謝　勛，楊鴻波，譚　紅，何錦林，李貴洪

(1貴州大學(xué)，貴州　貴陽　550001；2貴州省分析測試研究院，貴州　貴陽　550001)

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SPME
—GC / MS聯(lián)用技術(shù)對梵凈山翠峰茶香氣成分分析

謝勛1，2，楊鴻波2，譚紅2，何錦林2，李貴洪1，2

(1貴州大學(xué)，貴州貴陽550001；2貴州省分析測試研究院，貴州貴陽550001)

摘要：茶香氣是茶品質(zhì)的重要組成部分，研究茶葉香氣對提升茶葉品質(zhì)具有重大意義。本實(shí)驗(yàn)采用固相微萃取法提取梵凈山翠峰茶香氣，經(jīng)GC / MS分析，共鑒定出25中揮發(fā)性成分，其中梵凈山翠峰呈香的主要成分有芳樟醇(2.43 %)，壬醛(3.1 %)，葵酸甲酯(3.02 %)，順式—茉莉酮(2.82 %)，反式—β—法尼烯(4.63 %)，月桂酸甲酯(10.43 %)。

關(guān)鍵詞：固相微萃取；氣相色譜—質(zhì)譜；香氣；梵凈山翠峰茶

0引言

茶香氣是茶品質(zhì)的重要組成部分。茶葉的產(chǎn)地、等級、品種等不同，所得到的香氣在成分物質(zhì)種類[1]，以及成分物質(zhì)的含量都不同。每種茶葉之所以有獨(dú)特的香氣，就是源于其中的香氣物質(zhì)種類，以及每種香氣物質(zhì)所占配比的差異的綜合體現(xiàn)。茶葉香氣物質(zhì)在茶葉中含量很低，只占茶葉絕對含量的0.01 %～0.05 %[2]，卻在茶葉感官評審標(biāo)準(zhǔn)中，決定著茶葉的品質(zhì)。因占評審品質(zhì)分?jǐn)?shù)的25 %～35 %，所以現(xiàn)代分析技術(shù)用于研究茶葉香氣，提升茶葉品質(zhì)具有重大意義。

梵凈山地處貴州省印江，是“人與生物圈保留地網(wǎng)”之一，良好的生態(tài)，優(yōu)質(zhì)的土壤，適宜的氣候使得茶樹生長條件得天獨(dú)厚。梵凈山翠峰茶葉色翠綠、條索扁平、形態(tài)似矛、芽形秀麗、葉底色嫩綠，香氣青嫩，口感鮮醇，質(zhì)量優(yōu)良。為了保護(hù)梵凈山翠峰茶的品牌，用現(xiàn)代分析技術(shù)進(jìn)行香氣成分分析十分必要。

源于固相萃取的固相微萃SPME[3](Solid Phase Microextraction)，于二十幾年前被Suplco首次應(yīng)用，因?yàn)槠渥鳛榍疤幚砑夹g(shù)，集采樣、萃取、濃縮和進(jìn)樣一體，具有對環(huán)境無污染、操作簡單、無需溶劑、樣品無損、靈敏等優(yōu)點(diǎn)[4]，廣泛應(yīng)用于環(huán)境、藥物、食品[5]等分析。且富集的樣品可以直接與氣相色譜(GC)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC—MS)[6]、高效液相色譜(HPLC)、高效液相色譜—質(zhì)譜(HPLC—MS)結(jié)合分析，因此，此前因香氣成分復(fù)雜不易檢測成為現(xiàn)實(shí)[7]。

本實(shí)驗(yàn)選用的實(shí)驗(yàn)樣品為貴州省印江縣梵凈山翠峰茶，揮發(fā)性香氣物質(zhì)用二甲基硅氧烷吸附，用氣質(zhì)聯(lián)用對香氣進(jìn)行分離且定性與定量。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

供試樣為梵凈山翠峰茶一級品(產(chǎn)自貴州省印江縣某廠)，冷藏保存于冰箱中待用。

1.2實(shí)驗(yàn)儀器

氣質(zhì)聯(lián)用儀器為美國安捷倫公司生產(chǎn)(氣相型號6890B，質(zhì)譜型號5977)；香氣吸附裝置為美國Supelco公司生產(chǎn)，手柄(型號SAAB—57330U)和萃取頭材料為聚二甲基硅氧烷(100 μm)(型號SAAB—57300U)；250 ml錐形瓶自制的頂空瓶；水浴鍋；電子天平。

1.3實(shí)驗(yàn)方法

用電子天平準(zhǔn)確稱取5.000 0 g(精確到0.000 1 g)茶葉，然后放入250 ml錐形瓶自制的頂空瓶中，加入已備好的100 ℃沸水15 ml，蓋好瓶塞，放入水浴鍋中，水浴鍋恒溫60 ℃，先平衡5 min，使香氣達(dá)到氣液平衡，然后將SPME手柄穿過自制頂空瓶上端玻璃塞，推出纖維頭，吸附1 h取出[8]。

1.4GC—MS分析條件

GC條件：程序升溫條件，首先60 ℃平衡1 min，然后從60 ℃以3 ℃ / min 升溫至180 ℃(不保持)，最后從180 ℃以10 ℃ / min 升溫至250 ℃平衡10 min ，后運(yùn)行時(shí)間為3 min；進(jìn)樣口溫度250 ℃；氣質(zhì)接口輔助溫度為280 ℃；色譜柱為HP—5MS毛細(xì)管柱(30 m×0.25 μm ×0.25 mm)；色譜柱載氣流量1.0 ml / min；載氣為高純He氣(純度99.999 %)；不分流進(jìn)樣[9]。 MS條件：離子源溫度230 ℃，四級桿150 ℃，電離方式EI，EMV相對電壓847V，掃描質(zhì)量范圍40～350Amu；進(jìn)樣方式為手動(dòng)進(jìn)樣，首先直接將SPME 手柄插入氣相色譜儀進(jìn)樣口，然后推出里面的吸附柱，于250 ℃進(jìn)樣口中脫附3.5 min[10]。

1.5定性與定量

全掃得到的質(zhì)譜圖利用Mass Hunter 自帶的NIST14.L 譜庫進(jìn)行人工比對和圖庫檢索。物質(zhì)定性主要是獲得的物質(zhì)保留時(shí)間、斷鍵后產(chǎn)生的特征離子和碎片離子、物質(zhì)同位素等與標(biāo)準(zhǔn)圖庫比對和人工分析；使用系統(tǒng)的化學(xué)積分器對有關(guān)基峰、半峰高等進(jìn)行積分，然后得出各個(gè)揮發(fā)性物質(zhì)占峰面積與所有揮發(fā)性物質(zhì)所占峰面積的比值表示該揮發(fā)性物質(zhì)的百分比相對含量[11]。

1.6結(jié)果與分析

由圖1和表1可知，從梵凈山翠峰茶中鑒別出揮發(fā)性物質(zhì)共有27個(gè)，其中所鑒定出來的化合物25個(gè)，主要揮發(fā)性成分有1，3，5—環(huán)庚三烯(6.45 %)，芳樟醇(2.43 %)，壬醛(3.1 %)，葵酸甲酯(3.02 %)，2—Chloro—4—(4—methoxyphenyl)—6—(4—nitrophenyl)pyrimidine(10.85 %)，順式-茉莉酮(2.82 %)，反式—β—法尼烯(4.63 %)，3—Chloropropane—1，2 —diol，bis(tert—butyldimethylsilyl)ether(3.74 %)，月桂酸甲酯(10.43 %)，咖啡因(40.73 %)。其中咖啡因、2—Chloro—4—(4— methoxyphenyl)—6—(4—nitrophenyl)pyrimidine(10.85 %)、1，3，5—環(huán)庚三烯、3— Chloropropane—1，2—diol，bis(tert— butyldimethylsilyl)ether雖占揮發(fā)物質(zhì)百分比含量很多，但是是無氣味的，對氣味沒有貢獻(xiàn)。芳樟醇是一種香料，目前是世界用的最多的，擁有較強(qiáng)的木青氣味，具有玫瑰木氣息；壬醛和芳樟醇類似具有玫瑰香；葵酸甲酯具有玫瑰，柑橘香；順式-茉莉酮具有茉莉花香；反式-β-法尼烯清香、花香；月桂酸甲酯是具有類似酒香及花香類的香味物質(zhì)。在梵凈山綠茶中還含有其他的脂肪醇類，脂肪醛類，脂肪酮類等，雖說含量每種物質(zhì)含量很少，但對香味也有一定貢獻(xiàn)[12]。

2結(jié)論

梵凈山綠茶一級品中主要的香味賦香物質(zhì)為芳樟醇(2.43 %)，壬醛(3.1 %)，葵酸甲酯(3.02 %)，順式-茉莉酮(2.82 %)，反式-β-法尼烯(4.63 %)，月桂酸甲酯(10.43 %)，加上少量的脂肪醇類，脂肪醛類，脂肪酮類等，構(gòu)成了梵凈山翠峰茶的特征香氣。

圖1　總離子流

序號保留時(shí)間/min主成分CAS號相對百分含量/%11.940乙醛(Acetaldehyde)0000750700.5822.204乙酸(Aceticacid)0000641970.1333.5691,3,5環(huán)庚三烯(1,3,5,-cycloheptatriene)0001088836.45414.168芳樟醇(Linalool)0000787062.43514.323壬醛(Nonanal)0001241963.10618.264水楊酸甲酯(Methylsalicy-late)0001193680.68719.498Butanoicacid,2ethyl,1,2,3propanetriylester0565545420.94824.090癸酸甲酯(Decanoicacid,methylester)000110-4293.02924.4592Chloro4(4methoxyphenyl)6(4nitrophenyl)pyrimi-dine06367376710.851026.507己酸葉醇脂(Hexanoicacid,3hexenylester,(Z)-0315011180.391127.166順式茉莉酮(cisJasmone)0004881082.821228.3072Amino2oxoaceticacid,N-[3,4dimethylphenyl],eth-yleste0244511700.301329.431香葉基丙酮(5,9Undecadien2one,6,10dimethyl,(E)-0037967010.411429.621反式β法尼烯((E).beta.-Famesene)0187948484.631530.738β紫羅蘭酮(trans.beta.-Ionone)0000797761.011631.617α法尼烯(1,3,6,10-Dodecatetraene,3,7,11-trimethyl,(Z,E)-0265601450.751731.5803Chloropropane1,2diol,bis(tertbutyldimethylsilyl)e-ther0004173113.741832.342月桂酸甲酯(Dodecanoicacid,methylester)00011182010.431935.192對叔丁基苯酚Phenol,p-tertbutyl0000985440.742038.0253,4Dihydroxyphenylglycol,4TMSderivative0561146260.86

續(xù)表

序號保留時(shí)間/min主成分CAS號相對百分含量/%2139.817十四烷酸甲酯(Methyltet-radecanoate)0001241070.692243.976咖啡因(Caffeine)00005808240.732346.199棕櫚酸甲酯(Hexadecanoicacid,methylester)0001123900.682449.1617,10,13十六烷三烯酸甲酯(7,10,13Hexadecatrienoicacid,methylester)0565543040.382549.7133氯3甲基己烷(Hexane,1-chloro5methyl-0332405610.33

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投稿日期：2016-01-04；修回日期：2016-01-14

Analysis on aromatic components of mount Fanjing ‘CuiFeng’ tea using SPME—GC / MS

XIE Xun1，2，YANG Hongbo2，TAN Hong2， HE Jinlin2，LI Guihong1，2

(1GuizhouUniversity，Guiyang550001China；2GuizhouAcademyofanalysistest，Guiyang550001，China)

Abstract：Aroma is an important component in tea quality，and there is a big significance to improve the tea quality in researching the tea aroma.Main aromatic components are separated and identified using SPME from FanJingShan ‘CuiFeng’ Tea，analyzed by GC / MS，contained 29 components，and the main component of FanJingShan ‘CuiFeng’ Tea are Linalool(2.43 %)，Nonana(3.1 %)，Decanoic acid，methyl ester(3.02 %)，cis—Jasmone(2.82 %)，(E)—.beta.—Famesene(4.63 %)and Dodecanoic acid methyl ester(10.43 %).

Keywords：SPME；GC / MS；aroma；mount Fanjing ‘CuiFeng’ tea

中圖分類號：TS 272

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1003—6563(2016)02—0070—04

*基金項(xiàng)目：國際合作項(xiàng)目：貴州茶葉品質(zhì)高質(zhì)化技術(shù)與信息化合作研究(2015DFA41280)。

作者簡介：謝勛(1991-)，男，四川廣安人，碩士。研究方向：食品分析。