王　靜，紀(jì)維紅，徐長林，蘇軍虎,3

(1.蘭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，甘肅 蘭州　730070； 2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 草業(yè)學(xué)院/草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/甘肅省草業(yè)工程實(shí)驗(yàn)室/中-美草地畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展研究中心，甘肅 蘭州　730070； 3.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)-新西蘭梅西大學(xué)草地生物多樣性研究中心，甘肅 蘭州　730070； 4.Institute of Natural and Mathematical Sciences,Massey University,Private Bag 102 904 North Shore Mail Centre 0632,Auckland,New Zealand)

?

達(dá)烏爾黃鼠線粒體Cyt b 基因序列特征及其系統(tǒng)進(jìn)化分析

王靜1，紀(jì)維紅2,3,4，徐長林2，蘇軍虎2,3

(1.蘭州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，甘肅 蘭州730070； 2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 草業(yè)學(xué)院/草業(yè)生態(tài)系統(tǒng)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/甘肅省草業(yè)工程實(shí)驗(yàn)室/中-美草地畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展研究中心，甘肅 蘭州730070； 3.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)-新西蘭梅西大學(xué)草地生物多樣性研究中心，甘肅 蘭州730070； 4.Institute of Natural and Mathematical Sciences,Massey University,Private Bag 102 904 North Shore Mail Centre 0632,Auckland,New Zealand)

在甘肅省天祝藏族自治縣采集12只達(dá)烏爾黃鼠(Spermophilusdauricus)，PCR產(chǎn)物直接測序獲得Cyt b基因1140 bp序列，采用Clustal X 1.84、MEGA 6.0、Dna SP 5.0 等生物信息學(xué)軟件進(jìn)行了序列特征和系統(tǒng)地位分析。結(jié)果顯示，達(dá)烏爾黃鼠Cyt b基因含116個(gè)多態(tài)信息位點(diǎn)，群體中多態(tài)位點(diǎn)類型有轉(zhuǎn)換、顛換，Cyt b基因T，C，A，G堿基含量分別為33.7%，25.9%，27.6%，12.9%?；贙imura雙參數(shù)的遺傳距離顯示，屬內(nèi)種間大黃鼠(Spermophilusmajor)與新疆黃鼠(Spermophilusfulvus)間遺傳距離最小(0.034)，高加索黃鼠(Spermophilusmusicus)與達(dá)烏爾黃鼠最大(0.172)，達(dá)烏爾黃鼠群體內(nèi)遺傳距離為0.140，種群分化較大，基于NJ法構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹符合傳統(tǒng)分類標(biāo)準(zhǔn)，研究為達(dá)烏爾黃鼠Cyt b基因標(biāo)記的種群遺傳學(xué)應(yīng)用提供了參考。

達(dá)烏爾黃鼠；線粒體；遺傳多樣性；Cyt b

達(dá)烏爾黃鼠(Spermophilusdauricus)又名草原黃鼠，隸屬于嚙齒目松鼠科[1]，是地棲松鼠類的一種，大多棲息在沙質(zhì)或半沙質(zhì)山坡、平原等[2]。其分布范圍比較廣，多見于我國東北、華北、西北等地區(qū)，主要是鼠疫的宿主和農(nóng)業(yè)、牧業(yè)、林業(yè)等的害鼠之一，對人類衛(wèi)生健康也有較大的影響。

一個(gè)物種的準(zhǔn)確分類和生態(tài)學(xué)認(rèn)識是其綜合利用和管理的關(guān)鍵，迄今有關(guān)達(dá)烏爾黃鼠的形態(tài)、分類與分布、生長發(fā)育與繁殖、年齡、性比、種群數(shù)量動(dòng)態(tài)、棲息地特征、食性、晝夜活動(dòng)節(jié)律、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化開發(fā)及防控等方面取得了豐富的研究成果[3-6]。系統(tǒng)分類地位方面，對達(dá)烏爾黃鼠種的劃分仍存有爭議，Gunduz等[7]比較了土耳其黃鼠屬物種的形態(tài)等差異，并描述了一個(gè)新種。Tsvirka等[8]比較了黃鼠屬(Spermophilus)內(nèi)物種的分子遺傳關(guān)系。Helgen等[9]對包含達(dá)烏爾黃鼠的黃鼠屬物種進(jìn)行了詳細(xì)的分類，并論證了屬內(nèi)各物種之間的關(guān)系。甘肅境內(nèi)達(dá)烏爾黃鼠分布較廣[10]，天祝地區(qū)存有阿拉善黃鼠(Spermophilusalaschanicus)，對其進(jìn)一步的研究可為種的合理劃分及其綜合管理利用提供基礎(chǔ)。

線粒體是真核細(xì)胞中最小的復(fù)制單位，因其具有拷貝數(shù)目多、化學(xué)分子量小、蛋白質(zhì)編碼效率高、母系遺傳和進(jìn)化速度也較核基因組快等特點(diǎn)，近年來越來越多的被作為分子標(biāo)記，廣泛地應(yīng)用在動(dòng)物進(jìn)化遺傳學(xué)、遺傳多樣性、分子生態(tài)學(xué)、物種以及品系鑒定等方面[11]。線粒體的細(xì)胞色素b(Cytochrome b，Cyt b)位于線粒體內(nèi)膜的磷脂雙分子層中，是參與氧化磷酸化合成能量ATP過程電子傳遞鏈中不可或缺的重要物質(zhì)，也是線粒體自身編碼的為數(shù)不多的蛋白質(zhì)之一[12]。Meyer的研究表明，初步進(jìn)行某種物種分子系統(tǒng)發(fā)育研究時(shí)可以首先采用Cyt b基因，它是13個(gè)蛋白質(zhì)編碼基因中了解的最為清楚的基因，也是被認(rèn)為最可信的分子標(biāo)記之一，同時(shí)用保守引物擴(kuò)增線粒體Cyt b基因較其他線粒體基因要容易的多，因此線粒體Cyt b基因研究較為廣泛。已有研究表明線粒體Cyt b基因在研究親緣關(guān)系較近的物種分類階元系統(tǒng)關(guān)系和種系地理學(xué)方面非常有用[13]。對甘肅省境內(nèi)達(dá)烏爾黃鼠分子分類學(xué)地位的研究報(bào)道較少，通過對達(dá)烏爾黃鼠線粒體Cyt b基因全序列進(jìn)行序列分析，并與Gen Bank中黃鼠屬的多個(gè)種Cyt b基因進(jìn)行同源性比較分析，目的在為達(dá)烏爾黃鼠種質(zhì)資源保護(hù)、研究和利用提供基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù)，為達(dá)烏爾黃鼠的綜合控制、管理和開發(fā)利用等提供參考。

1　材料和方法

1.1樣本采集

12只達(dá)烏爾黃鼠于2012年6～7月從甘肅省境內(nèi)的武威市天祝自治縣采集。其中，雄性4只(成年個(gè)體3只)，雌性8只(成年個(gè)體4只)。采集肝臟后，于體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇中保存，帶入實(shí)驗(yàn)室置于-70℃冰箱冷凍保存待用。再根據(jù)頭骨類型、牙齒及其他性狀特征，通過參照標(biāo)本，對比鑒別[14-15]，將其歸分為達(dá)烏爾黃鼠。

1.2基因組DNA的提取

稱取研磨的肝臟組織0.5～1.0 g，采用常規(guī)的酚氯仿抽提法提取基因組DNA[16]。

1.3線粒體DNA序列的擴(kuò)增及測定

參考序列來自NCBI上發(fā)表的黃鼠屬(登錄號為NC005315)等線粒體DNA全序列。利用Clustal X(1.83)軟件[17]和BLAST軟件進(jìn)行序列對比后，用Primer Premier 5.0設(shè)計(jì)[18]用于擴(kuò)增控制區(qū)的特異性引物，所用引物由上海生工生物技術(shù)有限公司合成。引物序列為：上游5′-TCCCCAAAGCATCAAGGAAG；下游5′-GGCATGGGCTGATTAGACATT。PCR擴(kuò)增的反應(yīng)體系：DNA模板1 μL，PCR buffer(含Mg2+20 mmol/L)2.5 μL，dNTP(10 mmol/L)0.5 μL，上下游引物(10 pmol/μL)各1 uL，TaqDNA聚合酶(2 U/uL)0.5 μL，加水補(bǔ)足25 μL。擴(kuò)增的反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性5 min，94℃變性40 s，57℃退火40 s，72℃延伸40 s，35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸10 min，然后于4℃保存。擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物用1.5%的瓊脂糖凝膠電泳檢測，用DNA膠回收試劑盒(TaKaRa)進(jìn)行純化、回收，對擴(kuò)增效果良好的樣品送往上海生工生物工程有限公司進(jìn)行雙向測定。

1.4數(shù)據(jù)處理和分析

通過Chromas (V 1.45)軟件獲得原始序列數(shù)據(jù)，同時(shí)進(jìn)行人工校對，用Clustal X(1.83)程序?qū)λ玫腄NA序列進(jìn)行比對。通過Dna SP 5.0[19]比較分析。檢測多態(tài)位點(diǎn)，劃分單倍型，測定單倍型多樣度?；贙imura雙參數(shù)法估算遺傳距離[20]，應(yīng)用MEGA 6.0[21]的鄰近距離法(NJ)，參照文獻(xiàn)[9]的方法以草原旱獺(Marmotabobak)為外群構(gòu)建親緣關(guān)系樹，自引導(dǎo)檢驗(yàn)估計(jì)系統(tǒng)樹中結(jié)點(diǎn)的置信度，重復(fù)次數(shù)為1 000次。

2　結(jié)果與分析

2.1各序列變異分析

通過測序獲得了達(dá)烏爾黃鼠的Cyt b基因1 140 bp序列，發(fā)現(xiàn)了達(dá)烏爾黃鼠有116個(gè)多態(tài)信息位點(diǎn)，群體中多態(tài)位點(diǎn)類型有轉(zhuǎn)換、顛換，T，C，A，G堿基含量分別為33.7%，25.9%，27.6%，12.8%。表現(xiàn)出明顯的反G偏倚，G+C含量(38.7%)明顯小于A+T(61.3%)含量(表1)。

2.2遺傳距離分析

用MEGA 6.0軟件分析得到Kimura-2 parameter遺傳距離(表2)。研究結(jié)果顯示，各群體間的遺傳距離都與群體內(nèi)的一致。內(nèi)類群的最小遺傳距離是大黃鼠與新疆黃鼠之間(0.034)，最大遺傳距離是高加索黃鼠與達(dá)烏爾黃鼠之間(0.172)。長尾黃鼠，達(dá)烏爾黃鼠，安納托利亞黃鼠3個(gè)近緣物種之間的遺傳距離在(0.132)～0.169，平均遺傳距離為0.147。

2.3分子系統(tǒng)樹的構(gòu)建

根據(jù)Cyt b 基因構(gòu)建的系統(tǒng)進(jìn)化樹中，處于進(jìn)化外群的是兩種旱獺M.robusya和M.bobak。進(jìn)化處于頂端的兩個(gè)物種是猶地州地松鼠(S.mollis)和Spermophilusvigilis。本試驗(yàn)所研究的12種黃鼠屬基本處于進(jìn)化的中間位置。其中2個(gè)單倍型達(dá)烏爾黃鼠聚在一起形成一個(gè)分支再與安納托利亞黃鼠聚合成一個(gè)支。同樣是高加索黃鼠和小黃鼠先聚合后再與長

表1　黃鼠屬物種堿基序列組成

注：*為此研究測得的單倍型序列

表2　松鼠科Cyt b基因片段序列遺傳距離(基于Kimura雙參數(shù)模型)

注：SCI,SDA,ADA2,SER,SFU,SMA,SMU,SPY,SRE,SSU和SXA分別代表物種S.citellus,S.dauricus,S.dauricus,S.erythrogenys,S.fulvus,S.major,S.musicus,S.pygmaeus,S.relictus,S.suslicus.

尾黃鼠聚成一個(gè)合支形成姐妹群。新疆黃鼠和大黃鼠的分支與淡尾黃鼠(S.pallicaudata)和天山黃鼠的分支互為姐妹群，再與赤頰黃鼠聚合，最后與斑紋黃鼠聚合成一個(gè)合支。處于同一分支的物種遺傳距離小，相應(yīng)的進(jìn)化關(guān)系也相近(圖1)。

3　討論

線粒體 Cyt b基因一般情況不發(fā)生缺失和(或)插入，堿基置換大多數(shù)也很穩(wěn)定。很大程度上只傾向于轉(zhuǎn)換或顛換，并且編碼蛋白質(zhì)的密碼子位點(diǎn)進(jìn)化速度不恒定。線粒體Cyt b基因和其他大多數(shù)的脊椎動(dòng)物一樣，具有較高的保守性，也說明其在生物體的生命活動(dòng)過程中的重要作用。Cyt b基因作為蛋白質(zhì)編碼基因比線粒體rDNA和非編碼區(qū)的基因更易于排序，再加上能用一些通用引物擴(kuò)增[22]，所以，線粒體DNA細(xì)胞色素b序列在解決親緣關(guān)系較近的分類階元的系統(tǒng)關(guān)系方面很有用，被認(rèn)為是解決系統(tǒng)發(fā)育問題最可信的分子標(biāo)記之一[12]。通過試驗(yàn)所測得的線粒體Cyt b 基因部分序列進(jìn)行了分析，結(jié)果表明這幾種黃鼠科的線粒體Cyt b 基因序列合并后，A+T的平均含量為61.3%，明顯高于G+C的平均含量(38.7%)表現(xiàn)出明顯的A+T的含量偏斜。與其他黃鼠一樣，鳥嘌呤是稀有堿基，腺嘌呤出現(xiàn)比較頻繁，這與文獻(xiàn)記載的mtDNA富含A+T相一致[23]。

圖1　基于線粒體Cyt b基因序列構(gòu)建的NJ樹Fig.1　NJ tree of Spermophilus dauricus based on mitochondrial Cyt b gene sequences

用MEGA 6.0軟件分析得到的Kimura-2 parameter遺傳距離，結(jié)果顯示各群體間的遺傳距離都與群體內(nèi)的一致。最大遺傳距離為高加索黃鼠與達(dá)烏爾黃鼠之間(0.172)。最小遺傳距離是大黃鼠與新疆黃鼠之間(0.034)，其中，同種的達(dá)烏爾黃鼠由于生活在不同的地區(qū)，其進(jìn)化關(guān)系也相對較遠(yuǎn)，遺傳距離也比較大，為0.140。由分子系統(tǒng)樹分析大黃鼠和新疆黃鼠是姐妹種群，處于進(jìn)化的頂端。而高加索黃鼠和達(dá)烏爾黃鼠處于分子樹的不同支，交點(diǎn)也處于各分支的端點(diǎn)。固然采集該屬內(nèi)所有的物種對構(gòu)建物種系統(tǒng)進(jìn)化樹是很關(guān)鍵，物種的不全可能會導(dǎo)致系統(tǒng)關(guān)系的變化，今后有必要收集該屬內(nèi)更全面的物種，并利用多基因數(shù)據(jù)(線粒體基因組和核基因組)，或者更適宜的DNA條形碼進(jìn)行分類鑒定和系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系的研究。

種群里的遺傳性狀在世代之間的變化是生物的進(jìn)化。性狀是指基因的表現(xiàn)型，在繁殖過程中，基因會經(jīng)復(fù)制并傳遞到子代，基因的突變可使性狀改變，進(jìn)而造成種群中個(gè)體之間的變異。新性狀又會因物種遷徙或是物種間的基因轉(zhuǎn)移，而隨著基因在種群中傳遞，并受到環(huán)境的影響與環(huán)境發(fā)生很好的契合，這些改變有更多的生態(tài)意義，可能會導(dǎo)致分布范圍變化與物種的形成[24]。分子生物學(xué)與生物化學(xué)可以利用構(gòu)成生命的各種分子，用來研究生物的進(jìn)化關(guān)系。這些分子包括了核糖核酸(RNA)、脫氧核糖核酸(DNA)、線粒體(Cyt b，D-loop)基因、蛋白質(zhì)與糖體等[25]?？梢酝ㄟ^機(jī)器與電腦將這些分子的堿基序列、氨基酸序列定序構(gòu)建出與傳統(tǒng)分類學(xué)大致符合的分子系統(tǒng)樹。如此就能推斷并量化出物種間的親緣關(guān)系。本研究提供了甘肅境內(nèi)達(dá)烏爾黃鼠的Cyt b基因序列和分布信息，將為后續(xù)研究提供依據(jù)和相關(guān)信息，及進(jìn)一步物種客觀的劃分等提供基礎(chǔ)，從而為該物種的有效管理與合理利用奠定基礎(chǔ)。

[1]王靜,紀(jì)維紅,蘇軍虎,等.達(dá)烏爾黃鼠(Spermophilusdauricus)生態(tài)學(xué)研究進(jìn)展[J].中國農(nóng)學(xué)通報(bào),2015,31(8):33-39.

[2]孫小勇,高云芳,王琦,等.達(dá)烏爾黃鼠實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)、繁殖及其冬眠陣[J].獸類學(xué)報(bào),2012,32(4):356-361.

[3]姜樹珍,謝卓,董潤蘭,等.山西五臺縣草地嚙齒類動(dòng)物空間生態(tài)位寬度及重疊度研究[J].草原與草坪,2016,36(1):72-77.

[4]趙天飆,梁煒,秦豐程,等.草原黃鼠生態(tài)學(xué)研究概述[J].內(nèi)蒙古師大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)漢文版)，2000,29(2):125-129.

[5]劉加坤,王廷正,李金鋼,等.達(dá)烏爾黃鼠種群年齡結(jié)構(gòu)的研究[J].獸類學(xué)報(bào).1993,13(4):277-282.

[6]羅明澍,鐘文勤.達(dá)烏爾黃鼠種群生態(tài)的一些資料[J].動(dòng)物學(xué)雜志,1990(2):50-60.

[7]Gunduz I,Jaarola M,Tez C,etal.Multigenic and morphometric differentiation of ground squirrels (Spermophilus,Scuiridae,Rodentia) in Turkey,with a description of a new species[J].Molecular Phylogenetics & Evolution,2007,43(3):916-35

[8]Tsvirka M V,Spiridonova L N,Korablev V P.Molecular genetic relationships among east Palaerctic ground squirrels of the genusSpermophilus(Sciuridae,Rodentia)[J].Russian Journal of Genetics,2008,44(8):966-974.

[9]Helgen K M,Cole F R,Helgen L E,etal.Generic revision in the Holarctic ground squirrel genusSpermophilus[J].Journal of Mammalogy,2009,90(2):270-305.

[10]楊彥東,蘇軍虎,花立民.碌曲縣草原鼠害區(qū)劃研究[J].草原與草坪,2014,34(6):51-55.

[11]陳星,沈永義,張亞平.線粒體DNA在分子進(jìn)化研究中

的應(yīng)用[J].動(dòng)物學(xué)研究.2012,33(6):566-573.

[12]李宗軍,徐建興.線粒體的分子進(jìn)化與氧效應(yīng)[J].生物技術(shù)通訊,2005,16(2):168-171.

[13]Meyer A.Shortcoming of the cytochrome b gene as a molecular marker[J].Trends in Ecology and Evolution,1994,9(4):278-289.

[14]劉榮堂,武曉東.草地保護(hù)學(xué)-草地嚙齒動(dòng)物學(xué)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2011.

[15]付和平,武曉東,張福順,等.阿拉善黃鼠模式產(chǎn)地標(biāo)本染色體核型[J].動(dòng)物學(xué)雜志,2009,44(6):31-35.

[16]王海芳,蘇軍虎,劉榮堂,等.基于線粒體ND4基因的鼢鼠系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系[J].草原與草坪,2008(4):20-23.

[17]Thompson H D,Gibson T J,Pllewnia K F,etal.The CLUSTAL X windows interface:Flexible strategies for multiple sequence alignment aided by quality analysis tools[J ].Nucleic Acids Res,1997,25(24):4876-4882.

[18]Singh V K,Mangalam A K,Dwivedi S,etal.Primer Premier:program for design of degenerate primers from a protein sequence[J].Bio Techniques,1998,24:318-319.

[19]Rozas J,Sanchez-DelBarrio X M,Rozas R,etal.DNA polymorphism analyses by the coalescent and other methods)[J].Bioinformatics,2003,19(4):2496-2497.

[20]Kimura M A.Simple method for estimating evolutionary rate of base substitution through comparative studies of nucleotide sequences[J].Journal of Molecular Evolution,1980,16(2):111-120.

[21]Tamura K,Stecher G,Peterson D,etal.MEGA6:Molecular Evolutionary Genetics Analysis Version 6.0[J].Molecular Biology and Evolution,2013,30:2725-2729.

[22]郭新紅,劉少軍,劉巧,等.魚類線粒體DNA研究新進(jìn)展[J].遺傳學(xué)報(bào)，2004,31(9)：983-1000.

[23]Campbell B C,Steffenl ampbell J D.Phylogeny of the Nasonia species complex (Hymenoptera:Pteromalidae) inferred from an internal transcribed spacer (ITS2) and 28S rDNA sequences[J].Insect Molecular Biology,1994,2(4):225-370.

[24]孫婷婷,顏忠誠.物種關(guān)系模式及其進(jìn)化[J].生物學(xué)通報(bào)，2005，40(8):17-18.

[25]蘇軍虎,王靜,劉榮堂,等.從線粒體序列分異探討鼢鼠凸顱亞屬(Eospalax)種間差異的有效性[J].草地學(xué)報(bào),2011,19(4):694-698.

Sequence analysis of mitochondrial Cyt b gene and evolutionary relationships ofSpermo-philusdauricus

WANG Jing1, JI Wei-hong2,3,4,XU Chang-lin2,SU Jun-hu2,3

(1.LanzhouVocationalTechnologyCollege,Lanzhou730070,China； 2.CollegeofPrataculturalScience,GansuAgriculturalUniversity/KeyLaboratoryofGrasslandEcosystem(MinistryofEducation)/PrataculturalEngineeringLaboratoryofGansuProvince/Sino-U.S.CentersforGrazinglandEcosystemSustainability,Lanzhou730070,China； 3.GansuAgriculturalUniversity-MasseyUniversityResearchCentreforGrasslandBiodiversity,GansuAgriculturalUniversity,Lanzhou730070,China； 4.InstituteofNaturalandMathematicalSciences,MasseyUniversity,PrivateBag102 904NorthShoreMailCentre0632,Auckland,NewZealand)

TwelveSpermophilusdauricuswere collected from Tianzhu,Gansu Province,the mitochondrial 1140 bp Cyt b gene sequence were directly sequenced based on PCR products.Then Clustal X 1.84,MEGA 6.0 and Dna SP 5.0 bioinformatics software were used for sequence analysis.The results showed thatS.dauricushad 116 polymorphic information sites.Population polymorphic loci types had transition,transversion,Cyt b gene T,C,A,G nucleotide contents were 33.7%,25.9%,27.6%,12.9%.Based on genetic distance of Kimura two-parameter display,intraspecific between large ground squirrel (S.major) and Xinjiang ground squirrel (S.fulvus) genetic distance is the minimum (0.034),then Caucasian squirrels (S.musicus) and ground squirrels (S.dauricus) is the maximum (0.172),withinSpermophilusdauricusgenetic distance is 0.140,suggesting large population differentiation,NJ-based phylogenetic tree meeted with the traditional taxonomy.The results provided a reference marker toSpermophilusspeciespopulation genetics researches.

Spermophilusdauricus；mitochondrial；evolutionary relationships;Cyt b

2016-04-06；

2016-05-18

蘭州市農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目“蘭州市農(nóng)田害鼠(達(dá)烏爾黃鼠)監(jiān)測及防控技術(shù)研究”(2013-4-131)；甘肅省高?？蒲许?xiàng)目“藥用動(dòng)物鼢鼠(塞隆骨)DNA條碼形篩選及鑒定研究”(2015A-205)資助

王靜(1982-),女,甘肅蘭州市人，博士,講師，主要從事生物工程的教學(xué)研究工作。

E-mail：jwang_423@126.com

S 443；Q 754

A

1009-5500(2016)03-0017-06

蘇軍虎為通訊作者。