魏　　強　董建方李文彬　趙培然　丁菲菲　李連之（聊城大學化學化工學院，聊城　5059）（山東工程技師學院材料科學系，聊城　507）

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兩個組氨酸希夫堿鎳(Ⅱ)配合物的合成、晶體結構和DNA相互作用及SOD活性

魏強1董建方2李文彬1趙培然1丁菲菲1李連之＊，1
（1聊城大學化學化工學院，聊城252059）
（2山東工程技師學院材料科學系，聊城252027）

摘要：合成了2個新的L-組氨酸水楊醛希夫堿混配體鎳(Ⅱ)配合物，［Ni（Sal-L-His）（Phen）］·H2O（1）（Sal-L-His=L-組氨酸水楊醛希夫堿，Phen=菲咯啉）和［Ni（Sal-L-His）（Bipy）］2·2CH3OH·3H2O（2）（Bipy=2，2′-聯吡啶）。X射線單晶衍射測定表明，1為單核配合物，屬于單斜晶系，P21/c空間群，晶胞參數為：a=1.586 31（13）nm，b=1.215 11（11）nm，c=1.211 30（9）nm，β=106.581（2）°，V=2.237 7（3）nm3Z=4。2為雙核配合物，屬于正交晶系，C2221空間群，晶胞參數為：a=1.415 30（13）nm，b=1.717 71（15）nm，c=2.256 02（19）nm，V 5.484 6（8）nm3，Z=4。紫外吸收光譜、熒光光譜、圓二色光譜和粘度測定等研究表明，2個配合物與小牛胸腺DNA（CT-DNA）均以插入方式相結合。運用NBT光照還原法測定了配合物的超氧化物歧化酶（SOD）活性，求得IC50（1）=51.5 μmol·L-1，IC50（2）=58. μmol·L-1。

關鍵詞：鎳配合物；L-組氨酸；希夫堿；晶體結構；DNA；SOD

山東省自然科學基金（No.Y2004B02）和聊城大學大學生科技文化創(chuàng)新基金（No.SF2014042）資助項目。

＊通信聯系人。E-mail：lilianzhi1963@163.com；會員登記號：S06N1205M1202。

0引言

希夫堿過渡金屬配合物具有抗腫瘤、抗菌、抗癌等多種生物活性［1］。近年來，氨基酸希夫堿過渡金屬配合物由于其多方面的性質特別是在醫(yī)藥學中的潛在應用引起人們的極大興趣［2］。鎳作為一種生命必需元素，存在于生物體的系列酶中，比如脲酶、鎳鐵氫化酶、超氧化物歧化酶等［3-4］。它具有促進紅細胞再生，刺激生血功能的作用，在維持大分子結構穩(wěn)定性、膜穩(wěn)定性和細胞的超微結構方面也起到重要作用。鑒于鎳所特有的生物活性，近來鎳及其化合物越來越受到廣大科研工作者的關注。文獻報道許多鎳的配合物表現出良好的抗菌、抗癌、抗氧化以及DNA結合和DNA切割活性［5-6］。

核酸是生物體的重要組成成份，它對生物的生長、發(fā)育、繁殖、變異等現象起著決定作用，一直是現代生物學、化學和醫(yī)學的重要研究領域。DNA作為生命遺傳信息的攜帶者和傳遞者，是許多藥物的主要作用靶點。在分子水平上研究藥物或者配合物小分子與DNA等生物大分子的相互作用，是當前生命科學、藥物化學的重要課題之一。這對于研究致癌化合物的致癌機理和抗癌藥物的藥理和毒性以及設計合成新型藥物方面都有很大意義［7-8］。超氧陰離子自由基（O2-·）是生物體內有氧代謝的產物，也是對生命體系毒性很高的物種［9］，導致包括脂類物質的超氧化、DNA損傷、老化、癌癥和許多其他疾病。超氧化物歧化酶（SOD）能有效清除O2-·，在抗輻射損傷、減緩衰老以及預防癌癥等方面有其獨特作用［10］。天然SOD生產成本高，且壽命短、易失活，分子量大不易通過細胞膜，在應用上受到一定限制。因此，人工合成穩(wěn)定、無毒、分子量小的活性化合物來替代天然SOD具有重要意義［11］。鑒于此，我們合成了2種新的氨基酸希夫堿鎳(Ⅱ)配合物，測定了其晶體結構，利用紫外可見吸收光譜、熒光光譜、圓二色光譜和粘度測量等方法，研究了這兩個配合物與小牛胸腺DNA （CT-DNA）的作用，還利用氮藍四唑（NBT）光照還原法測定了配合物的模擬SOD的性質。

Scheme 1　Structure of the Schiff base ligand

1　實驗部分

1.1試劑與儀器

水楊醛購自阿法埃莎化學技術有限公司，L-組氨酸購自北京經科宏達生物技術有限公司，氮藍四唑（NBT）購自AMRESCO，核黃素購自上海生工生物工程股份有限公司，N，N-四甲基乙二胺購自SIGMA ALDRICH，小牛胸腺DNA（CT-DNA），溴化乙錠（EB）和三羥甲基氨基甲烷（Tris）均購自華美生物工程有限公司。CT-DNA儲存溶液用10 mmol·L-1Tris-HCl/ 10 mmol·L-1NaCl，pH 7.1緩沖溶液配制，經UV光譜測定A260/A280＞1.8，CT-DNA的濃度通過測量其在260 nm處的吸光度，然后根據其摩爾吸光系數ε260=6 600 L·mol-1·cm-1來確定［12］。其它試劑如四水合醋酸鎳、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、菲咯啉、2，2′-聯吡啶等均為分析純試劑。

Bruker Smart-1000 CCD型衍射儀，Nicolet 5700 FT-IR型紅外光譜儀 （KBr壓片），UV-2500 PC型紫外-可見光光度計（Shimadzu，日本），LS55型熒光光譜儀（Perkin Elmer，美國），JASCO J-810型圓二色光譜儀（Japan），烏氏粘度計。

1.2配合物1和2的合成

取0.155 2 g（1.0 mmol）L-組氨酸和0.056 1 g （1.0 mmol）KOH于圓底燒瓶中，加入10 mL甲醇，加熱攪拌至完全溶解后，滴加110 μL（1.0 mmol）水楊醛的甲醇溶液（4 mL）。60℃下攪拌回流1 h后，再滴加0.249 8 g（1.0 mmol）四水合醋酸鎳的甲醇溶液（4 mL），繼續(xù)回流反應2 h。最后，再逐滴加入含0.198 0 g（1.0 mmol）菲咯啉（1）或0.156 2 g（1.0 mmol）2，2′-聯吡啶（2）的甲醇溶液（4 mL）。加熱回流反應3 h，室溫冷卻過濾，濾液在室溫下靜置數天，得到塊狀單晶。配合物1為棕色塊狀單晶，產率約為60%。元素分析按 C25H21N5NiO4計算的理論值 （%）：C 58.40；H4.12；N13.62；實驗值（%）：C58.36；H4.08%；N 13.58。配合物1的IR（cm-1）：3 421（s，νO-H）；1 622（s，νC=N）；1 592（s，νCOO）；546（w，νNi=O）；494（w，νNi-N）。配合物2為淺棕色塊狀單晶，產率約為58%。元素分析按C48H52N10Ni2O11計算的理論值 （%）：C 54.27；H 4.93；N，13.18。實驗值（%）：C 54.31；H 4.91；N 13.15。配合物2的IR（cm-1）：3 424（s，νO-H）；1 624（s，νC=N）；1 593（s，νCOO）；545（s，νNi=O）；496（m，νNi-N）。

1.3晶體結構測定

選取尺寸為0.34 mm×0.30 mm×0.22 mm的配合物1和0.13 mm×0.11 mm×0.05 mm的配合物2的單晶，置于Bruker Smart-1000 CCD型單晶衍射儀上，以石墨單色化的Mo Kα（λ=0.071 073 nm）輻射為光源，以φ-ω掃描方式收集衍射點。選取I＞2σ（I）的可觀察點（1為2 150個，2為2 226個）用于結構解析和修正。衍射數據用SAINT程序進行還原［13］，并用SADABS程序對衍射強度數據進行吸收校正［14］。單晶結構由直接法以SHELXS程序獲得。結構解析和精修均采用SHELXTL-97軟件完成［15］。非氫原子的坐標在差值Fourier合成中確定，并對其坐標及各向異性熱參數進行了全矩陣最小二乘法修正。氫原子采用理論加氫得到。配合物的主要晶體學數據列于表1。

CCDC：1038774，1；1420088，2。

1.4配合物與DNA的相互作用

1.4.1紫外可見吸收光譜測定

用10 mmol·L-1Tris-HCl/10 mmol·L-1NaCl，pH 7.1緩沖液配制一系列試樣。固定配合物的濃度為15 μmol·L-1，逐漸增大CT-DNA的濃度，反應體系于室溫放置1 h。配制等濃度的緩沖溶液或DNA緩沖溶液作為參比，設定波長范圍200～500 nm，測定不同DNA濃度下配合物的紫外可見吸收光譜。

1.4.2配合物對DNA-EB體系熒光光譜的影響

用10 mmol·L-1Tris-HCl/10 mmol·L-1NaCl，pH 7.1緩沖液配制一系列試樣。固定CT-DNA濃度為15 μmol·L-1，EB濃度為3 μmol·L-1，配合物的濃度逐漸增加，反應體系于室溫放置1 h后測定熒光光譜狹縫寬度：10 nm，激發(fā)波長為525 nm；發(fā)射波長范圍為540～680nm，掃描速度：300nm·min-1。

表1　配合物的晶體學數據Table 1　Crystallographic data for the two complexes

1.4.3圓二色光譜測定

用10 mmol·L-1Tris-HCl/10 mmol·L-1NaCl，pH 7.1緩沖液配制一系列試樣。固定CT-DNA的濃度為100 μmol·L-1，配合物的濃度逐漸增加，反應體系于室溫放置1 h，測定DNA的圓二色光譜（扣除緩沖液和配合物的光譜）。掃描范圍為220～320 nm，掃描速度為200 nm·min-1，路徑長度1 cm，響應時間為1 s。1.4.4粘度測定

用10 mmol·L-1Tris-HCl/10 mmol·L-1NaCl，pH 7.1緩沖液配制一系列試樣。固定CT-DNA的濃度為100 μmol·L-1，逐漸增加配合物濃度，設r=ccomplex/ cDNA，使r分別為0、0.02、0.04、0.06、0.08。試樣在（30± 0.1）℃下水浴中恒溫30 min后，測定溶液流經毛細管的時間t。每個樣品重復測定3次，取平均值。相對粘度η=（t-t0）/t0，以（η/η0）1/3對r作圖，t0為緩沖溶液流經毛細管所需的時間，η0為r=0時DNA溶液的相對粘度。在相同條件下，測定EB和甲基綠（MG）對DNA溶液相對粘度的影響。

1.5SOD活性測試

采用NBT光照還原法測定配合物的SOD活性［16］。用pH=7.8的10.0 mmol·L-1磷酸鹽緩沖液配制1.0×10-4mol·L-1NBT，6.2×10-6mol·L-1核黃素和8.3×10-4mol·L-1N，N-四甲基乙二胺和配合物（濃度為1.0×10-6～9.0×10-6mol·L-1）溶液。室溫下，用恒定光強的冷光燈照射，每光照1 min用紫外可見吸收光譜儀測定其在560 nm處的吸光度，測定時間為10 min。

圖1　配合物1和2的分子結構（橢球率30%）Fig.1　Molecular structures of complex 1 and complex 2 with thermal ellipsoids at 30%probability

表2　配合物的主要鍵長和鍵角Table 2　Selected bond lengths（nm）and angles（°）for the complexes

2　結果與討論

2.1晶體結構解析

配合物的分子結構見圖1，主要鍵長和鍵角見表2。在配合物1的分子結構中，Ni(Ⅱ)離子與組氨酸水楊醛希夫堿配體中的酚羥基氧原子O2，亞氨基氮原子N1，咪唑環(huán)上的氮原子N2，菲咯啉配體中的2個氮原子（N4和N5）和水分子的氧原子O1配位，形成一個六配位的變形八面體結構。N1，N2，N5和O2原子位于八面體的赤道平面上，O1和N4原子位于八面體的軸向位置，Ni(Ⅱ)離子幾乎與赤道平面共面，其偏離基本平面位置距離只有0.000 07（2）nm，O1-Ni1-N4形成的鍵角為166.79（17）°，表明配位原子圍繞Ni(Ⅱ)形成一畸變的八面體。另外菲咯啉平面分子與Ni(Ⅱ)離子配位后，形成一個五元環(huán)，其平面與赤道平面之間形成的二面角為84.69（12）°，幾乎垂直于赤道平面。值得注意的是，在由氨基酸希夫堿配體參與形成的配合物中，羧基氧原子往往參與金屬離子的配位［17-18］，而在該配合物中羧基氧原子未參與配位，而是組氨酸咪唑環(huán)上的氮原子配位。這可能是由于咪唑環(huán)上的氮原子配位更加利于配合物的穩(wěn)定，這種配位形成一個六元環(huán)，若是羧基氧原子配位則形成五元環(huán)，其張力要比六元環(huán)大些。在配合物1的晶體中，分子間氫鍵O1-H1D…O3ii和N3-H1…O3i，以及分子內氫鍵O1-H1C…O4將配合物分子連接形成一個二維平面結構（圖2）。其鍵長和鍵角見表3。

續(xù)表2

圖2　配合物1和2的二維結構Fig.2　2D structure of complex 1 and 2

在配合物2的不對稱結構單元中，包含1個希夫堿和菲咯啉混配體雙核Ni(Ⅱ)配合物主體分子，2個甲醇和3個水溶劑分子。配合物2主體分子為希夫堿配體上咪唑環(huán)橋連的具有中心對稱結構的雙核配合物。由于分子結構的對稱性，這里僅討論對稱單元中的一部分。配合物的分子結構中，Ni(Ⅱ)離子與組氨酸水楊醛希夫堿配體中的酚羥基氧原子O3、亞氨基氮原子N1、羧基氧原子O1、2，2′-聯吡啶配體上的2個氮原子N4和N5以及咪唑環(huán)上的氮原子N2i配位，形成一個六配位的變形八面體結構N1，N4，O1和O3原子位于八面體的赤道平面上N2i和N5原子位于八面體的軸向位置。赤道平面上的鍵角∠N1-Ni1-O3（91.7（2）°），∠N1-Ni1-O1（80.7（2）°）∠O3-Ni1-N4（92.5（2）°）和∠O1-Ni1-N4（95.1（2）°）之和為360.0°，表明Ni(Ⅱ)離子幾乎與赤道平面共面，其偏離基本平面位置距離為0.008 19（3）nm，N2i-Ni1 N5形成的鍵角為170.2（3）°，表明配位原子圍繞Ni(Ⅱ)離子形成一畸變的八面體。另外聯吡啶平面分子與Ni(Ⅱ)離子配位形成一個五元環(huán)，其基本平面與赤道平面之間形成的二面角為87.02（18）°，幾乎垂直于赤道平面。希夫堿配體圍繞Ni(Ⅱ)離子形成Ni1 O1-C1-C2-N1五元環(huán)和 Ni1-O3-C9-C8-C7-N1六元環(huán)，兩環(huán)基本平面所形成的二面角為9.20（31）°，它們的形成增加了配合物的穩(wěn)定性。在配合物2的晶體中，溶劑甲醇分子通過氫鍵O4-H4…O3iii與主體分子連接。溶劑水分子通過N3-H3…O5ii、O5-H5D …O2v、O6-H6D…O2vii及O6-H6C…O2vi等與主體分子形成氫鍵作用。另外，2個溶劑水分子之間通過O5-H5C…O6iv形成氫鍵作用。這些氫鍵相互作用將配合物分子連接形成二維平面網狀結構（圖2），其鍵長和鍵角見表3。

表3　配合物1和2的氫鍵鍵長和鍵角Table 3　Hydrogen bond lengths（nm）and angles（°）for complex 1 and 2

2.2配合物與DNA作用

2.2.1紫外可見吸收光譜

電子吸收光譜法是研究配合物與DNA相互作用的常用方法。當金屬配合物與DNA結合后，其配體所處的環(huán)境會發(fā)生變化，從而導致配合物的吸收光譜的強度和波長發(fā)生變化。一般來說，若金屬配合物與DNA之間的相互作用為靜電或溝面作用方式時，它們的紫外光譜不會發(fā)生明顯的變化。但加入DNA后，若配合物的電子吸收光譜的吸收峰位紅移，強度減小，可認為是配合物與DNA發(fā)生插入作用的證據之一［19］。因為插入配體與DNA堿基對可發(fā)生π電子堆積，插入配體的π*空軌道與堿基的π軌道發(fā)生偶合，使能量降低，導致π→π*躍遷能量減小，從而產生紅移現象；同時，偶合后的π*軌道因部分填充電子使π→π*躍遷幾率減小，產生減色效應［20］。

圖3為不同濃度CT-DNA存在下配合物的紫外吸收光譜圖。從圖中可以看出，隨著DNA濃度的增大，配合物1在268 nm處的吸收發(fā)生了明顯的減色效應且稍有紅移，這說明配合物與DNA的作用方式是插入作用。同樣配合物2也產生了相似現象。為了定量衡量配合物與DNA結合的強弱，可利用公式cDNA/（εa-εf）=cDNA/（εb-εf）+1/［Kb（εb-εf）］求得結合常數Kb［21］，其中εa為配合物的表觀摩爾吸光系數，εb，εf分別為鍵合和自由配合物的摩爾吸光系數。將-cDNA/（εa-εf）對cDNA作圖（圖3），求得結合常數Kb（1）＝2.41×104L·mol-1，Kb（2）＝1.89×104L·mol-1。作為與DNA結合的典型的插入試劑EB，它與DNA的結合常數為3.3×105L·mol-1［22］，與之相比，這兩個配合物比EB插入劑的結合常數小，這說明該配合物與DNA的插入作用較弱，這可能是因為配合物為畸變的八面體構型，其平面性沒有EB的好。

2.2.2熒光光譜

溴化乙錠（EB）是研究藥物分子與DNA作用的經典的嵌入式熒光探針，它自身的熒光很弱，但是與DNA作用后，其生色團嵌入DNA分子的堿基對中使熒光強度大大增加［23］。當有其它也能與DNA發(fā)生插入作用的配合物存在時，會將EB從EB-DNA復合物中擠出，從而使EB-DNA的熒光強度顯著降低。因此，通過測定體系熒光的降低程度，可以推斷配合物與DNA的相互作用方式。

圖3　不同濃度CT-DNA存在下配合物1和2的紫外可見吸收光譜以及-cDNA/（εa-εf）對cDNA作圖Fig.3　Absorption spectra of complex 1 and 2 in the absence and presence of CT-DNA，and the plot of-cDNA/（εa-εf）vs cDNA

圖4　不同濃度配合物存在時EB-DNA體系的熒光光譜和I0/I對r作圖Fig.4　Fluorescence spectra of EB-DNA system in the absence and presence of complex 1 and 2，and plot of I0/I vs r

圖4為配合物與EB競爭實驗的熒光光譜圖。由圖4可見，EB-DNA體系在595 nm處的熒光強度隨著2個配合物濃度的增加而顯著降低，這說明配合物發(fā)生了類似于EB的插入作用，從而將EB從結合位點競爭下來。為定量研究這2個配合物對EB-DNA體系的熒光猝滅程度，可根據Stern-Volmer方程求得熒光猝滅常數Ksq［24］：I0/I=1＋Ksqr，其中I0為未加入配合物時EB-DNA體系的熒光強度，I為加入不同濃度配合物時EB-DNA體系的熒光強度，r=ccomplex/cDNA。將I0/I對r作圖，分別求得猝滅常數Ksq（1）=0.85，Ksq（2）=0.72。由此看出，配合物1的作用要強于配合物2，這可能是菲咯啉的平面性比2，2′-聯吡啶的要好，可以更好地嵌入到DNA的堿基對中。這與吸收光譜的實驗結果一致。與所報道的鎳配合物［Ni（PzTA）2CO3］·5H2O（Ksq=0.542），［NiQ（PyTA）（H2O）2］Cl·H2O（Ksq=0.708）和［NiQ（PzTA）（H2O）2］Cl·H2O（Ksq= 0.613）［25］相比要大些，但是明顯小于［Ni（atz）（DCA）（H2O）2］·2H2O（Ksq=1.38）［26］，與這些配合物的結構不同有關。

2.2.3圓二色光譜

CD光譜是研究小分子與DNA相互作用并探究其對DNA構象影響的重要手段之一。CT-DNA的CD光譜在273 nm和245 nm處有2個明顯的特征峰，273 nm處正峰是由CT-DNA堿基對的π-π堆積作用引起的，245 nm處負峰則主要對應于雙螺旋結構的B型構象［27］。圖5為配合物與CT-DNA作用的圓二色光譜。由圖中可以看出，當加入相同濃度的配合物1和2后，DNA的CD譜發(fā)生了明顯的變化，273 nm處正峰逐漸增大，而245 nm處負峰基本不變，且配合物1引起的正峰增大值比配合物2更強。這說明2個配合物與DNA的作用是插入到DNA堿基對中，影響到DNA堿基對之間的π-π堆積作用使DNA的構象發(fā)生了改變［28］，并且配合物1對其構象的影響要強于配合物2。這與紫外可見吸收光譜和熒光光譜的結論是吻合的。

圖5　配合物對CT-DNA圓二色光譜的影響Fig.5　Effects of the two complexes on CD spectra of CT-DNA

2.2.4粘度測定

粘度測定被認為是在缺乏晶體結構數據的情況下，確定配合物與DNA結合模式最有效的方法之一，其結果有時比光譜數據更具有說服力［29］。配合物對DNA溶液粘度的影響有3種情況：（1）當配合物以溝面或靜電方式與DNA作用時，對DNA雙鏈的影響較小，DNA溶液的粘度幾乎不發(fā)生改變；（2）當配合物以部分插入方式 （或溝槽結合）進入DNA堿基對時，使得DNA雙鏈發(fā)生扭結，降低DNA溶液的粘度；（3）當配合物以插入方式與DNA作用時，DNA相鄰堿基對的距離會變大來容納配合物小分子的插入，因而導致DNA雙螺旋鏈伸長，使DNA溶液的粘度增大。圖6為不同化合物對DNA溶液粘度的影響。由圖6可看出，隨著配合物濃度的增加，DNA溶液的相對粘度增大，與插入劑EB所引起DNA溶液的粘度變化趨勢一致，而與溝槽結合劑甲基綠（MG）的變化趨勢相反。這說明配合物1和2均以插入方式與CT-DNA結合，但比典型的插入劑EB要弱；且配合物1與DNA的插入作用要略強于配合物2。這與上述光譜研究結果是一致的。這可能是由于配合物1中配體phen的平面性好，且分子體積較小而空間位阻較小，有利于其與DNA的插入作用。

圖6　配合物、EB和MG對CT-DNA相對粘度的影響Fig.6　Effects of the complexes，EB and MG on the relative viscosity of CT-DNA

2.3SOD活性測定

氮藍四唑（NBT）光照還原法是測定物質SOD活性的常用的方法。在光照條件下，核黃素（VB2）與四甲基乙二胺反應產生超氧陰離子自由基（O2-·），生成的O2-·使NBT還原為藍紫色化合物甲臜，甲臜在560 nm處有最大吸收，且吸光度與濃度成正比，因此通過測定不同時間下吸光度A560的變化可以得到一條直線，直線斜率（K值）的大小可以反映甲臜生成的快慢。當向該體系中加入SOD活性配合物后，其與NBT競爭O2-·，從而減慢甲臜生成的速率。圖7為不同濃度的配合物對反應體系吸光度隨時間變化曲線。由圖7可知，隨著配合物濃度的增大，直線的斜率逐漸變小，說明濃度越大，抑制率越大。配合物對O2-·的抑制率（α）可以通過公式α=（1-k′/k）×100%求出［30］，其中k為未加配合物之前的直線斜率，k′為加入配合物后的直線斜率。以抑制率對配合物濃度作圖，可獲得抑制率為50%時的配合物濃度，即為一個活性單位IC50。IC50越小，活性越大。圖8為以抑制率α對配合物濃度作圖所得曲線，求得配合物1的IC50=51.5 μmol·L-1，配合物2的IC50= 58.1 μmol·L-1。其值與之前報道的鎳配合物［Ni（L）（HL）］（ClO4）·H2O（IC50=34.0 μmol·L-1）和［Ni（HL）（bipy）（H2O）］（NO3）（ClO4）·H2O（IC50=38.0 μmol·L-1）的IC50值相當［31］，但與天然SOD（IC50=0.015 μmol·L-1）相比，相差較大［32］。這說明該配合物具有一定的SOD活性。

圖7　配合物的濃度對反應體系的吸光度（A560）-時間關系的影響Fig.7　Effect of complex concentration on the plot of absorbance of the reaction system vs time

圖8　配合物對O2-·的抑制率隨濃度變化曲線Fig.8　Change of inhibition rate of the complex to O2-· with various concentrations

3　結論

合成了L-組氨酸水楊醛希夫堿與菲咯啉或2，2′-聯吡啶混配體的2個鎳(Ⅱ)配合物，通過IR進行了表征，利用X射線單晶衍射測定了其晶體結構。利用紫外可見吸收光譜、熒光光譜、圓二色光譜和粘度測定等研究了配合物與CT-DNA的相互作用，結果表明配合物均以插入方式與CT-DNA作用，而配合物1對DNA的作用要強于配合物2，這是由于菲咯啉的平面性比2，2′-聯吡啶的要好，可以更好的插入到DNA的堿基對中。NBT光照還原法測定表明2種配合物都具有一定的SOD活性。這些結果可為研究氨基酸希夫堿鎳配合物的結構和生物活性及作用機理提供一定的實驗證據。

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中圖分類號：O614.81+3

文獻標識碼：A

文章編號：1001-4861（2016）05-0789-10

DOI：10.11862/CJIC.2016.117

收稿日期：2015-12-12。收修改稿日期：2016-03-24。

Syntheses，Crystal Structures，DNA Interactions and SOD Activities of Two Nickel(Ⅱ)Complexes with L-Histidine Schiff Base

WEI Qiang1DONG Jian-Fang2LI Wen-Bin1ZHAO Pei-Ran1DING Fei-Fei1LI Lian-Zhi＊，1
（1School of Chemistry and Chemical Engineering，Liaocheng University，Liaocheng，Shandong 252059，China）
（2Department of Material Science，Shandong Polytechnic Technician College，Liaocheng，Shandong 252027，China）

Abstract：Two new nickel(Ⅱ)complexes，［Ni（Sal-L-His）（Phen）］·H2O（1）（Sal-L-His=the Schiff base derived from salicylaldehyde and L-Histidine，Phen=1，10-phenanthroline），and［Ni（Sal-L-His）（Bipy）］2·2CH3OH·3H2O（2）（Bipy= 2，2′-Bipyridine），have been synthesized.Their crystal structures have been determined by single crystal X-ra diffraction analysis.It showed that 1 is a mononuclear complex and belongs to monoclinic crystal system，P21/ space group with the cell parameters:a=1.586 31（13）nm，b=1.215 11（11）nm，c=1.211 30（9）nm，β=106.581（2）° V=2.237 7（3）nm3，Z=4；2 is a binuclear complex and belongs to orthorhombic crystal system，C2221space group with the cell parameters:a=1.415 30（13）nm，b=1.717 71（15）nm，c=2.256 02（19）nm，V=5.484 6（8）nm3，Z=4 The results of UV absorption，fluorescence，circular dichroism（CD）spectra and viscosity measurement indicated that the two complexes bind to CT-DNA in an same intercalative mode.SOD-like activities of the complexes were determined by the modified photoreduction of NBT.The value of IC50（1）is 51.5 μmol·L-1and IC50（2）is 58.1 μmol· L-1.CCDC:1038774，1；1420088，2.

Keywords：nickel(Ⅱ)complex；L-histidine Schiff base；crystal structure；DNA；SOD activity