武慧娟，陳本建（.甘肅省草原技術(shù)推廣總站，甘肅　蘭州　73000；2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院，甘肅　蘭州　730070）

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不同添加劑對苜蓿青貯品質(zhì)的影響

武慧娟1，陳本建*
（1.甘肅省草原技術(shù)推廣總站，甘肅蘭州730010；2.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)草業(yè)學(xué)院，甘肅蘭州730070）

摘要：為研究乳酸菌以及乳酸菌分別與甲酸、雙乙酸鈉的組合對苜蓿青貯效果的影響，進行了乳酸菌及乳酸菌組合不同添加劑量處理的苜蓿青貯發(fā)酵試驗。結(jié)果表明：添加乳酸菌對苜蓿青貯效果有很大的改善作用，且乳酸菌組合作用均優(yōu)于其單獨作用。通過灰色關(guān)聯(lián)度分析可知：乳酸菌與甲酸組合的高添加水平效果最佳，中等添加水平次之，對照組的青貯效果最差。

關(guān)鍵詞:乳酸菌；甲酸；雙乙酸鈉；苜蓿；青貯效果

苜蓿（Medicago sativa）是一種優(yōu)良的蛋白質(zhì)飼草，也是國內(nèi)外栽培面積較大的多年生牧草之一，因其富含蛋白質(zhì)、脂肪、多種礦質(zhì)元素、維生素以及牲畜生長發(fā)育所必需的氨基酸［1］，被受家畜青睞。然而，苜蓿的如何保存一直是個難題。原因有：①若將其晾曬成干草，則會造成葉片的大量脫落，營養(yǎng)損失嚴(yán)重；②在許多苜蓿種植帶，第二、三茬苜蓿收獲季節(jié)，正值雨熱同季，刈割后的苜蓿不能及時晾曬并調(diào)制成干草，造成苜蓿發(fā)霉變質(zhì)，這樣不但造成營養(yǎng)的損失，而且還會有許多對家畜有害的有毒物質(zhì)產(chǎn)生；③若將其用常規(guī)的方法調(diào)制成青貯飼草料，則由于苜蓿水分、蛋白質(zhì)含量以及緩沖能值高，可溶性糖含量低，在實際生產(chǎn)中，往往不易調(diào)制成功。因此，近年來國內(nèi)外許多專家學(xué)者研究通過青貯添加劑來改善苜蓿青貯料的青貯品質(zhì)。本試驗通過添加不同添加水平的乳酸菌以及乳酸菌與甲酸、雙乙酸鈉的組合，來探討它們對苜蓿青貯效果的影響，并得出最佳添加劑量的添加劑組合，為生產(chǎn)實踐提供一定的理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1試驗材料

青貯原料：取自甘肅華瑞農(nóng)業(yè)股份有限公司苜蓿種植基地，為種植第一茬的初花期紫花苜蓿，含水量為65%左右。

添加劑：甲酸、雙乙酸鈉，均為（分析純）級，乳酸菌為青貯專用添加劑，呈粉末狀。

青貯容器:40×60cm食品級聚乙烯袋。試驗儀器：鍘刀、抽真空機（DT300）、微波爐（Midea/ EG720KG4- NA）、pHS- 3C精密酸度計、UV1902PC紫外可見分光光度計等。

1.2試驗設(shè)計

本試驗采用完全隨機試驗，三種青貯添加劑：乳酸菌（A）、雙乙酸鈉（B）、甲酸（C），每種添加劑有3個添加水平，其中乳酸菌（A1、A2、A3）添加量分別為10g· kg-1、20g·kg-1、30g·kg-1，雙乙酸鈉（B1、B2、B3）添加量分別為5g·kg-1、10g·kg-1、15g·kg-1，甲酸（C1、C2、C3）添加量分別為5mL·kg-1、10mL·kg-1、15mL·kg-1，乳酸菌與雙乙酸鈉組合為：A1B1、A2B2、A3B3，乳酸菌與甲酸的組合為：A1C1、A2C2、A3C3，另設(shè)一個對照D（CK），共10個處理，每個處理3次重復(fù)。

1.3試驗方法

將處于初花期的第一茬苜蓿刈割后，鍘成3～5 cm的草段并晾曬，使其水分降至65%左右，稱取苜蓿原料500 g，與添加劑混勻后裝入聚乙烯袋，用真空包裝機抽真空并封口。常溫下發(fā)酵45 d后開封取樣，制樣待測相關(guān)指標(biāo)。

1.4測定指標(biāo)與方法

開袋后，將青貯飼料樣品混合均勻，取20 g樣品，剪碎放入塑料瓶中，加入180 mL蒸餾水，將其置于- 4℃的培養(yǎng)箱中靜置48 h后用4層紗布及定性濾紙過濾，對浸出液一部分用于青貯飼料pH測定；另一部分濾液保存在- 20℃的冰箱冷凍，用于測定氨態(tài)氮（NH3- N）和乳酸（LA）。將混勻后剩余的青貯樣品至于信封袋中與105℃烘箱中烘干24 h，直至質(zhì)量不變，烘干的樣品用粉碎機粉碎，裝入自封袋內(nèi)，用于粗纖維（CF）、可溶性糖（WSC）的測定［4］。

青貯料的pH值用酸度計測定［5］；氨態(tài)氮采用苯酚-次氯酸鈉比色法［6］；可溶性糖采用蒽酮-硫酸比色測定法進行測定［7］；乳酸采用對羥基聯(lián)苯比色法測定［8］；粗纖維采用酸堿分次水解法［9］。

1.5數(shù)據(jù)處理

采用SPSS17.0、EXCEL2007對所測數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。

2　結(jié)果與分析

2.1添加劑對青貯料pH的影響

圖1　添加劑對苜蓿青貯料pH的影響

注：圖中A代表乳酸菌，AB代表乳酸菌與雙乙酸鈉組合，AC代表乳酸菌與甲酸組合，不同數(shù)字代表不同添加水平，下同；

由圖1可知：與CK相比，添加劑對苜蓿青貯料pH的影響差異均顯著（P＜0.05）。A對青貯料pH的影響具體表現(xiàn)為：A1添加水平與A2、A3添加水平之間差異顯著（P＜0.05），而A2、A3之間差異不顯著（P＞0.05）；AB組合的各添加水平之間差異不顯著（P＞0.05）；AC組合的不同添加水平間差異均顯著（P＜0.05），A3C3添加水平下的青貯料pH（4.05）最低。

2.2添加劑對青貯料NH3- N的影響

圖2　添加劑對苜蓿青貯料NH3- N的影響

從圖2來看，添加劑均能降低苜蓿青貯料中NH3- N的含量，且與CK相比差異顯著（P＜0.05）。除A1與A3添加水平之間差異顯著外，其它各添加劑組合的不同添加水平間差異不顯著（P＞0.05），其中A3C3處理組NH3- N含量最低，為96.72 g·kg-1。

2.3添加劑對青貯料WSC的影響

圖3　添加劑對苜蓿青貯料WSC的影響Fig3 The effects of additives on the WSC of alfalfa silage

對照相比，乳酸菌及其乳酸菌組合對苜蓿青貯料中WSC含量的影響顯著（P＜0.05）（圖3）。對于A處理組，其作用效果具體表現(xiàn)為：均使WSC含量降低，隨著A添加量的增加，WSC含量逐漸降低，且不同添加水平間差異顯著（P＜0.05）；而對于A與B、C的組合，受二者疊加作用的影響，使WSC含量升高，且隨著添加量的增加，WSC逐漸升高，各添加水平間差異顯著（P＜0.05）。其中，A3C3處理組WSC含量為6.00%，表現(xiàn)為最高，A3B3處理組次之。

2.4添加劑對青貯料CF的影響

圖4　添加劑對苜蓿青貯料CF的影響

從圖4來看，乳酸菌及其組合均能使青貯料中CF的含量降低，與CK相比差異顯著（P＜0.05），但各添加劑的不同水平間差異不顯著（P＞0.05）。

2.5添加劑對青貯料LA的影響

圖5　添加劑對苜蓿青貯料LA的影響

青貯料中LA含量受添加劑的影響，除A1B1處理組外，其它各組均升高，且除A1C1、A2C2外，其它各組與CK相比差異顯著（P＜0.05）。就添加A處理組來看，隨著A添加量的增加，LA含量逐漸升高，且各水平間差異顯著（P＜0.05）；AB組合，受二者的疊加作用影響，A1B1表現(xiàn)為降低，A2B2、A3B3表現(xiàn)為升高，但后兩者之間差異不顯著（P＞0.05）；AC組合，受二者的疊加作用影響，全部表現(xiàn)為升高，但升高幅度明顯小于A單獨作用，且A1C1、A2C2添加水平與A3C3間差異顯著（P＜0.05）。

2.6不同處理的灰色關(guān)聯(lián)度分析

表1　不同添加劑對苜蓿青貯處理影響的灰色關(guān)聯(lián)度分析Table 1　Grey correlation degree analysis of the impact of different additives on alfalfa silage processing

由表1可知：各處理的關(guān)聯(lián)度高低排序為A3C3＞A2C2＞A2B2＞A3B3＞A1C1＞A1B1＞A3＞A1＞A2＞D；AC組合的高添加水平與中等添加水平對苜蓿青貯品質(zhì)的改善效果居于一、二，其次為AB組合的中、高添加水平，CK位于最后。

3　討論

青貯飼料調(diào)制時添加青貯添加劑能有效改善青貯飼料的品質(zhì)。添加乳酸菌可提高青貯發(fā)酵初期乳酸菌基數(shù)，促進乳酸發(fā)酵，抑制不良發(fā)酵，因而改善了青貯飼料的品質(zhì)［10］。許多研究［11-14］表明，當(dāng)原料表面附著的乳酸菌數(shù)量少時，添加乳酸菌制劑就可以保證青貯初期發(fā)酵所需的乳酸菌數(shù)量，使之盡快盡早進入乳酸發(fā)酵階段，使pH值迅速下降，抑制微生物對蛋白質(zhì)的水解作用，減少青貯料中NH3- N的生成，提高飼料的質(zhì)量和適口性，使干物質(zhì)損失降低［15］。

甲酸一直被認(rèn)為是青貯飼料有效的添加劑，在青貯過程中起到防腐劑的作用。甲酸的最大優(yōu)點是保存青貯原料本身含有的水溶性糖和由多糖轉(zhuǎn)化而來的水溶性糖，這對反芻動物很重要，因為飼喂青貯料時水溶性糖是瘤胃微生物合成菌體蛋白質(zhì)至關(guān)重要的能源［16］。在青貯飼料調(diào)制過程中，甲酸可以迅速降低青貯料的pH，抑制了腐敗菌的活動，很好的保存了飼料中WSC含量，同時也減少了NH3- N的形成，這與余國輝［17］、楊富裕［18］等的研究結(jié)果一致。

雙乙酸鈉不僅作為防霉劑具有較強的殺死真菌能力保證飼料不霉壞變質(zhì)，而且還可起到酸化劑的作用，有效地調(diào)節(jié)畜禽腸道的pH值，提高胃蛋白酶和消化酶的活性，提高蛋白質(zhì)的消化率，增加畜禽對飼料的適口性，抑制有害菌生長，有利于乳酸菌生長，從而降低耗料，提高飼料利用率［19］。

研究表明，當(dāng)2種或2種以上的添加劑同時配合使用時，會出現(xiàn)協(xié)同作用和拮抗作用。當(dāng)出現(xiàn)協(xié)同作用時，其功效會加強；當(dāng)出現(xiàn)拮抗作用時，則功效會減弱［10］。本試驗結(jié)果表明：乳酸菌與雙乙酸鈉和甲酸復(fù)合添加處理后苜蓿青貯飼料的發(fā)酵和營養(yǎng)品質(zhì)均顯著優(yōu)于對照組，且添加劑組合處理的青貯飼料的品質(zhì)優(yōu)于單一添加乳酸菌作用。

4　結(jié)論

在苜蓿青貯飼料調(diào)制過程中，添加單一的乳酸菌會顯著降低青貯料pH、NH3- N以及CF含量，WSC含量顯著高于對照（P＜0.05）；乳酸菌與雙乙酸鈉和甲酸的組合對苜蓿青貯效果的影響同乳酸菌，且效果均優(yōu)于單一的乳酸菌，其中乳酸菌與甲酸組合效果最佳。經(jīng)不同添加劑對苜蓿青貯處理影響的灰色關(guān)聯(lián)度分析可知：乳酸菌與甲酸組合的高添加水平對苜蓿青貯品質(zhì)的影響效果最好，中等添加水平處理組次之，對照組青貯品質(zhì)最差。

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中圖分類號：S551+.7

文獻標(biāo)識碼：A

文章編號：1006- 799X（2015）03- 0037- 03

基金項目：細(xì)毛羊飼料生產(chǎn)預(yù)加工（034- 036213）

作者簡介：武慧娟（1990-），女，甘肅古浪人，碩士，主要研究方向為牧草栽培及草產(chǎn)品加工。

通訊作者：陳本建*