IL-1、IL-2、IL-6、IL-8等，之后產(chǎn)生IL-10、IL-4、IL-13、轉(zhuǎn)化生長因子α等抗炎因子，隨著抗炎因子的增多而出現(xiàn)免疫抑制反應[10]。本研究發(fā)現(xiàn)肺炎合并膿毒癥組患兒外周血IL-2、IL-6及IL-8較肺炎組患兒均顯著升高，而肺炎合并膿毒癥組患兒外周血IL-10與肺炎組患兒相比輕度升高，但無明顯統(tǒng)計學差異。以上結果說明膿毒癥患兒處于炎性因子顯著升高，而抗炎因子開始升高的免疫抑制階段，通常體內(nèi)細胞因子反應是由體內(nèi)炎性因子及抗炎因子組成的復雜網(wǎng)絡共同調(diào)控的，機體通過下調(diào)炎性因子的表達及產(chǎn)生抗炎因子來降低體內(nèi)最初產(chǎn)生的炎性反應。因此，膿毒癥患兒體內(nèi)可能會出現(xiàn)炎性因子及抗炎因子同時存在的復雜畫面。

膿毒癥是建立在炎癥反應的基礎上，但炎癥反應只是膿毒癥的一部分。在最初的炎癥介質(zhì)釋放之后，機體隨之就迅速產(chǎn)生了一批具有拮抗作用的抗炎因子以便制約炎癥因子反應，抗炎因子的數(shù)量及反應程度并不亞于炎性反應，甚至可能超過炎性因子。機體產(chǎn)生抗炎性因子的目的是下調(diào)前炎性因子并調(diào)節(jié)炎性反應，防止炎性反應過度激活對機體造成嚴重損傷，使機體達到新的平衡。因此必須重視炎性因子及抗炎因子在膿毒癥中的作用，當體內(nèi)抗炎因子顯著降低時，往往提示炎癥反應過度，體內(nèi)炎癥反應平衡已被打破，患者預后不良[10]。

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[專業(yè)責任編輯：侯偉]

Changes of serum cytokines and their significance in children with pneumonia and sepsis

WANG Ling, YIN Chun-yan, WEI Ling-zhi, XIAO Yan-feng

(Department ofPediatrics,Second Affiliated Hospital of Xi’an Jiaotong University, Shaanxi Xi’an 710004, China)

2016-03-25

王玲(1965-)，女，主管技師，主要從事小兒血液系統(tǒng)疾病的檢驗工作。

肖延風，主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2016.08.017

R725.6

A

1673-5293(2016)08-0956-03