王明杰，夏 猛，施學(xué)麗，申曉晴，付 蕾，蔣 筱（廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西南寧500；廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西南寧5000；廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院，廣西南寧500）

加味溫膽湯對(duì)抑郁模型大鼠海馬不同時(shí)間段RaS蛋白表達(dá)的影響

王明杰1，夏 猛2，施學(xué)麗2，申曉晴2，付 蕾3，蔣 筱2（1廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西南寧530023；2廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西南寧530001；3廣西中醫(yī)藥大學(xué)附屬瑞康醫(yī)院，廣西南寧530011）

【摘 要】目的：探討調(diào)理脾胃方加味溫膽湯對(duì)慢性應(yīng)激結(jié)合孤養(yǎng)大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力以及海馬區(qū)信號(hào)因子RaS蛋白表達(dá)的影響.方法：選取128只清潔級(jí)SD大鼠，將其按照隨機(jī)數(shù)字表法分為空白對(duì)照組（n=32）、模型對(duì)照組（n=32）、中藥治療組（n=32）、西藥治療組（n=32）.應(yīng)用孤養(yǎng)加慢性輕度不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激方法造模，采用糖水消耗實(shí)驗(yàn)、曠場(chǎng)行為實(shí)驗(yàn)測(cè)試大鼠抑郁行為變化，Western B1ot測(cè)定海馬RaS蛋白表達(dá)水平.結(jié)果：加味溫膽湯具有增強(qiáng)抑郁模型糖水消耗量，改善抑郁模型快感缺失的功能，且其效應(yīng)隨著治療周次的增加，呈不斷遞進(jìn)的關(guān)系，21 d開(kāi)始顯效，28 d效果最佳；加味溫膽湯具有改善抑郁模型大鼠空間認(rèn)知能力、增加大鼠興奮性的功效，其效應(yīng)顯效時(shí)間為21 d，最佳時(shí)間為28 d；加味溫膽湯具有上調(diào)RaS蛋白表達(dá)的作用，且其效應(yīng)隨著治療周次的增加，呈不斷遞進(jìn)的關(guān)系，21 d開(kāi)始顯效，28 d效果最佳.結(jié)論：加味溫膽湯對(duì)抑郁模型大鼠具有較好的治療功效，其作用機(jī)制可能與上調(diào)海馬區(qū)RaS蛋白相關(guān).

【關(guān)鍵詞】加味溫膽湯；抑郁模型；海馬；RaS蛋白

0　引言

抑郁癥是由各種復(fù)雜誘因引起的以情感抑郁為主要臨床表現(xiàn)的一種情感障礙性疾?。?］.當(dāng)前，隨著人們生活節(jié)奏的加快，接觸到各種應(yīng)激刺激頻次的增多，抑郁癥的發(fā)病率也呈現(xiàn)出逐年上升的趨勢(shì).有研究調(diào)查［2］發(fā)現(xiàn)，截止到2005年，抑郁癥的全球發(fā)病率已經(jīng)達(dá)到全球總?cè)丝诘?0%.最近有數(shù)據(jù)資料［3］顯示，我國(guó)的精神障礙類(lèi)疾病數(shù)已經(jīng)居于各類(lèi)疾病譜的第一位，上海市的抑郁癥患者人數(shù)已達(dá)到總?cè)丝跀?shù)量的5%以上.而美國(guó)、加拿大以及歐洲國(guó)家抑郁癥患者每年可造成約1500億美元的損失.目前醫(yī)學(xué)界仍以藥物為防治抑郁癥的主要方法.臨床上常用的一些抗抑郁藥物，包括抑制類(lèi)抗抑郁藥，單胺氧化酶抑制劑抗抑郁藥、神經(jīng)遞質(zhì)類(lèi)抑制劑抗抑郁藥物，以及三環(huán)、四環(huán)類(lèi)抗抑郁藥物等.這些抗抑郁藥物都存在一些副作用，長(zhǎng)期服用易產(chǎn)生藥物依賴(lài)性，作用反彈，還可能出現(xiàn)頭暈、惡心等臨床癥狀［4-5］.在抑郁癥的防治研究中，中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的中醫(yī)藥具有整體治療優(yōu)勢(shì)，并且中草藥的復(fù)方具有多層次、多環(huán)節(jié)、多靶位點(diǎn)藥理學(xué)作用，因此，國(guó)內(nèi)外在抗抑郁藥物的研發(fā)方面也越來(lái)越注重中醫(yī)藥的應(yīng)用.本研究在治療中采用“調(diào)理脾胃法”治療抑郁癥，采用動(dòng)態(tài)研究方法探討加味溫膽湯的抗抑郁效應(yīng)，并從RaS蛋白表達(dá)闡釋其作用機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下.

1　材料和方法

1.1動(dòng)物 選取8周齡（60 d左右）的清潔級(jí)雄性SD大鼠共128只［大鼠的合格證號(hào)：SCXK（湘）2009-0004］，體質(zhì)量（185±22）g，由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供.飼養(yǎng)環(huán)境：室溫（22±3）℃，相對(duì)濕度（55±3）%，12 h晝夜節(jié)律，均自由進(jìn)食及飲水，適應(yīng)環(huán)境1周后開(kāi)始實(shí)驗(yàn).空白組5只/籠群養(yǎng)，其余各組1只/籠進(jìn)行孤獨(dú)飼養(yǎng).在動(dòng)物飼養(yǎng)過(guò)程中，動(dòng)物的各種處置方案符合中華人民共和國(guó)科學(xué)技術(shù)部2006年頒布的《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見(jiàn)》標(biāo)準(zhǔn)［6］.

1.2分組及模型復(fù)制 按照隨機(jī)數(shù)字表法將所選大鼠分為空白對(duì)照組（n=32）、模型對(duì)照組（n=32）、中藥治療組（n=32）、西藥治療組（n=32）（后文均簡(jiǎn)稱(chēng)為空白組、模型組、中藥組、西藥組）.除空白組外，其余每組的大鼠均采用孤養(yǎng)方法進(jìn)行飼養(yǎng)，并且自確定大鼠的分組信息之后，每只大鼠均接受共計(jì)持續(xù)21 d的各種未提前預(yù)知的、不同類(lèi)型的刺激，包括24 h禁止飲食，24 h禁止飲水，24 h連續(xù)的白光照明，4℃冰水條件下游泳，時(shí)間5 min，45℃烘箱進(jìn)行熱烘刺激，持續(xù)5 min，夾住大鼠尾1 min，高速進(jìn)行水平振蕩，大約3 min，100 V電壓電擊大鼠足底，持續(xù)1 min，尾懸掛，持續(xù)1 min，共9種刺激方式，21 d內(nèi)隨機(jī)安排，每天均選擇上午的9∶00進(jìn)行，選擇9種刺激方式中的一種，每種刺激方式的次數(shù)≤3次.

1.3給藥方法 各組在進(jìn)行孤養(yǎng)結(jié)合慢性應(yīng)激刺激后，即開(kāi)始給藥.中藥組大鼠經(jīng)胃給大鼠灌服加味溫膽湯，12 g/（kg·d）；西藥組以同樣的方法給大鼠灌服氟西汀1.8 mg/（kg·d），模型組、空白組給大鼠灌服生理鹽水2 mL/（kg·d），每日早晨8∶30定時(shí)進(jìn)行，共持續(xù)給藥28 d.

1.4觀(guān)察指標(biāo)及方法

1.4.1糖水消耗量檢測(cè) 在進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)檢測(cè)前，預(yù)先對(duì)每只大鼠進(jìn)行適應(yīng)訓(xùn)練，使大鼠適應(yīng)糖飲水的刺激，待大鼠適應(yīng)后，對(duì)其禁水，并在24 h后行SD大鼠的糖水消耗試驗(yàn).每只大鼠給予可供大鼠自由口服的1瓶1%蔗糖水，限時(shí)供飲，時(shí)間為1 h，1 h后取走水瓶，并用電子天平檢測(cè)蔗糖水的消耗量（檢測(cè)前后瓶中水量之差，計(jì)算每只大鼠的糖水消耗量，檢測(cè)的時(shí)間點(diǎn)為第7、14、21、28天.

1.4.2Open?fie1d行為檢測(cè) 采用曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱檢測(cè)，以大鼠穿越曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱底面方塊的數(shù)量作為水平活動(dòng)的得分（具體評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為：大鼠的四爪均全部進(jìn)入方格方可計(jì)分）；而且以大鼠在箱內(nèi)直立次數(shù)作為垂直活動(dòng)的得分（大鼠的兩前爪騰空或者是兩前爪攀附墻壁方可計(jì)分）.檢測(cè)時(shí)間同樣定在實(shí)驗(yàn)的第7、14、21、28天，檢測(cè)時(shí)間為3 min/次.

1.4.3Western B1ot檢測(cè) 取大鼠海馬組織，提取蛋白后，采用標(biāo)準(zhǔn)蛋白檢測(cè)法檢測(cè)蛋白濃度；移取10 μL的蛋白液到新的1.5 mL EP管中，然后加入5 μL的RIPA buffer；室溫下放置5 min（保證充分裂解）；加15 μL的Laemm1i 1oading buffer并加熱到95℃，放置5～20 min；冰上冷卻5 min后，將蛋白及蛋白Marker加到4%～20%的膠上；標(biāo)準(zhǔn)SDS?PAGE電泳，并進(jìn)行Western B1et轉(zhuǎn)膜，將蛋白轉(zhuǎn)到 PVDF膜上；加10～20 mL由 5%干奶粉和 0.05%的 Tris Buffered Sa1ine以及0.05%的Tween組成的混合液（TTBS）進(jìn)行封閉，室溫1 h；加入1∶1000稀釋的外RaS抗體，4℃，過(guò)夜；用TTBS洗三次，10min/次；室溫下孵育二抗（稀釋濃度一般為1∶2000～1∶20000），TTBS洗三次，10 min/次；最后用 Chemi?1uminescence substrate顯色，曝光成像.

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料用±s表示，組間比較用t檢驗(yàn)，多個(gè)實(shí)驗(yàn)組間的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異采用單因素方差分析（one?way ANOVA）進(jìn)行分析，P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.

2　結(jié)果

2.1糖水消耗量檢測(cè) 在實(shí)驗(yàn)的第7、14天時(shí)，各組大鼠糖水消耗量比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行到第21天時(shí)，開(kāi)始逐漸出現(xiàn)差異.模型組與空白組相比，糖水消耗量減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；中、西藥組與模型組比較，糖水消耗量增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）.第28天時(shí)，各組間差異進(jìn)一步顯現(xiàn).與空白組比較，模型組大鼠的糖水消耗量相對(duì)增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與模型組比較，中、西藥組糖水消耗量增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；中、西藥組間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，表1、圖1）.

表1　各組大鼠在抑郁形成過(guò)程中糖水消耗量比較（±s，g）

表1　各組大鼠在抑郁形成過(guò)程中糖水消耗量比較（±s，g）

aP＜0.05 vs模型組；bP＜0.01 vs空白組.

組別　n　7 d　n　14 d　n　21 d　n　28 d空白組　8　4.77±1.28　8　5.06±1.39　8　5.43±1.14　8　5.86±1.08模型組　8　4.83±0.95　8　4.39±1.60　8　2.93±1.15b　8　2.39±1.27b中藥組　8　4.92±1.78　8　5.30±1.47　8　5.75±1.57a　7　6.35±2.22a西藥組　8　5.19±1.47　8　5.48±1.52　8　5.76±1.74a　8　6.14±2.07a

圖1　各組大鼠在抑郁形成的不同時(shí)間段糖水消耗量比較

2.2Open-field行為學(xué)檢測(cè) 在第7、14天時(shí)，大鼠Open-fie1d行為學(xué)實(shí)驗(yàn)中的水平運(yùn)動(dòng)得分以及他們?cè)诖怪边\(yùn)動(dòng)方面的得分變化微小，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）.在第21天時(shí)，各組大鼠的運(yùn)動(dòng)得分情況出現(xiàn)差異.模型組大鼠的水平運(yùn)動(dòng)得分及垂直運(yùn)動(dòng)得分明顯低于空白組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；中、西藥組的大鼠在水平運(yùn)動(dòng)及垂直運(yùn)動(dòng)方面的得分均明顯高于模型組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）.第28天時(shí)，不同組大鼠之間的差異進(jìn)一步增大.模型組大鼠水平運(yùn)動(dòng)及其垂直運(yùn)動(dòng)方面的得分均明顯低于空白組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；中藥和西藥組大鼠的水平運(yùn)動(dòng)得分與垂直運(yùn)動(dòng)得分明顯高于模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；中、西藥組大鼠之間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，表2、3，圖2、3）.

表2　各組大鼠在抑郁形成的不同時(shí)間段Open?fie1d實(shí)驗(yàn)水平運(yùn)動(dòng)得分比較　（±s，分）

表2　各組大鼠在抑郁形成的不同時(shí)間段Open?fie1d實(shí)驗(yàn)水平運(yùn)動(dòng)得分比較　（±s，分）

aP＜0.05 vs模型組；bP＜0.01 vs空白組.

組別　n　7 d　n　14 d　n　21 d　n　28 d空白組　8　32.70±8.72　8　31.90±10.99　8　32.16±9.27　8　30.26±9.35模型組　8　31.23±6.78　8　25.41±9.32　8　16.24±8.70b　8　10.26±7.14b中藥組　8　32.60±6.27　8　28.57±7.63　8　24.71±9.56a　7　22.42±5.25a西藥組　8　33.40±7.70　8　28.34±9.23　8　25.61±7.96a　8　21.72±7.38a

表3　各組大鼠在實(shí)驗(yàn)各階段Open?fie1d實(shí)驗(yàn)垂直運(yùn)動(dòng)得分比較（±s，分）

表3　各組大鼠在實(shí)驗(yàn)各階段Open?fie1d實(shí)驗(yàn)垂直運(yùn)動(dòng)得分比較（±s，分）

aP＜0.05 vs模型組；bP＜0.01 vs空白組.

組別　n　7 d　n　14 d　n　21 d　n　28 d空白組　8　16.70±5.27　8　15.98±4.64　8　16.82±4.13　8　17.05±3.92模型組　8　16.60±6.68　8　13.30±5.74　8　8.98±3.75b　8　4.62±1.94b中藥組　8　17.80±4.56　8　14.91±6.57　8　12.21±4.78a　7　9.22±2.57a西藥組　8　16.30±3.84　8　13.74±5.05　8　13.62±3.66a　8　9.42±3.73a

圖2　各組大鼠在實(shí)驗(yàn)各階段Open?fie1d實(shí)驗(yàn)水平運(yùn)動(dòng)得分

2.3RaS蛋白檢測(cè) 在第7、14天時(shí)，大鼠海馬區(qū)RaS蛋白表達(dá)變化不明顯，各組之間比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）.在實(shí)驗(yàn)的第21天時(shí)，不同組的大鼠之間開(kāi)始逐漸出現(xiàn)差異性.與空白組比較，模型組大鼠海馬區(qū)的RaS蛋白表達(dá)明顯減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與模型組比較，中、西藥組大鼠海馬區(qū)的RaS蛋白表達(dá)顯著增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；第28天時(shí)，與空白組比較，模型組大鼠海馬區(qū)的RaS蛋白表達(dá)顯著減少，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與模型組比較，中、西藥組RaS蛋白顯著增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；中、西藥組相同時(shí)間段的RaS蛋白表達(dá)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05，圖4、5，表4）.

表4　各組大鼠在實(shí)驗(yàn)各階段的RaS蛋白相對(duì)表達(dá)量比較（±s，%）

表4　各組大鼠在實(shí)驗(yàn)各階段的RaS蛋白相對(duì)表達(dá)量比較（±s，%）

bP＜0.01 vs空白組；dP＜0.01 vs模型組.

組別　n　7 d　n　14 d　n　21 d　n　28 d空白組　8　34.32±11.65　8　43.33±16.65　8　52.45±22.45　8　60.45±23.23模型組　8　24.78±8.42　8　25.45±11.22　8　28.45±12.44b　8　30.45±13.67b中藥組　8　29.45±12.56　8　33.34±11.34　8　38.23±11.23d　7　45.66±21.45d西藥組　8　28.52±15.56　8　33.53±14.56　8　40.43±15.34d　8　44.34±19.45d

圖4　各組大鼠在實(shí)驗(yàn)各階段的RaS蛋白表達(dá)（Western B1ot技術(shù)檢測(cè)；A空白組；B模型組；C中藥組；D西藥組）

圖5　各組大鼠在實(shí)驗(yàn)各階段的RaS蛋白表達(dá)

3　討論

抑郁癥屬于中醫(yī)“郁”證范疇，歷代醫(yī)家對(duì)其病因病機(jī)早有闡釋?zhuān)偨Y(jié)起來(lái)總離不開(kāi)濕、痰、熱、瘀阻滯氣機(jī)，導(dǎo)致臟腑功能失調(diào).對(duì)于調(diào)理脾胃法的認(rèn)識(shí)，在歷代醫(yī)家的古籍文獻(xiàn)中，雖然沒(méi)有明確提出以調(diào)理脾胃法治療抑郁癥者，但相關(guān)古籍文獻(xiàn)，都蘊(yùn)含著豐富的調(diào)理脾胃法治療思想.如《金匱要略·婦人雜病篇》：“婦人臟躁，喜悲傷欲哭，象如神靈所作，數(shù)欠伸，甘麥大棗湯主之”、“婦人咽中如有炙臠，半夏厚樸湯主之”.現(xiàn)代醫(yī)家對(duì)抑郁癥的治療，亦有個(gè)別研究涉及脾胃.但縱觀(guān)目前涉及脾胃臟腑治療抑郁癥的研究特點(diǎn)，在治療方法上多采用健脾、補(bǔ)脾之法，在病位上多認(rèn)為抑郁癥為心脾、肝脾相兼為病，而單獨(dú)從脾胃入手者鮮見(jiàn)，且在藥物配伍上，以補(bǔ)法為主，少有針對(duì)脾胃轉(zhuǎn)樞作用采用升降并用的配伍方法進(jìn)行遣方用藥［7-10］.本研究以調(diào)理脾胃法為指導(dǎo)，采用升降并用的藥物配伍思路，選用加味溫膽湯治療抑郁癥，前期臨床研究表明，加味溫膽湯具有較好的抗抑郁作用，且臨床副反應(yīng)較西藥氟西汀少［11-12］.由此可見(jiàn)，調(diào)理脾胃法治療抑郁癥具有臨床實(shí)踐依據(jù).

慢性不可預(yù)知應(yīng)激刺激（chronic unpredictab1e stress，CUS）模型方法是通過(guò)一系列應(yīng)激刺激（如電擊、剝奪食水、冷水浸泡、晝夜顛倒等）使動(dòng)物在行為上出現(xiàn)活動(dòng)能力下降的表現(xiàn)，從而模仿人類(lèi)抑郁癥的行為狀態(tài).該模型不但可有效模擬人類(lèi)抑郁行為特征表現(xiàn)，同時(shí)還存在血漿皮質(zhì)激素升高等與內(nèi)源性抑郁癥相似的狀態(tài)，該模型結(jié)合孤養(yǎng)可進(jìn)一步模擬抑郁癥狀憂(yōu)郁、寂寞、悲傷的情感狀態(tài).目前，該模型已得到國(guó)內(nèi)外的普遍認(rèn)可，在抑郁癥發(fā)病機(jī)制的研究中被廣泛采用［13］.糖水?dāng)z入量可以反映大鼠對(duì)食物的欣快感，這一實(shí)驗(yàn)反映了獎(jiǎng)賞系統(tǒng)在抑郁癥中的作用.已有研究［14］證實(shí)，應(yīng)激后動(dòng)物模型對(duì)獎(jiǎng)賞的反應(yīng)性下降，出現(xiàn)了快感缺失.目前其已成為評(píng)價(jià)大鼠抑郁癥模型建立是否成功的標(biāo)志之一［15］.曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)是非常經(jīng)典的行為學(xué)實(shí)驗(yàn)，可以有效體現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在新環(huán)境中的探究行為及動(dòng)物的情緒變化，可用來(lái)測(cè)試動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的“興奮”或“抑郁”狀態(tài)，多用于抑郁癥藥效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)［16-17］.本研究采用調(diào)理脾胃方加味溫膽湯干預(yù)孤養(yǎng)結(jié)合慢性不可預(yù)知應(yīng)激刺激模型，通過(guò)對(duì)大鼠糖水消耗量和曠場(chǎng)行為的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，加味溫膽湯具有抑郁模型糖水消耗量，改善抑郁模型快感缺失的功能，且其效應(yīng)隨著治療周次的增加，呈不斷遞進(jìn)的關(guān)系，21 d開(kāi)始顯效，28 d效果最佳；同時(shí)，加味溫膽湯具有改善抑郁模型大鼠空間認(rèn)知能力、增加大鼠興奮性的功效，其效應(yīng)顯效時(shí)間為21 d，最佳時(shí)間為28 d.

RaS在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中起著分子開(kāi)關(guān)的作用，具有調(diào)控細(xì)胞黏附、促進(jìn)細(xì)胞凋亡、抑制細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、調(diào)節(jié)細(xì)胞形態(tài)等多種生物學(xué)功能.RaS家族蛋白一般情況下在質(zhì)膜的內(nèi)側(cè)聚集，并作為一種分子開(kāi)關(guān)將胞外信號(hào)引入細(xì)胞核內(nèi)，具有調(diào)節(jié)和影響細(xì)胞增殖、分化的能力.RaS在介導(dǎo)細(xì)胞黏附，以及調(diào)節(jié)膜的突起形成和細(xì)胞遷移等方面具有重要作用，同時(shí)也可以調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖和凋亡等.在抑郁癥的研究中，已明確抑郁癥患者存在神經(jīng)元凋亡現(xiàn)象［18-19］，因此，了解Ras在抑郁癥及抗抑郁治療中的作用對(duì)抑郁癥的研究具有重要意義.目前關(guān)于RaS的研究較少，未見(jiàn)有RaS蛋白表達(dá)與抑郁癥關(guān)系的相關(guān)研究報(bào)道.本研究發(fā)現(xiàn)，加味溫膽湯具有上調(diào)RaS蛋白表達(dá)的作用，且其效應(yīng)隨著治療周次的增加，呈不斷遞進(jìn)的關(guān)系，21 d開(kāi)始顯效，28 d效果最佳.

綜上所述，結(jié)合加味溫膽湯對(duì)抑郁模型大鼠行為學(xué)的調(diào)節(jié)作用，加味溫膽湯對(duì)大鼠行為的改善作用與上調(diào)海馬區(qū)RaS蛋白表達(dá)趨勢(shì)同步，由此推斷，加味溫膽湯對(duì)抑郁模型大鼠具有較好的治療功效，其作用機(jī)制可能與上調(diào)海馬區(qū)RaS蛋白相關(guān).

【參考文獻(xiàn)】

［1］Kahn DA，Mo1ine ML，Ross RW，et a1.Major depression during conception and pregnancy：a guide for patients and fami1ies［J］. Postgrad Med，2001（Spec No）：110-111.

［2］Topuzog1uˇA，Binbay T，U1a? H，et a1.The epidemio1ogy of major depressive disorder and subthresho1d depression in Izmir，Turkey：Preva1ence，socioeconomic differences，impairment and he1p?seeking［J］. J Affect Disord，2015，181：78-86.

［3］Mak A，Tang CS，Chan MF，et a1.Damage accrua1，cumu1ative g1ucocorticoid dose and depression predict anxiety in patients with systemic 1upus erythematosus［J］.C1in Rheumato1，2011，30（6）：795-803.

［4］Jern P，Johansson A，Piha J，et a1.Antidepressant treatment of premature ejacu1ation：discontinuation rates and preva1ence of side effects for dapoxetine and paroxetine in a natura1istic setting［J］. Int JImpot Res，2015，27（2）：75-80.

［5］Zanos P，Piantadosi SC，Wu HQ，et a1.The prodrug 4?Ch1o?rokynurenine causes ketamine?1ike antidepressant effects，but not side effects，by NMDA/G1ycineB?site inhibition［J］.J Pharmaco1 Exp Ther，2015，355（1）：76-85.

［6］關(guān)于發(fā)布《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見(jiàn)》的通知［J］.畜牧獸醫(yī)科技信息，2007（4）：35-36.

［7］李喜枝.產(chǎn)后抑郁癥中醫(yī)辨治初探［J］.云南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1991，14（2）：1-2.

［8］孫清廉.抑郁癥的辯證施治［J］.家庭中醫(yī)藥，2011（12）：58-59.

［9］邢協(xié)強(qiáng)，謝新年.抑郁癥的中醫(yī)辯證論治［J］.醫(yī)學(xué)臨床研究，2003，20（7）：541-542.

［10］邸 杰.中醫(yī)治療抑郁癥的辯證思路［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2009，7（7）：114-115.

［11］武 麗，張麗萍，陳貴海，等.解郁1號(hào)對(duì)抑郁大鼠血漿促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子和皮質(zhì)醇含量的影響［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2009，20（2）：513-514.

［12］夏 猛，覃振林，唐紅珍.調(diào)理脾胃法治療抑郁癥的衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)學(xué)評(píng)價(jià)［J］.廣西醫(yī)學(xué)，2011，33（9）：1190-1192.

［13］Redei EE，Ahmadiyeh N，Baum AE，et a1.Nove1 anima1 mode1s of affective disorders［J］.Semin C1in Neuropsychiatry，2001，6（1）：43-67.

［14］郭曉云，崔東紅，顧 靖，等.ω?3多不飽和脂肪酸對(duì)慢性輕度應(yīng)激抑郁癥大鼠糖水?dāng)z入量及腦單胺類(lèi)遞質(zhì)的影響［J］.中華精神科雜志，2007，40（4）：238-242.

［15］Wi11ner P.Va1idity，re1iabi1ity and uti1ity of the chronic mi1d stress mode1 of depression：a 10?year review and eva1uation［J］.Psycho?pharmaco1ogy（Ber1），1997，134（4）：319-329.

［16］Kushwah N，Jain V，Deep S，et a1.Neuroprotective Ro1e of Intermit?tent Hypobaric Hypoxia in Unpredictab1e Chronic Mi1d Stress Induced Depression in Rats［J］.PLoS One，2016，11（2）：e149309.

［17］Lu J，Shao RH，Hu L，et a1.Potentia1 antiinf1ammatory effects of acupuncture in a chronic stress mode1 of depression in rats［J］. Neurosci Lett，2016，618：31-38.

［18］戴 巍，李衛(wèi)東，盧 峻，等.電針對(duì)慢性應(yīng)激抑郁大鼠海馬神經(jīng)元凋亡及 JNK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響［J］.針刺研究，2010，35（5）：330-334.

［19］張麗萍，武 麗，張 曼.解郁1號(hào)對(duì)抑郁模型大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的影響［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2009，36（10）：1805-1806.

【中圖分類(lèi)號(hào)】R285.5

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

文章編號(hào)：2095?6894（2016）06?01?05

收稿日期：2016-05-20；接受日期：2016-06-04

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81302930）；廣西自然科學(xué)基金項(xiàng)目（2012GXNSFBA053091）

作者簡(jiǎn)介：王明杰.主治醫(yī)師.研究方向：疼痛疾病研究.E?mai1：45898628@qq.com

通訊作者：夏 猛.博士后，講師.研究方向：情志病證的中醫(yī)藥防治. E?mai1：hanksummer@163.com