胡京紅，周海燕，王淑艷，黃　翔，王　娟

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，北京　100029；2.亞寶北中大(北京)制藥有限公司,北京　101300；3.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京　100102)

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ICP-AES法檢測清開靈注射液中多種無機元素含量

胡京紅1，周海燕2，王淑艷1，黃翔1，王娟3

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，北京100029；2.亞寶北中大(北京)制藥有限公司,北京101300；3.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京100102)

摘要：目的建立同時測定清開靈注射液中多種無機元素含量的方法。方法用微波消解法對樣品進(jìn)行預(yù)處理，采用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜儀(ICP-AES)對10個不同批次清開靈注射液中的無機元素進(jìn)行含量測定。結(jié)果通過各元素含量測定方法學(xué)考察，確立了儀器的檢出限及各元素的最佳檢測波長，10批次清開靈注射液各元素相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.16%～4.90%，加標(biāo)回收率在92.0%～117.0%之間。結(jié)論該方法靈敏度高、可靠易行，滿足清開靈注射液無機元素含量檢測條件，初步確立其各元素含量范圍。

關(guān)鍵詞：清開靈注射液；ICP-AES；無機元素

清開靈注射液是北京中醫(yī)藥大學(xué)曹春林教授于1979年在《溫病條辯》“安宮牛黃丸”的基礎(chǔ)上研制而成的現(xiàn)代中藥速效制劑，具有清熱解毒、化痰通絡(luò)、醒神開竅的功效，在中醫(yī)治療急重?zé)岚Y中發(fā)揮著不可替代的作用。目前，有關(guān)清開靈有機成分的研究已有大量報道，質(zhì)量控制方法大多集中在有效成分(或指標(biāo)性成分)的含量測定或指紋圖譜研究方面[1-3]，而其無機微量元素的研究則鮮有報道。無機元素與有機成分之間具有相互協(xié)同、相互滲透、共同發(fā)揮藥效的作用[4-5]，因此加強對中藥制劑中無機元素的質(zhì)量研究是對中藥質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的有益補充。本文擬從無機元素含量檢測的角度對臨床應(yīng)用廣泛、不良反應(yīng)較為突出的中藥注射劑代表方劑清開靈注射液進(jìn)行研究，應(yīng)用ICP-AES方法對清開靈注射液中所含的無機元素進(jìn)行分析，為其含量控制提供依據(jù)。

1儀器與試藥

1.1儀器SPS8000電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜儀(北京科創(chuàng)海光儀器有限公司)，儀器主要工作參數(shù)：入射功率：1.2 kW，冷卻氣流量：16 L·min-1，霧室氣流量：0.8 L·min-1，輔助氣流量：0.6 L·min-1，載氣流量：0.4 L·min-1，積分次數(shù)：3 次；重復(fù)次數(shù)：1 次。MDS-6型微波消解儀(上海新儀化學(xué)科技有限公司)，微波消解程序為升壓控制模式，消解功率與壓力設(shè)置為5檔，選定儀器工作參數(shù)見表1；2000D型超純水機(北京長風(fēng)儀器儀表公司)。

1.2試藥清開靈注射液(亞寶北中大(北京)制藥有限公司，批號012907，110103，110203，110204，110501，110702，111103，111202，111203，111204)，每批次取10份樣品；硝酸(優(yōu)級純，北京化工廠)；超純水(電阻率18.2 MΩ·cm-1)；高純氬氣(北京綠氧天罡科技開發(fā)有限公司)；對照品：Cu，F(xiàn)e，Zn，Na，K，Ca，Mn，Mg，P，Cr，Pb，Ni，Cd等單元素對照品儲備液，質(zhì)量濃度均為1 000 μg·mL-1(中國計量科學(xué)研究院提供)，Al，Ba，Ti等單元素對照品儲備液質(zhì)量濃度均為 100 μg·mL-1(中國計量科學(xué)研究院提供)。

2方法

2.1對照品溶液的配制將Cu，F(xiàn)e，Mn，Zn，Na，K，Ca，Mg，P等單元素對照品儲備液按照質(zhì)量濃度為0.00，0.50，1.00，5.00，10.00和20.00 μg· mL-1梯度配制成混合對照品系列溶液；Cr，Pb，Ni，Cd，Al，Ba，Ti 等單元素對照品儲備液按照質(zhì)量濃度為0.00，0.25，0.50，1.00，2.00和4.00μg·mL-1梯度配制成混合對照品系列溶液，對照品儲備液用體積分?jǐn)?shù)為1% 的硝酸逐級稀釋。

2.2樣品處理精密吸取清開靈注射液1 mL，置于消解罐中，加入4 mL硝酸溶液，旋緊頂蓋，置于微波消解爐內(nèi)按照表1消解程序微波消解。消解完畢，壓力顯示小于1 MPa 時，打開罐蓋，將樣品溶液放置通風(fēng)櫥內(nèi)靜置抽風(fēng)，加熱板趕酸至近干，加入2.5 mL硝酸溶液，用超純水定量轉(zhuǎn)移樣品并定容到25 mL的比色管中，同時制備空白樣品溶液，備用。

表1微波消解程序

Tab.1 The procedure of microwave digestion

步驟功率/W壓力/MPa時間/s13000.330024000.612034001.012044001.512053002.0300

2.3樣品的測定以10 mL·L-1的硝酸溶液作參比，通過對對照品溶液、試劑空白和樣品溶液進(jìn)行檢測對比，選擇靈敏度適中、穩(wěn)定性好且光譜干擾少的譜線為該樣品各元素的分析譜線。將系列對照品溶液進(jìn)樣，對各元素的對照品系列溶液進(jìn)行測定，得各元素標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線分別對10批次清開靈注射液樣品進(jìn)行檢測。

3結(jié)果

3.1標(biāo)準(zhǔn)曲線在測試條件下，依次對系列對照品溶液進(jìn)行測試，儀器工作站繪制各元素曲線，其線性相關(guān)系數(shù)在0.999 5～1.000 0之間。

3.2儀器的分析譜線和檢出限通過對對照品溶液、試劑空白和樣品溶液進(jìn)行掃描對比，綜合分析3條譜線，選擇1條靈敏度高、穩(wěn)定性好且光譜干擾少的適合清開靈注射液樣品分析的譜線；取空白溶液平行測定10次，以3倍空白溶液的標(biāo)準(zhǔn)偏差作為儀器檢出限，低于此質(zhì)量濃度的元素均為未檢出，各元素分析的譜線和檢出限見表2。

表2各元素的分析譜線和檢出限

Tab.2 Analysis spectrum line and limit of detection

元素分析譜線/nm檢出限/μg·mL-1元素分析譜線/nm檢出限/μg·mL-1元素分析譜線/nm檢出限/μg·mL-1Na588.9950.011Mn257.6100.0001Ba455.4030.001K766.4900.032Mg279.5530.0002Cr283.5630.002Ca393.3660.001Fe259.9400.0050Cd214.4380.033P213.6180.204Ti334.9410.0030Cu324.7540.003Al396.1520.025Pb220.3530.0310Ni231.6040.007Zn206.2000.003

3.3精密度與回收率將一定質(zhì)量濃度的混合對照品溶液平行測定10次，用其相對標(biāo)準(zhǔn)偏差確定本實驗方法條件下各元素測定的精密度。在樣品中加入不同質(zhì)量濃度的各元素對照品溶液，并按照1.2項下方法進(jìn)行消解和測定，進(jìn)行加標(biāo)回收實驗，各元素的精密度及回收率見表3。

表3各元素精密度和回收率數(shù)據(jù)

Tab.3 The results of the precision and recovery tests for each element

元素RSD/%回收率/%元素RSD/%回收率/%元素RSD/%回收率/%Na1.5692.0Mn1.0094.5Ba1.35101.2K4.46117.0Mg0.16100.8Cr1.7293.7Ca0.6497.5Fe1.9296.9Cd4.90116.8P3.40100.4Ti0.08105.0Cu1.64100.0Al1.1196.2Pb1.9099.4Ni1.3496.1Zn3.39103.4

各元素相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.16%～4.90%之間，回收率在92.0%～117.0%之間，說明選定的儀器測試條件及方法可靠，適用于清開靈注射液中各元素測定。3.410批次清開靈注射液無機元素含量測定結(jié)果見表4。

表410批清開靈注射液元素含量測定結(jié)果

Tab.4 The determination results of trace element content in 10 batches of Qingkailing Injections

(n=10)

4討論

清開靈注射液中含有人體必需的微量元素，其生物活性和藥效與無機元素的含量高低有著密切的關(guān)系，研究這些無機元素各成分的比例及相互關(guān)系有重要的意義。無機元素與中藥療效間存在著密切的關(guān)系[6-8]，且不同類別功效的中藥中無機元素的含量有明顯差異，王健等[9]測定了368味中藥的11種元素含量，發(fā)現(xiàn)所測得元素總量從多到少排序依次是：鎮(zhèn)咳藥，抗腫瘤藥，祛痰藥，降壓藥，抗菌藥，抗病毒藥，抗真菌藥，鎮(zhèn)靜藥，消炎藥和鎮(zhèn)痛藥。對于中藥材及中成藥中無機元素的測定，可作為其質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)中的一個重要指標(biāo)。

本實驗結(jié)果表明，清開靈注射液10個批次樣品中各元素含量基本相近，其含量由高到低依次為Na、K、Ca、P、Zn、Al、Mn、Mg、Fe、Ti、Pb、Ba、Cr、Cd、Cu、Ni。其中鋅、鋁、錳、鎂、鐵等微量元素含量較高。據(jù)文獻(xiàn)報道，鐵、銅及其配合物具有明顯的抗菌消炎作用[10]。由于清開靈注射液給藥途徑特殊，必須控制有毒重金屬元素的含量，本實驗測得重金屬元素鉛、鎘、銅含量較低，有些批次未檢出鉛和鎘，砷和汞在10批次中均未檢測到，符合文獻(xiàn)中的規(guī)定[11]：鉛≤5.0 mg· kg-1，鎘≤0.3 mg· kg-1，砷≤2.0 mg·kg-1，銅≤20 mg· kg-1，汞≤0.2 mg·kg-1，重金屬總量≤20 mg·kg-1。

實驗采用ICP-AES法對10個不同批次清開靈注射液無機元素進(jìn)行含量測定，方法學(xué)考察顯示各元素相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.16%～4.90%，加標(biāo)回收率在92.0%～117.0%之間，說明該方法具有較好的精密度和準(zhǔn)確度，能滿足清開靈注射液無機元素含量測定要求。本研究為有效監(jiān)控清開靈注射液生產(chǎn)各環(huán)節(jié)中重金屬元素的污染隱患及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的控制提供依據(jù)。

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基金項目：北京中醫(yī)藥大學(xué)自主選題項目(編號：2011-JYBZZ-JS061)

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.04.015

中圖分類號：R927.2

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1004-2407(2016)04-0376-04

(收稿日期：2015-09-28)

Determination of trace elements in Qingkailing Injections by ICP-AES

HU Jinghong1，ZHOU Haiyan2，WANG Shuyan1，HUANG Xiang1，WANG Juan3

(1.School of Preclinical Medicine，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China； 2.Yabao Beizhongda(Beijing) Pharmaceutical Limited Company，Beijing 101300，China； 3.School of Chinese Materia Medica，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100102，China)

Abstract:Objective To establish a method for the determination of a variety of inorganic elements in Qingkailing Injections simultaneously.Methods Qingkailing Injections of 10 different batches were dissolved by microwave digestion and then determined by inductively coupled plasma atomic emission spectrometry(ICP-AES).Results Under the established conditions，the recoveries were between 92.0%-117.0% of the 10 batches of Qingkailing Injections, and the detection relative standard deviations(RSD) were between 0.16%-4.90%.Conclusion The method is sensitive，reliable and suitable for the determination of inorganic elements in Qingkailing Injections.

Key words：Qingkailing Injection；ICP-AES；inorganic elements