李力

[摘 要]應(yīng)用植物離體培養(yǎng)技術(shù)研究文心蘭增殖技術(shù)。結(jié)果表明：文心蘭原球莖增殖的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA4 mg·L-1+NAA0.4mg·L-1+活性炭1.5g·L-1+蔗糖20.0g·L-1；最佳的幼苗分化培養(yǎng)基是1/2MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg· L-1+蔗糖20.0g·L-1+瓊脂10.0g·L-1為佳；最佳的壯苗培養(yǎng)基以1/2MS+NAA1.0mg·L-1+蔗糖20 g·L-1+活性炭2.0 g·L-1+黃瓜汁10%為佳。

[關(guān)鍵詞]文心蘭；原球莖；增殖；分化；壯苗

[中圖分類號]S682.31 [文獻標(biāo)識碼]A

文心蘭（Oncidium）為蘭科文心蘭屬植物，又名跳舞蘭、舞女蘭或跳舞女郎（Dancing Lady Orchid）。近年來，作為重要的切花和盆花種，市場需求量急劇增加，成為洋蘭類的新寵之一。文心蘭同其它蘭科植物一樣，多采用傳統(tǒng)的分株或播種等方法進行繁殖，由于分株繁殖系數(shù)低，播種又存在后代性狀不一致等缺點，因而，利用現(xiàn)代生物組織培養(yǎng)技術(shù)進行種苗的快繁生產(chǎn)具有重要的意思。為此本實驗對文心蘭原球莖的增殖、分化及壯苗進行了探索性研究。

1 材料與方法

1.1 材料與主要儀器

1.1.1 供試材料

文心蘭莖尖誘導(dǎo)形成的原球莖（Protocorm Like Body以下簡稱PLB）。

1.1.2 主要儀器

塑料瓶、玻璃棒、量筒、移液管、酒精燈、PHS-2數(shù)顯酸度計、超凈工作臺、高壓蒸氣滅菌鍋、METTLERPM200電子天平

1.2 試驗方法

1.2.1 原球莖的增殖

先將文心蘭莖尖誘導(dǎo)形成的PLB在MS+6-BA 2+NAA 1的培養(yǎng)基上擴增30 d，培養(yǎng)溫度（28±1）℃、光強2000～1500 Lx、光照時間12 h/d。繼代增殖達到一定數(shù)量后進行以下探索性實驗。

1.2.1.1 不同濃度6-BA和NAA對文心蘭PLB增殖的影響試驗

以MS為基本培養(yǎng)基，具體設(shè)計方案見表1。每種處理接5瓶，每瓶接種15個PLB塊，PLB塊3mm，3次重復(fù)。培養(yǎng)溫度（28±1）℃、光強2000～1500 Lx、光照時間12 h/d，培養(yǎng)時間為30 d。

1.2.1.2 不同MS對文心蘭PLB增殖的影響

將文心蘭PLB分別接種在MS、1/2MS、1/3MS+6-BA2.0 mg·L-1 +NAA1.0mg·L-1 的培養(yǎng)基上，每種處理接5瓶，每瓶接種15個PLB，PLB塊3mm，3次重復(fù)。培養(yǎng)溫度（28±1）℃、光強2000～1500Lx、光照時間12h/d，培養(yǎng)時間為30 d。

1.2.2 分化與壯苗

1.2.2.1 不同濃度激素組合對幼苗分化的影響將增殖得到的原球莖切割后，以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，通過分別添加激素6-BA和NAA含量來探索最佳分化苗配方。每種處理接5瓶，每瓶接種15個PLB，PLB塊3mm，3次重復(fù)。培養(yǎng)溫度（28±1）℃、光強2000～1500Lx、光照時間12h/d，培養(yǎng)時間為30d。統(tǒng)計幼苗分化率。

1.2.2.2 不同添加物對壯苗生根的影響

為了提高后期移苗的成活率，本試驗設(shè)計了香添加蕉、黃瓜、馬鈴薯、椰乳汁、水幾種壯苗生根培養(yǎng)基，對壯苗生根的影響試驗，每種處理接5瓶，每瓶接10株2～3cm的文心蘭無根苗?；九囵B(yǎng)基采用1/2MS+蔗糖20 g·L-1+活性炭2.0 g·L-1+NAA1.0 mg·L-1。培養(yǎng)溫度（28±1）℃、光強2500 Lx、光照時間14 h/d，培養(yǎng)時間為60d。

2 結(jié)果與分析

2.1 6-BA和NAA對文心蘭PLB增殖的影響

根據(jù)表一的試驗結(jié)果，對不同6-BA和NAA對文心蘭PLB增殖的影響進行方差分析，其分析結(jié)果見表二。

表二的方差分析結(jié)果表明，NAA和6-BA對文心蘭PLB的增殖影響顯著（P<0.05），NAA與BA的交互作用不大（P>0.05）。

從表二可以看出，a因素3水平中a2與之間a1和a3差異顯著，說明6-BA 4.0 mg·L-1時，最有利于文心蘭PLB的增殖。

從表三可以看出，b2與b1和b3之間差異顯著，說明NAA0.4 mg·L-1時最有利于文心蘭PLB的增殖。故文心蘭PLB增殖的最優(yōu)激素組合為6-BA4 mg·L-1+NAA0.4 mg·L-1。

2.2 不同MS培養(yǎng)基對文心蘭PLB增殖的影響

由表四可知，大量元素對文心蘭PLB增殖有一定影響，大量元素太低不利于PLB增殖，1/3MS增殖系數(shù)只有1.5，MS和1/2MS增殖系數(shù)較高，沒有明顯差異，達到2.1以上。

2.3 不同添加物對壯苗生根的影響

從表五可以看出，在文心蘭壯苗生根實驗中，不同添加物對促進瓶苗生根存在一定的差異。處理2（添加黃瓜汁），生根率達100.0%，平均每株有6條根，植株高6.0 cm，且根系粗壯。從表五還可以看出添加香蕉、馬鈴署、椰乳汁對生根都有一定促進作用，生根率分別為85.0%、80%、67%，均比對照高。實驗結(jié)果表明，添加黃瓜汁對文心蘭壯苗生根最有利。

3 小結(jié)與討論

文心蘭作為漂亮的觀賞花卉，市場的需求量很大。NAA 能促進細(xì)胞分裂、誘導(dǎo)愈傷組織的形成，6-BA 可促進細(xì)胞分裂和生根等，培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素的比率合適與否是決定生芽和壯苗生根的關(guān)鍵。提高細(xì)胞分裂素的質(zhì)量濃度，有利于芽的形成；提高生長素質(zhì)量濃度，有利于根的形成。

通過實驗得出：心蘭PLB的最佳增殖培養(yǎng)基是MS+6-BA4mg· L-1+NAA0.4mg·L-1 +活性炭1.5g·L-1+蔗糖20.0g·L-1是。最佳的幼苗分化培養(yǎng)基是1/2MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1+蔗糖20.0。最佳的生根壯苗是1/2MS+NAA1.0mg·L-1+蔗糖20g·L-1+活性炭2.0g·L-1+黃瓜汁10%作為壯苗培養(yǎng)基最為理想，培養(yǎng)基中加入適當(dāng)天然有機物有助生根壯苗。

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