李秀蘭，孫德軍，李尊強(qiáng)，董洪海，范奇光，蒼會波，陳榮平

(1.黑龍江省煙草公司樺南煙葉分公司，黑龍江樺南 154400；2.黑龍江省煙草公司綏化煙葉分公司，黑龍江綏化 152000；3.黑龍江省煙草公司牡丹江煙草科學(xué)研究所，黑龍江牡丹江 157011)

?

部分烤煙新品種的角斑病抗性調(diào)查

李秀蘭1，孫德軍2，李尊強(qiáng)3，董洪海2，范奇光2，蒼會波2，陳榮平3

(1.黑龍江省煙草公司樺南煙葉分公司，黑龍江樺南 154400；2.黑龍江省煙草公司綏化煙葉分公司，黑龍江綏化 152000；3.黑龍江省煙草公司牡丹江煙草科學(xué)研究所，黑龍江牡丹江 157011)

摘要[目的]評價黑龍江部分烤煙新品種的角斑病抗性。[方法]在黑龍江省角斑病常年發(fā)病較重的地塊調(diào)查各個烤煙品種、品系的發(fā)病情況。[結(jié)果]發(fā)現(xiàn)高抗角斑病品種LJ982、0110-52、0631-112、0206-21和0206-41，其中LJ982和0206-21較易烘烤，主要經(jīng)濟(jì)性狀較好，可在生產(chǎn)上示范應(yīng)用，其他品種可作為抗病育種材料。[結(jié)論]研究結(jié)果為促進(jìn)煙葉的優(yōu)質(zhì)高效生產(chǎn)提供了理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞烤煙品種；角斑??；抗性；調(diào)查

煙草角斑病在世界各地均有發(fā)生，是煙草產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生的病害之一，由丁香假單胞桿菌角斑專化型Pseudomonassyringaepv.Angulata(Fromeetal)Holland[1]侵染引起。近些年來，由于生產(chǎn)上沒有抗角斑病品種，給煙草角斑病流行創(chuàng)造了條件，使得該病害呈現(xiàn)逐年加重的趨勢，尤以黑龍江和遼寧等省發(fā)病最嚴(yán)重，個別煙區(qū)發(fā)病率高達(dá) 100%，已嚴(yán)重威脅部分煙區(qū)煙葉生產(chǎn)的發(fā)展[2]。角斑病常與野火病同時發(fā)生，病原同屬細(xì)菌，在細(xì)菌學(xué)上有很多相似之處，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為這2種病害是同一種病原所致[3]，癥狀上角斑病沒有野火病毒素產(chǎn)生的黃色暈圈，角斑病病斑的壞死區(qū)域呈現(xiàn)黑色和更多的不規(guī)則的角[4-6]。黑龍江省煙區(qū)降水多的年份野火病常年發(fā)生，最初是野火病為主，之后是野火病和角斑病混合發(fā)生，近幾年角斑病上升為主要病害。遼寧省的遼東煙區(qū)角斑病發(fā)生比黑龍江省早幾年。2013年后期降水較多，黑龍江省的綏化、肇州、望奎、賓縣、林口和寶清等地都發(fā)生了較嚴(yán)重的角斑病，給煙區(qū)造成較大的損失。從種植品種看，遼寧省主栽遼煙17和遼煙19，搭配吉煙9號和云煙87等，吉林省種植吉煙9號、龍江911、龍江935、龍江981和吉煙10號，黑龍江省主栽龍江911和龍江981，搭配種植龍江925和LJ237，這些品種都不抗角斑病，給角斑病流行創(chuàng)造了條件，每年即使投入大量的人力、物力防病，但效果不佳。

選育和使用抗病品種是防治角斑病最經(jīng)濟(jì)有效的措施。早在1942年，Clayton就成功地利用長花煙草(N.longiflora)和普通煙草(N.tabacum)雜交獲得了抗野火病的TL106，將長花煙草的野火病(角斑病)抗性基因轉(zhuǎn)移到普通煙草TL106中，該抗性是由單顯性基因控制，TL106也對角斑病(P.angulate)有抗性。TL106的抗性基因通過Clayton等的努力已轉(zhuǎn)移到許多栽培品種中[7]，白肋煙品種Burly21和Kentucky14抗煙草野火病和角斑病[8]。津巴布韋采用基因漸滲將黃花煙(N.rustica)品種Brasilea的野火病0號、1號和角斑病抗性基因轉(zhuǎn)移到普通煙草中[9]，云南省從津巴布韋引進(jìn)的烤煙品種KRK26和KRK22抗角斑病[10]，國內(nèi)關(guān)于煙草抗角斑病品種鮮見報道，黑龍江省煙草公司牡丹江煙草科學(xué)研究所在常年發(fā)病較重的黑龍江綏化建立抗性鑒定圃，將新育成的烤煙高代材料或品種(系)種植在病圃上，篩選抗角斑病的烤煙品種，以期為煙葉生產(chǎn)提供更多可供選擇的抗病品種，確保煙葉的優(yōu)質(zhì)高效生產(chǎn)。

1材料與方法

1.1材料為選育抗角斑病的烤煙品種，黑龍江省煙草公司牡丹江煙草科學(xué)研究所育成新品系及生產(chǎn)上使用的品種，分別于2009和2013年在黑龍江省角斑病發(fā)病較重的煙區(qū)進(jìn)行發(fā)病情況測試，2 a共有47份(次)材料品種(系)參試，所有試驗材料(表1)均由牡丹江煙草科學(xué)研究所提供。

1.2試驗設(shè)計試驗地點(diǎn)設(shè)在黑龍江省綏化市永安鄉(xiāng)紅旗村。采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計，3次重復(fù)，單行區(qū)，每區(qū)種植20株。株距0.6 m，行距1.0 m。四周以NC89為保護(hù)行。人工誘發(fā)與自然發(fā)病相結(jié)合，在病害高發(fā)期調(diào)查發(fā)病程度。

1.3田間管理與接種采用當(dāng)?shù)責(zé)熑~生產(chǎn)的規(guī)范化栽培技術(shù)措施，雙棚塑料托盤育苗，3月上旬播種，4月上旬假植，5月上旬移栽。施肥量與當(dāng)?shù)氐目緹熒a(chǎn)田相當(dāng)，施純氮量37.5 kg/hm2，氮、磷、鉀比例為1∶1.5∶2.5。全生育期不用藥劑防治角斑病，地膜覆蓋栽培，正常打頂留葉。打頂前噴施角斑病菌液接種。

表1　供試材料

1.4病害發(fā)病程度調(diào)查選擇發(fā)病最重的時間，即8月下旬進(jìn)行調(diào)查。

1.4.1煙草葉斑病害田間病害嚴(yán)重程度分級標(biāo)準(zhǔn)。病害嚴(yán)重度以全株為單位分級，適用于所有葉斑病害較大面積調(diào)查。分級標(biāo)準(zhǔn)：0級，全株無病；0.5級，全株病斑很少(小病斑2 mm以內(nèi)不超過15個，5 mm以內(nèi)病斑不超過2個)；1級，全株葉片有少量病斑(小病斑少于50個，大病斑2～10個)；2級，1/3以下葉片上有中量病斑(小病斑50～100個，大病斑10～20個)；3級，1/3～2/3葉片上有病斑，病斑中量到多量(小病斑100個以上，大病斑20個以上)，下部個別葉片干枯；4級，2/3以上葉片有病斑，病斑多，部分葉片干枯。

1.4.2發(fā)病程度計算方法。發(fā)病率計算公式：

T=∑Mi/N×100

式中，T—發(fā)病率；Mi—各發(fā)病級別的株數(shù)；N—調(diào)查總株數(shù)。

病情指數(shù)計算公式：

DI=∑(Si×Mi)/4N×100

式中，DI—病情指數(shù)；Si—發(fā)病級別；Mi—相應(yīng)發(fā)病級別的株數(shù)；i—病情分級的各個級別；N—調(diào)查總株數(shù)。

1.4.3抗病性評價。以NC89的病情指數(shù)作為高感的中值，角斑病病情指數(shù)在23.33以下定為高抗，23.34～46.66定為中抗，46.67～70定為中感，70.01以上定為高感。顯著性分析用SPSS軟件。

2結(jié)果與分析

2.12009年各品種發(fā)病調(diào)查結(jié)果由表2可知，通過抗病性比較，參試品種中沒有達(dá)到高抗水平的品種；9859-51C、9619-531、0110-51、0110-411、9861-82、0107-113、9833-514和0105-5發(fā)病較輕，病情指數(shù)分別為28.45、37.66、38.90、42.31、42.62、42.98、47.22和49.17，達(dá)到中抗水平；發(fā)病較重的有0105-11、NC89、吉煙9號和LJ237，病情指數(shù)分別為78.33、85.00、86.11和88.46，為高感。其他為中感角斑病。

2.22013年各品種發(fā)病調(diào)查結(jié)果由表2可知，LJ982、0631-112、0110-52、0206-21和0206-41病情指數(shù)平均值分別為0、0、0、10.00和10.99，表現(xiàn)為高抗角斑?。?616-62、0714-42、0709-12、0709-322、0716-111、071-422和0422-42病情指數(shù)分別為25.00、27.78、28.17、35.65、39.58、41.20和43.33，表現(xiàn)為中抗角斑病；0716-412、0716-322、0702-721和0716-423病情指數(shù)分別為52.00、62.50、66.58和66.69，表現(xiàn)為中感角斑??；0710-112、紅花大金元、NC89、0710-113、0709-521、0703-31、0717-43和0703-71病情指數(shù)分別為86.34、71.95、81.67、80.39、79.53、76.61、75.38和74.24，表現(xiàn)為高感角斑病。

2.32013年品種比較試驗角斑病田間自然發(fā)病情況調(diào)查結(jié)果2013年在黑龍江省寶清進(jìn)行烤煙品種比較試驗，共有15個品種(系)參試，7月降水偏多，角斑病發(fā)生嚴(yán)重，NC71、云煙99、云煙87、K326和龍江851發(fā)病率分別為85%、82%、75%、80%和70%，其中NC71、云煙87、K326和龍江851這4個品種失去采烤價值；0206-41和LJ982未發(fā)病，PVH2254、云煙97和0408發(fā)病較輕，發(fā)病率分別為1%、5%和5%(表3)。

表2角斑病抗性鑒定圃調(diào)查數(shù)據(jù)統(tǒng)計

Table 2Field investigation data statistics of the resistance evaluation on angular leaf spots

年份Year試驗代號Testcode品種(系)名稱Variety(line)name病情指數(shù)Diseaseindex抗性評價Resistanceevaluation2009N19859-51C28.45a中抗N79619-53137.66ab中抗N210110-5238.90ab中抗N190110-41142.31ab中抗N59861-8242.62ab中抗N150107-11342.98ab中抗N33351447.22abc中抗N130105-549.17abc中抗N140107-11250.28abc中感N210110-5151.11abc中感N170110-1352.22abc中感N110102-72153.89abcd中感N160109-31254.27abcde中感N8龍江92558.26abcdef中感N100102-4258.89abcdef中感N180110-14259.44abcdef中感N4龍江98162.78bcdef中感N6CV8766.11bcdef中感N29826-412C70.00bcdef中感N120105-1178.33cdef高感N23NC8985.00def高感N22吉煙9號86.11ef高感N9LJ23788.46f高感2013B1LJ9820a高抗B30631-1120a高抗B200110-520a高抗B240206-2110.00ab高抗B230206-4110.90ab高抗B20616-6225.00abc中抗B120714-4227.78abc中抗B70709-11228.17abc中抗B130709-32235.65abcd中抗B140716-11139.58abcde中抗B170716-42241.20abcdef中抗B210422-4243.33abcdef中抗B160716-41252.00bcdef中感B150716-32262.50cdef中感B40702-72166.58cdef中感B180716-42366.69cdef中感B60703-7174.24def高感B190717-4375.38def高感B50703-3176.61def高感B80709-52179.53def高感B110710-11380.39def高感B22NC8981.67ef高感B9紅大81.95ef高感B100710-11286.34f高感

注：同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示不同處理間在0.05水平差異顯著。

Note：Different lowercases in the same row indicated significant differences at 0.05 level among treatments.

表3品種比較試驗田間自然發(fā)病調(diào)查結(jié)果

Table 3Variety comparative test on the natural infection in open field

代號Code品種(系)名稱Variety(line)name發(fā)病率Incidencerate∥%G1NC7185G2PVH22541G3云煙975G4云煙9982G5紅花大金元23G6云煙8775G7K32680G80206-410G9NC8910G10中煙1009G1104085G12龍江85177G13龍江98120G14LJ9820G15龍江91120

3討論

煙草角斑病抗源材料國內(nèi)鮮見相關(guān)報道，美國20世紀(jì)70年代NICOTINAprocedures for experimental use報道了野火病和角斑病多集中在野生煙，抗野火病0號小種的有N.alata、N.attenuata、N.bigelovii、N.longiflora、N.nudicaulis、N.repanda、N.rustica、N.suaveolens、N.arentsii、N.bonariensis、N.debneyi、N.gluca、N.plumbaginifolia、N.langsdorffii、N.trigonophylla、N.acaulis、N.cavicola、N.fragrans、N.undulata和N.wigandioie?？挂盎鸩?號小種的有N.nudicaulis、N.repanda、N.rustica和N.undulata。角斑病抗源有N.alata、N.occidentalis和N.sylvestris[7]。我國還沒有利用國外抗性種質(zhì)選育出抗角斑病和野火病煙草品種的報道，TL106從長花煙轉(zhuǎn)來野火病抗性基因，該品種也抗角斑病，Burly21和KY14在我國煙草種質(zhì)庫中有所保存，可在育種工作中使用。

LJ982是用NC89和9304雜交選育而成的常規(guī)定型品種，NC89感角斑病，LJ982的抗性有可能來自9304，其抗性來源尚需進(jìn)一步研究。0206-21和0206-41是用龍江911與9529-212A雜交選育而成的常規(guī)定型品種，栽培煙草較少，9529-212A是由4082與8021雜交選育而成的常規(guī)定型材料。0110-52是由龍江911與8021雜交選育而成的常規(guī)定型材料，8021有可能是角斑病抗性來源，需進(jìn)一步研究。0631-112是由McNair944與9609-531雜交選育而成的常規(guī)定型材料。由于早期TL106在國內(nèi)使用較少，這些角斑病的抗性可能不是來源于TL106。

4結(jié)論

4.1篩選出抗角斑病的烤煙品種(系)及應(yīng)用病圃鑒定結(jié)果顯示，LJ982、0631-112、0110-52、0206-21和0206-41這5個品種(系)高抗角斑病，9859-51C等12個品種(系)中抗角斑病，品種對比試驗田自然發(fā)病情況調(diào)查結(jié)果LJ982和0206-41未發(fā)病，也驗證了病圃鑒定結(jié)果。LJ982、0206-21、0110-52和0206-41表現(xiàn)出較穩(wěn)定的角斑病抗性。黑龍江省烤煙生產(chǎn)

試驗結(jié)果顯示，LJ982植株塔形，葉形長橢圓，除高抗角斑病外還免疫TMV，易烤，烤后煙葉金黃到橘黃，主要農(nóng)藝、經(jīng)濟(jì)性狀表現(xiàn)較好，于2015年通過黑龍江省煙草品種審評委員會審評，是一個兼顧抗性和品質(zhì)的優(yōu)良品種。該品種落黃稍慢，生育期略長，達(dá)到124 d左右，可在積溫較高或輕質(zhì)土壤種植，注意控制氮肥用量，增加灌水措施。0206-21和0206-41為姊妹系，該2個新品系同時兼抗角斑病和赤星病。0206-21參加過黑龍江省烤煙品種區(qū)域試驗和示范試驗，表現(xiàn)出早熟、耐肥、易烤等特點(diǎn)，主要經(jīng)濟(jì)性狀較好，外觀質(zhì)量和內(nèi)在質(zhì)量均較好，在黑龍江省綏化表現(xiàn)突出，可繼續(xù)試驗，進(jìn)而在適宜的地區(qū)推廣種植。0206-41田間生長勢較強(qiáng)，生育期略長，落黃、成熟稍慢，影響了烘烤特性，雜色煙較多，不宜在生產(chǎn)上直接利用，可作為育種材料應(yīng)用。

4.2部分老品種或?qū)彾ㄆ贩N的抗性NC89、紅花大金元、吉煙9號和龍江981對角斑病抗性不佳，為“中感”到“高感”，如果要種植這些品種，必須選擇角斑病較輕的產(chǎn)區(qū)種植或增

強(qiáng)防病措施。

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基金項目黑龍江省煙草公司科技開發(fā)項目(2011-2015)。

作者簡介李秀蘭(1963- )，女，湖南耒陽人，農(nóng)藝師，從事烤煙遺傳育種研究。

收稿日期2016-04-18

中圖分類號S 435.72

文獻(xiàn)標(biāo)識碼A

文章編號0517-6611(2016)14-179-03

Investigation on Resistance to Angular Leaf Spots of Some Flue-cured Tobacco New Varieties

LI Xiu-lan1, SUN De-jun2, LI Zun-qiang3et al

(1. Huanan Tobacco-leaf Branch of Heilongjiang Tobacco Company, Huanan, Heilongjiang 154400; 2. Suihua Tobacco-leaf Branch of Heilongjiang Tobacco Company, Suihua, Heilongjiang 152000; 3. Mudanjiang Tobacco Research Institute of Heilongjiang Tobacco Company, Mudanjiang, Heilongjiang 157011)

Abstract[Objective] To research the resistance to angular leaf spots of some flue-cured tobacco new varieties in Heilongjiang Province. [Method] The incidence situation of different flue-cured tobacco varieties and lines was investigated in heavy diseased plot of Heilongjiang Province. [Result] High resistance varieties to angular leaf spots were found out, which were LJ982, 0110-52, 0631-112, 0206-21 and 0206-41. Among them, LJ982 and 0206-21 were easy to be cured and showed good economic characters, which could be used in flue-cured tobacco production. Other varieties could be used as tobacco germplasms of resistance breeding. [Conclusion] This research provides theoretical foundation for the high-quality and high-efficient production of tobacco leaves.

Key wordsFlue-cured tobacco varieties; Angular leaf spot; Resistance; Investigation