朱光書，朱方容，林強(qiáng)，曾燕蓉，崔秋英，邱長玉，張朝華

（1.江蘇科技大學(xué)，鎮(zhèn)江市 212018；2.廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣總站，南寧市530007）

·試驗研究·

赤銹病桑葉養(yǎng)蠶對蠶體健康及產(chǎn)繭與產(chǎn)卵的影響

朱光書1，2，朱方容2，林強(qiáng)2，曾燕蓉2，崔秋英2，邱長玉2，張朝華2

（1.江蘇科技大學(xué)，鎮(zhèn)江市 212018；2.廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣總站，南寧市530007）

為探討赤銹病桑葉養(yǎng)蠶對蠶體健康和蠶繭產(chǎn)量的影響，用赤銹病桑葉進(jìn)行養(yǎng)蠶和制種試驗。結(jié)果表明：3齡起蠶至5齡熟蠶用赤銹病重度為害葉、中度為害葉飼養(yǎng)，其眠蠶、熟蠶整齊，健蠶率、結(jié)繭率達(dá)100%，3齡蠶蟲蛹率達(dá)98.70%以上、3齡蠶成蛾率達(dá)94.00%以上、正常產(chǎn)卵蛾率達(dá)93.30%，良卵率達(dá)99.66%以上，與正常桑葉飼養(yǎng)沒有顯著差異，表明使用赤銹病桑葉養(yǎng)蠶對蠶的健康和生長發(fā)育無不良影響；但赤銹病重度為害葉、中度為害葉飼養(yǎng)與正常桑葉飼養(yǎng)相比，最大蠶體重分別下降16.59%、9.84%，蛹體重下降13.57%、5.69%、全繭量下降13.74%、6.63%、繭層量下降16.67%、5.88%；蠶蛾產(chǎn)卵數(shù)也有所下降。評價認(rèn)為，赤銹病為害葉養(yǎng)蠶對蠶沒有一般毒性、發(fā)育毒性、神經(jīng)毒性、器官毒性和生殖毒性，赤銹病桑葉用于絲繭育養(yǎng)蠶和種繭育養(yǎng)蠶是安全的，但應(yīng)及早使用，減輕赤銹病病情，避免赤銹病重度為害、蔓延傳播擴(kuò)大危害；赤銹病桑葉與正常桑葉隔餐或隔天交替喂蠶用葉，可彌補(bǔ)連續(xù)食用赤銹病葉帶來的營養(yǎng)不足，達(dá)到穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)。

桑樹赤銹??；葉質(zhì)；蠶體生命力；蠶繭量；產(chǎn)卵量

桑樹赤銹?。ˋecidium mori Barclay），又稱赤粉病、金桑、金葉、金吊葉、黃疸，是桑樹常見的病害，主要為害桑樹新梢的嫩芽、葉片及?；ā㈤1]，該病最早記載于我國北宋末代溫革著的《瑣碎錄》，稱為“金葉”[2]。桑樹赤銹病的典型癥狀為嫩芽染病后病部畸形或彎曲，常造成桑芽不能萌發(fā)；葉片染病，最初在葉片背面散生圓形有光澤小點(diǎn)，逐漸隆起成青泡狀，然后顏色變黃，表面有點(diǎn)狀分布的壺狀銹孢子器，從銹孢子器中噴出鮮橙黃色粉狀的銹孢子布滿全葉，葉片上的老病斑最后呈暗紫色潰瘍狀；新梢上的芽、莖、花椹等部位染病，局部肥厚或彎曲畸形，出現(xiàn)橙黃色病斑，而枝梢上病斑最后逐漸變黑凹陷[1]。桑赤銹病在我國的廣西、四川、江蘇、浙江、云南、安徽、廣東、江西、山東、陜西、山西、河北、新疆、甘肅、福建、遼寧、臺灣等省區(qū)桑園均有發(fā)生[3-6]，特別是種植在潮濕的沿海、沿江及山間峪地區(qū)域的桑園，桑赤銹病常暴發(fā)成災(zāi)[6]。

桑赤銹病為真菌性病害，病原菌屬擔(dān)子菌亞門、銹菌目、半知銹菌科、春孢銹屬的桑春孢銹菌（Aecidium mori Barclay）[1]，關(guān)于桑赤銹病的發(fā)病規(guī)律、流行原因與防治方法已有較多報道[7-10]，溫度15～25℃，相對濕度90%以上是最適環(huán)境；30 ℃以上高溫病原體生長受抑制；銹孢子主要靠風(fēng)、 雨傳播，桑枝和芽內(nèi)越冬菌絲是來年病原基礎(chǔ)；春季桑赤銹病流行與當(dāng)年初春高溫多濕氣候條件和所屬特殊地理環(huán)境有關(guān)；夏季桑赤銹病流行與長期陰雨有關(guān)。2011年郭堂勛、莫賤友[11]等報道了幾個桑樹品種資源材料對赤銹病的抗性鑒定，認(rèn)為不同地域桑赤銹病病原菌均屬濕潤型生理小種；倫教40對赤銹病的抗性較強(qiáng)，可作為中抗赤銹病品種加以利用。

很多真菌具有藥用價值和保健作用，但一些真菌含有害有毒物質(zhì)，會使人等動物中毒和致病[12]；許多大型有毒真菌具有抗蟲活性[13]。部分真菌及其代謝物對人畜有害，如曲霉菌、青霉菌、鐮刀菌和毒蕈等，真菌毒素即是由此類真菌產(chǎn)生的物質(zhì)，人畜食下即可引起急慢性中毒[14]，因此食品、飼料、中藥材質(zhì)量安全標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了真菌毒素含量的標(biāo)準(zhǔn)限值。

桑葉、桑果既是食品也是藥品，桑葉是蠶的飼料，也可作禽畜動物飼料。迄今，赤銹病桑葉被赤銹病菌物及次生物質(zhì)污染后是否對人、動物有害有毒，未見有報道；赤銹病桑葉養(yǎng)蠶對蠶健康及產(chǎn)繭、產(chǎn)卵影響的研究報道甚少。筆者于2013年用赤銹病葉養(yǎng)蠶制種試驗，分析其安全性和對養(yǎng)蠶產(chǎn)繭產(chǎn)卵的影響，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

本次研究共進(jìn)行2次試驗，第1次試驗收蟻時間為2013年7月1日；第2次試驗收蟻時間為2013年9月13日。供試家蠶品種為兩廣二號（正交），供試桑葉來自廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)科學(xué)研究院雜交組合選育試驗園的10-11號試驗園的沙2×倫109品種桑葉。第1次試驗于7月10—21日用赤銹病重度為害桑葉（每平方厘米有8個以上銹孢子器，見圖1）與正常無病葉作對比，未感染赤銹病的正常桑葉為對照葉； 第2次試驗于9月19日—10月2日用赤銹病中度為害桑葉（每平方厘米有4～7個銹孢子器，見圖2）與正常無病葉作對比，未感染赤銹病的正常桑葉為對照葉。

圖1 赤銹病重度為害桑葉

圖2 赤銹病中度為害桑葉

1.2 養(yǎng)蠶制種及調(diào)查方法

1.2.1 蠶兒飼養(yǎng)與制種 按照廣西壯族自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)DB45/T87—2003《 桑蠶絲繭育養(yǎng)蠶技術(shù)規(guī)程》進(jìn)行蠶種催青和1～3齡小蠶飼養(yǎng)。從收蟻起，1～3齡同室同一大區(qū)，使用桑特優(yōu)2號的母本品種7862的桑葉飼養(yǎng)[15]，3齡起蠶開始分小區(qū)飼養(yǎng)。具體為赤銹病葉和正常葉（對照）各喂養(yǎng)3小區(qū)，每小區(qū)50頭蠶。給桑量為飽食給桑，以下次喂蠶前桑葉剛好吃完為度，每天給桑3次。蠶期、蛹期和制種期同室同樣溫度、濕度環(huán)境。上蔟第13～16 d為化蛾產(chǎn)卵期，化蛾當(dāng)天上午9：30交配，時雌、交配5 h后拆對，排盡尿后單蛾投入紙蛾袋產(chǎn)卵，第二天早上8：00統(tǒng)一殺蛾，產(chǎn)卵后蠶種自然溫、濕度保護(hù)。

1.2.2 調(diào)查與計算 從3齡起蠶開始調(diào)查蠶兒生命力，即調(diào)查每個齡期從起蠶到眠蠶的病蠶和死蠶總數(shù)。5齡第5 d調(diào)查每小區(qū)平均最大蠶體重；上蔟第7 d調(diào)查每小區(qū)蠶兒的結(jié)繭頭數(shù)、化蛹頭數(shù)、死籠率、全繭量、繭層量、繭層率、蛹體重；蠶蛹繼續(xù)保護(hù)至羽化。羽化后調(diào)查化蛾數(shù)，交配產(chǎn)卵后調(diào)查產(chǎn)卵蛾數(shù)，蠶卵固定色后調(diào)查產(chǎn)卵數(shù)和良卵數(shù)。計算各齡期健蠶率、眠蠶整齊度，平均最大蠶體重、結(jié)繭率、死籠率、3齡蟲蛹率、后期死蛹率、3齡蠶成蛾率、雌蛹重、產(chǎn)卵蛾率、15蛾產(chǎn)卵數(shù)、15蛾良卵數(shù)、單蛾產(chǎn)卵數(shù)、單蛾良卵數(shù)、良卵率、平均單蛾良卵數(shù)。用Excel2003軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。

1.2.3 安全性（健康性）評價指標(biāo)及計算方法

用8個指標(biāo)評價赤銹病桑葉養(yǎng)蠶的安全性（健康性），具體指標(biāo)及計算公式如下：

入眠率（%）＝入眠當(dāng)天18∶00眠蠶頭數(shù)／當(dāng)天總蠶頭數(shù)×100

健蠶率（%）＝齡末健蠶數(shù)／起蠶頭數(shù)×100

死籠率（%）＝上蔟第7 d調(diào)查的死籠繭數(shù)／調(diào)查總繭數(shù)×100

后期死蛹率（%）＝上蔟第7 d后至化蛾的死亡數(shù)／上蔟第7 d的蠶蛹數(shù)×100

3齡蟲蛹率（%）＝上蔟第7 d健蛹數(shù)／3齡起蠶頭數(shù)×100

3齡蠶成蛾率（%）＝化蛾數(shù)／3齡起蠶頭數(shù)×100

正常產(chǎn)卵蛾率（%）＝正常產(chǎn)卵蛾數(shù)／投蛾數(shù)×100

良卵率（%）＝單蛾良卵數(shù)／單蛾產(chǎn)卵數(shù)×100

2 結(jié)果與分析

2.1 赤銹病桑葉養(yǎng)蠶對蠶體健康的影響

赤銹病重度為害葉飼養(yǎng)區(qū)與正常葉飼養(yǎng)區(qū)各齡健蠶率、結(jié)繭率、3齡蟲蛹率都為100%，死籠率均為0；3齡蠶成蛾率也高達(dá)97.33%，比對照區(qū)3齡蠶成蛾率提高4.67個百分點(diǎn)（表1），但其差異沒有達(dá)到顯著水平。

赤銹病中度為害葉飼養(yǎng)區(qū)與正常葉飼養(yǎng)區(qū)各齡健蠶率、結(jié)繭率、3齡蟲蛹率都為100%，死籠率均為0；赤銹病中度為害葉飼養(yǎng)區(qū)的3齡蟲蛹率、3齡成蛾率分別高達(dá)98.70%、94.00%，且稍高于對照區(qū)，但其差異沒有達(dá)到顯著水平。

表1 赤銹病重度為害葉養(yǎng)蠶的生命力

表2 赤銹病中度為害葉養(yǎng)蠶的生命力

2.2 赤銹病桑葉養(yǎng)蠶對發(fā)育經(jīng)過的影響

赤銹病重度為害桑葉養(yǎng)蠶，3齡眠、4齡眠均很整齊，與對照區(qū)沒有差異；熟蠶比對照區(qū)晚1 d（即23 h），但很整齊，參試蠶同在一天全部熟完（見表3）。

表3 赤銹病重度為害葉養(yǎng)蠶的發(fā)育經(jīng)過

2.3 赤銹病桑葉養(yǎng)蠶對蠶繭產(chǎn)量和繭質(zhì)的影響

赤銹病桑葉養(yǎng)蠶與正常葉養(yǎng)蠶相比，蠶食桑量有所減少，蠶體瘦小、體重降低、全繭量、繭層量、蛹體重顯著下降。其中，重度為害葉養(yǎng)蠶，最大蠶體重下降16.59%，全繭量、繭層量、蛹體重分別下降13.74%、16.67%、13.57%（表4）；中度為害葉養(yǎng)蠶，最大蠶體重下降9.84%，全繭量、繭層量、蛹體重分別下降6.63%、5.88%、5.69%（表5）。

赤銹病重度為害葉飼養(yǎng)區(qū)的繭層率比對照區(qū)下降0.60個百分點(diǎn)，但不顯著；赤銹病重度為害葉飼養(yǎng)區(qū)與對照區(qū)相比幾乎沒有下降。

表4 赤銹病重度為害葉養(yǎng)蠶成績

表5 赤銹病中度為害葉養(yǎng)蠶成績

2.4 赤銹病桑葉養(yǎng)蠶的制種成績

用赤銹病桑葉養(yǎng)蠶的制種成績見表6、表7。從3齡期開始飼喂赤銹病桑葉，其蠶蛹羽化后交配制種，絕大部分蠶蛾正常產(chǎn)卵，不產(chǎn)卵蛾、少產(chǎn)卵蛾極少，重度為害葉飼養(yǎng)區(qū)的正常產(chǎn)卵蛾率達(dá)93.30%、中度為害葉飼養(yǎng)區(qū)正常產(chǎn)卵蛾率高達(dá)97.78%，分別比正常葉區(qū)（對照區(qū)）高2.44個百分點(diǎn)、2.22個百分點(diǎn)，但未達(dá)顯著水平。

重度為害葉區(qū)與正常葉區(qū)相比，集團(tuán)總產(chǎn)卵數(shù)（15蛾）、集團(tuán)總良卵數(shù)（15蛾）分別下降10.33%、 9.28%，但未達(dá)顯著差異水平；集團(tuán)（15蛾）良卵率高達(dá)99.66%，比正常葉區(qū)提高1.28個百分點(diǎn)；單蛾產(chǎn)卵數(shù)、單蛾良卵數(shù)分別減少9.56百分點(diǎn)、9.30百分點(diǎn)，且達(dá)到差異顯著水平。單蛾良卵率高達(dá)99.44%，與正常葉區(qū)沒有差異（表6）。

中度為害葉區(qū)與正常葉區(qū)相比，集團(tuán)產(chǎn)卵數(shù)（15蛾）、集團(tuán)總良卵數(shù)（15蛾）分別下降3.13%、2.67%，單蛾產(chǎn)卵數(shù)、單蛾良卵數(shù)分別減少4.41%和4.57%，但未達(dá)顯著水平；良卵率兩者沒有差異，高達(dá)99.72%（表7）。

表6 赤銹病重度為害桑葉養(yǎng)蠶的制種成績

表7 赤銹病中度為害桑葉養(yǎng)蠶的制種成績

3 討論

3.1 赤銹病為害葉養(yǎng)蠶對蠶沒有一般毒性、發(fā)育毒性、神經(jīng)毒性、器官毒性和生殖毒性

利用生物飼喂實(shí)驗檢測評價食物、藥品的安全性，具有結(jié)果可靠、綜合全面等優(yōu)點(diǎn)。例如應(yīng)用斑馬魚模型進(jìn)行一般毒性、發(fā)育毒性、神經(jīng)毒性、器官毒性和生殖毒性等測試來評藥物的安全性[16]。本試驗也從這5個方面觀察分析赤銹病桑葉養(yǎng)蠶的安全性：一般毒性（中毒癥狀、死亡率、生命力情況）、神經(jīng)毒性（蠶兒食桑、活動、吐絲結(jié)繭情況）、器官毒性（對體壁、中腸的毒性）、發(fā)育毒性（生長發(fā)育情況、眠蠶整齊度、熟蠶整齊度）和生殖毒性（正常產(chǎn)卵蛾率、交配率、良卵率）。本試驗3齡起到5齡熟蠶的3個齡期連續(xù)喂食赤銹病重度或中毒為害桑葉，均沒有出現(xiàn)吐液、拒食、體縮、擺頭、身體扭曲等家蠶急性中毒癥狀[17]，各齡健蠶率為100 %、結(jié)繭率100%、死籠率極低（0、1.33%），3齡蠶蟲蛹率、3齡蠶成蛾率極高，分別為98.70%～100%，94.00%～97.33%，且高于對照區(qū)（正常葉），表明赤銹病為害桑葉對蠶無一般毒性；赤銹病桑葉飼養(yǎng)區(qū)蠶兒食?；顒印⑷~絲結(jié)繭活動、蛹期活動正常，沒有呆伏不動、狂躁、亂爬、吐亂絲、旋蛹等神經(jīng)異常癥狀，表明赤銹病為害桑葉對蠶無神經(jīng)毒性；赤銹病桑葉飼養(yǎng)區(qū)蠶體壁沒有異常病斑、排便正常、吐絲正常、眠起蛻皮正常、化蛹正常，表明赤銹病為害桑葉對蠶無器官毒性；赤銹病桑葉飼養(yǎng)區(qū)蠶兒能正常生長發(fā)育成蛾，交配產(chǎn)卵，完成整個世代，且眠蠶的整齊度、熟蠶的整齊度很高，與喂食正常桑葉沒有差別，雖然熟蠶時間比正常桑葉晚了一天，可能是營養(yǎng)的問題，但均在同一天全部熟完，表明赤銹病為害桑葉對蠶無發(fā)育毒性；赤銹病桑葉飼養(yǎng)區(qū)蠶兒能正常生長發(fā)育成蛾，雌蛾與雄蛾能正常交配、產(chǎn)卵，出現(xiàn)不產(chǎn)卵或產(chǎn)卵極少蛾低于正常桑葉（對照區(qū)），正常產(chǎn)卵蛾率高達(dá)93.30%～97.78%，高于對照區(qū)，良卵率高達(dá)99.70%，表明赤銹病為害桑葉對蠶無生殖毒性。

3.2 赤銹病為害葉養(yǎng)蠶影響蠶繭產(chǎn)量和卵量

赤銹病為害葉養(yǎng)蠶與正常桑葉養(yǎng)蠶相比，蠶體結(jié)實(shí)、較瘦小，蠶體重、蛹體重及全繭量、繭層量顯著下降；蠶蛾產(chǎn)卵量有所下降，赤銹病重度為害桑葉區(qū)產(chǎn)卵量下降達(dá)到顯著水平，中重為害葉飼養(yǎng)區(qū)與正常葉飼養(yǎng)區(qū)的差異不顯著。桑葉赤銹病越重，養(yǎng)蠶產(chǎn)量與卵量下降就越大。體重與產(chǎn)量下降原因是蠶不大喜歡吃這種赤銹病葉，導(dǎo)致食桑量有所減少，營養(yǎng)攝取不夠。植物葉片受銹病為害后，葉片中水分和營養(yǎng)物質(zhì)含量因被病菌吸收利用而減少，如冬小麥感染銹病后葉片全氮含量減少，且病情指數(shù)與全氮含量呈負(fù)相關(guān)[18]；紅豆草、白花草木樨、箭筈豌豆感染銹病后，葉片粗蛋白含量顯著減少，葉片粗蛋白含量與病害嚴(yán)重度顯著負(fù)相關(guān)[14]；紫花苜蓿感染赤銹病后，葉片的含水量、粗蛋白含量、粗灰分含量減少，其含量與病害嚴(yán)重度呈負(fù)相關(guān)；纖維素含量呈正相關(guān)[19]。本試驗用赤銹病桑葉養(yǎng)蠶的結(jié)果也表明，赤銹病為害桑葉的葉質(zhì)已有明顯下降的趨勢。

3.3 赤銹病為害葉應(yīng)及早利用

本試驗表明，赤銹病桑葉雖然某些營養(yǎng)成分減少了，產(chǎn)量下降了，但對蠶沒有毒性，即使是用赤銹病嚴(yán)重為害的桑葉養(yǎng)小蠶、大蠶，對蠶體健康和生長發(fā)育都沒有不良影響；輕度為害葉養(yǎng)蠶對蠶體健康和產(chǎn)量的安全性應(yīng)該更高。因此，赤銹病桑葉用于絲繭育養(yǎng)蠶和種繭育養(yǎng)蠶是安全的。為減輕病情、減少病害損失、減少赤銹病病原的傳播，發(fā)病桑園應(yīng)及早用葉，避免為害嚴(yán)重時才用葉；赤銹病桑葉與正常桑葉隔餐或隔天交替喂蠶用葉，可彌補(bǔ)連續(xù)食用赤銹病桑葉帶來的營養(yǎng)不足，達(dá)到穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)。

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A；

1006-1657（2016）02-0006-5

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廣西十二五科技規(guī)劃重大專項項目及課題（No.桂科重14121002，No.桂科重14121002-2-2，No.桂科重14121002-4-4），現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項（No.CARS-22），八桂學(xué)者建設(shè)工程專項（No.2011104-16）。

信息］朱光書（1981—），男，本科，農(nóng)藝師，從事桑樹遺傳育種研究。E-mail：445979725@qq.com。

信息］朱方容（1962—），男，本科，研究員。E-mail：gxzfr@126.com