杜晨光，徐丁潔，丁培杰，曹穎，鄭彩慧，白素芬，柳月娟，董玉山

運(yùn)脾消食顆粒對厭食癥大鼠模型血清瘦素、鋅含量影響的研究

杜晨光，徐丁潔，丁培杰，曹穎，鄭彩慧，白素芬，柳月娟，董玉山

目的探討運(yùn)脾消食顆粒對厭食癥大鼠模型血清瘦素、鋅含量的影響。方法采用病因模擬法建立小兒厭食癥動物模型，分別對模型大鼠攝食量、體質(zhì)量以及血清瘦素、鋅含量進(jìn)行檢測。結(jié)果第7天，模型組、小劑量組、大劑量組大鼠攝食量與正常組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.01），攝食量平均下降23.6%。第1、7天，各組大鼠體質(zhì)量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）；第14天，模型組與正常組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），大、小劑量組與模型組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）；第21、28天，大、小劑量組與模型組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。與正常組比較，模型組血清瘦素、鋅水平均顯著降低（均P＜0.05）；與模型組比較，兩個治療組血清瘦素、鋅水平與其差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。結(jié)論運(yùn)脾消食顆粒對厭食癥模型具有明顯治療作用，其發(fā)揮臨床療效的作用機(jī)制可能是通過調(diào)節(jié)血清瘦素、鋅含量來實(shí)現(xiàn)的。

瘦素；鋅；運(yùn)脾消食顆粒；大鼠；厭食癥模型

厭食癥是臨床中常見的小兒消化系統(tǒng)疾病，表現(xiàn)為非疾病因素而出現(xiàn)較長時期的見食不貪、食欲不振、甚則拒食，多見于1～6歲的兒童；城市發(fā)病率高于農(nóng)村，一年四季均可發(fā)病，尤以夏末秋初多見。厭食癥對小兒的生長發(fā)育、營養(yǎng)狀況、智力發(fā)展均有影響。長期厭食，可使小兒攝取營養(yǎng)物質(zhì)不足，不能滿足迅速生長發(fā)育的需要，導(dǎo)致小兒營養(yǎng)不良、貧血、佝僂病及免疫力低下，出現(xiàn)反復(fù)呼吸道感染，嚴(yán)重影響小兒身體健康［1］。運(yùn)脾消食顆粒為治療厭食癥的經(jīng)驗(yàn)方，筆者導(dǎo)師焦平教授臨床應(yīng)用該方20余年，療效肯定。本實(shí)驗(yàn)主要探討瘦素、鋅在小兒厭食癥發(fā)病過程中發(fā)揮的作用及該藥的治療機(jī)制，為新藥開發(fā)和臨床安全用藥提供一定的科學(xué)依據(jù)?，F(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1　資料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動物選用SPF級健康SD大鼠，日齡35～40 d，體質(zhì)量（60±10）g，雌雄兼用，共48只。由天津山川紅實(shí)驗(yàn)動物科技有限公司提供，合格證號：SCXK （2009-001）。

1.2主要藥品及試劑運(yùn)脾消食顆粒：由焦三仙、炒白術(shù)、半夏、陳皮、雞內(nèi)金、胡黃連及佩蘭等中藥組成。所需中藥材均購自同仁堂藥店，再由河北聯(lián)合大學(xué)附屬醫(yī)院制劑室水煎濃縮，加輔料攪拌成膏，烘干粉碎，再用滾動制粒機(jī)制成顆粒，封裝機(jī)分裝成袋，每袋9克。Leptin放免試劑盒（北京科美東雅生物技術(shù)有限公司提供，批號20140525）。血清鋅試劑盒（上海信裕生物科技有限公司提供，批號20140801）。

1.3特制高蛋白高脂飼料（以下簡稱特制飼料）用奶粉、魚松、豆粉、玉米粉、白糖、鮮雞蛋、鮮肥肉，按1∶1∶2∶1∶1∶2∶2比例配制，所用配料均購自家樂福超市。

1.4實(shí)驗(yàn)儀器放射免疫分析儀、半自動生化分析儀、臺式高速低溫離心儀、電子分析天平、常用手術(shù)器械及試管等。

1.5方法將48只SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3 d，然后隨機(jī)分為正常組、模型對照組（簡稱模型組）、運(yùn)脾消食顆粒小劑量組（簡稱小劑量組）、運(yùn)脾消食顆粒大劑量組（簡稱大劑量組），每組12只。采用病因模擬法造模［2］，正常組用常規(guī)鼠飼料喂養(yǎng)，其他3組用特制飼料喂養(yǎng)。所有動物均單籠喂養(yǎng)，自由進(jìn)食飲水，每天記錄攝食量及體質(zhì)量。以造模大鼠平均攝食量低于正常組20%～30%為造模成功。造模成功后，各組開始灌胃，1次/d，連續(xù)灌胃20 d。正常組和模型組灌服等體積（均為2 ml）蒸餾水，小劑量組和大劑量組分別灌服運(yùn)脾消食顆粒12.5g· kg—1·d—1、25 g·kg—1·d—1。于末次給藥后次日，斷頸采全血2ml盛于一次性塑料試管內(nèi)，每只試管采血前均按組做好標(biāo)記。待4組大鼠采血完畢，將盛血的試管分別置于離心機(jī)中以3000 r/min離心15 min，取血清，—20℃保存待測。采用放免法檢測瘦素含量，半自動生化分析儀檢測鋅含量。

1.6統(tǒng)計方法所有數(shù)據(jù)均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用單因素方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1各組動物攝食量、體質(zhì)量變化比較

第1天，各組大鼠攝食量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；第7天，模型組、小劑量組、大劑量組大鼠攝食量與正常組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），攝食量平均下降23.6%，而模型組、小劑量組、大劑量組大鼠攝食量3組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），造模成功。給藥第14天，大、小劑量組與模型組的攝食量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）；第21、27天，大、小劑量組與正常組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。見表1。

第1、7天，各組大鼠體質(zhì)量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）；第14天，模型組與正常組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），大、小劑量組與模型組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.01）；第21、28天，大、小劑量組與模型組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。見表2。2.2各組動物血清瘦素、鋅含量變化比較與正常組比較，模型組血清瘦素、鋅水平均顯著降低（均P＜0.05）；與模型組比較，兩個治療組血清瘦素、鋅水平與其差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05）。見表3。

表1　各組動物攝食量變化比較（=12）　g

表2　各組動物體質(zhì)量變化比較（=12）　g

表3　各組動物血清瘦素、鋅含量變化比較 （ =12）

3　討論

治療厭食癥的關(guān)鍵在于運(yùn)脾和胃、消食導(dǎo)滯。運(yùn)脾消食顆粒是在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，結(jié)合長期臨床經(jīng)驗(yàn)和現(xiàn)代藥理研究，在朱丹溪保和丸基礎(chǔ)上加減化裁而來。其主要方藥包括焦三仙、炒白術(shù)、半夏、陳皮、雞內(nèi)金、胡黃連及佩蘭等。具有運(yùn)脾和胃、消食化滯之功，經(jīng)多年臨床應(yīng)用，對小兒厭食癥療效良好。方中焦三仙為消食化滯之要藥；白術(shù)，燥濕和中，補(bǔ)脾益胃消食，與焦三仙共為君藥，取其消補(bǔ)兼施之意。雞內(nèi)金，具有和胃健脾，寬中消食之作用。陳皮，有理氣降逆，調(diào)中開胃之功效，善治中焦脾胃氣滯濕阻之證。半夏，具有燥濕化痰，降逆止嘔，消痞散結(jié)之功。以上三藥，共為臣藥，收行氣化滯，健脾消食止嘔之效。胡黃連可清小兒疳積之熱，佩蘭芳香化濕醒脾，共為佐使，輔助君、臣之藥達(dá)運(yùn)脾和胃、消食化滯之功［3］。該方消補(bǔ)并舉，標(biāo)本同治，補(bǔ)而不滯，消導(dǎo)而不傷正，故對厭食癥有較滿意的療效。

本文結(jié)果顯示，給藥第14天，大、小劑量組與模型組的攝食量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05），表明運(yùn)脾消食顆粒開始顯效；第21、27天，大、小劑量組與正常組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05），這表明兩組大鼠的攝食量已經(jīng)恢復(fù)至正常水平。

本文結(jié)果還顯示，第1、7天，各組大鼠體質(zhì)量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；第14天，模型組與正常組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)院意義（均P＜0.05），大、小劑量組與模型組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），說明運(yùn)脾消食顆?？纱龠M(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，增加大鼠體質(zhì)量；第21、28天，大、小劑量組與模型組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P＜0.05），說明該藥物能促使厭食大鼠體質(zhì)量增加。

瘦素由脂肪細(xì)胞分泌進(jìn)入血液循環(huán)，可與下丘腦飽食中樞的相關(guān)受體結(jié)合，抑制弓狀核神經(jīng)元合成和釋放神經(jīng)膚Y，降低食欲。同時，也可與POMC神經(jīng)元上的相應(yīng)受體結(jié)合，增加促黑激素（a-MSH）的釋放，引起食欲降低，通過這兩條通路，瘦素在中樞食欲抑制中起到了比較重要的作用［4］。根據(jù)瘦素的這一系列作用，可以推測厭食患者血清瘦素水平應(yīng)該高于正常者，但本實(shí)驗(yàn)結(jié)果卻恰恰與之相反，模型組大鼠瘦素水平明顯低于正常組。因此筆者推測，實(shí)驗(yàn)大鼠瘦素水平的降低可以減少機(jī)體能量消耗，是機(jī)體在饑餓、消瘦狀態(tài)下的一種應(yīng)激性的自我保護(hù)，以此來保存能量，維持基本生命活動，說明其水平的變化可能不是厭食癥的病因，而是厭食癥的一種結(jié)果［5-6］。與模型組比較，運(yùn)脾消食顆?？商岣吣Ｐ痛笫笱迨菟厮?，提示該藥促進(jìn)攝食的機(jī)制與其對瘦素的良性調(diào)節(jié)作用有關(guān)。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，兒童食欲正常與否與人體微量元素鋅密切相關(guān)。正常人唾液中每分子味覺素含2個鋅離子，體內(nèi)鋅缺乏時味覺素作用減弱，缺鋅還可以引起舌黏膜增生和角化不全，阻塞味蕾小孔使味覺敏感度下降，從而引起厭食［7］。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，模型組大鼠血清鋅明顯低于正常水平，治療后，血清鋅的含量增加，與臨床研究結(jié)果一致，為治療小兒厭食癥提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

［1］汪受傳，虞堅爾.中醫(yī)兒科學(xué)（全國中醫(yī)藥行業(yè)高等教育十二五規(guī)劃教材）［M］.北京：中國中醫(yī)藥出版社，2013：134-137

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10.3969/j.issn.1671-0800.2016.07.010

R289.5

A

1671-0800（2016）07-0863-03

唐山市科技局指導(dǎo)項(xiàng)目（13130216b）；河北省中醫(yī)藥管理局指令項(xiàng)目（2014054）

063000河北省唐山，河北聯(lián)合大學(xué)中醫(yī)學(xué)院

董玉山，Email：dys6507 06@163.com

2016-03-05（本文編輯：姜曉慶）