馮　梅，滕文浩，姜雯雯，向繼洲，3，劉　慧，3，楊　磊（1.廣州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，廣東廣州51136；.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系，湖北武漢30030；3.藥物靶點(diǎn)研究與藥效學(xué)評(píng)價(jià)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北武漢30030；.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院麻醉科，湖北武漢300）

表皮生長因子受體在腎血管性高血壓大鼠心血管重構(gòu)中的作用

馮梅1，2，滕文浩2，姜雯雯2，向繼洲2，3，劉慧2，3，楊磊4
（1.廣州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，廣東廣州511436；2.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)系，湖北武漢430030；3.藥物靶點(diǎn)研究與藥效學(xué)評(píng)價(jià)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北武漢430030；4.華中科技大學(xué)
同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院麻醉科，湖北武漢430022）

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：2016-4-26 11：06網(wǎng)絡(luò)出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20160426.1106.016.html

目的表皮生長因子受體（EGFR）是一種受體型酪氨酸激酶，參與調(diào)節(jié)多種重要的細(xì)胞功能。既往研究表明，EGFR在促進(jìn)心肌肥大和血管平滑肌細(xì)胞增殖中發(fā)揮了重要作用。本實(shí)驗(yàn)擬觀察EGFR是否參與了腎血管性高血壓心血管重構(gòu)。方法本實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)典的“兩腎一夾”（2K1C）Goldblatt腎性高血壓大鼠模型，觀察血壓、左室心指數(shù)和心血管系統(tǒng)組織病理學(xué)變化，采用免疫組織化學(xué)和Western blot檢測(cè)心肌和主動(dòng)脈EGFR以及磷酸化ERK的表達(dá)。結(jié)果術(shù)后2周，2K1C大鼠收縮壓急劇升高；6周后，左室心指數(shù)增加，心肌間質(zhì)膠原纖維增生，胸主動(dòng)脈內(nèi)中膜增厚，表明腎血管性高血壓誘導(dǎo)了心血管重構(gòu)。與假手術(shù)組相比，2K1C大鼠心肌和主動(dòng)脈EGFR表達(dá)增加，且與收縮壓升高的程度相關(guān)（P＜0.05）。磷酸化ERK 1/2的水平也明顯上調(diào)。結(jié)論EGFR及下游激酶ERK 1/2參與了腎血管性高血壓大鼠心血管重構(gòu)，并與高血壓的嚴(yán)重程度相關(guān)。

兩腎一夾（2K1C）；腎血管性高血壓；心血管重構(gòu)；表皮生長因子受體；MAPK；大鼠

高血壓導(dǎo)致的心血管疾病嚴(yán)重危害人類健康和生命，已成為一個(gè)重大的全球性公共衛(wèi)生問題。在過去的半個(gè)世紀(jì)，盡管高血壓的治療進(jìn)展顯著，但是高血壓的患病率仍在全世界范圍內(nèi)明顯增長［1-2］。高血壓發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，近年來證實(shí)，高血壓及其并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展與心血管重構(gòu)密切相關(guān)［3］。心血管重構(gòu)包括血管重構(gòu)和心肌重構(gòu)，是一種嚴(yán)重的高血壓并發(fā)癥。心肌重構(gòu)雖然在病程初為有利的適應(yīng)性反應(yīng)，但長時(shí)間的心肌肥大將導(dǎo)致擴(kuò)張性心肌病、心力衰竭甚至死亡［4］。腎血管性高血壓（renovascular hypertension，RVH）是各種原因造成腎動(dòng)脈狹窄或阻塞后產(chǎn)生的繼發(fā)性高血壓，是僅次于腎臟疾病導(dǎo)致繼發(fā)性高血壓的第2位原因。

表皮生長因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）是一種受體型蛋白酪氨酸激酶，廣泛表達(dá)于包括心臟和血管的正常組織，是調(diào)控許多基本的細(xì)胞生物過程如分化、增殖、遷移等的重要因子［5］。EGFR過表達(dá)或過度刺激可以導(dǎo)致細(xì)胞生長紊亂和組織重構(gòu)。雖然研究表明，EGFR參與了某些繼發(fā)性高血壓所致的心肌肥大和血管平滑肌細(xì)胞增殖的發(fā)生發(fā)展［6］，但在腎血管性高血壓中的作用迄今尚未見報(bào)道。因此，本實(shí)驗(yàn)采用“兩腎一夾”（two-kidney，one-clip，2K1C）Goldblatt大鼠模型，探討EGFR在腎血管性高血壓心血管重構(gòu)中的作用及機(jī)制。

1　材料與方法

1.1試劑與儀器抗EGFR、ERK兔多克隆抗體（Santa Cruz），抗p-ERK兔多克隆抗體（Cell Signa-ling），抗GAPDH鼠單克隆抗體（Abcam），BCA蛋白測(cè)定試劑盒、辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔IgG、羊抗小鼠IgG（Thermo），超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒（碧云天生物技術(shù)研究所），UltraSensitiveTMS-P免疫組化染色試劑盒（福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司），其余試劑為國產(chǎn)分析純。智能無創(chuàng)血壓計(jì)（Softron BP-98A，日本軟隆株式會(huì)社），顯微鏡成像系統(tǒng)（Olympus）。

1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物清潔級(jí)♂Sprague-Dawley（SD）大鼠，體質(zhì)量180～200 g［許可證SCXK（鄂）No.2004-0007］，由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，自由飲水?dāng)z食，室溫控制在23～25℃。適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組和2K1C模型組。

1.3“兩腎一夾”高血壓大鼠模型的建立按照文獻(xiàn)中經(jīng)典的腎動(dòng)脈鉗夾方法制備2K1C Goldblatt腎性高血壓大鼠模型，具體操作如下［7］：SD大鼠手術(shù)前禁食12 h，質(zhì)量濃度為200 g·L-1烏拉坦腹腔注射麻醉后，常規(guī)腹部備皮，消毒，于劍突下1.5 cm行腹部正中切口暴露左腎，在近腹主動(dòng)脈端左腎動(dòng)脈起始部0.5 cm處放置內(nèi)徑為0.20～0.25 mm的自制U型鋁夾，右側(cè)腎臟不觸及。術(shù)后3日內(nèi)肌注青霉素30 000 U/只。假手術(shù)組大鼠除不套鋁夾外，其余手術(shù)步驟均相同。術(shù)后每周測(cè)量大鼠體重和血壓各1次，共飼養(yǎng)6周。

1.4大鼠血壓的測(cè)定采用智能無創(chuàng)血壓計(jì)檢測(cè)大鼠清醒狀態(tài)下尾動(dòng)脈血壓，測(cè)量前大鼠全身和鼠尾局部預(yù)熱10～15 min后開始測(cè)量。每只大鼠重復(fù)測(cè)量5次，每次間隔不少于1 min，取平均值［8］。術(shù)前預(yù)先測(cè)定收縮壓3 d。然后，在每周的同一時(shí)刻點(diǎn)檢測(cè)血壓直到實(shí)驗(yàn)結(jié)束。術(shù)前最后一次血壓作為統(tǒng)計(jì)學(xué)比較時(shí)的基礎(chǔ)血壓。術(shù)前收縮壓以11.0～16.0 kPa為正常范圍，術(shù)后血壓較術(shù)前高4.0 kPa以上并且同時(shí)大于或等于20.0 kPa，手術(shù)側(cè)腎臟無梗死、萎縮或纖維化者為高血壓模型復(fù)制成功［9］。

1.5左室肥大的檢測(cè)所有大鼠6周末處死后迅速開胸取出心臟，4℃預(yù)冷的生理鹽水清洗、濾紙吸干，稱重，計(jì)算心指數(shù)［心臟重量（heart weight，HW）與體重（body weight，BW）之比］。然后去除大血管殘根、左、右心房和右心室游離壁，保留左心室及室間隔，電子天平精確稱重作為左心室重量。左心室重量指數(shù)（left ventricular mass index，LVMI）為左心室重量（left ventricular weight，LVW）與體重（body weight，BW）之比。計(jì)算左心室重量指數(shù)和心指數(shù)以評(píng)價(jià)左心室肥厚程度。

1.6心臟和胸主動(dòng)脈的病理形態(tài)學(xué)檢測(cè)大鼠處死后，迅速取出胸主動(dòng)脈和心臟置于預(yù)冷的質(zhì)量濃度為40 g·L-1多聚甲醛中4℃固定24 h。石蠟包埋、切片、蘇木精-伊紅染色，光學(xué)顯微鏡下觀察并拍片，ImageJ軟件測(cè)量胸主動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度（intima-media thickness，IMT），即從管腔內(nèi)表面到中膜和外膜之間的內(nèi)表面的距離，每條動(dòng)脈隨機(jī)取5個(gè)橫切面，取平均值。另外，心肌纖維化的程度采用Masson染色法來檢測(cè)［10］。

1.7免疫組化檢測(cè)大鼠主動(dòng)脈EGFR采用即用型S-P免疫組化染色試劑盒，步驟如下：脫蠟、水化、抗原修復(fù)，每張切片依次加入50 μL過氧化酶阻斷溶液、正常動(dòng)物血清孵育10 min后，抗EGFR抗體4℃孵育過夜。次日依次加入生物素標(biāo)記的IgG抗體和鏈霉菌抗生物素-過氧化物酶溶液，室溫下孵育15 min。最后加入二甲苯聯(lián)苯胺（DAB）溶液，顯微鏡下觀察3～10 min后終止顯色反應(yīng)，蘇木精復(fù)染、脫水、透明、封片。結(jié)果判定：EGFR陽性表達(dá)細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞膜呈棕黃色顆粒，陰性表達(dá)細(xì)胞呈藍(lán)紫色。

1.8心肌EGFR、p-ERK和ERK的Western blot檢測(cè)心肌Western blot的分析如前所述［11］。取大鼠心尖部組織約100 mg剪碎，加入RIPA裂解液在冰浴上勻漿。4℃ 12 000×g離心收集上清液，BCA法測(cè)定蛋白含量。50 μg蛋白樣品加樣，恒壓電泳后轉(zhuǎn)移至NC膜上，牛血清白蛋白中室溫封閉1 h。NC膜分別用兔抗EGFR、p-ERK、ERK抗體、鼠抗GAPDH抗體4℃孵育過夜，辣根過氧化物酶標(biāo)記IgG室溫孵育1 h；ECL顯色、壓片。采用ImageJ圖像分析軟件進(jìn)行半定量分析。

2　結(jié)果

在2K1C大鼠組，3只大鼠在實(shí)驗(yàn)過程中死亡，另外3只沒有出現(xiàn)高血壓排除在研究之外。因此，共有20只大鼠用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)，其中2K1C組9只，假手術(shù)組11只。

精準(zhǔn)扶貧的根本是公共財(cái)政資金。贛州作為一個(gè)欠發(fā)達(dá)地區(qū)，怎樣把有限的資金集中在刀刃上，是一個(gè)很大的考驗(yàn)。

2.12K1C大鼠收縮壓2K1C和假手術(shù)組所有大鼠基礎(chǔ)血壓值相似［（15.5±1.8）kPa vs（15.7± 2.0）kPa］，術(shù)后2周，2K1C大鼠收縮壓急劇升高達(dá)21.3 kPa以上，與假手術(shù)組相比差異有顯著性［（22.1±5.8）kPa vs（15.6±1.7）kPa，P＜0.01］，至6周末實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，2K1C組大鼠收縮壓較基礎(chǔ)血壓升高33.6%（Fig 1，P＜0.01），以上結(jié)果表明腎血管性高血壓大鼠模型建立成功。

Fig 1　Systolic blood pressure measured with a tail-cuff at pre-and post 2K1C operation periods

2.22K1C大鼠左心室重量指數(shù)的變化左心室重量指數(shù)（LVMI）是反映左室肥大最直觀的指標(biāo)之一。所有大鼠生長情況相似，各組之間實(shí)驗(yàn)?zāi)┑捏w重和心指數(shù)沒有明顯差異（數(shù)據(jù)未顯示）。與假手術(shù)組相比，2K1C大鼠左心室重量指數(shù)增加了18%左右（Tab 1、Fig 2A，P＜0.05）。

Tab 1　Changes of left ventricular mass index at pre-and post 2K1C operation periods

2.3心肌HE染色心肌HE染色結(jié)果如Fig 2B所示，假手術(shù)組心肌纖維排列成束，心肌細(xì)胞染色均勻，分支走行清楚；心肌細(xì)胞的間隙均勻，肌束內(nèi)見少量結(jié)締組織。腎血管性高血壓大鼠心肌存在多種高血壓和心肌梗死的病理改變。心肌細(xì)胞排列紊亂，分支走行不規(guī)則，染色不均勻，心肌纖維腫脹甚至斷裂，細(xì)胞間隙變窄，肌束內(nèi)可見局灶性纖維組織增生，炎細(xì)胞浸潤。在高倍視野中可見心肌細(xì)胞肥大、壞死，細(xì)胞核消失，空泡形成。

2.4心肌膠原纖維心臟膠原纖維沉積導(dǎo)致的纖維化如Fig 2C所示。Masson染色的心肌切片光鏡下觀察，膠原纖維呈藍(lán)色，心肌細(xì)胞呈紅色。假手術(shù)組大鼠心肌壁內(nèi)小血管外膜或周圍可見少量膠原纖維，走行規(guī)則，不向周圍間質(zhì)延伸。心肌間質(zhì)內(nèi)僅有少量膠原沉積。高血壓大鼠心肌內(nèi)血管周圍的膠原增生明顯，長距離延伸至間質(zhì)中。心肌細(xì)胞間膠原異常堆積，排列散亂，呈柵欄狀緊裹心肌細(xì)胞。

Fig 2　Changes of heart in 2K1C rats

2.5腎血管性高血壓大鼠胸主動(dòng)脈病理形態(tài)學(xué)變化實(shí)驗(yàn)6周末，胸主動(dòng)脈HE表明（Fig 3A），假手術(shù)組胸主動(dòng)脈各層結(jié)構(gòu)正常，中膜可見完整、豐富的彈力纖維。腎血管性高血壓大鼠胸主動(dòng)脈內(nèi)膜有斷裂；中膜細(xì)胞排列紊亂，較明顯的細(xì)胞腫脹、疏松、淡染，內(nèi)膜下細(xì)胞空泡樣變、胞核固縮；外膜較多炎細(xì)胞浸潤，以淋巴細(xì)胞為主；病變嚴(yán)重處中膜全層空泡樣變，中膜明顯變薄，彈力纖維消失，細(xì)胞核淡染，溶解消失、結(jié)構(gòu)破壞等梗死樣變。除此之外，2K1C高血壓模型組的血管中膜厚度高于假手術(shù)組（Fig 3B，P＜0.05）。

Fig 3　Morphological changes of aorta in 2K1C rats（n=6）

2.62K1C大鼠心肌EGFR的表達(dá)為了探討EGFR是否參與了2K1C腎血管性高血壓大鼠心血管的重構(gòu)，本實(shí)驗(yàn)采用Western blot的方法檢測(cè)了大鼠心肌EGFR蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比，2K1C大鼠心肌EGFR表達(dá)明顯增加（Fig 4A、4B，P＜0.05）。

為評(píng)價(jià)EGFR表達(dá)與血壓的相關(guān)性，按照收縮壓的水平將2K1C大鼠分為2組：第1組收縮壓低于20.0 kPa，第2組收縮壓高于20.0 kPa，每組的平均血壓分別為（18.1±0.9）kPa（n=4）和（23.0± 4.4）kPa（n=5）。每組EGFR與GAPDH的比值如Fig 4C所示。與假手術(shù)組相比，兩組EGFR的表達(dá)均增加，而且第2組的EGFR/GAPDH的比值要高于第1組（P＜0.05）。以上結(jié)果表明，隨著血壓升高，心肌EGFR蛋白的表達(dá)也相應(yīng)增強(qiáng)。

2.72K1C大鼠心肌ERK的表達(dá)ERK 1/2是EGFR的下游激酶，同時(shí)ERK 1/2信號(hào)通路是參與細(xì)胞增殖的重要途徑。研究發(fā)現(xiàn)，ERK 1/2在心肌肥大和纖維化的發(fā)生發(fā)展中具有重要的作用［12］。

Fig 4　Change of EGFR expression in rat heart after 2K1C operation.

因此，我們進(jìn)一步探討了MAPK-ERK信號(hào)通路是否參與了腎血管性高血壓誘導(dǎo)的心肌重構(gòu)。Western blot（Fig 5A）和定量分析（Fig 5B、5C）的結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比，2K1C高血壓大鼠心臟ERK的磷酸化水平增加（P＜0.01），其中第2組pERK/ERK的比值高于第1組（P＜0.01）。這些結(jié)果表明，2K1C高血壓大鼠EGFR的下游激酶ERK表達(dá)也發(fā)生了相應(yīng)改變。

Fig 5　Change of the activation of ERK in rat heart after 2K1C operation

2.82K1C大鼠胸主動(dòng)脈EGFR的表達(dá)我們進(jìn)一步檢測(cè)了胸主動(dòng)脈EGFR的表達(dá)。免疫組化分析顯示，2K1C大鼠胸主動(dòng)脈EGFR表達(dá)以血壓依賴性的方式明顯增強(qiáng)，尤其在血管的內(nèi)膜和中膜。反之，假手術(shù)組EGFR表達(dá)水平較低（Fig 6）。此結(jié)果提示EGFR可能參與了2K1C腎血管性高血壓血管重構(gòu)的發(fā)生。

Fig 6　Change of EGFR expression in rat aorta after 2K1C operation

3　討論

本研究結(jié)果表明，2K1C大鼠心肌和主動(dòng)脈中EGFR及其下游激酶ERK 1/2表達(dá)上調(diào)，并且與高血壓的嚴(yán)重程度相關(guān)。EGFR可能參與了腎血管性高血壓大鼠心血管重構(gòu)的發(fā)生和發(fā)展。

腎血管性高血壓的發(fā)病率為1%～10%，在惡性高血壓合并腎功能不全者的患者可達(dá)30% ～40%。由于這類高血壓可以通過內(nèi)外科治療得到有效控制，腎臟病變和腎功能在一定程度上具有可逆性，因此深受臨床醫(yī)生的重視?！皟赡I一夾”型腎血管性高血壓大鼠模型成模迅速穩(wěn)定、操作簡單、存活率高，而且易并發(fā)左室肥厚，在高血壓動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用廣泛。由于腎臟灌注壓下降，導(dǎo)致腎素過度釋放并持續(xù)激活腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)，這種情況類似2K1C的高血壓動(dòng)物模型的發(fā)生機(jī)制。本研究采用高腎素型高血壓的2K1C大鼠模型，術(shù)后6周，15只中有9只形成了穩(wěn)定的高血壓。

心血管重構(gòu)是高血壓性心血管疾病的共同病理基礎(chǔ)，也是決定高血壓患者預(yù)后的主要因素之一。在一系列病理學(xué)參數(shù)中，LVMI是反映左室肥大最直觀的指標(biāo)之一，動(dòng)脈中膜厚度最能直接反映血管壁的重構(gòu)程度。在本實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)，2K1C高血壓大鼠不僅左心室指數(shù)增大，心肌間質(zhì)和血管周圍均存在明顯纖維化，而且主動(dòng)脈中膜明顯增厚，提示“兩腎一夾”高血壓模型伴有明顯的心血管重構(gòu)現(xiàn)象。

EGFR是一種受體型酪氨酸激酶，高度表達(dá)于多種腫瘤細(xì)胞上，在調(diào)節(jié)惡性腫瘤的生長和增殖中起著重要的作用。因此，EGFR與腫瘤的相關(guān)性以及以它為靶點(diǎn)的腫瘤靶向治療一直是腫瘤研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)問題［13］。近來有研究顯示，EGFR對(duì)于促進(jìn)胚胎期心臟的發(fā)育及維持成體心臟的功能方面都具有重要的意義，參與了多種心臟病理過程的發(fā)生發(fā)展［14-15］。血管緊張素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）通過激活生長相關(guān)性信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在心血管重構(gòu)中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。研究發(fā)現(xiàn)，AngⅡ誘導(dǎo)有絲分裂，促進(jìn)心肌生長是由EGFR活化介導(dǎo)的。本實(shí)驗(yàn)的Western blot和免疫組化的結(jié)果表明，2K1C大鼠心肌和主動(dòng)脈的EGFR表達(dá)明顯上調(diào)，而且與高血壓的程度存在著相關(guān)性。這些結(jié)果為EGFR參與腎血管性高血壓所致的心血管重構(gòu)提供了直接證據(jù)。

對(duì)各種生長因子來說，酪氨酸激酶激活在有絲分裂的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中是基本的步驟。在EGFR下游的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中，MAPKs/ERK通路是介導(dǎo)細(xì)胞增殖、分化最重要的酪氨酸激酶通路。大量研究報(bào)道，EGFR通過激活ERK在自發(fā)性高血壓和Ang II誘導(dǎo)的左室肥大中起著重要的作用。我們的研究也發(fā)現(xiàn)，2K1C大鼠心肌中磷酸化ERK的表達(dá)水平呈血壓依賴性的上調(diào)，其變化趨勢(shì)與EGFR一致。因此，EGFR參與腎血管性高血壓心血管重構(gòu)的機(jī)制可能部分是通過激活MAPK/ERK信號(hào)通路，EGFR可能是防治腎血管性高血壓心血管重構(gòu)的新靶點(diǎn)。

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Epidermal growth factor receptor involvement in
cardiovascular remodeling in renovascular hypertensive rats

FENG Mei1，2，TENG Wen-hao2，JIANG Wen-wen2，XIANG Ji-zhou2，3，LIU Hui2，3，YANG Lei4
（1.School of Pharmaceutical Sciences，Guangzhou Medical University，Guangzhou511436，China；2.Dept of Pharmacology，School of Basic Medicine，Tongji Medical College，Huazhong University of Science and Technology，Wuhan430030，China；3.Key Laboratory for Drug Target Researches and Pharmacodynamic Evaluation of Hubei Province，Wuhan430030，China；4.Dept of Anesthesiology，Union Hospital，Tongji Medical College，Huazhong University of Science and Technology，Wuhan430022，China）

AimTo determine the possibilities andmechanisms of EGFR，a receptor protein tyrosine kinaseassociated with many important cellular processes responsible for cardiovascular remodeling in renovascular hypertensive rats.Methods2K1C hypertensive rats were used in the present study.Blood pressure was measured with the tail-cuff method.LVMI and histopathological changes in the cardiovascular system were analysed.EGFR expressions of aorta and myocardium as well as phosphorylation levels of ERK in hypertensive rats were detected by immunohistochemistry and Western blot analysis，respectively.ResultsSystolic blood pressure was markedly increased 2 weeks after 2K1C surgery.Cardiovascular remodeling induced by hypertension was confirmed by elevated LVMI，proliferation of collagen fibers in myocardial interstitium，histopathological changes in cardiovascular system and increased IMT of thoracic aorta 6 weeks after 2K1C surgery.Compared with sham rats，EGFR expression in the ventricular myocardium of 2K1C rats was significantly increased at 6 weeks（P＜0.05），and the EGFR/GAPDH ratio was higher in 2K1C rats with higher systolic blood pressure（P＜0.05）.Phosphorylation level of ERK 1/2 was upregulated correspondingly in 2K1C rats（P＜0.01）.Increased EGFR expression was also found in aortas of 2K1C rats，particularly in tunica intima and media.ConclusionEGFR and its down-stream kinases ERK 1/2 are involved in cardiovascular remodeling in association with the severity of hypertension in renovascular hypertensive rats.

two-kidney，one-clip（2K1C）；renovascular hypertension；cardiovascular remodeling；epidermal growth factor receptor；mitogen-activated protein kinases；rat

10.3969/j.issn.1001-1978.2016.05.008

A

1001-1978（2016）05-0625-07

R-332；R331.31；R331.32；R392.11；R544.1；R977.3

2016-01-25，

2016-02-26

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（No 81370299）；中央高?；A(chǔ)研究基金（No 2012QN135）；廣州醫(yī)科大學(xué)博士啟動(dòng)基金（No 2012C04）

馮梅（1971-），女，博士，講師，研究方向：心血管藥理學(xué)，E-mail：fengmei20134@yahoo.com；楊磊（1973-），男，碩士，副主任醫(yī)師，研究方向：心血管麻醉學(xué)，通訊作者，E-mail：yanglliuh@sina.com