齊素敏,　吳有芳,　李如美,　張思聰,莊乾營,　周仙紅,　于　毅*,　劉永杰*

(1. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院, 泰安　271000; 2. 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所,山東省植物病毒學(xué)重點實驗室, 濟南　250100)

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山東省不同地區(qū)韭蛆種群對殺蟲劑的抗藥性

齊素敏1,2,吳有芳1,李如美2,張思聰2,莊乾營2,周仙紅2,于毅2*,劉永杰1*

(1. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護學(xué)院, 泰安271000; 2. 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所,山東省植物病毒學(xué)重點實驗室, 濟南250100)

用胃毒觸殺聯(lián)合毒力法監(jiān)測了山東省7個韭菜種植區(qū)的韭蛆種群對毒死蜱、辛硫磷、高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、吡蟲啉和噻蟲嗪6種常用殺蟲劑的抗性水平。結(jié)果表明:山東省各地區(qū)韭蛆種群對毒死蜱和辛硫磷的抗性已較為普遍,其中莘縣種群對毒死蜱的抗性超過30倍;對高效氯氰菊酯的抗性為中等水平;泰安種群對供試的兩種菊酯類藥劑均產(chǎn)生了低水平抗性;而對吡蟲啉和噻蟲嗪,7個供試種群處于敏感或敏感性下降狀態(tài)。

山東省;韭蛆;田間種群;抗藥性

韭菜遲眼蕈蚊(BradysiaodoriphagaYangetZhang)屬雙翅目,眼蕈蚊科,遲眼蕈蚊屬。幼蟲稱韭蛆,是為害韭菜、蔥、蒜等經(jīng)濟作物的重要地下害蟲之一[1-3]。該蟲以幼蟲群集寄主根部蛀食,常造成韭菜缺苗斷壟,使韭菜減產(chǎn)甚至絕產(chǎn)[4-5]。韭蛆體小、繁殖力強、世代重疊嚴重,防治困難,近年來發(fā)生有加重的趨勢[6-7]?；瘜W(xué)防治因成本低、藥效快的優(yōu)點,目前仍是防治韭蛆的主要方法。為有效防治該蟲,菜農(nóng)不斷增加農(nóng)藥使用量,不僅導(dǎo)致農(nóng)藥殘留,也易引起抗藥性等問題,而且韭蛆為小作物害蟲,常用殺蟲劑種類較少,更增加了該蟲產(chǎn)生抗性的風險,因此評價韭蛆抗性水平,顯得尤為重要。

高占林等[8]于2000年在室內(nèi)測定了河北省不同地區(qū)韭蛆田間種群對不同殺蟲劑的敏感性,發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)的韭蛆對藥劑的敏感程度不同。山東省是韭菜生產(chǎn)大省,有關(guān)山東省不同地區(qū)韭蛆種群抗藥性的研究目前未見報道。本研究通過對山東省不同地區(qū)種群韭蛆進行抗藥性監(jiān)測,了解和掌握全省韭蛆對常用殺蟲劑的抗藥性水平,針對抗藥性水平,探討科學(xué)有效的防治策略,對保持韭蛆對殺蟲劑的敏感性和延緩抗性的發(fā)展,實現(xiàn)韭蛆的可持續(xù)治理具有重要的理論和應(yīng)用價值。

1　材料與方法

1.1供試韭蛆

相對敏感種群:2012年采自山東省壽光市溫室大棚韭菜,于實驗室內(nèi)連續(xù)飼養(yǎng)超過30代,期間未接觸任何藥劑。

濟南種群:采自山東省濟南市唐王鎮(zhèn)韓東村溫室大棚兩年生韭菜;泰安種群:采自山東省泰安市邱家店鎮(zhèn)舊縣村小拱棚四年生韭菜;莘縣種群:采自山東省聊城市莘縣張寨鄉(xiāng)郭坊村小拱棚四年生韭菜;茌平種群:采自山東省聊城市茌平縣肖莊鎮(zhèn)皮里村小拱棚三年生韭菜;沂源種群:采自山東省淄博市沂源縣魯村鎮(zhèn)魯村四村小拱棚三年生韭菜;壽光種群:采自山東省壽光市文家街道北關(guān)橋村三年生韭菜;臨沭種群:采自山東省臨沂市臨沭縣曹莊鎮(zhèn)新華村小拱棚三年生韭菜。每個地區(qū)種群均為2015年5月采集,于室內(nèi)飼養(yǎng)一代,選取F1代供試。敏感種群和田間種群均選取個體大小較一致的健康3齡幼蟲作為供試蟲源。

1.2供試藥劑

97%毒死蜱(chlorpyrifos)原藥(山東埃森化學(xué)有限公司),90%辛硫磷(phoxim)原藥(湖北仙隆化工有限公司),27%高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin)母藥(廣東立威化工有限公司),97%高效氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin)原藥(濟南市賽德爾化工有限公司),95%吡蟲啉(imidacloprid)原藥(南京紅太陽股份有限公司),98%噻蟲嗪(thiamethoxam)原藥(江蘇綠葉農(nóng)化有限公司)。

表1　供試韭蛆種群用藥史1)

1)*表示種群采自老韭菜種植區(qū),取樣地塊種植韭菜多年。

*indicates thatB.odoriphagacollected from the area that people have planted Chinese chives for years.

1.3試驗方法

參考慕衛(wèi)等[9]的胃毒觸殺聯(lián)合毒力測定方法。將原藥或母藥用丙酮配制成母液,再用0.1% Tween-80水溶液按照0.5倍等比稀釋為5～7個濃度。將干凈濾紙平鋪在直徑9 cm培養(yǎng)皿內(nèi),在濾紙上定量滴加1.2 mL藥液。將韭菜莖基的白色部分剪成約1 cm小段,于不同濃度藥液中浸泡30 s后取出,在吸水紙上吸去多余藥液后置于鋪有相同藥液處理濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi),每皿2段。然后用毛筆輕輕挑起大小一致3齡韭蛆幼蟲置于培養(yǎng)皿內(nèi)。每皿接入試蟲20頭,每處理重復(fù)3次,同時設(shè)空白對照。處理后將培養(yǎng)皿置于溫度(25±1)℃、光照L∥D=16 h∥8 h、相對濕度50%～70%的人工氣候箱內(nèi)飼養(yǎng)。每天用滴管在濾紙周圍滴加適量水保濕。于藥后48 h檢查試蟲存活情況。

1.4數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 19.0軟件處理數(shù)據(jù),求得毒力回歸方程、標準誤、LC50及相關(guān)系數(shù)。將供試藥劑對供試種群的LC50與敏感種群的LC50相比,得到抗性倍數(shù)(resistance ratio)。抗性水平劃分標準參考沈晉良等[10]的方法:敏感(抗性倍數(shù)≤3);敏感性降低或耐藥性提高(抗性倍數(shù)為3.1～5);低水平抗性(抗性倍數(shù)為5.1～10);中等水平抗性(抗性倍數(shù)為10.1～40);高水平抗性(抗性倍數(shù)為40.1～160);極高水平抗性(抗性倍數(shù)≥160.1)。

2　結(jié)果與分析

毒力測定結(jié)果表明,山東省7個韭蛆種群對毒死蜱均已產(chǎn)生抗藥性,其中濟南種群敏感性略有下降,抗性為3.47倍;泰安、莘縣、茌平、沂源和壽光種群敏感性較低,產(chǎn)生了中等水平抗性,抗性為15.97～30.47倍;臨沭種群抗性是敏感種群的7.32倍,抗性屬于低等水平。對辛硫磷,濟南種群處于敏感狀態(tài),泰安、莘縣、沂源和壽光種群為中等水平抗性,抗性倍數(shù)分別為25.69、24.05、15.90和17.80倍;茌平和臨沭種群對辛硫磷表現(xiàn)出低水平抗性,抗性分別為6.43倍和5.70倍。對高效氯氰菊酯,濟南和臨沭種群處于敏感水平;莘縣種群的敏感性最低,抗性為11.45倍,達到中等水平抗性;泰安種群抗性為6.40倍,屬低水平抗性;茌平、沂源、壽光種群的抗藥性增強,抗性分別為3.95、4.88和5.76倍。對高效氯氟氰菊酯,泰安種群產(chǎn)生了低水平抗性,抗性為8.06倍;莘縣、茌平、沂源、壽光和臨沭種群對高效氯氟氰菊酯敏感性下降,抗性為3.29～4.70倍;而濟南種群處于敏感水平。泰安、莘縣、茌平、沂源和壽光種群對吡蟲啉耐藥性提高,抗性為3.31～4.29倍,濟南和臨沭種群對吡蟲啉保持敏感。對噻蟲嗪,泰安、莘縣、茌平和沂源種群抗性分別為4.53、3.22、3.16和3.68倍,為敏感性下降狀態(tài),濟南、壽光和臨沭種群處于敏感狀態(tài)。

表2　山東不同地區(qū)韭蛆種群對6種殺蟲劑的抗性水平1)

續(xù)表2Table 2 (Continued)

藥劑Insecticide種群Population斜率Slope(Mean±SE)LC50(95%CL)/mg·L-1相關(guān)系數(shù)(r)Correlationcoefficient抗性倍數(shù)Resistanceratio吡蟲啉ImidaclopridYY1.131±0.4486.516(2.624～32.366)0.9853.86SG1.713±0.4956.236(3.554～12.716)0.9623.69LS1.131±0.4483.258(1.312～16.183)0.9851.93S1.418±0.4741.686(0.573～3.238) 0.9671.00噻蟲嗪ThiamethoxamJN1.448±0.4704.547(2.009～9.347) 0.9961.10TA1.304±0.47018.617(9.510～97.565) 0.9844.53SX1.390±0.46713.231(7.542～28.439) 0.9933.22CP1.216±0.45512.991(5.721～49.121) 0.9703.16YY1.292±0.46215.111(7.428～58.421) 0.9913.68SG1.535±0.4778.290(3.746～15.806)0.9882.01LS1.288±0.4617.313(3.553～27.207)0.9901.78S1.833±0.5044.106(2.187～7.022) 0.9911.00

1) S:敏感種群;JN: 濟南種群; TA: 泰安種群; SX: 莘縣種群;CP: 茌平種群; YY: 沂源種群; SG: 壽光種群; LS: 臨沭種群;抗性倍數(shù)=田間種群LC50/敏感品系LC50。S: Susceptible population; JN: Ji’nan population; TA: Tai’an population; SX: Shenxian population;CP: Chiping population; YY: Yiyuan population; SG: Shouguang population; LS: Linshu population; Resistance ratio=LC50value of field population/LC50value of susceptible strain.

3　討論

監(jiān)測結(jié)果表明,山東省7個不同地區(qū)韭蛆種群對6種常用殺蟲劑中的4種都產(chǎn)生了不同程度的抗藥性。其中對毒死蜱、辛硫磷為中抗和低抗水平；對高效氯氰菊酯(莘縣種群屬于中抗水平)和高效氯氟氰菊酯屬于低抗水平；對吡蟲啉和噻蟲嗪處于敏感或敏感性下降狀態(tài)。韭蛆對常用殺蟲劑抗性水平的差異性可能與不同韭菜產(chǎn)區(qū)韭蛆治理過程中用藥種類、用藥量和用藥頻率[11]等因素有關(guān)。毒死蜱和辛硫磷屬于有機磷類農(nóng)藥,用于防治地下害蟲時，一般釆用灌根、拌土撒施[12]及噴霧等施藥方法。近年來這兩種殺蟲劑在韭蛆防治中用量大、使用頻率較高,造成韭蛆對其抗性水平較高。農(nóng)業(yè)部已發(fā)布公告,決定自2016年12月31日起,禁止毒死蜱在蔬菜上使用[13]。高效氯氰菊酯和高效氯氟氰菊酯屬于擬除蟲菊酯類藥物,具有高效、廣譜、低毒等優(yōu)點,也是一種被廣泛使用的殺蟲劑,但由于其使用頻率少于前兩者,因此韭蛆對其抗藥性水平相對較低。吡蟲啉和噻蟲嗪屬于新煙堿類藥物,具有殺蟲活性高、內(nèi)吸性好、對人畜安全、與環(huán)境相容性高等特性,常用來防治蚜蟲、粉虱等刺吸式口器害蟲[14-17]。而在山東的韭菜種植區(qū),菜農(nóng)們常使用此類農(nóng)藥噴霧防治韭菜上的蚜蟲、薊馬等害蟲,對韭蛆的選擇壓力要遠小于前4種采用灌根施藥法的殺蟲劑。

從抗性總體水平來看,莘縣種群抗性較高,而濟南種群對6種常用藥劑處于相對敏感狀態(tài)。不同韭菜產(chǎn)區(qū)韭蛆對常用殺蟲劑抗性水平的差異與釆集試蟲的地理位置及當?shù)夭宿r(nóng)的用藥情況密切相關(guān)。莘縣是老韭菜種植區(qū),韭蛆危害一直比較嚴重,當?shù)夭宿r(nóng)常過量使用農(nóng)藥,甚至不惜使用甲拌磷等高毒農(nóng)藥,使得該地韭蛆種群對幾種常用農(nóng)藥產(chǎn)生了相對高的抗性；而濟南種群采自新韭菜種植區(qū),少有韭蛆危害,除了少量使用毒死蜱和辛硫磷控制害蟲外,基本不用藥,因此較為敏感。

不同地區(qū)韭蛆種群抗藥性的差異,除了與不同韭菜產(chǎn)區(qū)韭蛆治理過程中用藥種類、用藥量、用藥頻率等因素有關(guān)外,齡期、飼養(yǎng)溫度、食料、測定方法對其敏感性也有一定影響[18]。韭蛆幼蟲常聚集在鱗莖里或鉆蛀假莖中為害[19]。由于該蟲鉆蛀為害,再加上其蟲體小、體軟的特點,若直接將韭蛆幼蟲從為害部挑出,易使其受機械損傷而影響試驗結(jié)果。建議將采回的含有韭蛆的韭菜根于人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng),待成蟲羽化后,用吸蟲器將其吸出,于培養(yǎng)皿中配對產(chǎn)卵,選取室內(nèi) F1或F2代供試。

目前,山東省不同地區(qū)韭蛆種群已對4種常用殺蟲劑產(chǎn)生了不同程度的抗性,其中部分地區(qū)種群對毒死蜱和辛硫磷及高效氯氰菊酯的抗性已達到中等水平。為了延長殺蟲劑的使用壽命,減緩韭蛆抗性發(fā)展速度,藥劑防治中應(yīng)限制使用有機磷和菊酯類農(nóng)藥,在使用吡蟲啉、噻蟲嗪等新煙堿類藥劑時,考慮到其存在溫度效應(yīng)和濃度效應(yīng),為提高藥劑利用率,盡量選擇傍晚在地溫高的季節(jié)對韭菜地進行施藥[20]。同時,嚴格控制用藥劑量和安全間隔期,注意不同種類殺蟲劑的輪替使用,盡可能在較低的選擇壓下取得較好的防效。

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(責任編輯：楊明麗)

Detection of insecticide resistance of Bradysia odoriphaga in Shandong Province

Qi Sumin1,2,Wu Youfang1,Li Rumei2,Zhang Sicong2,Zhuang Qianying2,Zhou Xianhong2,Yu Yi2,Liu Yongjie1

(1.College of Plant Protection, Shandong Agricultural University, Tai’an271000, China;2. Institute of Plant Protection, Shandong Academy of Agricultural Sciences,Shandong Key Laboratory of Plant Virology, Ji’nan250100, China)

The levels of resistance to six commonly used insecticides, chlorpyrifos, phoxim,beta-cypermethrin,lambda-cyhalothrin, imidacloprid and thiamethoxam were determined in seven populations ofBradysiaodoriphagacollected from Shandong Province by stomach-contact combination toxicity method. The results showed that the resistance ofB.odoriphagapopulations to chlorpyrifos and phoxim was very common in Shandong Province. The resistance ratio of Shenxian population was more than 30-fold to chlorpyrifos, while moderate resistance tobeta-cypermethrin. Tai’an population had low level resistance tobeta-cypermethrin andlambda-cyhalothrin. However, all tested populations were relatively sensitive to imidacloprid and thiamethoxam.

Shandong Province;Bradysiaodoriphaga; field population; insecticide resistance

2015-07-27

2015-10-22

公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(201303027)

E-mail: robertyuyi@163.com;lyj@sdau.edu.cn

S 433, S 482.3

A

10.3969/j.issn.0529-1542.2016.04.030