張瑩瑩，薛東江

(魯南制藥集團(tuán)股份有限公司，山東 臨沂 273400)

白藜蘆醇乳劑的制備

張瑩瑩，薛東江

(魯南制藥集團(tuán)股份有限公司，山東 臨沂 273400)

目的：采用高速分散-探頭超聲法制備白藜蘆醇注射乳劑，并對其進(jìn)行處方及工藝優(yōu)化。方法：以穩(wěn)定常數(shù)為考察指標(biāo)作正交試驗(yàn)，篩選最佳處方和制備工藝。結(jié)果：最后確定最優(yōu)處方為：0.1 %的白藜蘆醇、油酸0.3 %的pluronic F68、0.3 %的油酸、1.2 %磷脂、2.25 %甘油和10 %大豆油；最優(yōu)工藝為：乳化溫度70 ℃、高速分散時間8 min，轉(zhuǎn)速11000 r/min，超聲功率為400 w，超聲時間5 min。結(jié)論：該處方工藝可行，所制備的白藜蘆醇乳劑具有較高穩(wěn)定性。

白藜蘆醇；乳劑；高速分散-探頭超聲法

注射用乳劑是由注射用乳化劑、注射用水、注射用油及其它輔料組成，具有良好的生物相容性[1]。作為靜脈給藥載體，乳劑解決了難溶性藥物的靜注問題，增加藥物的吸收；載藥量大；在水包油型乳劑中，藥物幾乎都存在于油相和水包油的界面層中，避免了與水的直接接觸，從而提高藥物穩(wěn)定性；延長藥物作用時間；降低注射時的刺激性；使藥物緩釋、控釋及具有一定的靶向性等特點(diǎn)。

白藜蘆醇[2](Resveratrol，簡稱Res)化學(xué)名稱為3，4，5一三羥基二苯乙烯，是含芪類結(jié)構(gòu)的二苯乙烯芪類、非黃酮類多酚物質(zhì)。大量研究表明白藜蘆醇對心血管疾病有明顯的治療和預(yù)防作用，具有抗突變、抗氧化、降低血小板聚集等生物活性。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)表明它還能夠誘導(dǎo)大部分腫瘤細(xì)胞凋亡，具有抗腫瘤活性，被喻為又一新的綠色抗癌藥物[3]。

由于白藜蘆醇難溶于水，不易被吸收，給藥后體內(nèi)消除半衰期短，在血液中較快的清除[4]。所以本文將白藜蘆醇制成乳劑，延長體內(nèi)作用時間，緩慢釋藥，促進(jìn)藥物吸收，提高生物利用度，增強(qiáng)它的藥理作用，降低毒性。

1 儀器及試藥

1.1 儀器

XS205-DU分析天平；高效液相色譜儀；JY92-llN型超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)；0516-1臺式離心機(jī)；FJ-200高速分散勻質(zhì)機(jī)

1.2 試藥及試劑

白藜蘆醇(鄭州荔諾生物科技有限公司，含量98 %)；注射用大豆油(鐵嶺北亞藥用油有限公司)；注射用大豆磷脂(上海太偉藥業(yè)藥業(yè)有限公司)；注射用普朗尼克F-68(德國BASF)；注射用甘油(浙江遂昌惠康藥業(yè)有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 白藜蘆醇乳劑含量測定方法的建立

2.1.1 儲備液的制備

精密稱取白藜蘆醇乳劑標(biāo)準(zhǔn)品25 mg于250 mL容量瓶中，加甲醇適量超聲使溶解，用甲醇稀釋至刻度，混勻，得0.1 mg/mL的白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品儲備液。

2.1.2 色譜條件

色譜柱：Ultrasphere ODS C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流動相：甲醇：水(80：20)；流速：0.8 mL/min；檢測波長：306 nm；進(jìn)樣量：20 μL。

2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取100 μg/mL的白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品儲備液10 mL置于100 mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，得濃度為10?g/mL的白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別精密吸取白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)品儲備液0.05 mL、1.0 mL、5.0 mL、10.0 mL、15.0 mL、20.0 mL、25.0 mL置于100 mL容量瓶中，以甲醇定容至刻度，搖勻，得濃度分別為0.05 μg/mL、1.0 μg/mL、5.0 μg/mL、10.0 μg/mL、15.0 μg/mL、20.0 μg/mL、25.0 μg/mL的系列溶液，分別進(jìn)樣20 μL，以峰面積(A)為縱坐標(biāo)。以濃度(C)為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：A=109509C+2311.9(R=0.9999)，白藜蘆醇在濃度0.05～25 μg/mL范圍內(nèi)，峰面積與測定濃度曲線呈良好的線性關(guān)系，回收率高，重現(xiàn)性好，能準(zhǔn)確快速的進(jìn)行含量測定。

2.2 注射乳劑的質(zhì)量評價指標(biāo)

2.2.1 外觀

乳白色、沒有油滴、不分層、流動性好為合格乳劑。

2.2.2 離心穩(wěn)定性

將乳劑5 mL置離心管以4500 r/min離心10 min，微量進(jìn)樣器精密量取離心管底部樣50 μL置于10 mL量瓶中，用蒸餾水(過0.22 μm微孔濾膜)稀釋定容，用蒸餾水做空白對照，500 nm處用紫外一可見分光光度計測定吸收度(n=3)，記做A。未離心的乳劑用相同方法測定吸收度(n=3)，記做A0。按Ke =︱A0-A︱/A0×100%來計算乳劑的穩(wěn)定性參數(shù)Ke。計算所得的Ke值越小，則乳劑中分散乳滴在離心力作用下上浮的越少，說明乳劑越穩(wěn)定。

2.2.3 粒徑大小及粒徑分布

注射乳劑屬于非均相體系，存在物理穩(wěn)定性的問題，所以應(yīng)該把乳劑的粒徑大小和分布作為控制乳劑質(zhì)量的重要指標(biāo)。

2.3 白藜蘆醇乳劑正交設(shè)計優(yōu)化處方工藝

經(jīng)過單因素考察和多次預(yù)試驗(yàn)，確定了以下處方組成：白藜蘆醇0.1 %，甘油2.25 %，油酸0.3 %。以穩(wěn)定性常數(shù)為考察指標(biāo)，用正交設(shè)計考察磷脂的用量(A)、F68的用量(B)、油相比例(C)的不同水平對乳劑穩(wěn)定性的影響。

表1 因素水平表

根據(jù)以上各因素、水平按L9(3*4)安排試驗(yàn)，結(jié)果見表2。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果表

表2(續(xù))

以穩(wěn)定性常數(shù)為指標(biāo)對正交設(shè)計結(jié)果進(jìn)行評價，由極差R可知， B

最優(yōu)組合為油相的用量為10 %，磷脂用量為1.2 %，pluronicF68用量為0.3 %，油酸的用量為0.3 %，甘油的用量為2.25 %。

2.4 工藝因素考察

在單因素考察的基礎(chǔ)上，固定乳劑制備溫度70 ℃，以穩(wěn)定性常數(shù)為評價指標(biāo)對制備過程重要的工藝因素采用正交設(shè)計?？疾熘苽鋾r勻質(zhì)速度(A)、高速勻質(zhì)時間(B)、超聲功率(C)和超聲時間(D)的不同水平對乳劑穩(wěn)定性的影響。

表3 因素水平表

根據(jù)以上各因素、水平按L9(3*4)安排試驗(yàn)，結(jié)果見表4。

表4 正交試驗(yàn)結(jié)果表

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，各因素的影響程度為A>B>D>C，即在乳劑的制備工藝中高速勻化的轉(zhuǎn)速對穩(wěn)定性影響最大，其次是高速勻化的時間，超聲功率和超聲時間。最佳工藝組合為：A1B1C2D3。即：高速勻化轉(zhuǎn)速為11000 r/min，勻化時間為8 min，超聲時間為5 min，超聲功率為400 W。

3 小結(jié)與討論

(1) 研究了白藜蘆醇乳劑的處方及制備工藝。以穩(wěn)定性常數(shù)為考察指標(biāo)，高速攪拌-探頭超聲兩步乳化法制備白藜蘆醇乳劑。乳化劑在最佳乳化溫度時，油水界面上兩種復(fù)合乳化劑緊緊排列形成了穩(wěn)定的復(fù)合界面膜。由于磷脂存在著相轉(zhuǎn)化溫度，在其相轉(zhuǎn)化溫度附近制備的乳劑粒徑較小，乳劑的穩(wěn)定性較高，另外，適宜的乳化溫度能使油相的粘度降低，得到的乳劑粒徑小且均勻。

(2)單獨(dú)使用磷脂作為乳化劑時所形成的單層乳化膜流動性較大，這樣油相就很易通過乳化膜間隙向水相中擴(kuò)散。加入F68作為輔助乳化劑時，此時具有較小親水端的磷脂和F68的長PEO嵌段組成了很厚的親水界面層，就克服了單層乳化膜的不足，這樣就在油水界面形成較厚的復(fù)合乳化膜，增強(qiáng)乳劑的穩(wěn)定性。

[1] 游榮輝,叢龍波,袁海龍.靜脈亞微乳研究進(jìn)展及其在現(xiàn)代中藥研究中的應(yīng)用[J].中草藥,2007, 38(6):946-948.

[2] 康彥芳，封軍來.白藜蘆醇藥理作用及制備方法[J] .糧食與油脂，2006(11)：37-39.

[3] 向 敏，匡小東．白黎蘆醇及其藥理保健功能的研究[J] .中國食品添加劑，2004(5)：16-20．

[4] 李延華，王偉軍.白藜蘆醇的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用前景[J] .中國釀造，2008(4)：10-12.

(本文文獻(xiàn)格式：張瑩瑩，薛東江.白藜蘆醇乳劑的制備[J].山東化工，2016，45(12)：20-21，24.)

The Preparation of Resveratrol Emulsion

Zhang Yingying, Xue Dongjiang

(Lunan Pharmaceutical Company Ltd., Linyi 273400, China)

Objective:Preparation of Resveratrol emulsion for two-step emulsification(high speed stirring-ultrasonic wave).Methods: The Ke as investigation of formulation factors and process factors investigated, and the orthogonal design optimization formulation. Results:The optimized formula was composed of 0.1 % Resveratrol，10 % admixture of Soybean oil, 0.3 %Pluronic F68，0.3 % oleic acid and 1.2 % SPC astheemulsifying agent, 2.25 %glycerol as the is osmotic adjusting agent. The optimized manufacturing parameters: working temperature was 70 ℃, stirring time was 8 min,stirring speed was 11000 r/min, ultrasonic power was 400 w, ultrasonic time was 5 min.Conclusion:The formulation technology is feasible, the preparation of Resveratrol emulsion with high stability.

Resveratrol; emulsion; high speed stirring-ultrasonic wave

2016-01-06

張瑩瑩(1984—)，女，助理工程師，從事新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。

TQ469

A

1008-021X(2016)12-0020-02