劉鐸，魯建美，張吉仲，呂露陽

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鹽狗脊的質(zhì)量標準研究

劉鐸，魯建美，張吉仲，呂露陽

［摘要］目的：建立鹽狗脊的質(zhì)量標準。方法：采用薄層鑒別和水分、灰分及浸出物等方法對鹽狗脊進行定性鑒別，采用高效液相色譜法，測定了鹽狗脊中原兒茶酸的含量。結(jié)果：薄層色譜鑒別等能夠很好地鑒別鹽狗脊，且專屬性較強。結(jié)論：所建立的質(zhì)量控制方法結(jié)果準確、操作簡便、重復性好，可控制鹽狗脊的質(zhì)量。

［關鍵詞］鹽狗脊；質(zhì)量標準；含量測定

［作者單位］西 南民族大學民族醫(yī)藥研究院，四川 成都 610041

Tel:15008471360 Email:15008471360@163.com

Email:daowen2003@126.com

鹽狗脊為蚌殼蕨科植物金毛狗脊Cibotiumbarometz （L.） J.Sm.的干燥根莖。秋、冬二季采挖，除去泥沙，干燥。鹽狗脊的炮制方法為將狗脊刮凈毛，放入鍋中，加鹽水拌勻，煮熟至無白心。取出曬至五、六成干，悶軟，切薄片，曬干。每100kg狗脊，用食鹽3kg。狗脊經(jīng)炮制后呈不規(guī)則長條形或卷縮不規(guī)則；切面暗褐色至黑棕色，較平滑，近邊緣1-4mm處有一條棕黃色隆起的木質(zhì)部環(huán)紋或條紋，邊緣不整齊，偶有金黃色絨毛殘留［1］；質(zhì)堅硬。狗脊經(jīng)炮制后具有增強補肝腎的作用。《中國藥典》中僅收錄了燙狗脊［2］，因此，我們對鹽狗脊進行了系統(tǒng)的質(zhì)量標準研究，用以規(guī)范鹽狗脊的質(zhì)量標準。

1　實驗材料

1.1 儀器

KQ-250DE型數(shù)控超聲波清洗器 （昆山市超聲儀器有限公司）；STI-501型液相色譜儀（杭州賽智科技有限公司）；水浴鍋等。

1.2 試藥

乙腈為色譜純（天津科密歐化學試劑有限公司，批號：20100106 ）；四氫呋喃（成都市科龍化工試劑廠，批號：2014092201），甲醇（成都市科龍化工試劑廠，批號：2014102901），乙醇（成都市科龍化工試劑廠，批號：20120306），冰醋酸（成都市科龍化工試劑廠，批號：20090910）均為分析純，水為高純水。

1.3 藥物飲片

鹽狗脊藥材分別購于成都康美藥業(yè)、廣西健一藥業(yè)、成都荷花池藥材市場。

2　實驗方法與結(jié)果

2.1 性狀

經(jīng)炮制后切面呈暗褐色至黑棕色，味咸，有增強補肝腎的功用。

2.2 鑒別

2.2.1 薄層鑒別 取本品粉末2 g，用甲醇50 mL，超聲提取30分鐘，過濾后蒸干，剩余藥渣用1 mL甲醇溶解，作為供試品溶液。另取2 g狗脊藥材作為對照，同法制成對照藥材溶液。吸取供試品溶液3～6 μL，對照藥材溶液4 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，使成條狀，以甲苯-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（3∶5∶6∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵溶液-1%鐵氰化鉀溶液（1∶1）（臨用配制），放置至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。結(jié)果如下圖。

圖1 鹽狗脊TLC圖

2.3 檢查

2.3.1 水分 將測定用的鹽狗脊破碎成直徑不超過3 mm的顆?；蛩槠恢睆胶烷L度在3 mm以下的可不破碎；通過二號篩用減壓干燥法處理。

因狗脊中含有少量揮發(fā)性成分，因此采用烘干法進行水分測定。取鹽狗脊供試品2～5 g，平鋪于干燥至恒重的扁形稱量瓶中，厚度不超過5 mm；疏松供試品不超過10 mm ；精密稱定，打開瓶蓋在100～105℃干燥5小時，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定，再在上述溫度干燥1小時，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重的差異不超過5 mg為止。根據(jù)減失的重量，計算供試品中含水量（%）。用此方法分別測定了5批樣品，測定結(jié)果分別為5.3%、5.7%、12.0%、5.9%、11.7%（見表1）。

2.3.2 總灰分 測定用的藥材供試品須粉碎，使能通過二號篩，混合均勻后，取供試品藥材2～3 g（如須測定酸不溶性灰分，可取供試品藥材3～5 g），置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量（準確至0.01 g），緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時，逐漸升高溫度至500～600℃，使完全灰化并至恒重。根據(jù)殘渣重量，計算供試品藥材中總灰分的含量（%）。2.3.3 浸出物 稱取供試品藥材約2～4 g，精密稱定，置100～250 ml的錐形瓶中，精密加水50～100 ml ，密塞，稱定重量，靜置1小時后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1小時。放冷后，取下錐形瓶，密塞，再稱定重量，用水補足所減失的重量，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25 ml，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中、在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3小時，置干燥器中冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量。除另有規(guī)定外，以干燥品來計算供試品中水溶性浸出物的含量（%）。

表1 鹽狗脊水分、總灰分、浸出物、原兒茶酸含量測定結(jié)果

2.4 原兒茶酸含量的測定

按中國藥典2010年版一部附錄VI D，參照“燙狗脊”含量測定方法。

2.4.1 色譜條件與系統(tǒng)適應性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-1%冰醋酸溶液（5∶95）為流動相；檢測波長為260 nm。理論板數(shù)按原兒茶酸峰計算應不低于3000。按以上色譜條件進行試驗，色譜峰分離條件好。結(jié)果如圖2。

圖2 鹽狗脊HPLC圖

2.4.2 對照品溶液的制備 取原兒茶酸對照品適量，精密稱定，加甲醇-1%冰醋酸溶液（70∶30）混合溶液制成每1 ml含50 μg的溶液，即得。

2.4.3 供試品溶液的制備 取本品粉末（過三號篩）約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇-1 %冰醋酸溶液（70∶30）混合溶液25 mL，稱定重量，超聲處理（功率250 W，頻率40 kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇-1%冰醋酸溶液（70∶30）混合溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4.4 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μl，注入液相色譜儀，測定，即得。

本品按干燥品計算，含原兒茶酸（C7H6O4）不得少于0.020%。測定結(jié)果見表1。

3　結(jié)果與討論

文獻報道不同產(chǎn)地狗脊中原兒茶酸含量在0.0328%～0.004%之間，相差約8倍［3］，而炮制如砂炒狗脊、酒蒸狗脊、蒸狗脊的原兒茶酸含量均大于炮制前，其中以砂炒狗脊增加得最多，為炮制前的4倍［4］；也有報道炮制前后，狗脊片、燙狗脊片、蒸狗脊片中原兒茶酸含量均值分別為0.028%、0.040%、0.051%，蒸、燙炮制可提高原兒茶酸的含量［5］?？梢?，狗脊經(jīng)加熱炮制，原兒茶酸含量增加，這可能是加熱過程由其苷轉(zhuǎn)化為苷元所至［4］，也可能是大分子鞣質(zhì)降解所至［6］。這可能也是《中國藥典》2010年版僅對燙狗脊制訂了含量測定的原兒茶酸限度，但對狗脊藥材和飲片狗脊（厚片）并未制訂含量測定項的原因。在《中國藥典》中沒有收錄鹽狗脊的質(zhì)量標準，且在《廣西壯族自治區(qū)中藥飲片炮制規(guī)范》2007年版中鹽狗脊僅收錄于熟狗脊項下，因此我們對鹽狗脊進行了系統(tǒng)的研究，對鹽狗脊的臨床應用及質(zhì)量控制具有重要意義。

感謝四川省食品藥品檢驗所、四川省中藥飲片炮制規(guī)范制定委員會為本次研究提供經(jīng)費支持。

［參考文獻］

［1］國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典:2010 年版一部［S］.北京: 中國醫(yī)藥科技出版社，2010: 160.

［2］廣西壯族自治區(qū)食品藥品監(jiān)督管理局. 廣西壯族自治區(qū)中藥飲片炮制規(guī)范. 廣西科學技術出版社，2007版.

［3］羅瑞，何智建.不同產(chǎn)地狗脊中原兒茶酸和原兒茶醛的含量測定［J］.臨床醫(yī)學工程， 2011，18（7）: 1100-1101.

［4］謝艷，羅瑞，何智建.狗脊炮制工藝的研究［J］.臨床醫(yī)學工程，2011，18（7）:1096-1097.

［5］陳征，李文莉， 童珂.狗脊飲片不同炮制品中原兒茶酸的含量測定［J］.湖南中醫(yī)藥大學學報， 2011， 31（9）: 38-40.

［6］賈天柱，刁秀蘭，李軍，等.狗脊不同炮制品種鞣質(zhì)的含量測定［J］.中成藥， 2002， 24（1）: 32-34.

（責任編輯：傅舒）

Research on the quality standards of salt processed Gouji

LIU Duo， LU Jian-mei， ZHANG Ji-zhong， LV Lu-yang//（EthnicMedicine Institute， Southwest University for Nationalities， Che gdu 610041，Sichuan）

［Abstract］Objective: To establish quality standard for salt processed Gouji. Method: The TLC and water， ash， and extract detection were performed for the qualitative identification of salt processed Gouji. High performance liquid chromatography （HPLC）method was applied to detect protocatechuic acid in salt processed Gouji. Result: TLC can be used to identify salt processed Gouji with specifity. Conclusion: The established method of quality control is accurate， simple and reproducible which can be used for quality control of salt processed Gouji.

［Key words］Salt processed Gouji； quality standard； content determination

［中圖分類號］R283.3

［文獻標識碼］A

［文章編號］1674-926X（2016）02-009-03

［作者簡介］劉 鐸，男，碩士生，研究方向：中藥、民族藥的制劑研究

［通訊作者］張 吉仲，男，副教授，從事中藥及民族藥復方藥理及疾病動物模型研究

［收稿日期］2015-12-30