秦　湉，李芳香，逯鳳肖，郁建平*

(1.貴州大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽，550025；2.貴州大學(xué) 藥學(xué)院，貴州 貴陽 550025)

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二氫楊梅素對鯉魚生長及某些生理指標(biāo)的影響

秦湉1，李芳香1，逯鳳肖2，郁建平2*

(1.貴州大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽，550025；2.貴州大學(xué) 藥學(xué)院，貴州 貴陽 550025)

試驗旨在研究二氫楊梅素(Dihydromyricetin ，DMY)對鯉魚生長性能、血清指標(biāo)及消化酶指標(biāo)的影響。選取體重相近的鯉魚，隨機(jī)分為5個處理組，Ⅰ組為飼喂基礎(chǔ)日糧的對照組，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組為分別添加DMY 0.075%、0.10%、0.125%、0.25%的試驗組。試驗期為64 d，結(jié)果表明，基礎(chǔ)日糧中添加0.125%和0.25%的DMY極顯著提高鯉魚的增重率(WGR)和肥滿率(CF)，不同劑量的DMY添加都極顯著降低鯉魚餌料系數(shù)(FCR)(P<0.01)?；A(chǔ)日糧中添加0.25% DMY顯著提高鯉魚血清中白蛋白(ALB)和總蛋白(TP)的含量(P<0.05)，添加不同劑量的DMY對鯉魚血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性沒有顯著影響(P>0.05)?；A(chǔ)日糧中添加0.25% DMY可以顯著提高鯉魚胃蛋白酶活性(P<0.05)，極顯著降低腸道淀粉酶活性(P<0.01),添加不同劑量DMY對鯉魚腸道脂肪酶活性沒有顯著影響(P>0.05)。

二氫楊梅素；鯉魚；生長性能；血清指標(biāo)；消化酶指標(biāo)

藤茶作為藥食兩用的植物，是蛇葡萄屬植物上的嫩莖葉，最初在民間作為草藥應(yīng)用[1]。二氫楊梅素(Dihydromyricetin ，DMY)是藤茶提取物中的有效成分[2]，研究表明，DMY具有多種藥理活性，如消炎、鎮(zhèn)痛、抗高血壓、保肝護(hù)肝及解酒、增強(qiáng)免疫力、抗氧化和抑菌[3-9]，但其在水產(chǎn)生物中還沒有廣泛應(yīng)用。近幾年，各種中草藥以及各種微生物作為魚飼料添加劑，對魚類生長性能、抗氧化性等各方面進(jìn)行研究。試驗主要通過在基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量的DMY，研究DMY對鯉魚的生長性能、血清指標(biāo)以及消化酶指標(biāo)的影響，為DMY在水產(chǎn)生物養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供依據(jù)。

1　材料與方法

1.1試驗材料

二氫楊梅素：貴州大學(xué)生化營養(yǎng)研究所提供。

鯉魚：貴州本地鯉魚，購自貴陽市花溪區(qū)洛平村漁場。

ALB含量試劑盒(南京建成生物工程研究所)，TP含量試劑盒(南京建成生物工程研究所)，谷草轉(zhuǎn)氨酶試劑盒(南京建成生物工程研究所)，腸道蛋白酶試劑盒(南京建成生物工程研究所)，腸道淀粉酶(南京建成生物工程研究所)，腸道脂肪酶(南京建成生物工程研究所)。

儀器：TU1901雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)，電子天平(梅特勒；XS205)。

1.2試驗設(shè)計

選取健康的鯉魚120尾(30.39±10.53) g，隨機(jī)分為5個處理，每個處理3個重復(fù)，每個重復(fù)8尾。以基礎(chǔ)日糧組為對照試驗組，Ⅰ組為基礎(chǔ)日糧組，Ⅱ組為基礎(chǔ)日糧組+0.075%DMY，Ⅲ組為基礎(chǔ)日糧組+0.10%DMY，Ⅳ組為基礎(chǔ)日糧組+0.125%DMY，Ⅴ組為基礎(chǔ)日糧組+0.25%DMY。預(yù)試驗期為14 d，正式試驗期為64 d。

表1　基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干%)

注：每千克預(yù)混料含：CuSO4·5H2O 2.0 g、FeSO4·7H2O 25 g、MnSO4·4H2O 7 g、ZnSO4·7H2O 22 g、Na2SeO 30.04 g、KI 0.026 g、CoCl2·6H2O 0.1 g、VA 900 000 IU、VD 200 000 IU、VE 4 500 mg、VK 3 220 mg、VB1320 mg、VB21 090 mg、Vpp 2 000 mg、VB6500mg、VB121.6 mg、VC10 000 mg、泛酸 1 000 mg、葉酸 16.5 mg

1.3飼養(yǎng)試驗

試驗鯉魚在塑料水箱中飼養(yǎng)(規(guī)格為90 cm×50 cm×25 cm)，預(yù)實驗為14 d。飼喂日常飼料的為對照組，Ⅰ組為日常飼料對照組，Ⅱ組為試驗組日常飼料+0.075%DMY，Ⅲ組為試驗組日常飼料+0.10%DMY，Ⅳ組為試驗組日常飼料+0.125%DMY，Ⅴ組為試驗組日常飼料+0.25% DMY。試驗期為64 d。每天投喂2次，投餌量為魚體重的2%～4%，投喂45 min后，將剩余的餌料排出，每2～3 d換一次水，換水后每箱中添加125 g海鹽。

1.4指標(biāo)的測定

1.4.1生長性能指標(biāo)的測定

正式試驗開始后，先測定每箱魚的初體重，饑餓24 h的狀態(tài)下記錄。試驗期為64 d，在試驗期間每箱試驗魚在一定的時間段分別檢測兩次總體重(饑餓24 h)，每組抽取6尾，檢測體長和體重，記錄。

增重率(weighe gain ratio,WGR,%)=100×(Wt-WO)/WO

餌料系數(shù)(feed conversion ration,FCR)=FI/(Wt-WO)

肥滿度(condition factor,CF,%)=100×Wb/L3)

式中，Wt：魚末體均重，WO：魚初體均重，F(xiàn)I：每尾魚平均攝食料總量，Wb：每尾魚末體重，L：每尾魚末體長)

1.4.2血清指標(biāo)的測定

每個重復(fù)選取6尾試驗魚，尾部靜脈采血。在3000 r/min的轉(zhuǎn)速下離心10 min，取得血清。置于1.5 ml離心管中，于-20℃冰箱中保存。以測定血清中白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)。按試劑盒說明檢測鯉魚血清中白蛋白、總蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶含量。

1.4.3腸道消化酶的測定

試驗每個重復(fù)隨機(jī)選取6尾魚，進(jìn)行魚體解剖。迅速取出腸道，用生理鹽水洗凈其表面粘液和血液，用濾紙擦干。準(zhǔn)確地稱取一定量組織，制成組織勻漿，離心取上清液，制成所需粗酶液樣品。以測定胃蛋白酶、腸道淀粉酶、腸道脂肪酶。按試劑盒說明檢測鯉魚腸道蛋白酶、腸道淀粉酶、腸道脂肪酶活性。

1.5數(shù)據(jù)分析

試驗的數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計處理軟件，應(yīng)用其ANOVA模塊進(jìn)行單因素的方差分析，LSD要點(diǎn)方法對各組間進(jìn)行多重比較，結(jié)果采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來表示。

2　結(jié)果與分析

2.1DMP對鯉魚生長的影響

可以得出(見表2)，添加DMY劑量為0.125%和0.25%對鯉魚WGR和CF有極顯著的影響(P<0.01)，其WGR幅度分別為153.58%、160.39%，CF增長的幅度分別為40.66%、58.24%。餌料系數(shù)各組DMY的添加量都有極顯著降低(P<0.01)，其FCR降低幅度分別為52.38%、65.27%、76.09%、77.60%。

表2　DMY對鯉魚生長性能的影響

注：同一列數(shù)據(jù)上表字母相同表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.05)；下表同。

2.2DMY對鯉魚血清指標(biāo)的影響

可以看出(見表3)，添加 DMY 0.25%DMY對鯉魚血清的ALB、TP含量有顯著增高(P<0.05)，其ALB增高幅度為25.78%，TP增高幅度為22.55%(P<0.05)，其他各組間差異性不顯著(P>0.05)。添加不同劑量DMY對鯉魚血清中GOT含量沒有顯著影響(P>0.05)。

表3　DMY對鯉魚血清指標(biāo)的影響

2.3DMY對鯉魚腸道消化酶指標(biāo)的影響

可以看出(見表4)，添加0.25%DMY對鯉魚的腸道淀粉酶活性可以顯著降低(P<0.05)，其降低幅度為77.41%，其他各組間差異性不顯著(P>0.05)；添加0.25%DMY可以極顯著提高腸道蛋白酶活性(P<0.01)，其增高幅度為181.82%，其他各組間差異性不顯著(P>0.05)；添加不同劑量DMY對鯉魚腸道脂肪酶活性沒有顯著影響(P>0.05)。

表4　DMY對鯉魚腸道消化酶指標(biāo)的影響

3　結(jié)論與討論

3.1基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量DMY對鯉魚生長性能的影響

WGR和CF的變化是飼料添加劑對鯉魚生長性能影響最直接的表現(xiàn)，吳文等[10]在飼料中添加0.3%的絞股蘭來飼喂草魚，使其增重提高31.25%。戴青[11]在日糧中添加0.25%DMY可以極顯著提高瑤山雞的日增重。柴桂珍[12]在飼料中草藥添加可以促進(jìn)魚類的生長。黃銀燕[13]在飼料中添加2%和4%的螺旋藻及杜仲提取物可以顯著降低奧尼魚餌料系數(shù)。本試驗結(jié)果，日糧中添加劑量為0.125%和0.25%的DMY對鯉魚WGR和CF都有極顯著提高(P<0.01)，添加不同劑量的DMY都可以極顯著降低其FCR(P<0.01)。結(jié)果表明，添加不同劑量的DMY對鯉魚的生長性能有一定的促進(jìn)作用。

3.2基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量的DMY對鯉魚血清指標(biāo)的影響

血清中ALB和TP含量可以表現(xiàn)體內(nèi)蛋白代謝的情況，其中ALB參與魚體免疫調(diào)理和營養(yǎng)的作用，血清中GOT的含量是肝功能的重要指標(biāo)，在機(jī)體的蛋白質(zhì)代謝中有重要作用。楊弘等[14]研究表明飼料蛋白水平對尼羅羅非魚ALB和TP沒有顯著影響，但是與對照組相比，數(shù)值有明顯增長。聶國興[15]木聚糖酶對尼羅羅非魚血液中ALB和TP含量有極顯著提高，對血液中GOT含量沒有顯著影響。夏薇等[16]三種不同飼料添加劑對建鯉血清中GOT的活性沒有顯著影響，雖然數(shù)值有明顯降低。Wang Y等[17]在基礎(chǔ)日糧中用蛋白肽代替部分蛋白原料，建鯉魚血清中GOT的活性偏低在正常情況下，當(dāng)肝臟和心機(jī)等組織發(fā)生病變時，血清中GOT活性會大幅度上升。周小波等[18]在基礎(chǔ)日糧中添加不同乳酸菌對血清中GOT活性有降低作用。本試驗在基礎(chǔ)日糧中添加0.25%的DMY可以顯著提高血清中ALP和TP的含量(P<0.05)，飼料中添加DMY可以提高鯉魚體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝，對鯉魚魚體的營養(yǎng)水平有顯著的提高。添加不同劑量的DMY對鯉魚血清中GOT活性沒有顯著影響(P>0.05)，DMY對于鯉魚的肝臟功能有保護(hù)作用。

3.3基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量的DMY對鯉魚腸道消化酶指標(biāo)的影響

張耀武等[19]在黃顙魚的日糧中添加含有金銀花的中草藥，可提高其生長性能和非特異性免疫力。許培玉[20]在凡納濱對蝦中添加小肽制品可提高腸道消化酶的活性。本試驗，在基礎(chǔ)日糧中添加DMY 0.25%可以顯著增強(qiáng)鯉魚胃蛋白酶活性(P<0.05)，極顯著降低腸道淀粉酶活性(P<0.01)，在基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量DMY對鯉魚腸道脂肪酶活性沒有顯著影響(P>0.05)，但可以在一定程度上降低腸道脂肪酶活性。

[1]侯建軍,覃紅斌,胡澤華. 野生藤茶的藥理作用和臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 湖北民族學(xué)院學(xué)報(醫(yī)學(xué)版),2002,19(4):36-38.

[2]熊璞,姚茂君,肖凱軍. 藤茶中二氫楊梅素的提取研究[J]. 現(xiàn)代食品科學(xué),2009,25(8):907-910.

[3]何桂霞,楊偉朋,裴剛,等. 二氫楊梅素抗脂質(zhì)過氧化作用的研究[J]. 中國中藥雜志,2003,28(12):1188-1190.

[4]楊書珍,張友勝,寧正祥,等. 二氫楊梅素對幾種食品常見菌的抑制效果[J]. 天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2003,15(1):40-42.

[5]潘人琦,郁建平. 二氫楊梅素解酒作用的研究[J]. 山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報,2012,31(3):247-249.

[6]Matsumoto T，Tahara S. Ampelopsin，a major antifungal constituent from salix sachalinensis and its methyl ethers. Nippon nogeikagaku kaishi [J]. Joumal of the Japan Society for Bioseience Biotechnology and Agrochemistry, 2001,75(6):659-667.

[7]覃潔萍,鐘正賢,周桂芬,等. 雙氫楊梅樹皮素降血糖的試驗研究[J]. 中國中藥雜志,2001,18(5):351-353.

[8]張友勝,寧正祥,楊書珍,等. 顯齒蛇葡萄蛇二氫楊梅樹皮素的抗氧化作用及其機(jī)制[J]. 藥學(xué)學(xué)報,2003,389(4):241-244.

[9]王丹,郁建平，劉灝. 藤茶二氫楊梅素抗氧化活性研究[J]. 山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報,2013,32(3):243-246.

[10]吳文,葉金云,陸清爾,等. 絞股蘭作為飼料添加劑的探究[J]. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報,1998,7(8):367-370.

[11]戴青,郁建平,龔飛，等. 二氫楊梅素對瑤山雞生長,涂在性能及血清抗氧化指標(biāo)的影響[J]. 飼料工業(yè)雜志社,2014,35(16):9-12.

[12]柴桂珍,劉冠章,趙晶晶，等. 中藥在水產(chǎn)養(yǎng)殖中應(yīng)用前景[J]. 中國獸藥雜志,1999,33(2):52-54.

[13]黃銀燕,劉華忠. 螺旋藻對彭澤鯽生長性能的研究[J]. 齊魯漁業(yè),2005,22(4):39-40.

[14]楊弘,徐起群,樂貽榮,等. 飼料蛋白水平對尼羅羅非魚幼魚生長性能,體組成,血液學(xué)指標(biāo)與肝臟非特異性免疫指標(biāo)的影響[J]. 動物營養(yǎng)學(xué)報,2012,24(12):2384-2392.

[15]聶國興,明紅,鄭俊林,等. 木聚糖酶對尼羅羅非魚血液生理生化指標(biāo)的影響[J]. 大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報,2009,22(5):361-365.

[16]夏薇. 幾種環(huán)保型飼料添加劑對建鯉生產(chǎn)性能和生化指標(biāo)的影響[D].南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2014.

[17]Wang Y,Xiong L,Yang K J,et al. Effect of beta-cypermethrin on GTP and GOT activities of crucian serum[J]. Agric Sci&Technol,2005,6(1):20-23.

[18]周曉波,黃燕華,曹俊明,等. 對羅非魚生長性能、體成分、血清生化指標(biāo)及腸道菌群的影響[J]. 2014,26(7):2009～2017.

[19]張耀武,鄭建武,劉文輝,等. 復(fù)方中草藥制劑對黃顙魚生長和非特異性免疫功能的影響[J]. 水產(chǎn)科學(xué),2010,29(4):226-228.

[20]許培玉,周洪琪. 小肽制品對凡納濱對蝦蛋白酶和淀粉酶活力的影響[J]. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報,2005(2):133-137.

Effects of Dihydromyricetin on Growth Performance, Serum Indexes and Digestive Enzyme Indexes of Common Carp

QINtian1,YUJian-ping2,LUFeng-xiao3,LIFang-xiang3

(CollegeofLifeSciences,GuizhouUniversity,Guiyang,Guizhou550025，China)

The effects of Dihydromyricetin (DMY)on growth performance,serum indexes anddigestive enzymes ofCyprinuscarpiowere investigated in the present work.The group fed the basal diet was used as the control, and the basal diets supplemented with different DMYs (0.075%,0.10%,0.125% and 0.25%) were used as the treatments.The treatments added with 0.125% and 0.25% DMY significantly increased WGR and CF ofCyprinuscarpio(P<0.01),and different dosages of DMY might extremely significantly decrease the CFR(P<0.01). Addition of 0.25% DMY significantly increased ALB and TP levels in the serum ofCyprinuscarpio(P<0.05) ,and different dosages of DMYs gave no significant effect on the GOT activity in the serum (P>0.05). Treatment with 0.25% DMY could significantly improvethe pepsaseactivity (P<0.05),intestinalamylase activitydecreased significantly(P<0.01),and the addition of different dosages of DMYs had no significantly effects on the intestinal lipase activity ofCyprinuscarpio(P>0.05).

Dihydromyricetin;Cyprinuscarpio; Growth performance; Serum indexes; Digestive enzyme

2016-01-29；

2016-02-07

貴州省科技廳農(nóng)業(yè)攻關(guān)項目[黔科合MY〔2011〕3094號]。

郁建平，男，教授，博士生導(dǎo)師，主要研究方向：天然產(chǎn)物的分離、提??；E-mall: yujp666666@163.com。

S963.73

A

1008-0457(2016)01-0091-04國際DOI編碼：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2016.02.018