王希東，郝少君，王　靈，張正臣

解放軍第三七一中心醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453000

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*通信作者

抗眩顆粒對(duì)內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型的影響

王希東，郝少君，王靈*，張正臣

解放軍第三七一中心醫(yī)院，河南 新鄉(xiāng) 453000

[摘要]目的觀察抗眩顆粒對(duì)內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型的影響。方法取造高血壓模型成功大鼠72只，按血壓高低隨機(jī)分為6組，每組12只，分別灌服大、中、小劑量抗眩顆粒混懸液、養(yǎng)血清腦顆?；鞈乙?、卡托普利混懸液和同體積的蒸餾水；空白對(duì)照組灌同體積的生理鹽水，連續(xù)給藥7 d。于第7天造模，給藥后2 h測(cè)各組大鼠血壓值。結(jié)果與模型組比較，大、中、小劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組大鼠血壓(SBP、DBP)均顯著降低。與空白對(duì)照組比較，模型組血漿ANG-2、ET水平均顯著性升高(P<0.01)。與模型組比較，大、中、小劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組大鼠血漿ANG-2水平均顯著降低(P<0.01或P<0.05)；大、中劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組大鼠血漿ET水平均明顯降低(P<0.05)。結(jié)論抗眩顆粒對(duì)內(nèi)分泌型高血壓大鼠有良好的改善作用。

[關(guān)鍵詞]抗眩顆粒；大鼠；內(nèi)分泌型高血壓模型；養(yǎng)血清腦顆粒；卡托普利片

0引言

眩暈在臨床上非常多見(jiàn)，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，其發(fā)生與腦部微循環(huán)功能障礙、血液流變學(xué)異常、細(xì)胞內(nèi)自由基損傷等諸多因素有密切關(guān)系。目前治療該疾病的藥物較多，西藥雖見(jiàn)效快，但持續(xù)時(shí)間短且不良反應(yīng)較大。市售中藥制劑效果也不太理想，根據(jù)多年的臨床經(jīng)驗(yàn)我們研制了抗眩顆粒，該方劑由磁石、夏枯草、葛根、牛膝、鉤藤、姜半夏、川芎、丹參組成，具有平肝潛陽(yáng)、活血通竅、息風(fēng)定眩的作用，臨床用于因高血壓、腦動(dòng)脈硬化、椎基底動(dòng)脈供血不足、美尼爾氏病、植物神經(jīng)功能紊亂引起的眩暈、頭重足輕、行走不穩(wěn)等療效較好。為驗(yàn)證其作用并探討其作用特點(diǎn)，本研究觀察了該顆粒對(duì)內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型的影響。

1實(shí)驗(yàn)材料

1.1藥品抗眩顆粒，中國(guó)人民解放軍第三七一中心醫(yī)院提供。制法：按處方稱取原材料，洗凈，加6～8倍水煎煮2次，第1次2 h，第2次2 h，合并煎液，過(guò)濾，濾液濃縮至室溫，加乙醇使藥液含醇量達(dá)60%，靜置24 h濾過(guò)，含醇藥液回收乙醇，藥液濃縮至相對(duì)密度為1.15～1.30，約0.5 kg(80 ℃)。加適量糊精及適量糖粉(約3～4份)混勻，制粒整粒，分裝，每袋10 g(每袋相當(dāng)于原生藥24 g)，即得。批號(hào)：20110620，口服，每次10 g，每日3次。養(yǎng)血清腦顆粒，天士力制藥集團(tuán)股份有限公司，批號(hào)：120802；卡托普利片，常州制藥廠有限公司，批號(hào)：12032812；氯化鈉注射液，河南雙核華利藥業(yè)有限公司，批號(hào)：A12050807；丙酸睪酮注射液，上海通用藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：120309，規(guī)格：1 mL∶25 mg。大豆油，河南愛(ài)廚植物有限公司；試劑盒：ANG-2，R&D,批號(hào)：DZE30668.ET，R&D。

1.2動(dòng)物大鼠，SD，清潔級(jí)，由山東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：0013913。

1.3儀器BP-98A Series大鼠無(wú)創(chuàng)血壓儀，北京軟隆生物技術(shù)有限公司；可調(diào)式移液器，上海雷勃分析儀器有限公司；TGL-16G臺(tái)式離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1動(dòng)物分組及給藥取清潔級(jí)雄性大鼠120只，每只大鼠造模前連續(xù)測(cè)大鼠血壓3 d，取血壓相近的100只大鼠，3次血壓平均值作為大鼠初始血壓。

隨機(jī)取12只大鼠作為空白對(duì)照組，其余大鼠造內(nèi)分泌型高血壓模型，每日皮下注射丙酸睪酮注射液5 mg/kg造模，每天注射1次，連續(xù)造模14 d?？瞻讓?duì)照組每日皮下注射相同劑量大豆油。分別于造模第7、14天測(cè)大鼠血壓值。大鼠收縮壓升高15 mmHg以上者為造模成功。第14天，取造高血壓模型成功大鼠72只，按血壓高低隨機(jī)分為6組，每組12只，分別灌服大、中、小劑量抗眩顆?；鞈乙?10、5、2.5 g/kg，用蒸餾水配成0.5、0.25、0.125 g/mL，2 mL/100 g)、養(yǎng)血清腦顆?；鞈乙?2 g/kg，用蒸餾水配成0.1 g/mL，2 mL/100 g)、卡托普利片混懸液(12.5 mg/kg，用蒸餾水配成0.625 mg/mL，2 mL/100 g)和同體積的蒸餾水；空白對(duì)照組灌同體積的生理鹽水，每天給藥1次，連續(xù)給藥7 d；給藥期間仍給造模用藥。于第7天造模，給藥后2 h(禁食不禁水12 h)測(cè)各組大鼠血壓值；然后眼眶取血，EDTA抗凝管抗凝，離心取血漿測(cè)血管緊張素Ⅱ、內(nèi)皮素ET含量。

2.2大鼠血漿血管緊張素Ⅱ、內(nèi)皮素水平測(cè)定分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。

在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40 μL，然后再加待測(cè)樣品10 μL(樣品最終稀釋度為5倍)。將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。以空白孔調(diào)零，450 nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15 min以內(nèi)進(jìn)行。以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

3結(jié)果

各組初始血壓(SBP、DBP)之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，說(shuō)明分組均勻；造模第7、14天，與空白對(duì)照組比較，模型組血壓顯著升高(P<0.01)，但在第7天，大鼠收縮壓多未升高15 mmHg以上，在第14天，大鼠收縮壓均升高15 mmHg以上，說(shuō)明造模型成功，符合模型要求。給藥后，與模型組比較，大、中、小劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組大鼠血壓(SBP、DBP)均顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1　抗眩顆粒對(duì)內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型血壓的影響(mmHg，n=12)

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

與空白對(duì)照組比較，模型組血漿ANG-2、ET水平均顯著性升高(P<0.01)，說(shuō)明造模型成功。與模型組比較，大、中、小劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組大鼠血漿ANG-2水平均顯著降低(P<0.01或P<0.05)；大、中劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組大鼠血漿ET水平均明顯降低(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2　抗眩顆粒對(duì)內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型血漿ANG-2、ET水平的影響

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01

4討論

我院研制的抗眩顆粒，方中用磁石、鉤藤重在鎮(zhèn)肝潛陽(yáng)，牛藤補(bǔ)益肝腎，引藥下行；川芎、丹參益氣活血，葛根清渾發(fā)散；川芎益走散，上行頭目巔頂，理氣通脈；夏枯草祛肝風(fēng)，行經(jīng)絡(luò)；半夏躁濕化痰，和胃上嘔，痰濕不留，眩暈?zāi)酥筟1-5]。組方以鎮(zhèn)肝潛陽(yáng)為主，輔以活血通絡(luò)、化痰除濕。在先期應(yīng)用湯劑，結(jié)合臨床應(yīng)用效果，不斷調(diào)整處方的藥物組成及用量的基礎(chǔ)上，最終定下處方。經(jīng)過(guò)篩選，加工提取制成方便服用、易于吸收的顆粒制劑。為確保其制劑質(zhì)量，前期進(jìn)行了工藝標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[6]及藥理[7-8]的研究，包括抗眩顆粒對(duì)小鼠微循環(huán)的影響、抗眩顆粒的鎮(zhèn)靜作用、抗眩顆粒對(duì)大鼠血瘀模型的影響。為探討其療效原理，本文對(duì)大鼠皮下注射丙酸睪丸素，成功建立了大鼠內(nèi)分泌型高血壓模型，在造模第17、14天，大鼠血壓均顯著升高，在第14天大鼠收縮壓均升高15 mmHg以上，符合模型要求；模型組血漿ANG-2、ET水平顯著性升高。與模型組比較，大、中、小劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型血壓(SBP、DBP)均顯著降低；與模型組比較，大、中劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型血漿ANG-2水平均顯著降低，小劑量抗眩顆粒組可使內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型血漿ANG-2水明顯著降低；大、中劑量抗眩顆粒組、養(yǎng)血清腦顆粒組及卡托普利組內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型血漿ET水平均明顯降低。提示抗眩顆粒對(duì)內(nèi)分泌型高血壓大鼠模型有好的改善作用。本實(shí)驗(yàn)為抗眩顆粒的臨床應(yīng)用提供了依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

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Effect of anti-glare granules on the rat model of endocrine hypertension

WANG Xi-dong,HAO Shao-jun,WANG Lin*,ZHANG Zheng-chen

(371 Central Hospital of PLA,Xinxiang 453000,China)

[Abstract]ObjectiveTo observe the effect of anti-glare granules on the endocrine hypertensive rat model.MethodsSeventy-two hypertensive model rats were selected and randomly divided into 6 groups according to the level of blood pressure,12 rats in each group,and they were given large,medium and small doses of anti-glare granules suspension,yangxueqingnao granule suspension,captopril suspension and the same volume of distilled water;blank control group were given the same volume of physiological saline,administered for 7 d continuously.The blood pressure of rats after 7 d and at 2 h after drug delivery was measured.ResultsCompared with model group,the blood pressure (SBP,DBP) of large,medium and small dosage of anti-glare granule groups,yangxueqingnao granule group,and captopril group were significantly decreased;compared with blank control group,the serum ANG-2 and ET levels of model group were significantly decreased (P<0.01);compared with model group,the ANG-2 levels of large,medium and small dosage of anti-glare granule groups,yangxueqingnao granule group,and captopril group were significantly decreased (P<0.01 or P<0.05),the ET levels of large and medium dosage of anti-glare granule groups,yangxueqingnao granule group,and captopril group were significantly decreased (P<0.05).ConclusionAnti-glare granules have a good improvement effect on endocrine-type hypertensive rat model.

Key words：Anti-glare granules;Rat;Endocrine-type hypertension model;Yangxueqingnao granule;Captopril tablets

收稿日期：2015-08-05

基金項(xiàng)目：河南新鄉(xiāng)重點(diǎn)科技攻關(guān)(ZG14013)

DOI:10.14053/j.cnki.ppcr.201604003