李海琴，魏　岳，劉林秀，季華員，武艷平，康昭風

（江西省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所，江西 南昌 330200）

東鄉(xiāng)黑雞禽白血病及雞白痢凈化效果研究

李海琴，魏岳，劉林秀，季華員，武艷平，康昭風

（江西省農業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所，江西 南昌 330200）

東鄉(xiāng)黑雞是國內外的珍稀雞種，東鄉(xiāng)黑雞所產天然綠殼雞蛋被我國營養(yǎng)學家于若木教授譽為“華夏明珠”和“東方神蛋”[1]。東鄉(xiāng)綠殼蛋具有外形美觀、蛋質優(yōu)良的特點，深受消費者的歡迎。但由于禽白血病病毒與雞白痢沙門菌的感染，嚴重地制約了東鄉(xiāng)黑雞的發(fā)展。禽白血病是由禽白血病病毒（ALV）引起的禽類的多種傳染性腫瘤疾病的統(tǒng)稱，目前仍無有效疫苗和藥物。雞白痢沙門菌?。ê喎Q雞白痢）是由雞白痢沙門桿菌引起的各日齡雞只常發(fā)的傳染病[3]。這兩種雞病最重要的防控措施是對種群進行凈化，建立無禽白血病及雞白痢種雞群。本試驗根據熒光定量PCR-HRM檢測泄殖腔棉拭子及蛋清淘汰ALV陽性雞群結合血清平板凝集方法淘汰雞白痢陽性雞群的凈化方案對東鄉(xiāng)黑雞進行禽白血病及雞白痢凈化，現(xiàn)將試驗結果報告如下。

1　材料與方法

1.1試驗雞群東鄉(xiāng)黑雞高產系。將同一批次1日齡雛雞分成兩群（A群和B群），分開隔離飼養(yǎng)，A群按照熒光定量PCR-HRM檢測方法結合血清凝集平板試驗實施禽白血病和雞白痢凈化，至6月齡時獲得的陰性雞作為凈化雞群；B群不做凈化，作為非凈化雞群。

1.2主要儀器和試劑Rotor-Gene Q（HRM），購自德國Qiagen公司；雞白痢多價染色抗原檢測試劑，購自北京中海生物科技有限公司。

1.3試驗分組分別從上述凈化與非凈化雞群中隨機挑選260只（240只母雞，20只公雞）作為凈化試驗組和非凈化試驗組。

1.4飼養(yǎng)管理凈化和非凈化組雞群實行隔離飼養(yǎng)，但在雞舍結構、籠具、飼料、飲水、光照和免疫等飼養(yǎng)管理條件上一致。

2　結果與分析

2.1禽白血病和雞白痢凈化與非凈化雞群死淘情況差異觀察、記錄2組雞的發(fā)病和死亡情況，記錄病雞的發(fā)病經過、臨床癥狀和治療情況，對死亡病雞進行病理剖檢，記錄各組織器官的病理變化。凈化組與非凈化組在6～12月齡的死淘情況如下：在整個觀察期內，非凈化組母雞共死淘12只，公雞死淘1只，非凈化組總體死淘率為5%；凈化組共死淘母雞4只，公雞無死淘，總體死淘率為1.54%；凈化組雞群總體死淘率低于非凈化組3.46個百分點。對死淘雞做病理剖檢及實驗室診斷發(fā)現(xiàn)，非凈化雞群6只死淘母雞有腫瘤性結節(jié)，PCR檢測為禽白血病病毒感染，2只死淘母雞診斷為沙門菌感染，2只死淘母雞診斷為大腸桿菌感染，2只死淘母雞死于脫肛，1只死淘公雞診斷為禽白血??；凈化雞群2只死淘母雞死于脫肛，2只死淘母雞診斷為大腸桿菌感染。禽白血病與雞白痢凈化組死淘數(shù)較非凈化組有明顯的下降，說明開展這2個病的凈化研究可顯著提高雞存活率，對提高養(yǎng)雞經濟效益意義重大。

2.2東鄉(xiāng)黑雞禽白血病和雞白痢凈化與非凈化雞群產蛋性能差異分別記錄和統(tǒng)計2組試驗雞的產蛋率、蛋重和料蛋比。對凈化與非凈化組6～12月齡的產蛋率統(tǒng)計結果如圖1所示，在記錄的7個月產蛋周期內，凈化組月均產蛋率均高于非凈化組，其中7、10、11月齡和12月齡產蛋率差異顯著（P<0.05）；與凈化組相比，非凈化組在9月齡后的產蛋率快速下降，12月齡非凈化組產蛋率為38.38%，而凈化組仍保持在47.29%，表現(xiàn)出更長的產蛋高峰維持時間。由表1可知，月均產蛋率凈化組較非凈化組高6.82個百分點；非凈化組平均蛋重和耗料量均顯著低于凈化組（P<0.05）。

圖1　不同月齡凈化與非凈化組月均產蛋率

表1　6～12月齡禽白血病和雞白痢凈化與非凈化組平均產蛋性能

2.3禽白血病和雞白痢凈化與非凈化雞群種蛋及孵化性能差異由表2可知，禽白血病和雞白痢凈化組與非凈化組相比，其種蛋合格率高出4.18個百分點，受精率高出2.24個百分點，出雛率高出8.89個百分點，健雛率高出4.35個百分點。

表2　禽白血病和雞白痢凈化與非凈化組種蛋及孵化性能

2.4禽白血病和雞白痢凈化與非凈化雞群后代生產性能差異

2.4.1禽白血病和雞白痢凈化與非凈化雞群后代死淘情況差異由圖2可知，隨著月齡增長，凈化與非凈化組死淘率均逐漸下降。與非凈化組后代相比，凈化組后代死淘率下降明顯，1、2月齡和3月齡時凈化組死淘率分別低出3.52、0.72個百分點和0.33個百分點。

圖2　禽白血病和雞白痢凈化與非凈化組后代不同月齡死淘率

2.4.2禽白血病和雞白痢凈化與非凈化雞群后代生長性能差異由表3可知，1日齡和1月齡時體重，凈化組與非凈化組公母雞均無顯著差異（P> 0.05）；2月齡后，與非凈化組相比，凈化組母雞和公雞的體重均有所提高，母雞體重差異更加明顯，其中2月齡、3月齡時凈化組母雞體重較非凈化組分別高16.10 g（P<0.05）和36.00 g（P>0.05）。由表4可知，1月齡時，平均日增重相同，但隨著月齡增大，凈化組平均日增重較非凈化組提高，其中2、3月齡平均日增重分別比非凈化組高0.25 g和0.41 g；3月齡的總增重，凈化組較非凈化組高25.63 g；凈化組與非凈化組的總耗料量無明顯差異；與非凈化組相比，凈化組料重比下降0.05。

表3　（A） 禽白血病和雞白痢凈化與非凈化雞后代不同月齡體重

表3?。˙） 禽白血病和雞白痢凈化與非凈化雞后代不同月齡體重

表4　禽白血病和雞白痢凈化與非凈化雞后代生長性能

3　小結與討論

禽白血病病毒（ALV）和雞白痢沙門菌（SP）均可以垂直傳播，目前這兩種病最重要的防控措施是對種群進行凈化。本研究利用HRM分型技術快速區(qū)分內源型（ev）和外源型病毒的熒光定量PCR-HRM檢測方法對東鄉(xiāng)黑雞進行了禽白血病凈化。ALV PCR-HRM檢測方法操作簡便、快速，只需要在PCR反應前加入飽和熒光染料即可，所有步驟在3 h內完成（包括提取病毒RNA）。這個比前人用ELISA檢測P27抗原淘汰陽性雞群方法縮短了時間并節(jié)約了成本[2-4]。

本試驗對江西省東鄉(xiāng)黑雞開展禽白血病和雞白痢檢測凈化研究中，對獲得的凈化雞群和非凈化雞群在死淘、產蛋、種蛋孵化以及后代生長性能等方面進行了觀察比較。結果表明，凈化雞群及其后代的死淘率較非凈化組有較大程度降低；6～12月齡間月均產蛋率較非凈化組提高6.82個百分點；蛋重顯著高于非凈化組（P<0.05），且料蛋比較非凈化組低0.71個點；凈化組雞群種蛋在合格率、受精率、出雛率和健雛率指標上均高于非凈化組；凈化組后代3月齡內體重除1月齡母雞體重外，其他均高于非凈化組，其中2月齡母雞體重差異顯著（P<0.05）；與非凈化組相比，凈化組后代的平均日增重有所提高，3月齡總增重較非凈化組增加25.63 g，料重比降低0.05。研究結果與張丹俊的結果基本一致[5]。綜上可見，雞群經過禽白血病和雞白痢凈化后在生產性能上明顯優(yōu)于非凈化雞群，可顯著提高養(yǎng)殖效益，開展種雞群禽白血病和雞白痢凈化對提高養(yǎng)雞經濟效益意義重大。

[1]劉志祥.東鄉(xiāng)華綠神蛋傳奇[J].中國畜禽種業(yè)，2008（05）：19-20.

[2]王改利，劉貴華，初芹，等.北京地方品種雞禽白血病病毒的跟蹤檢測與PCR檢測方法的建立[J].華北農學報，2010，25（4）：213-217.

[3]錢琨，沈海玉，金文杰，等.蘇皖地區(qū)規(guī)?；u場禽白血病凈化的初步研究[J].中國家禽，2012（5）：8-11.

[4]張勝斌，吳天威，韋平，等.地方優(yōu)良雞種禽白血病病毒感染調查及凈化[J].中國家禽，2010（12）：11-16.

[5]張丹俊，沈學懷，趙瑞宏，等.禽白血病和雞白痢凈化與非凈化雞群生產性能差異性研究[J].安徽農業(yè)大學學報，2013，40（5）:695-700.

S858.292文獻標志碼：B

0529-6005（2016）07-0085-2

2016-01-18

江西省科技廳支撐計劃項目（20121BBF60033）；國家肉雞產業(yè)技術體系（CARS-42）

李海琴（1986-），女，助理研究員，碩士，主要從事動物疫病防控的研究，E-mail：278030049@qq.com
魏岳（1982-），男，助理研究員，博士，從事動物遺傳育種與繁殖的研究，E-mail：460055142@qq.com
魏岳與李海琴對本文具有同等貢獻

康昭風，E-mail：281523075@qq.com