宋文菲　楊娟　余玉生　胡宗文　王艷輝　張學(xué)文（云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所，蒙自661101）

蜂螨防治對西方蜜蜂人工授精蜂群的影響

宋文菲楊娟余玉生胡宗文王艷輝張學(xué)文
（云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶桑蜜蜂研究所，蒙自661101）

運用蜜蜂人工授精技術(shù)對12群西方蜜蜂蜂王進行人為控制的交尾，采用扣王斷子結(jié)合藥物的方式進行治螨，研究治螨措施對蜂王人工授精蜂群后期管理的影響。結(jié)果顯示：扣王斷子的治螨措施嚴(yán)重影響人工授精蜂群的后期群勢發(fā)展與生存，導(dǎo)致人工授精成功的8群蜂中只剩下1群群勢發(fā)展較好，保存率僅有12.5%。因此，在螨害嚴(yán)重地區(qū)，進行蜂王人工授精的同時不宜采用扣王斷子結(jié)合藥物的措施治螨。

西方蜜蜂；人工授精；蜂螨；群勢

蜜蜂人工授精是近40年發(fā)展起來的一門新技術(shù)，為蜜蜂育種和蜜蜂遺傳研究提供了可靠、有效的實驗手段。人工授精（instrumental insemination）也稱器械授精，即通過器械裝置把1只或多只雄蜂的精液注射入蜂王輸卵管內(nèi)使其受精[1]。該項技術(shù)真正發(fā)展于1926~ 1947年，美國科學(xué)家R.L.沃森被世界公認(rèn)為現(xiàn)代蜜蜂人工授精技術(shù)的創(chuàng)始人[2]。而中國開展這項技術(shù)的研究始于1959年，20世紀(jì)80年代后，已達到國際先進水平，利用該技術(shù)取得了單雄授精、單雄多雌授精和自體授精的新突破[3]，在育種及保種工作中占有重要地位。蜂螨是一類對世界養(yǎng)蜂業(yè)危害巨大的蜜蜂寄生蟲，通常的防治措施有：物理防治（熱處理、細(xì)粉末處理、分蜂處理等）；化學(xué)防治（雙甲脒等殺螨劑）；生物防治（生防微生物等）等[4]。其中扣王斷子結(jié)合化學(xué)防治的效果比較好，因此大部分地區(qū)治螨普遍采用此種方法。云南是螨害較重地區(qū)之一，全年治螨任務(wù)比較繁重，但根據(jù)生產(chǎn)與研究需要，治螨的同時也會進行蜜蜂人工授精，而采用的治螨措施對人工授精蜂群會產(chǎn)生怎樣的影響卻鮮有報道。本文研究對西方蜜蜂進行蜂王人工授精后采取扣王斷子結(jié)合藥物措施治螨的蜂群群勢發(fā)展情況，以期為蜂王人工授精及蜜蜂育種工作提供參考。

1　材料與方法

1.1材料

試驗蜂種為西方蜜蜂（Apis mellifera）；試驗蜂群共12群，每群初始群勢為0.5～1.5脾成蜂，其中3群為0.5脾成蜂，1群為1.5脾成蜂，8群為1脾成蜂。

1.2試驗時間與地點

2014年8月12日至13日進行人工授精，2014年 8月19日至28日先后將蜂王介紹入12群蜂中；地點為云南省紅河州蒙自市草壩鎮(zhèn)云南省農(nóng)科院蠶蜂所原種場內(nèi)的西方蜜蜂試驗蜂場。

1.3試驗器材

20 m l一次性注射器2支，100 μl采精器（改裝過的進樣器）2支，500 ml 75%醫(yī)用酒精1瓶，長方形毛巾，自制捕雄蜂籠4~5個，滅菌培養(yǎng)皿1個，醫(yī)用酒精棉，滅菌鑷子1把，250 ml生理鹽水1瓶，醫(yī)用氧氣瓶1個（內(nèi)部充滿二氧化碳）。

1.4試驗方法與步驟

首先，對試驗操作間及人工授精儀進行15 min的紫外滅菌消毒，滅菌的同時，捕捉巢脾邊緣及蜂箱邊緣的雄蜂（這些雄蜂接近性成熟，易于采集精液）；放置15 min后進入操作間，用75%醫(yī)用酒精浸濕毛巾，將儀器和操作臺擦拭干凈，用75%醫(yī)用酒精清洗所有器材；將生理鹽水與抗生素以30%比例配比混勻，用混勻液清洗采精器4~5遍，然后注入整管的混勻液，管內(nèi)不允許留有氣泡，將采精器擺放在儀器上。開始采集精液，先將采精器吸入一小段空氣（即兩個空格，4 μl），取雄蜂，用大拇指、食指揉捏胸部進行刺激，另一食指從后面向前推，取成熟雄蜂的精液，不能吸到粘液，精液與混勻液間留有一點空隙，不能混合在一起[5]。待精液采集完，用75%醫(yī)用酒精擦拭背腹鉤，將儀器擺正調(diào)節(jié)好，將蜂王放入麻醉室內(nèi)，用背腹鉤將其蜇針腔拉開，找到陰道口，用探針輔助著將裝有精液的注射管伸入進去，第一次注射4 μl左右，然后將蜂王放回扣王籠里。第二天重復(fù)第一天的步驟，繼續(xù)注射4 μl精液。

1.5授精后的管理

表1　人工授精成功蜂群治螨前后的群勢比較

將蜂王放入扣王籠放入培育處女王的核群內(nèi)，兩到三天后陸續(xù)介紹入蜂群內(nèi)。同時，9月5日至10月8日，飼喂蜂花粉以補充蜂群。

2　結(jié)果與分析

2.1蜂王產(chǎn)卵情況

8月25日，最早介紹入蜂群中的蜂王開始產(chǎn)卵，之后陸續(xù)有蜂王開始產(chǎn)卵，至28日，先期產(chǎn)卵的蜂群無加高巢房，初步判斷人工授精成功。9月11日，檢查蜂群，8群蜂的蜂王產(chǎn)卵正常且整齊，都已封蓋，確定為工蜂，人工授精成功。剩下4群蜂產(chǎn)卵情況不穩(wěn)定，混雜雄蜂卵。圖1和圖2分別是人工授精蜂王的狀態(tài)和產(chǎn)卵整齊的蜂群子脾封蓋的情況。

圖1　人工授精的蜂王

圖2　封蓋的子脾

2.2治螨對人工授精蜂群群勢的影響

如表1所示，10月8日，檢查蜂群，8群蜂群勢發(fā)展良好，之前產(chǎn)卵不穩(wěn)定的4群蜂予以剔除。10月10日進行扣王斷子結(jié)合藥物治螨，扣王16~17天后，原本發(fā)展良好的蜂群脾數(shù)縮至1~2脾，成蜂量更是不足，有的只有0.5脾。為了越冬并便于群勢發(fā)展，11月14日隨蜂場轉(zhuǎn)地到氣溫比較高的地方。12月19日檢查蜂群，蜂螨危害依然嚴(yán)重，蜂王已不產(chǎn)子，人工授精的蜂群已接近毀滅。

3　討論

本試驗結(jié)果顯示采取扣王斷子結(jié)合藥物的治螨措施嚴(yán)重影響蜂王人工授精蜂群的后期群勢發(fā)展與管理?？弁鯏嘧颖旧砭蜁绊懛淙旱姆敝撑c發(fā)展，加上人工授精蜂群本身已改變了蜂群的生物學(xué)特性，也加重了影響程度。因此，在螨害嚴(yán)重的地區(qū)進行蜜蜂人工授精工作時，我們建議不要采用扣王斷子結(jié)合藥物的治螨措施，以減小人工授精蜂群的損失，保證人工授精工作順利完成。推測原因，作者認(rèn)為有兩點，一是后期管理還不到位；二是螨害影響了雄蜂的精液質(zhì)量。而究其深層次的原因，還需進一步研究治螨后的人工授精蜂王與正常蜂王、治螨前授精蜂王的生理及免疫機制上的差異。

致謝：特別感謝吉林省養(yǎng)蜂科學(xué)研究所薛運波所長、牛慶生站長、李志勇博士、葛蓬老師、王志老師、張發(fā)老師在人工授精技術(shù)學(xué)習(xí)上的支持與悉心指導(dǎo)。

[1]陳國宏,王麗華.蜜蜂遺傳育種學(xué)[M].中國農(nóng)業(yè)出版社,北京, 2010,218-219.

[2]薛運波.蜜蜂人工授精技術(shù)研究及進展（上）[J].蜜蜂雜志, 2007,(7):18-20.

[3]李志勇.蜜蜂人工授精技術(shù)[J].特種經(jīng)濟動植物,2001,10: 10-11.

[4]張祎,韓日疇.蜜蜂寄生螨——狄斯瓦螨的研究進展[J].環(huán)境昆蟲學(xué)報,2012,34(3):345-353.

[5]葛蓬.蜂王人工授精與操作要點[J].農(nóng)村科學(xué)實驗，2005，(4)：35.

國家蜂產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項資金（CARS－45-SYZ 17）；云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院基礎(chǔ)性超前預(yù)研項目（2014CZJC014）；云南省科技廳“云南蜂王漿高產(chǎn)蜂種選育項目”（2011BB012）

宋文菲（1983－），女，助理研究員，從事蜜蜂良種選育及病害防治研究

張學(xué)文（1965－），男，副研究員，從事蜜蜂資源、飼養(yǎng)技術(shù)及授粉研究