唐　苗,李　芳,黃河清,周小花,唐申健,侯　娟

(吉首大學(xué)醫(yī)學(xué)院,湖南　吉首　416000)

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武陵片區(qū)8種水果醇提取物抗氧化活性比較*

唐苗,李芳,黃河清,周小花,唐申健,侯娟

(吉首大學(xué)醫(yī)學(xué)院,湖南吉首416000)

比較武陵片區(qū)8種新鮮水果的醇提取物的抗氧化活性。采用DPPH法對武陵片區(qū)8種新鮮水果醇提取物抗氧化活性的比較。 DPPH法測量的結(jié)果：這8種水果醇提取物抗氧化活性由強到弱依次是紅棗、野葡萄、柑橘，柚子、柿子、獼猴桃、八月瓜、雪蓮果。這8種水果都具有較強抗氧化作用,其有效成分值得進一步開發(fā)研究，并為以后的水果抗氧化研究提供參考依據(jù)。

武陵山片區(qū)；水果；抗氧化活性

眾所周知，水果不僅提供人體所需的一些維生素、礦物質(zhì)和纖維素等，而且還含有許多植物抗氧化物質(zhì)，如維生素C、維生素E、類胡蘿卜、多酚類物質(zhì)、類黃酮、花色素等，這些物質(zhì)都具有較強的抗氧化活性[1-2]。這些植物中的抗氧化物質(zhì)比起人工制造的抗氧化試劑更綠色，更健康。因此，水果在防治人類一些與自由基損傷相關(guān)的疾病以及抗衰老過程中可能起著十分重要的作用。武陵片區(qū)大部分地方都是富硒地區(qū)[3]，比如湘西地區(qū)土壤中硒的克拉克值在0.16×10-6～0.72×10-6之間，平均值為0.38×10-6，屬富硒區(qū)[4]。而且，水果在生長的過程中會積累硒元素。因此武陵片區(qū)生物水果含硒元素較高，硒元素具有較強的抗氧化及其他作用。所以，武陵片區(qū)湘西地區(qū)的水果的研究是很有意義的。近年來的有關(guān)水果的抗氧化活性研究較多，但是方法和結(jié)果不盡一致。為此，本實驗采用DPPH法對武陵片區(qū)紅棗、野葡萄、柑橘、柚子、柿子、獼猴桃、八月瓜、雪蓮果這8種新鮮水果醇提取物的抗氧化活性進行測定比較，分析其抗氧化活性。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

新鮮水果：紅棗、野葡萄、柑橘、柚子、柿子、獼猴桃、八月瓜、雪蓮果等，來自于武陵山片區(qū)農(nóng)貿(mào)市場；DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)，上海伊卡生物技術(shù)有限公司；95%乙醇、無水乙醇，鹽酸，國產(chǎn)分析純；蒸餾水；定性濾紙(101)。

1.2儀器

SP-723型可見分光光度計；UX420H電子天平；SHH.W21水浴鍋；HH.GF-1干燥箱；DS-1搗碎機；移液器；索氏提取器(規(guī)格：250 mL)；玻璃棒；燒杯；漏斗；刻度試管；移液管；水果刀；橡膠手套。

1.3方法

1.3.1水果前處理

在武陵山片區(qū)乾州農(nóng)貿(mào)市場買取當(dāng)?shù)匦迈r水果后，都用自來水、蒸餾水反復(fù)沖洗干凈后，削皮，去籽，取適當(dāng)果肉用搗碎機搗成漿。

1.3.2制備醇提取物

稱取50 g水果漿，按照料液比1:5加入95%乙醇，1%鹽酸，混勻，于85 ℃加熱回流3次，每次1 h，粗提液用紗布濾除絮狀物，過濾，并蒸發(fā)濃縮(每種水果提取液的濃縮時間都相同)。分別標(biāo)記成Ep加編號，放到4 ℃下保存[5]。

1.3.3抗氧化活性的測定

參考 Yamaguchi等[6]提出的DPPH 自由基分析法，準(zhǔn)確移取100 μL加入試管中，DPPH溶液(DPPH溶液制作方法：準(zhǔn)確稱取10 mg DPPH用無水乙醇溶液稀釋定容為100 mL，即得0.1 mg/mL DPPH 溶液)1 mL，用蒸餾水定容至4 mL，20 ℃常溫避光暗反應(yīng)30 min后于517 nm波長處測定吸光值。以無水乙醇對照組。

DPPH自由基的清除率=(1-A1/A0)×100%

式中：A1——樣品組的吸光值

A0——對照組的吸光值

1.4統(tǒng)計學(xué)處理

2　結(jié)果與討論

2.1根據(jù)DPPH法所測得結(jié)果

表1　8種水果清除DPPH自由基能力(n=5)

2.2利用SPSS軟件分析所得結(jié)果

根據(jù)表1分析的抗氧化活性由強到弱依次為紅棗、野葡萄、柑橘、柚子、柿子、獼猴桃、八月瓜、雪蓮果，如圖1所示。

圖1　8種水果清除DPPH自由基能力折線圖

根據(jù)圖1的結(jié)果可知這8種新鮮水果醇提物抗氧化活性最強的是紅棗，最弱的是雪蓮果，但本研究這僅僅是對這8種新鮮水果進行了醇提取物的比較。每種水果所含的水分都不一樣，以及水果中不僅僅含有一些易溶于乙醇類的抗氧化物質(zhì)，還含有較多水溶性的抗氧化物質(zhì)。因此，還需要更多不同方面的比較才能更全面的比較這8種水果的抗氧化活性。最近很多

其他的學(xué)者對水果的抗氧化作用進行了研究，比如，方敏，王耀峰，宮智勇等人采用 DPPH 法和 FRAP 法對 15 種水果，33 種蔬菜的抗氧化活性進行了測定比較，并且分析了抗氧化活性和VC 含量的關(guān)系。DPPH 法測量的結(jié)果表明：所測水果中抗氧化活性最強的為花紅李，最弱的為水晶梨；FRAP法測量的結(jié)果表明：所測水果中抗氧化活性最強的為橙子，最弱的為水晶梨和香梨[7]。雖然都是抗氧化活性的比較研究，但是其方法、結(jié)果不盡一致。本研究結(jié)果與上述報道沒有明顯的相關(guān)關(guān)系，原因可能是測定方法的不同，還有水果的品種、產(chǎn)地等因素也可能影響它們的抗氧化活性。

2.3測定方法的討論

目前測定抗氧化活性的方法較多，如DPPH自由基清除能力、羥自由基(HO·)清除能力、超氧自由基(O2·)清除能力、ABTS自由基清除能力、鐵離子還原能力(FRAP)、氧自由基吸收能力(ORAC)、總酚估計法(FC)、硫代巴比妥酸反應(yīng)物法(TBARS)、硫酸氰鐵法(FTC)、螯合金屬離子法等。DPPH自由基清除法屬于基于SET機制的方法，基于SET機制的方法，以測定氧化還原潛力為基礎(chǔ)的方法，大多操作簡單，便于實驗室大規(guī)模日常操作[8]。而且DPPH 自由基結(jié)構(gòu)簡單，性質(zhì)穩(wěn)定，反應(yīng)容易控制，是未來抗氧化劑自由基清除活性篩選的首選試劑[9]。

3　結(jié)　論

本研究中我們測定了武陵片區(qū)8種新鮮水果春提取物的抗氧化活性，結(jié)果表明這8種水果的醇提取物都具有一定的抗氧化活性，其中抗氧化活性最強的是新鮮紅棗最弱的是雪蓮果。這幾種水果的抗氧化活性差異比較大，原因可能是它們所含的抗氧化物質(zhì)組成上的差別以及各種抗氧化物質(zhì)含量的高低，因此它們的抗氧化活性的有效成分還有待于進一步的研究。同時，本研究也為以后的水果抗氧化研究提供參考依據(jù)。

[1]郭長江,楊繼軍.蔬菜、水果抗氧化作用的研究進展[J].中國公共衛(wèi)生,2001,17(1):87-88.

[2]王福海,黃成華.水果有效成分抗氧化能力評價研究進展[J].廣州化工:2014,42(15):39-41.

[3]戴光忠.我國富硒農(nóng)業(yè)地質(zhì)環(huán)境調(diào)查進展分析[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,41(30):12140-12143.

[4]張永康,劉紅艷,周亞林.湘西地區(qū)土壤硒含量及其分布的調(diào)查[J].長沙大學(xué)學(xué)報,2009,23(2):16-17.

[5]徐勝龍,楊建雄.柿子醇提取物的體外抗氧化研究[J].食品科學(xué),2008,29(04):131-134.

[6]YAMAGUCHI T,TAKAMURA H,MATOBA T,et al.HPLC method for evaluation of the free radical-scavenging activity by foods by using1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl[J]. Bioscience Biotechnology and Biochemistry,1998,62(6):1201-1204.

[7]方敏,王耀峰,宮智勇.15種水果和33種蔬菜的抗氧化活性研究[J].武漢工業(yè)學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院,2008,29(10):97-100.

[8]李華,李佩洪,王曉宇,等.抗氧化檢測方法的相關(guān)性研究[J].食品與生物技術(shù)學(xué)報,2008,27(4):6-11.

[9]熊雙麗,盧飛,史敏娟,等.DPPH自由基清除活性評價方法在抗氧化劑篩選中的研究進展[J].食品工業(yè)科技, 2012,33(08):380-383.

The Comparison in Antioxidant Activity of Alcohol Extracts from Eight Kinds of Fruit in Wulingshan Region*

TANGMiao,LIFang,HUANGHe-qing,ZHOUXiao-hua,TANGShen-jian,HOUJuan

(Medical School, Jishou University,Hunan Jishou 416000,China)

The DPPH method were used to compare the antioxidant activity of alcohol extracts from eight kinds of fruit in Wulingshan region.Results showed that the antioxidant activity of the eight kinds of fruit of alcohol extracts from strong to weak was in turns as follows: red dates,wild grape,citrus, shaddock,persimmon,kiwifruit,stauntonia latifolia,yacon.All the eight kinds of fruit had stronger antioxidant effect,the effective ingredient was worth further development and research,and reference for the later research on fruit antioxidant activity was provided.

wulingshan area;fruit;antioxidant activity

吉首大學(xué)2014年大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)與創(chuàng)新性實驗項目(JSU-CX-2014-90)。

唐苗(1993-),女,漢族,本科生,臨床醫(yī)學(xué)。

侯娟(1973-),女,土家族,高級實驗師,從事醫(yī)學(xué)病原生物學(xué)實驗教學(xué)及抗氧化技術(shù)工作。

R151.1

A

1001-9677(2016)03-0079-02