溫展翀 田春芳 黃志行

[摘要] 目的 研究孕婦血清P-亮氨酸氨基肽酶（LAP）檢測(cè)在異常妊娠中的應(yīng)用價(jià)值，為臨床異常妊娠的檢測(cè)提供參考。 方法 選擇我院2014年2月～2015年4月收治的妊娠產(chǎn)婦作為本次研究的對(duì)象，包括異常妊娠及正常妊娠，比較其血清LAP、堿性磷酸酶（ALP）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）活性。 結(jié)果 早期妊娠組中，異位妊娠產(chǎn)婦的LAP活性低于正常妊娠者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），但兩者ALP和ALT的活性差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；中期妊娠組中，先兆流產(chǎn)和正常妊娠產(chǎn)婦的LAP、ALP、ALT活性比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；晚期妊娠組中，正常妊娠和多胎妊娠、膽內(nèi)膽汁淤積癥的LAP、ALP、ALT活性比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 孕婦血清P-LAP檢測(cè)在異常妊娠中具有積極的價(jià)值，可有效監(jiān)測(cè)妊娠過程中是否存在異常情況。

[關(guān)鍵詞] 異常妊娠；P-LAP；血清；臨床價(jià)值

[中圖分類號(hào)] R714.22 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2016）03（b）-0084-03

[Abstract] Objective To study the clinical value of serum P-leucine aminopeptidase （LAP） detection in abnormal pregnancy and to provide reference opinions for the detection of abnormal pregnancy. Methods Pregnant parturient from February 2014 to April 2015 of our hospital were selected as experimental objective，including normal pregnant and abnormal pregnancy parturient.The activity of serum LAP，alkaline phosphatase （ALP） and alanine aminotransferase （ALT） in two groups were compared. Results In early pregnancy，the activity of LAP in ectopic pregnancy group was lower than that of normal pregnancy （P<0.05），but the activity of ALP and ALT between two groups had no obvious difference （P>0.05）.In mid pregnancy，the LAP，ALP and ALT between threatened abortion group and normal pregnancy group had no obvious difference （P>0.05）.In third pregnancy，the activity of LAP，ALP and ALT between normal pregnancy group and multiple pregnancy group，intrahepatic cholestasis had obvious difference （P<0.05）. Conclusion Pregnant serum P-LAP detection has positive determination value in abnormal pregnancy，which can effectively monitor whether there is any abnormal situation during pregnancy.

[Key words] Abnormal pregnancy；P-LAP；Serum；Clinical value

胎盤亮氨酸氨基肽酶（LAP）是人體中能夠降解多種多肽的降解催產(chǎn)素，臨床上亦稱之為催產(chǎn)素酶的膜結(jié)合型外肽酶[1]，如血管緊張素和抗利尿激素等。妊娠期間，產(chǎn)婦為了適應(yīng)胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育，孕婦體內(nèi)的激素和酶類也會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)的生理變化，其LAP活性在一定程度上可以較好地反映產(chǎn)婦的妊娠情況[2]。本文為進(jìn)一步探討孕婦血清P-LAP檢測(cè)在異常妊娠中的臨床價(jià)值，選擇我院收治的異常妊娠產(chǎn)婦和正常妊娠產(chǎn)婦作為研究對(duì)象進(jìn)行研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2014年2月～2015年4月收治的妊娠產(chǎn)婦作為本次研究的對(duì)象，按照妊娠時(shí)間分為早期妊娠組、中期妊娠組、晚期妊娠組，每組均有異常妊娠產(chǎn)婦及正常妊娠產(chǎn)婦，其中早期妊娠組有25例異位妊娠、25例正常妊娠產(chǎn)婦；中期妊娠組有25例先兆流產(chǎn)產(chǎn)婦、25例正常妊娠產(chǎn)婦；晚期妊娠組中有15例子癇前期產(chǎn)婦、20例膽內(nèi)膽汁淤積癥產(chǎn)婦、15例多胎妊娠產(chǎn)婦、50例正常妊娠產(chǎn)婦。100例異常妊娠產(chǎn)婦的年齡在20～41歲之間，平均年齡為（32.09±4.21）歲；100例正常妊娠產(chǎn)婦的年齡在21～40歲之間，平均年齡為（31.14±4.91）歲。各組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

異常妊娠產(chǎn)婦納入標(biāo)準(zhǔn)：①均確診為異常妊娠產(chǎn)婦；②排除心肝腎功能嚴(yán)重病變者；④排除血液系統(tǒng)疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病及不愿配合本次調(diào)查研究者；③排除伴有高血壓、糖尿病等嚴(yán)重病史患者。參與本次研究的所有患者均經(jīng)相關(guān)醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，對(duì)本次研究的方法和目的均具有知情權(quán)。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集方法 于清晨采集患者的空腹靜脈血2 ml，將其放入至抗凝管中，待10 min后，進(jìn)行離心處理，離心處理結(jié)束后，對(duì)各組產(chǎn)婦的LAP、堿性磷酸酶（ALP）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）活性進(jìn)行檢測(cè)[3]。

1.2.2 測(cè)試方法 使用ELISA法檢測(cè)法，試劑為亮氨酸/半胱氨酸氨肽酶（LNPEP）檢測(cè)試劑盒（武漢優(yōu)爾生物科技股份有限公司）。按說明書要求和方法進(jìn)行檢測(cè)[4]：將包被液稀釋至15 μg/ml，每孔100 μl，4℃過夜，洗液清洗9 min后，拍干，之后加入封閉液，每孔150 μl，溫度維持37℃，持續(xù)時(shí)間30 min，洗液清洗9 min，拍干后直接使用，加培養(yǎng)上清，100 μl每孔，繼續(xù)加入培養(yǎng)上清，100 μl每孔，加入羊抗人-HRP工作液，洗液清洗9 min后，拍干，加入顯色液和終止液，每孔100 μl，ELISA讀板儀讀取450 nm處的OD值。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)異常妊娠及正常妊娠產(chǎn)婦的LAP、ALP、ALT活性進(jìn)行觀察。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 18.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

早期妊娠組中，異位妊娠產(chǎn)婦的LAP活性低于正常妊娠者（P<0.05），但兩者ALP和ALT的活性無明顯差異。中期妊娠組中，先兆流產(chǎn)和正常妊娠產(chǎn)婦的LAP、ALP、ALT活性比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。晚期妊娠組中，多胎妊娠及肝內(nèi)膽汁淤積癥產(chǎn)婦的LAP、ALP、ALT活性均高于正常妊娠產(chǎn)婦，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；子癇前期和正常妊娠產(chǎn)婦的LAP、ALP、ALT活性比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

3 討論

異常妊娠是懷孕期間的異常情況，共分為早期妊娠、中期妊娠及晚期妊娠三項(xiàng)，異常妊娠的主要體征包括以下幾點(diǎn)。①子宮增大：子宮隨妊娠的進(jìn)展逐漸增大，檢查腹部，根據(jù)手測(cè)宮底高度和尺測(cè)恥上子宮長(zhǎng)度，可以幫助判斷妊娠周數(shù)；②胎動(dòng)：胎兒在子宮內(nèi)沖擊子宮壁的活動(dòng)稱為胎動(dòng)，胎動(dòng)是胎兒情況良好的表現(xiàn)，異常妊娠孕婦在第18～20周開始自覺胎動(dòng)，妊娠周數(shù)越多，胎動(dòng)越活躍，但至妊娠末期胎動(dòng)會(huì)逐漸減少，3～5次/h；③胎兒心音：在妊娠的18周后用聽診器經(jīng)過孕婦腹壁可以聽到胎兒心音，胎兒心音是雙音，像鐘表“滴答”，速度較快，120～160次/min，胎兒心音異常即可確診為異常妊娠。

ALP是同源二聚體蛋白，分子量為56 kD，由449個(gè)氨基酸組成每個(gè)單體，完整的ALP分子呈現(xiàn)典型的α的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)，且每個(gè)單體都具有一個(gè)活性中心，活性中心區(qū)域主要由三連體、水分子及三個(gè)金屬離子和配體氨基酸組成，ALP能夠?qū)?duì)應(yīng)底物去磷酸化的酶除去，且促進(jìn)磷酸根離子和自由的羥基，包括蛋白、核酸、生物堿等，ALP在人體的肝臟、骨骼、腸、腎和胎盤組織中具有廣泛的分布，經(jīng)肝臟向膽外排出，可以明顯催化核酸分子脫掉磷酸基因，異常妊娠產(chǎn)婦在妊娠早期和中期的ALP活性無明顯差異，但到了妊娠晚期，多胎妊娠和膽內(nèi)膽汁淤積癥患者的ALP活性明顯增高，與正常妊娠產(chǎn)婦比較，差異顯著。

ALT是常見的肝功能指標(biāo)，其升高可能預(yù)示著肝臟出現(xiàn)了嚴(yán)重的問題，是反映肝功能正常與否的重要指標(biāo)。肝炎是引起ALT升高的重要原因，當(dāng)肝臟因?yàn)橥饨绛h(huán)境的變化，如藥物影響、炎癥影響、食物影響或者是生活習(xí)慣影響時(shí)，會(huì)導(dǎo)致肝臟受損，異常妊娠產(chǎn)婦在妊娠早期和中期的ALP活性無明顯差異（P>0.05），但到了妊娠晚期，多胎妊娠和膽內(nèi)膽汁淤積癥患者的ALP活性明顯增高，與正常妊娠產(chǎn)婦比較，差異顯著。

LAP是反映肝膽疾病的靈敏指標(biāo)，肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞及毛細(xì)膽管上皮細(xì)胞中定位了大量的LAP，且在人體的肝臟、腦、肌肉、腎組織中有廣泛的分布[5]。隨著臨床上對(duì)血清LAP研究的深入發(fā)現(xiàn)，胎盤中的P-LAP對(duì)維持正常妊娠具有重要的作用，P-LAP也稱催產(chǎn)素酶，在妊娠的第37周可以達(dá)到高峰，在之后的妊娠過程中逐步下降，并且在分娩結(jié)束后，可以達(dá)到正常值[6]。相關(guān)資料表明[7]，當(dāng)產(chǎn)婦的妊娠時(shí)間增長(zhǎng)，但LAP未出現(xiàn)增高時(shí)，意味著產(chǎn)婦可能出現(xiàn)了相關(guān)的妊娠并發(fā)癥，如異位妊娠、先兆流產(chǎn)、胎盤功能發(fā)育不全等，這會(huì)給產(chǎn)婦的身心健康和正常妊娠造成嚴(yán)重的負(fù)面影響。異位妊娠是臨床常見的妊娠并發(fā)癥，導(dǎo)致該疾病的主要原因是受精卵在子宮之外的輸卵管或者其他地方著床，子宮蛻膜和受精卵外側(cè)的絨毛未進(jìn)行正常連接，胎盤組成出現(xiàn)異常，其LAP活性就會(huì)隨之降低[8-9]，本研究中異位妊娠產(chǎn)婦的LAP活性低于正常妊娠者，但兩組ALP和ALT的活性無明顯差異，這說明了孕婦血清P-LAP檢測(cè)在妊娠早期具有積極的診斷價(jià)值。

產(chǎn)婦發(fā)生流產(chǎn)的影響因素較多，一般來說，產(chǎn)婦流產(chǎn)后妊娠產(chǎn)物多為已經(jīng)退化的胚胎或者空孕囊，如未及早發(fā)現(xiàn)和治療，將給產(chǎn)婦的身心健康造成不利影響[10-11]。中期妊娠常出現(xiàn)先兆流產(chǎn)，這主要是因?yàn)樵谌焉锲陂g，胎盤逐漸成熟與發(fā)展，會(huì)影響并且代替卵巢妊娠黃體的功能，胎盤一旦出現(xiàn)內(nèi)分泌功能失調(diào)情況，相關(guān)的激素減少后，將無法繼續(xù)維持妊娠，本研究結(jié)果表明，正常妊娠產(chǎn)婦的LAP、ALP、ALT相對(duì)較高，但經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，兩者的差異不顯著，因此，尤其要引起相關(guān)的臨床重視。LAP是判斷肝膽疾病的靈敏指標(biāo)，本研究結(jié)果表明，肝內(nèi)膽汁淤積癥組的LAP、ALP、ALT活性明顯升高，說明除了LAP指標(biāo)外，ALP、ALT活性亦可以反映產(chǎn)婦肝內(nèi)膽汁淤積癥的情況[12-13]。另外，多胎妊娠組產(chǎn)婦的LAP、ALP、ALT亦明顯升高，這主要是由生理性的改變所引起。子癇前期的LAP活性會(huì)高于正常妊娠者，這說明LAP對(duì)于預(yù)測(cè)和診斷子癇前期具有重要的價(jià)值，但是由于個(gè)體的差異性，單次測(cè)定容易出現(xiàn)較大的誤差，故在測(cè)定子癇前期產(chǎn)婦LAP活性的過程中應(yīng)該連續(xù)測(cè)定觀察[14-15]。

綜上所述，孕婦血清P-LAP檢測(cè)在異常妊娠中具有積極的檢測(cè)價(jià)值，可有效監(jiān)測(cè)妊娠過程中是否存在異常情況。

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