張 江， 周立梅， 鄒 慧， 王孝方， 曲佳樂， 姜文月*

(1.長春康彼達(dá)科技有限公司，吉林長春 130012；2.吉林省現(xiàn)代中藥工程研究中心有限公司，吉林長春 130012)

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鹿茸珍葛膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

張 江1,2， 周立梅2， 鄒 慧2， 王孝方2， 曲佳樂2， 姜文月1,2*

(1.長春康彼達(dá)科技有限公司，吉林長春 130012；2.吉林省現(xiàn)代中藥工程研究中心有限公司，吉林長春 130012)

摘要[目的]建立鹿茸珍葛膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為該保健食品的質(zhì)量控制提供理論依據(jù)。[方法]采用分光光度法，根據(jù)GB5009系列國家標(biāo)準(zhǔn)方法及《中國藥典》，對該保健食品的功效成分和理化指標(biāo)進(jìn)行測定，建立質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。[結(jié)果]功效成分檢測：總黃酮≥22.6 g/kg，鈣≥173.5 g/kg，蛋白質(zhì)≥53.4 g/kg；理化指標(biāo)檢測：水分≤9.0%，灰分≤60%，崩解時(shí)限≤60 min。[結(jié)論]該方法操作簡便，準(zhǔn)確度高，重現(xiàn)性好，可作為該產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定依據(jù)。

關(guān)鍵詞鹿茸珍葛膠囊；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；功效成分；理化指標(biāo)

骨質(zhì)疏松癥是指骨骼中單位體積內(nèi)骨量減少、骨組織顯微結(jié)構(gòu)異常、骨脆性增加、容易發(fā)生骨折的一種疾病[1]。我國目前已進(jìn)入老齡化社會，且人口眾多，全世界老年人發(fā)病率已超過25%[2]，骨質(zhì)疏松癥已成為我國重要的公共衛(wèi)生問題之一。骨密度(BMD)是反映骨質(zhì)疏松程度的重要指標(biāo)，是預(yù)測骨折危險(xiǎn)性的重要依據(jù)。影響骨密度的因素很多，如年齡、性別、遺傳、飲食營養(yǎng)和地域等。目前，由于醫(yī)學(xué)上尚未完全根治骨質(zhì)疏松癥的方法，大部分都是通過增加骨密度來預(yù)防或治療骨質(zhì)疏松癥。

鹿茸珍葛膠囊由梅花鹿茸、珍珠粉、葛根、補(bǔ)骨脂等主要原料精制而成。此方以中醫(yī)理論的補(bǔ)腎、疏肝、補(bǔ)脾為主，輔助西醫(yī)理論的補(bǔ)鈣和雌激素為輔，精選保健食品原料經(jīng)科學(xué)配比精制而成。經(jīng)動物試驗(yàn)證明，其具有增加骨密度、防治骨質(zhì)疏松癥的保健功能。筆者對其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究，以期為該產(chǎn)品企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制定提供科學(xué)依據(jù)。

1材料與方法

1.1儀器Ultra-6100紫外分光光度計(jì)(北京普源精電科技有限公司)，ICE3500型原子吸收分光光度計(jì)(美國戴安)，ETHOSA型微波消解儀(意大利Milestone公司)，HH-S114型恒溫水浴鍋(金壇市華龍實(shí)驗(yàn)儀器廠)，DZF-6051型真空干燥箱(上海一恒科技有限公司)，SX-5-1型馬弗爐(天津市泰斯特儀器有限公司)，ZB-1E型智能崩解儀(天津市天大天發(fā)科技有限公司)。

1.2試藥蘆丁對照品購于中國食品藥品檢定研究所；鈣標(biāo)準(zhǔn)液、砷標(biāo)準(zhǔn)液、鉛標(biāo)準(zhǔn)液、汞標(biāo)準(zhǔn)液均購于國家有色金屬及電子材料分析測試中心；甲醇、乙醇及其他試劑均為分析純，購于北京化工廠；鹿茸珍葛膠囊(自制，批號：20150724、20150725、20150726)。

1.3方法

1.3.1功效成分測定。

1.3.1.1總黃酮[3]。①供試品溶液制備：精密稱定樣品6g，加70%乙醇100mL，80 ℃水浴回流2h，提取液50 ℃下減壓蒸餾，直至燒瓶內(nèi)無醇味。用75mL氯仿分3次萃取，收集下層水溶液濃縮并定容至50mL，待用。②樹脂純化：稱取2g經(jīng)預(yù)處理的聚酰胺樹脂粉末，濕法裝柱。取供試品水溶液2mL，緩慢滴入層析柱中，待液體被充分吸附后，用甲醇洗脫至流出液基本無色，洗脫流速1.0mL/min，收集洗脫液濃縮，用甲醇定容至10mL。③標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：準(zhǔn)確吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液(150μg/mL)0、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL置于10mL比色管中，加30%乙醇5mL，5%亞硝酸鈉0.3mL，振搖，室溫靜置5min；加10%硝酸鋁0.3mL，搖勻，室溫放置60min；加1.0mol/L氫氧化鈉溶液2mL，用30%乙醇定容至刻度，以零管為空白，在510nm處測定吸光度A，以濃度C為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。④樣品測定：取2mL待測液，其余操作方法同標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。

1.3.1.2鈣。①供試品、標(biāo)準(zhǔn)溶液制備：參考GB/T5009.92[4]。②測定方法：將消化好的試樣液、試劑空白液和鈣元素的標(biāo)準(zhǔn)濃度系列分別導(dǎo)人火焰進(jìn)行測定，具體測定參數(shù)：波長422.7nm,光源為可見光，火焰為空氣-乙炔，標(biāo)準(zhǔn)系列濃度為0.3～0.5mg/mL，稀釋溶液為20g/L氯化鑭溶液。

1.3.1.3蛋白質(zhì)。①樣品處理：參照GB5009.5[5]，同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。②測定方法：固定定氮蒸餾裝置，加入幾滴硫酸使水保持酸性，加熱至沸騰。向接收瓶內(nèi)加入10.0mL硼酸溶液及1～2滴混合指示液，并使冷凝管的下端插入液面下。準(zhǔn)確吸取2.0mL試樣處理液由小玻杯注入反應(yīng)室，以10mL水洗滌小玻杯并使之流入反應(yīng)室內(nèi)，隨后塞緊棒狀玻塞。將10.0mL氫氧化鈉溶液倒入小玻杯，提起玻塞使其緩緩流入反應(yīng)室，立即將玻塞蓋緊，并水封。夾緊螺旋夾，開始蒸餾。蒸餾10min后移動蒸餾液接收瓶，液面離開冷凝管下端，再蒸餾1min。然后用少量水沖洗冷凝管下端外部，取下蒸餾液接收瓶。以硫酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液滴定至終點(diǎn)，終點(diǎn)顏色為灰藍(lán)色，同時(shí)做試劑空白。

1.3.2理化指標(biāo)測定。①水分：參照GB5009.3[6]。②灰分[7]：參照GB5009.4。③崩解時(shí)限[8]：參照《中國藥典》2015版第4部。

2結(jié)果與分析

2.1功效成分

2.1.1總黃酮含量。標(biāo)準(zhǔn)曲線：回歸方程y=0.001 2x+0.001 5，R2=0.999 5。結(jié)果表明，蘆丁在75～600μg線性關(guān)系良好(圖1)。3批鹿茸珍葛膠囊樣品中總黃酮含量見表1。由表1可知，其平均值為28.3g/kg。考慮生產(chǎn)、檢測等誤差，以其平均值的80%為下限作為最低檢出限，確定鹿茸珍葛膠囊總黃酮含量不得低于22.6g/kg。

圖1　蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1　Standard curve of rutin

2.1.2鈣含量。3批鹿茸珍葛膠囊樣品中鈣含量見表1。由表1可知，其平均值為216.9g/kg?？紤]生產(chǎn)、檢測等誤差，以其平均值的80%為下限作為最低檢出限，確定鹿茸珍葛膠囊鈣含量不得低于173.5g/kg。

2.1.3蛋白質(zhì)含量。3批鹿茸珍葛膠囊樣品中蛋白質(zhì)含量見表1。由表1可知，其平均值為66.7g/kg?？紤]生產(chǎn)、檢測等誤差，以其平均值的80%作為最低檢出限，確定鹿茸珍葛膠囊樣品中蛋白質(zhì)含量不得低于53.4g/kg。

2.2理化指標(biāo)

2.2.1水分含量。由表2可知，3批樣品水分含量平均值為3.22%,均小于9.0%，符合膠囊劑水分的要求。

2.2.2灰分。由表2可知，3批樣品灰分含量平均值為47.80%?？紤]原料產(chǎn)地以及檢測等誤差，該產(chǎn)品灰分按3批樣品的平均值增加20%作為灰分的上限值，即灰分不得高于60%。

表13批樣品功效成分含量

Table1Contentsoffunctionalcomponentsofthreebatchesofsamples

g/kg

表23批樣品理化指標(biāo)

Table2Contentsofphysicalandchemicalindexesofthreebatchesofsamples

批號Batchnumber水分Moisturecontent∥%灰分Ashcontent∥%時(shí)間Timemin201507243.1249.8222201507253.3645.9221201507263.1947.6522平均Averagevalue3.2247.8021.67

2.2.3崩解時(shí)限。由表2可知，3批樣品崩解時(shí)限平均值為21.67min,均小于60min，符合膠囊劑崩解時(shí)限規(guī)定。

3結(jié)論

鹿茸珍葛膠囊以中醫(yī)補(bǔ)腎補(bǔ)骨生髓為主，結(jié)合西醫(yī)補(bǔ)鈣和雌激素為輔。該研究結(jié)果表明，總黃酮≥22.6g/kg,鈣≥173.5g/kg,蛋白質(zhì)≥53.4g/kg。為更好地控制產(chǎn)品質(zhì)量，該研究檢測了產(chǎn)品中水分、灰分、崩解時(shí)限等指標(biāo)。結(jié)果表明，水分和崩解時(shí)限均能滿足膠囊制劑的要求，因產(chǎn)品中含珍珠粉等天然鈣源，導(dǎo)致理化指標(biāo)中灰分含量較高，但不影響產(chǎn)品質(zhì)量和療效。

該研究所用方法操作簡單、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好，能夠?qū)υ摦a(chǎn)品的質(zhì)量進(jìn)行有效控制。下一步將對該產(chǎn)品的微生物和重金屬進(jìn)行檢測，完善該產(chǎn)品的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，為產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供科學(xué)依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 劉忠厚.骨質(zhì)疏松學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,1998:226.

[2] 黃火強(qiáng).骨質(zhì)疏松癥發(fā)病機(jī)理及臨床藥物治療[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2010,17(3):205-207.

[3] 白鴻.保健食品功效成分檢測方法[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社,2011:122-124.

[4] 中華人民共和國衛(wèi)生部.食品中鈣的測定:GB/T5009.92—2003[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2004.

[5] 中華人民共和國衛(wèi)生部.食品中蛋白質(zhì)的測定:GB5009.5—2010[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2010.

[6] 中華人民共和國衛(wèi)生部.食品中水分的測定:GB5009.3—2010[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2010.

[7] 中華人民共和國衛(wèi)生部.食品中灰分的測定:GB5009.4—2010[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2010.

[8] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:四部[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2015: 6-7.

基金項(xiàng)目吉林省科技發(fā)展計(jì)劃醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展專項(xiàng)資金項(xiàng)目(201307

作者簡介張江(1991- )，男，吉林長春人，初級，從事中藥學(xué)研究。*通訊作者，中級，博士，從事新藥及保健食品開發(fā)研究。

收稿日期2016-04-06

中圖分類號R 944.5

文獻(xiàn)標(biāo)識碼A

文章編號0517-6611(2016)16-117-02

StudyonQualityStandardforLurongzhengeCapsules

ZHANGJiang1,2,ZHOULi-mei2,ZOUHui2,JIANGWen-yue1,2*etal

(1.ChangchunKangbidaTechnologyCo.,Ltd.,Changchun,Jilin130012; 2.JilinModernChineseMedieineEngineeringandResearchCenterCo.,Ltd.,Changchun,Jilin130012)

Abstract[Objective] To establish the quality standard of Lurongzhenge Capsule, and to provide experimental basis for the quality control of healthy food. [Method] The spectrophotometry, GB5009 series of national standard and Chinese Pharmacopoeia were used to detect the functional component and physical and chemical index of healthy food. The quality control standard was established. [Result] Detection results of functional component were as follows: total flavonoids ≥ 22.6 g/kg, calcium ≥ 173.5 g/kg, and protein≥ 53.4 g/kg. Detection results of physical and chemical indexes were as follows: moisture≤ 9.0%, ash content ≤60%, and disintegration time ≤ 60 min. [Conclusion] This method is reliable, accurate, reproducible and feasible, and is suitable for the quality control of Lurongzhenge Capsules.

Key wordsLurongzhenge capsules; Quality standard；Functional component;Physicochemical index

27079YY)。