肖 揚，王鋒鋒，熊 杰，孟 磊，姚睿智，王 峻，莊禮興，陳 銘

?

·論著·

電針腧穴對腎絞痛大鼠鎮(zhèn)痛作用及其機制研究

肖 揚，王鋒鋒，熊 杰，孟 磊，姚睿智，王 峻，莊禮興，陳 銘

510120廣東省廣州市，廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院(肖揚，熊杰)；廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院(王鋒鋒，孟磊，姚睿智，王峻，莊禮興，陳銘)

【摘要】目的探討電針腧穴對腎絞痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用，并分析其鎮(zhèn)痛機制。方法2015-03-31至2015-04-28選取SPF級雄性SD大鼠26只，依據(jù)隨機數(shù)字表法將所有大鼠分為正常組8只、模型組8只、電針組10只，適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后，第8天起造模，正常組大鼠自由飲用蒸餾水，模型組及電針組大鼠自由飲用誘石劑水(1%乙二醇溶液+1%氯化銨水溶液)，連續(xù)10 d，建立草酸鈣結(jié)石致大鼠腎絞痛模型。造模成功后模型組及電針組均死亡1只。電針組大鼠選穴腎俞、三焦俞、三陰交和水泉進(jìn)行電針治療，共治療3 d。治療結(jié)束后第2天處死3組大鼠取材。比較造模后治療前(后統(tǒng)稱治療前)及治療第1、2、3天3組大鼠痛閾、模型組及電針組自發(fā)性疼痛評分，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法檢測3組大鼠腎組織中血栓素A2(TXA2)、前列環(huán)素(PGI2)、5-羥色胺(5-HT)表達(dá)水平，觀察取材后各組大鼠左腎組織病理學(xué)改變情況。結(jié)果治療方法與時間在大鼠痛閾上存在交互作用(P<0.05)；治療方法和時間在大鼠痛閾上主效應(yīng)顯著(P<0.05)；治療前及治療第1、2天模型組、電針組大鼠和治療第3天模型組大鼠痛閾均短于正常組(P<0.05)；治療第1、2、3天電針組大鼠痛閾均長于模型組(P<0.05)。治療方法與時間在大鼠自發(fā)性疼痛評分上存在交互作用(P<0.05)；治療方法和時間在大鼠自發(fā)性疼痛評分上主效應(yīng)顯著(P<0.05)；治療第1、2、3天電針組大鼠自發(fā)性疼痛評分均低于模型組(P<0.05)。模型組大鼠腎組織TXA2、PGI2、5-HT表達(dá)水平及電針組大鼠腎組織PGI2表達(dá)水平均高于正常組(P<0.05)；電針組大鼠腎組織TXA2、PGI2、5-HT表達(dá)水平均低于模型組(P<0.05)。正常組大鼠腎臟內(nèi)未見草酸鈣結(jié)晶沉積，腎小球形態(tài)規(guī)則，周圍組織無充血、無炎性細(xì)胞浸潤，腎小管無擴張，細(xì)胞排列整齊，結(jié)構(gòu)清晰。模型組大鼠腎小球形態(tài)規(guī)則，周圍組織充血水腫且炎性細(xì)胞浸潤，腎小管擴張明顯且見草酸鈣結(jié)晶，細(xì)胞排列紊亂，上皮細(xì)胞脫落壞死。電針組大鼠腎小球形態(tài)規(guī)則，周圍組織少許充血且炎性細(xì)胞浸潤，腎小管擴張但未見明顯草酸鈣結(jié)晶，細(xì)胞排列整齊，結(jié)構(gòu)清晰，未見上皮細(xì)胞脫落壞死。結(jié)論電針腧穴對腎絞痛大鼠具有鎮(zhèn)痛作用，且機制可能與下調(diào)炎性遞質(zhì)PGI2、TXA2及神經(jīng)遞質(zhì)5-HT表達(dá)水平有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】電針；腎絞痛；大鼠；針刺鎮(zhèn)痛；血栓素A2；前列環(huán)素；血清素

肖揚，王鋒鋒，熊杰，等.電針腧穴對腎絞痛大鼠鎮(zhèn)痛作用及其機制研究[J].中國全科醫(yī)學(xué)，2016，19(18)：2206-2210.[www.chinagp.net]

Xiao Y, Wang FF, Xiong J, et al.Analgesic effect and mechanism of electroacupuncture acupoints in renal colic rats[J].Chinese General Practice，2016，19(18)：2206-2210.

祖國醫(yī)學(xué)將腎絞痛歸屬于“淋證”、“腰痛”等范疇，其病位在腎與膀胱?！吨胁亟?jīng)·論淋瀝小便不利》中“砂淋者，腹臍中隱痛，小便難，其痛不可忍，須臾從小便中下如砂石之類，有大者如皂子，或赤或白(一作黃)，色澤不定”，其較早地對因泌尿系結(jié)石導(dǎo)致腎絞痛的臨床癥狀進(jìn)行了描述。腎絞痛的主要發(fā)病機制在于砂石羈留、阻遏絡(luò)脈，于是氣血運行不暢，不通則痛。電針是在普通針刺的行氣通經(jīng)、活血止痛基礎(chǔ)上，加以脈沖電治療，針電結(jié)合，加強止痛、鎮(zhèn)靜，促進(jìn)氣血循環(huán)。筆者為探討電針的鎮(zhèn)痛機制，加以腧穴特性，以炎性遞質(zhì)和神經(jīng)遞質(zhì)為切入點，觀察腎絞痛大鼠模型的行為學(xué)、組織學(xué)、炎性遞質(zhì)及神經(jīng)遞質(zhì)的表達(dá)水平，現(xiàn)報道如下。

1材料與方法

1.1實驗材料

1.1.1實驗動物2015-03-31至2015-04-28選取SPF級雄性SD大鼠26只，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，動物編號：SCXK(粵)2013-0034；月齡2～3個月，體質(zhì)量180～220 g。動物實驗在廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院SPF級別動物實驗室完成，環(huán)境設(shè)施許可證號：SYXK(粵)2013-0092；飼養(yǎng)條件：環(huán)境溫度20 ℃，濕度40%～70%，黑暗和照明時間各12 h。

1.1.2實驗試劑及儀器乙二醇溶液、氯化銨及40%甲醛溶液(上海晶純生化科技股份有限公司)；水合氯醛(天津市大茂化學(xué)試劑廠)；華佗牌無菌針灸針及華佗牌SDZ-Ⅱ電針儀(蘇州醫(yī)療用品廠有限公司)；大鼠血栓素A2(TXA2)、前列環(huán)素(PGI2)和5-羥色胺(5-HT)試劑盒(上海邦奕生物科技有限公司，批號：201503)；總蛋白(TP)測定試劑盒(帶標(biāo)準(zhǔn)：考馬斯亮藍(lán)法)(南京建成生物工程研究所，批號：20150326)；賽默飛世爾THERMO Multiskan MK2全自動酶標(biāo)儀；日本奧林巴斯cx21-BIM型生物顯微鏡。

本研究背景及創(chuàng)新點：

國內(nèi)外關(guān)于腎絞痛的治療多以西藥、手術(shù)為主，西藥以非甾體抗炎藥、麻醉類鎮(zhèn)痛藥、解痙類藥物為首選，而中醫(yī)中藥在治療方法中屬備選方法，主要因為中醫(yī)中藥觀察指標(biāo)以主觀為主，并缺乏相關(guān)科學(xué)、客觀的機制研究。目前，隨著中醫(yī)中藥的逐漸發(fā)展，電針治療已得到國內(nèi)外的廣泛認(rèn)可，但各大數(shù)據(jù)庫收錄關(guān)于電針治療腎絞痛的文獻(xiàn)均以臨床研究為主，且尚未見關(guān)于電針治療腎絞痛的機制研究。本研究通過采用電針腧穴對腎絞痛大鼠進(jìn)行鎮(zhèn)痛治療，并進(jìn)行相關(guān)機制的研究，初步探討電針腧穴的鎮(zhèn)痛機制，為電針的治療提供更加科學(xué)的依據(jù)。

1.2實驗分組及造模依據(jù)隨機數(shù)字表法將所有大鼠分為正常組8只、模型組8只、電針組10只。適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d后，第8天起造模，正常組大鼠自由飲用蒸餾水，模型組及電針組大鼠自由飲用誘石劑水(1%乙二醇溶液+1%氯化銨水溶液[1])，連續(xù)10 d，建立草酸鈣結(jié)石致大鼠腎絞痛模型。

1.3實驗方法造模成功后模型組及電針組均死亡1只，之后兩組均改為飲用蒸餾水。電針組大鼠選穴腎俞、三焦俞、三陰交和水泉，具體位置：腧穴位于第2腰椎棘突下，旁開約3 mm處；三焦俞位于第1腰椎棘突下，旁開約3 mm處；三陰交位于后肢內(nèi)側(cè)，內(nèi)踝尖正上方約6 mm處；水泉位于后肢內(nèi)側(cè)后下方，內(nèi)踝尖與跟腱凹陷處正下方2 mm處[2]。針具及操作方法：針具選用美容針(0.14 mm×13.00 mm)；直刺進(jìn)針，進(jìn)針約2～3 mm，將電針治療儀兩個電極(不分正負(fù)極)分別接在同側(cè)腎俞與三焦俞、三陰交與水泉穴位上，選用連續(xù)波，頻率2 Hz，電流1 mA，強度以引起大鼠肢體輕微抖動為宜，留針15 min，1次/d，共治療3 d。治療結(jié)束后第2天處死3組大鼠，并取腎組織進(jìn)行進(jìn)一步研究。

1.4觀察指標(biāo)

1.4.1行為學(xué)觀察觀察造模前、造模后治療前(后統(tǒng)稱治療前)及治療第3天3組大鼠精神狀態(tài)、行動情況、皮毛顏色及光澤、大小便情況等，并比較治療前及治療第3天3組大鼠的體質(zhì)量。

1.4.2痛閾分別于治療前及治療第1、2、3天測量3組大鼠的痛閾。在束縛并限制活動的條件下，采用水溫為(50.0±0.2)℃的熱水浸燙大鼠尾部4 cm，記錄入水至甩尾出水的時間則為痛閾，測量3次，取平均值。

1.4.3自發(fā)性疼痛評分治療前及治療第1、2、3天參照Attal等[3]評分方法對模型組和電針組大鼠進(jìn)行自發(fā)性疼痛評分測定。將模型組和電針組大鼠置于觀測盒內(nèi)，自由活動適應(yīng)環(huán)境后開始觀察，觀察時間為15 min。疼痛行為共6級：0分為動物無任何行為異常；1分為動物爪部輕度屈曲；2分為爪部屈曲明顯，并向外側(cè)翻；3分為動物側(cè)臥，爪部以內(nèi)側(cè)緣與玻璃板接觸，但不承重；4分為動物抬足，不與玻璃板接觸；5分為動物除抬足外，并有舔咬足趾表現(xiàn)，甚至呈弓腰狀。

1.4.4腎組織TXA2、PGI2、5-HT表達(dá)水平取材后將大鼠右腎組織通過機械勻漿方法提取蛋白，采用考馬斯亮藍(lán)法進(jìn)行蛋白定量后，以均一的蛋白濃度采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法進(jìn)行檢測，檢測方法嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行；采用酶聯(lián)免疫檢測儀在450 nm處分別測定各組TXA2、PGI2和5-HT吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(R2>0.99)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出待測樣品的表達(dá)水平。

1.4.5病理學(xué)檢查取材后將大鼠左腎組織采用10%甲醛溶液固定24 h，常規(guī)進(jìn)行石蠟包埋切片，蘇木素-伊紅(HE)染色，光鏡下觀察左腎組織病理學(xué)改變情況。

2結(jié)果

2.1行為學(xué)觀察造模前：3組大鼠精神狀態(tài)良好，行動靈活，毛色光澤，飲食及大小便正常。治療前：正常組大鼠無死亡，精神狀態(tài)良好，行動靈活，毛色光澤，飲食及大小便正常；模型組及電針組大鼠均死亡1只，且均精神萎靡不振，蜷縮懶動，時有爪部屈曲、弓腰，毛色粗糙，飲食及大小便減少。治療第3天：正常組大鼠精神狀態(tài)良好，行動靈活，毛色光澤，飲食及大小便正常；模型組大鼠無死亡，精神狀態(tài)一般，行動情況一般，時有爪部屈曲、弓腰，毛色粗糙，飲食及大小便較治療前增加；電針組大鼠無死亡，精神狀態(tài)一般，行動情況一般，毛色粗糙，飲食及大小便較治療前電針組及治療后模型組增加。3組大鼠治療前與治療第3天體質(zhì)量比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；且模型組、電針組大鼠治療前與治療第3天體質(zhì)量均低于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；治療第3天模型組、電針組大鼠體質(zhì)量均高于治療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表1)。

2.23組大鼠治療前及治療第1、2、3天痛閾比較治療方法與時間在大鼠痛閾上存在交互作用(P<0.05)；治療方法和時間在大鼠痛閾上主效應(yīng)顯著(P<0.05)。治療前及治療第1、2天模型組、電針組大鼠和治療第3天模型組大鼠痛閾均短于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；治療第1、2、3天電針組大鼠痛閾均長于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表2)。

2.32組大鼠治療前及治療第1、2、3天自發(fā)性疼痛評分比較治療方法與時間在大鼠自發(fā)性疼痛評分上存在交互作用(P<0.05)；治療方法和時間在大鼠自發(fā)性疼痛評分上主效應(yīng)顯著(P<0.05)。治療第1、2、3天電針組大鼠自發(fā)性疼痛評分均低于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表3)。

Table 1Comparison of body mass among the three groups of rats before treatment and on the third day of treatment

組別只數(shù)治療前治療第3天t配對值P值正常組8367±33361±400.3780.716模型組7231±36a292±25a-3.7620.009電針組9209±33a276±36a-4.2520.003F值53.09314.882P值<0.001<0.001

注：與正常組比較，aP<0.05

Table 2Comparison of pain threshold among the three groups before treatment and on day 1,2,3 of treatment

組別只數(shù)治療前治療第1天治療第2天治療第3天正常組811.1±0.911.4±1.310.8±1.310.7±1.1模型組76.7±1.4a5.7±1.1a6.1±1.2a7.2±1.1a電針組96.0±1.3a8.3±0.9ab8.1±1.0ab10.4±1.5bF值F交互=8.330,F組間=93.271,F時間=7.828P值P交互<0.001,P組間<0.001,P時間<0.001

注：與正常組比較，aP<0.05；與模型組比較，bP<0.05

Table 3Comparison of spontaneous pain score between the two groups before treatment and on day 1,2,3 of treatment

組別只數(shù)治療前治療第1天治療第2天治療第3天模型組78.0±1.87.6±1.46.9±2.04.3±1.1電針組97.9±1.63.2±1.7a3.8±1.6a1.2±1.0aF值F交互=5.040,F組間=52.381,F時間=28.034P值P交互<0.001,P組間<0.001,P時間<0.001

注：與模型組比較，aP<0.05

2.43組大鼠腎組織TXA2、PGI2、5-HT表達(dá)水平比較3組大鼠腎組織TXA2、PGI2、5-HT表達(dá)水平比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。模型組大鼠腎組織TXA2、PGI2、5-HT表達(dá)水平及電針組大鼠腎組織PGI2表達(dá)水平均高于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；電針組大鼠腎組織TXA2、PGI2、5-HT表達(dá)水平均低于模型組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05，見表4)。

2.53組大鼠左腎組織病理學(xué)檢查正常組大鼠腎臟內(nèi)未見草酸鈣結(jié)晶沉積，腎小球形態(tài)規(guī)則，周圍組織無充血、無炎性細(xì)胞浸潤，腎小管無擴張，細(xì)胞排列整齊，結(jié)構(gòu)清晰。模型組大鼠腎小球形態(tài)規(guī)則，周圍組織充血水腫且炎性細(xì)胞浸潤，腎小管擴張明顯且見草酸鈣結(jié)晶，細(xì)胞排列紊亂，上皮細(xì)胞脫落壞死。電針組大鼠腎小球形態(tài)規(guī)則，周圍組織少許充血且炎性細(xì)胞浸潤，腎小管擴張但未見明顯草酸鈣結(jié)晶，細(xì)胞排列整齊，結(jié)構(gòu)清晰，未見上皮細(xì)胞脫落壞死(見圖1，本文圖1彩圖見本刊官網(wǎng)www.chinagp.net電子期刊相應(yīng)文章附件)。

Table 4Comparison of kidney TXA2,PGI2 and 5-HT expressions among the three groups

組別只數(shù)TXA2PGI25-HT正常組820.6±1.96.4±0.627.2±1.5模型組724.2±2.0a8.4±0.7a32.5±1.2a電針組919.5±2.5b7.2±0.7ab27.2±2.2bF值9.99018.23223.942P值0.001<0.001<0.001

注：與正常組比較，aP<0.05；與模型組比較，bP<0.05；TXA2=血栓素A2，PGI2=前列環(huán)素，5-HT=5-羥色胺

3討論

急性腎絞痛在我國南方地區(qū)具有較高的發(fā)病率。在盛夏季節(jié)，約30%的患者因急性腎絞痛就診于急診外科門診，劇烈的疼痛讓患者急切渴望臨床醫(yī)生給予簡便、有效、迅速的鎮(zhèn)痛治療。腎絞痛治療的首要目標(biāo)是止痛，常用非甾體抗炎藥或阿片類鎮(zhèn)痛藥，但藥物鎮(zhèn)痛存在較多不良反應(yīng)且易成癮，因此臨床使用受到一定限制。中醫(yī)針灸尤其擅長治療各類痛癥，其具有起效迅速、簡便易行、持續(xù)鎮(zhèn)痛且無不良反應(yīng)的特點，因此廣泛應(yīng)用于頭痛、四肢關(guān)節(jié)痛、牙齦腫痛、頸肩腰部疼痛等各類痛癥的治療[4-9]。針灸配以微量低頻脈沖電流，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞膜離子平衡，舒張平滑肌及血管，解除痙攣和改善循環(huán)，而且還可通過反饋痛覺中樞及抑制各類炎性遞質(zhì)及神經(jīng)遞質(zhì)起到鎮(zhèn)痛作用[10-14]。電針是中醫(yī)針灸結(jié)合現(xiàn)代科技發(fā)展的重要成果，在腎絞痛鎮(zhèn)痛治療方面療效顯著。目前，國內(nèi)外尚未見關(guān)于電針對腎絞痛的鎮(zhèn)痛作用機制的研究，本研究通過炎性遞質(zhì)和神經(jīng)遞質(zhì)作為切入點，探討電針對腎絞痛的鎮(zhèn)痛效果及其作用機制，為電針的臨床應(yīng)用提供客觀、科學(xué)的依據(jù)。

針灸配穴是中醫(yī)辨證論治的重要體現(xiàn)，腎俞、三焦俞為臟腑之氣輸注于背的俞穴，屬足太陽膀胱經(jīng)?！锻馀_秘要》中“腎俞主腰痛不可俯仰反側(cè)……少腹急痛熱”指出，腎俞具有補虛壯腰、益腎填精之功。《銅人針灸經(jīng)》中“三焦俞主肩背拘急，腰脊強”指出，三焦俞具有運化水谷、通調(diào)水道之功。三陰交為足三陰經(jīng)交會之處，統(tǒng)治脾、肝、腎三陰經(jīng)所主疾患，肝藏血，脾統(tǒng)血，腎藏精，精血同源，氣血互生，具有補血分之虛、清血分之熱、行血分之滯、活血分之瘀的功效。水泉為足少陰腎經(jīng)的郄穴，是腎經(jīng)氣血深聚之處，既治循經(jīng)之癥，亦作陰經(jīng)郄穴治急性血癥，有通經(jīng)調(diào)血、疏利下焦之功。腎絞痛乃砂石羈留，阻遏絡(luò)脈，氣血瘀滯，發(fā)為腰痛。腰為腎府，取腎俞、三焦俞可取近治之效，配以三陰交、水泉，解血分之瘀滯。三焦俞可疏通氣機，配以腎俞、水泉有通利下焦，砂石自下。諸穴相配，共奏行氣活血、化瘀止痛、通淋排石之功效。

本研究結(jié)果顯示，治療前及治療第1、2天模型組、電針組大鼠和治療第3天模型組大鼠痛閾均短于正常組；治療第1、2、3天電針組大鼠痛閾均長于模型組、自發(fā)性疼痛評分均低于模型組，表明電針腎俞、三焦俞、三陰交、水泉等穴位可改善腎絞痛大鼠的痛閾及自發(fā)性疼痛評分。進(jìn)一步進(jìn)行機制分析，結(jié)果顯示，模型組大鼠腎組織TXA2、PGI2、5-HT表達(dá)水平及電針組大鼠腎組織PGI2表達(dá)水平均高于正常組；電針組大鼠腎組織TXA2、PGI2、5-HT表達(dá)水平均低于模型組；模型組大鼠腎小球形態(tài)規(guī)則，周圍組織充血水腫且炎性細(xì)胞浸潤，腎小管擴張明顯且見草酸鈣結(jié)晶；電針組大鼠腎小球形態(tài)規(guī)則，周圍組織少許充血且炎性細(xì)胞浸潤，腎小管擴張但未見明

注：A為正常組，B為模型組，C為電針組

圖13組大鼠左腎組織病理圖(HE染色，×200)

Figure 1Left kidney tissue pathology of the rats in the three groups

顯草酸鈣結(jié)晶；表明電針腧穴可降低腎組織中TXA2、PGI2和5-HT表達(dá)水平以及減輕腎小管擴張及炎性細(xì)胞浸潤，其機制可能為電針腧穴抑制炎性遞質(zhì)及神經(jīng)遞質(zhì)的合成，從而減輕5-HT致痛作用。TXA2、PGI2和5-HT等在腎絞痛的發(fā)生發(fā)展中扮演重要的角色，3者除具有明顯的致痛作用外，PGI2、TXA2作為花生四烯酸連鎖反應(yīng)的重要產(chǎn)物,PGI2具有較強的血管擴張作用,腎小球有效濾過率增多，從而加重梗阻。而TXA2具有強烈平滑肌收縮作用，使腎小管管腔內(nèi)壓力進(jìn)一步升高，疼痛增加[15-17]。5-HT是由血小板釋放自體活性物質(zhì)，TXA2表達(dá)水平升高導(dǎo)致血小板聚集，釋放更多的5-HT，既可引起平滑肌收縮，也可作用于感覺神經(jīng)末梢增加致痛作用[18-19]。因此，TXA2、PGI2和5-HT可能是電針治療腎絞痛的重要靶點之一。

基于中醫(yī)理論基礎(chǔ)及經(jīng)絡(luò)腧穴理論，結(jié)合鎮(zhèn)痛機制的初步探討結(jié)果，對電針治療腎絞痛提供科學(xué)、客觀的依據(jù)，讓電針治療腎絞痛有理可循。而疼痛是炎性遞質(zhì)、神經(jīng)遞質(zhì)、電生理活動、微循環(huán)血流動力學(xué)等因素相互作用的結(jié)果，電針鎮(zhèn)痛的原理包括神經(jīng)化學(xué)機制、神經(jīng)生理機制、分子機制和效應(yīng)機制等多個方面。本研究從炎性遞質(zhì)及神經(jīng)遞質(zhì)方面進(jìn)行探討論述，未來還需進(jìn)一步圍繞電生理、微循環(huán)血流動力學(xué)等開展，以探討電針治療腎絞痛的綜合鎮(zhèn)痛機制。

綜上所述，電針腧穴對腎絞痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用顯著，其能有效改善大鼠的痛閾及自發(fā)性疼痛評分、減輕腎小管擴張及炎性細(xì)胞浸潤，其機制可能與TXA2、PGI2和5-HT表達(dá)水平變化有關(guān)，為臨床使用電針治療腎絞痛提供客觀依據(jù)。

作者貢獻(xiàn)：肖揚進(jìn)行實驗設(shè)計與實施、資料收集整理、撰寫論文、成文并對文章負(fù)責(zé)；王鋒鋒、熊杰、孟磊進(jìn)行實驗實施、評估、資料收集；姚睿智、王峻、莊禮興、陳銘進(jìn)行質(zhì)量控制及審校。

本文無利益沖突。

參考文獻(xiàn)

[1]Li WF，Shi GH，Gu X，et al.Comparison of the experimental renal calcium oxalate calculus models in rats[J].Journal of Shanghai Jiaotong University(Medical Science)，2006，26(1)：66-68.(in Chinese)

李文峰，施國海，顧欣，等.實驗性大鼠腎草酸鈣結(jié)石模型的篩選研究[J].上海交通大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2006，26(1)：66-68.

[2]華興邦,李辭蓉，周浩良，等.大鼠穴位圖譜的研制[J].實驗動物與動物實驗,1991,1(1):1-5.

[3]Attal N,Jazat F,Kayser V,et al.Further evidence for pain-related behaviours in a model of unilateral peripheral mononeuropathy[J].Pain,1990,41(2):235-251.

[4]Linde K,Allais G,Brinkhaus B,et al.Acupuncture for migraine prophylaxis[J].Cochrane Database Syst Rev,2009(1):CD001218.

[5]Manheimer E,Cheng K,Linde K,et al.Acupuncture for peripheral joint osteoarthritis[J].Cochrane Database Syst Rev,2010(1):CD001977.

[6]Ernst E,Pittler MH.The effectiveness of acupuncture in treating acute dental pain:a systematic review[J].Br Dent J,1998,184(9):443-447.

[7]Xue B,Fan L,Hu L.Clinical observation on cervical spondylopathy vertebroarterial type treated by electro-acupuncture[J].J Tradit Chin Med,2007,27(1):39-42.

[8]Mo XF,Xuan LH,Jin YB,et al.Efficacy observation on abdominal acupuncture for adhesion-stage shoulder periarthritis[J].Zhongguo Zhen Jiu,2013,33(9):847-849.

[9]Zhao H,Liu Z,Xie L,et al.Interpretation of clinical practice guideline for low back pain treated with acupuncture and moxibustion[J].Zhongguo Zhen Jiu,2015,35(10):1065-1068.

[10]Han J,Wang XY,Wang J,et al.Adenosine A1 receptors involved in inflammatory pain and the mechanism of analgesia by electro-acupuncture[J].Journal of Clinical Acupuncture and Moxibustion,2015,31(2):57-61.(in Chinese)

韓晶,王曉燕,王健,等.腺苷A1受體參與炎癥痛及電針鎮(zhèn)痛機制研究[J].針灸臨床雜志,2015,31(2):57-61.

[11] Xue C,Xie L,Li X,et al.Analgesic mechanism of electroacupuncture in a rat L5 spinal nerve ligation model[J].Exp Ther Med,2015,9(3):987-991.

[12] Wang J,Meng FY,Chen SP,et al.Analysis on interrelation between electroacupuncture-induced cumulative analgesic effect and hypothalamic cholinergic activities in chronic neuropathic pain rats[J].Chin J Integr Med,2012,18(9):699-707.

[13]楊歡,鄭小蘭,徐國海,等.電針治療糖尿病神經(jīng)病理性疼痛機制的研究進(jìn)展[J].中國疼痛醫(yī)學(xué)雜志，2015，21(11)：855-858.

[14]Lin C,Ma L,Zhu S,et al.Applications of pain-related evoked potentials and short-latency somatosensory evoked potentials in acupuncture research:a narrative review[J].J Tradit Chin Med,2015,35(5):606-618.

[15]Kapoor DA，Weitzel S，Mowad JJ，et al.Use of indomethacin suppositories in the prophylaxis of recurrent ureteral colic[J].J Urol，1989，142(6)：1428-1430.

[16]黃華蘭,聶鑫,賀勇,等.內(nèi)毒素和前列腺素I2/血栓素A2與1型肝腎綜合征的關(guān)系[J].世界華人消化雜志，2013，21(29)：3132-3138.

[17]Zwergel U,Zwergel T,Leis HJ,et al.Eicosanoid synthesis in the isolated human renal peivis，ureter and bladder[J].Br J Urol，1991，67(3)：246-250.

[18]Ji HM,Hong YG.5-hydroxytriptamine 2A receptor and pain[J].International Journal of Pathology and Clinical Medicine，2007，27(5):456-460.(in Chinese)

冀海明，洪炎國.5-羥色胺2A受體與疼痛[J].國際病理科學(xué)與臨床雜志，2007，27(5):456-460.

[19]黃建國,黃朝頔,龔啟英,等.5-羥色胺與疼痛[J].中國皮膚性病學(xué)雜志,2015,29(9):974-977.

(本文編輯：毛亞敏)

Analgesic Effect and Mechanism of Electroacupuncture Acupoints in Renal Colic Rats

XIAOYang,WANGFeng-feng,XIONGJie,etal.

TheFirstClinicalMedicalSchool,GuangzhouUniversityofChineseMedicine,Guangzhou510120,China

【Abstract】ObjectiveTo study the analgesic effect and mechanism of electroacupuncture(EA) acupoints in renal colic rats.MethodsFrom March 31,2015 to April 28,2015,26 male SD rats in a SPF grade were selected and divided into normal group(n=8),model group(n=8) and EA group(n=10) by random number table method.The rats were fed adaptively for 7 days.From the 8th day,the rats in normal group were free to drink water,the rats of another groups were free to drink stone inducing agent(1% ethylene glycol solution and 1% ammonium chloride aqueous solution) for 10 days to establish renal colic models induced by calcium oxalate stone.There were two deaths including one in model group and one in EA group after models were established successfully.The electroacupuncture was applied to "Shenshu"(BL23),"Sanjiaoshu"(BL22),"Sanyinjiao"(SP6) and "Shuiquan"(KI5) in the rats in EA group for 3 days.Rats were executed on the next day after treatment ended.Before treatment and on day 1,2,3 of treatment, pain threshold value was compared among the three groups, spontaneous pain score was compared between model group and EA group， the TXA2, PGI2 and 5-HT expressions among the three groups were detected by ELISA method, the pathological changes of the left kidney tissue of each group were observed after biopsies.ResultsThere was interaction effect between treatment measure and time in pain threshold value(P<0.05);the main effect between treatment measure and time was significant in pain threshold value(P<0.05);Rats in model group and EA group had lower pain threshold than normal group before treatment,and on the first and second day of treatment (P<0.05);the rats in model group had lower pain threshold than normal group on the third day of treatment(P<0.05);the rats in EA group had higher pain threshold than model group on day 1,2,3 of treatment (P<0.05).There was interaction effect between treatment measure and time in the score of spontaneous pain(P<0.05);the main effect between treatment measure and time was significant in the score of spontaneous pain(P<0.05);the rats in EA group had lower score of spontaneous pain than model group on day 1,2,3 of treatment (P<0.05).The rats of model group were higher than normal group in the expressions of TXA2，PGI2 and 5-HT in renal tissue,and EA group was higher than normal group in the expression of PGI2 in renal tissue (P<0.05);the rats of EA group were lower than model group in the expressions of TXA2，PGI2 and 5-HT in renal tissue (P<0.05).For normal group,no calcium oxalate crystal deposit was observed in kidney;glomerular morphology was regular;no congestion in surrounding tissue,no infiltration of inflammatory cells,and no expansion of kidney tubules were found;the cells were in alignment and clear structure.For model group,glomerular morphology was regular;congestion and edema in surrounding tissue,infiltration of inflammatory cells,obvious expansion of kidney tubules,and calcium oxalate crystal deposit were noted;the cells were in disorder,and epithelial cells fell off and were necrotic.For EA group,glomerular morphology was regular;slight congestion and infiltration of inflammatory cells in surrounding tissue,and expansion of kidney tubules were noted,but no calcium oxalate crystal deposit was observed;the cells were in disorder and clear structure;no epithelial cells fell off and were necrotic.ConclusionThe EA acupoints treatment has analgesic effect on renal colic rats.The therapeutic mechanism is possibly achieved by inhibiting the expressions of inflammatory mediators TXA2,PGI2 and neurotransmitter 5-HT.

【Key words】Electroacupuncture；Renal colic;Rats;Acupuncture Analgesia；Thromboxane A2;Epoprostenol;Serotonin

通信作者：陳銘，510120廣東省廣州市，廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院；E-mail：chenming0953@sohu.com

【中圖分類號】R 691.4

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

doi：10.3969/j.issn.1007-9572.2016.18.019

(收稿日期：2016-01-23；修回日期：2016-05-06)

·中醫(yī)·中西醫(yī)結(jié)合研究·