崔彬彬,魏俊杰,張　妍,曹柳青，劉帥勇，沈一嵐,孫宇涵

(1 保定學(xué)院 生化系，河北 保定 071000；2 北京林業(yè)大學(xué) 林木育種國家工程實驗室，生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，北京 100083)

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銀腺楊大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂及胚囊發(fā)育研究

崔彬彬1,魏俊杰1,張妍1,曹柳青1，劉帥勇1，沈一嵐2,孫宇涵2

(1 保定學(xué)院 生化系，河北 保定 071000；2 北京林業(yè)大學(xué) 林木育種國家工程實驗室，生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，北京 100083)

[摘要]【目的】 對銀腺楊大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂和胚囊的發(fā)育進(jìn)程進(jìn)行研究，為確定染色體加倍的有效處理時期提供細(xì)胞學(xué)參考，以提高通過雌配子染色體加倍途徑選育三倍體的效率。【方法】 2014年1月采集銀腺楊雌花枝進(jìn)行水培，48 h后每隔3 h采集花芽樣品。采用石蠟切片法對銀腺楊的大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂及胚囊發(fā)育進(jìn)程進(jìn)行研究，同步觀察雌花芽的外部形態(tài)?！窘Y(jié)果】 銀腺楊大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂及胚囊發(fā)育進(jìn)程與花芽的外部形態(tài)變化存在一定的相關(guān)性，花序微露時，大孢子母細(xì)胞進(jìn)入減數(shù)分裂細(xì)線期；1/2花序伸出芽鱗，發(fā)育到減數(shù)分裂中期Ⅰ；花序全部露出、長約1.55 cm左右時，進(jìn)入減數(shù)分裂四分體時期。授粉前12 h，功能大孢子進(jìn)入胚囊發(fā)育時期，雌蕊柱頭開裂角度約180°時發(fā)育到單核胚囊；授粉后24 h，柱頭褐色，發(fā)育到二核胚囊；授粉后36 h，柱頭開始萎蔫，發(fā)育到四核胚囊；授粉后60 h，柱頭干枯，發(fā)育到八核胚囊?！窘Y(jié)論】 根據(jù)銀腺楊雌花芽外部形態(tài)可判斷其大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂及胚囊發(fā)育時期，以適時進(jìn)行染色體的加倍處理；同時，銀腺楊大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂和胚囊發(fā)育進(jìn)程呈現(xiàn)出明顯的不同步性，同花芽的不同小花及同一小花的不同胚珠間均存在著明顯的發(fā)育差異，這一特點(diǎn)對種群進(jìn)化有重要意義。

[關(guān)鍵詞]銀腺楊；大孢子母細(xì)胞；減數(shù)分裂；胚囊發(fā)育

銀腺楊(Populusalba×P.glandulosa)是白楊派的一種，具有生長快、樹干通直挺拔、適應(yīng)性強(qiáng)、主根和側(cè)根發(fā)達(dá)、枝繁葉茂等特點(diǎn)，是重要的造林綠化樹種。三倍體楊樹具有速生、巨大等特性，可以獲取更高的木材產(chǎn)量[1-2]，同時三倍體育種綜合了雜種優(yōu)勢育種和倍性育種的優(yōu)勢，可以通過一輪次育種過程實現(xiàn)林木的綜合性狀遺傳改良[3]，因此人工創(chuàng)造三倍體逐漸成為現(xiàn)代林木育種工作的重要手段，一般通過理化處理誘導(dǎo)2n花粉或2n雌配子的方式人工選育三倍體新品種[4]。但通過誘導(dǎo)2n花粉加倍時，由于加倍花粉在受精過程中競爭能力差[5]，導(dǎo)致這種方式的三倍體得率較低[6]；而通過誘導(dǎo)大孢子染色體加倍和胚囊染色體加倍形成的2n雌配子，不存在單倍性配子的競爭問題，因而越來越受到林木育種者的青睞。李艷華等[7]在誘導(dǎo)銀腺楊大孢子染色體加倍時，以毛白楊為父本授粉，結(jié)果三倍體得率最高達(dá)16.7%；王君等[8]以秋水仙堿誘導(dǎo)青楊胚囊染色體加倍，三倍體得率最高為66.7%。顯然，誘導(dǎo)楊樹大孢子和胚囊染色體加倍是有效的多倍體誘導(dǎo)途徑。染色體加倍技術(shù)的關(guān)鍵是對處理時期的把握，因此對大孢子減數(shù)分裂和胚囊發(fā)育進(jìn)程的判斷尤為重要，這就需要對其進(jìn)行細(xì)胞學(xué)觀察。在利用誘導(dǎo)花粉染色體加倍選育白楊三倍體的研究中，康向陽等[9]將細(xì)胞學(xué)技術(shù)與染色體加倍技術(shù)結(jié)合起來，證明了白楊花粉染色體加倍的有效處理時期為減數(shù)分裂粗線期。而在楊屬植物中，有關(guān)小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)程及其遺傳變異方面的細(xì)胞學(xué)研究較多[10-13]，由于大孢子母細(xì)胞及胚囊包裹于胚珠之中，有關(guān)其發(fā)育過程的細(xì)胞學(xué)研究相對較少，發(fā)育時期也難以即時判別，因此限制了2n雌配子誘導(dǎo)及其在育種中的應(yīng)用。李艷華等[7]的研究證明，銀腺楊的大、小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)程存在對應(yīng)關(guān)系，而將銀腺楊大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂和胚囊發(fā)育的整個細(xì)胞學(xué)過程與其花芽發(fā)育的外部形態(tài)聯(lián)系起來的研究尚未見報道。為此，本研究以銀腺楊為材料，采用石蠟切片方法，對大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂和胚囊的發(fā)育進(jìn)程進(jìn)行了研究，同步觀察雌花芽的外部形態(tài)，以期為確定染色體加倍的有效處理時期提供細(xì)胞學(xué)參考和技術(shù)支持，進(jìn)而提高通過雌配子染色體加倍途徑選育三倍體的效率。

1材料與方法

1.1材料

銀腺楊雌花枝采集于國家重點(diǎn)林木良種基地山東冠縣苗圃。2014年1月采集花芽飽滿、無病蟲害的健壯花枝，用塑料薄膜包裹嚴(yán)密，運(yùn)至河北大學(xué)溫室，避風(fēng)低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2方法

于2014-01-23將銀腺楊雌花枝在河北大學(xué)溫室內(nèi)進(jìn)行切枝水培，溫度保持在10～25 ℃，授粉前花枝水培48 h，每隔3 h采集4～5個花芽，去除鱗片，用FAA固定液(V(體積分?jǐn)?shù)70%乙醇)∶V(乙酸)∶V(體積分?jǐn)?shù)38%甲醛)=90∶5∶5)固定，共歷時340 h，固定花芽500個左右，4 ℃低溫保存。

收集銀腺楊花粉，當(dāng)銀腺楊雌花序處于最佳授粉時期時對其授粉。授粉后每隔6 h用FAA 固定液固定雌花芽4～5個，授粉5 d后每 12 h固定1次，直至授粉后第7天，固定的雌花芽均于4 ℃低溫保存?zhèn)溆谩Ｃ看芜M(jìn)行雌花芽固定時均記錄下被固定花芽的外部形態(tài)特征，用游標(biāo)卡尺測量其花芽長度，同時對新鮮材料做解剖，觀察柱頭的發(fā)育情況，采用Leica EZ4HD體式顯微鏡觀察并拍照。

大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂及胚囊發(fā)育進(jìn)程的觀察采用石蠟切片法，從每個FAA固定液固定的雌花芽基部、中部和頂部各摘取4個小花，經(jīng)過逐級酒精脫水，二甲苯透明，采用石蠟包埋、切片，切片厚度8 μm，鐵礬蘇木精染色，苦味酸飽和液分色，最后進(jìn)行顯微觀察，并對發(fā)育過程各時期進(jìn)行統(tǒng)計，以占優(yōu)勢比例的發(fā)育時期作為階段標(biāo)志性時期。所有制片均用Olympus BX51型顯微鏡觀察并拍照。

2結(jié)果與分析

2.1銀腺楊大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)程

在溫室水培條件下，銀腺楊水培210 h后開始進(jìn)入減數(shù)分裂，共歷時105 h，其大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)程與花芽的發(fā)育存在一定的相關(guān)性(表1)，隨著雌花芽逐漸膨大、伸長，直到花序完全露出芽鱗，大孢子母細(xì)胞從減數(shù)分裂的細(xì)線期發(fā)育到四分體。當(dāng)銀腺楊雌花枝在溫室水培約8 d時，雌花芽開始膨大(圖1-A)，柱頭透明(圖1-B)，此時從子房縱切面觀察，珠心與珠被約呈45°夾角，可以看到珠心表皮下的孢原細(xì)胞體積增大發(fā)育為大孢子母細(xì)胞。

銀腺楊雌花枝水培210 h，雌花芽長約0.76 cm，花序微露(圖1-C)，柱頭黃色(圖1-D)，銀腺楊大孢子母細(xì)胞開始進(jìn)入減數(shù)分裂前期Ⅰ的細(xì)線期(圖2-A)，細(xì)胞核仁明顯，核內(nèi)出現(xiàn)細(xì)長如線的染色體。雌花枝水培222 h，花芽長約0.84 cm，約1/5雌花序露出芽鱗，子房比細(xì)線期稍大，減數(shù)分裂進(jìn)入細(xì)線末期(圖2-B)，此時染色體在細(xì)胞核內(nèi)發(fā)生極化，集中于核仁一側(cè)呈花束狀。雌花枝水培234 h，花芽長約0.96 cm，約1/4花序露出芽鱗(圖1-E)，柱頭稍顯紅色(圖1-F)，大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)入粗線期(圖2-C)，此時同源染色體聯(lián)會，染色體縮短加粗，形態(tài)明顯。雌花枝水培240 h，雌花芽外形變化不大，此時染色體進(jìn)一步縮短變粗，聯(lián)會的二價體因非姊妹染色單體相互排斥而松解，但仍有幾個交叉聯(lián)結(jié)在一起，大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)入雙線期(圖2-D)。雌花枝水培245 h，花芽長約1.14 cm，約1/3花序露出芽鱗(圖1-G)，柱頭微紅(圖1-H)，多數(shù)大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)入終變期(圖2-E)，染色體變得更為濃縮和粗短，分散在整個核內(nèi)。雌花枝水培258 h，雌花芽長約1.20 cm，約1/2花序露出芽鱗(圖1-I)，柱頭伸長，開始分叉(圖1-J)，大部分大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂發(fā)育到中期Ⅰ(圖2-F)，此時核仁消失，配對的同源染色體分布排列在赤道板中央，具有典型的細(xì)胞分裂相，容易識別。雌花枝水培270 h，花芽長約1.23 cm，約2/3花序露出芽鱗(圖1-K)，柱頭呈紅色(圖1-L)，大孢子母細(xì)胞進(jìn)入減數(shù)分裂后期Ⅰ(圖2-G)，配對的同源染色體在紡錘絲的牽引下移向細(xì)胞兩極，同源染色體分離，隨后形成二分體，完成第一次減數(shù)分裂。雌花枝水培285 h，花芽長約1.52 cm，花序已全部露出(圖1-M)，柱頭四叉明顯，開裂角度小于30°(圖1-N)，大孢子母細(xì)胞進(jìn)入減數(shù)分裂中期Ⅱ(圖2-H)。繼續(xù)水培至315 h，雌花芽長約1.55 cm，花序完全露出，柱頭伸出，開裂角度約60°(圖1-O)，大孢子母細(xì)胞進(jìn)入減數(shù)分裂四分體時期(圖2-I)。

表 1　銀腺楊大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)程及雌花芽形態(tài)特征

圖 1銀腺楊雌花芽及其柱頭的發(fā)育進(jìn)程

A,B.膨大的雌花芽及其柱頭；C,D.花序微露的雌花芽及其柱頭；E,F.1/4花序露出芽鱗的雌花芽及其柱頭；

G,H.1/3花序露出芽鱗的雌花芽及其柱頭；I,J.1/2花序露出芽鱗的雌花芽及其柱頭；K,L.2/3花序露出芽鱗的雌花芽及其柱頭；

M.花序全部露出芽鱗的雌花芽；N.開裂角度小于30°的柱頭；O.開裂角度約60°的柱頭；

P.開裂角度約90°的柱頭；Q.開裂角度約120°的柱頭；R.開裂角度約180°的柱頭

Fig.1Female flower bud and its stigma development ofPopulusalba×P.glandulosa

A,B.Inflated female flower bud and its stigma;C,D.Female flower bud with a little catkin out and its stigma;

E,F.Female flower bud with 1/4 of the catkin out and its stigma;G,H.Female flower bud with 1/3 of the catkin out and its stigma;

I,J.Female flower bud with 1/2 of the catkin out and its stigma;K,L.Female flower bud with 2/3 of the

catkin out and its stigma;M.Female flower bud with all of catkin out;N.Stigma with cracking angle less than 30°;

O.Stigma with cracking angle about 60 °; P.Stigma with cracking angle about 90 °;

Q.Stigma with cracking angle about 120°;R.Stigma with cracking angle about 180°

圖 2　銀腺楊大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)程

通過石蠟切片觀察發(fā)現(xiàn)，銀腺楊胚囊發(fā)育過程歷時3～4 d，大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)入四分體以后，珠孔端的3個大孢子退化，合點(diǎn)端的大孢子繼續(xù)發(fā)育，形成功能大孢子(圖3-A)，功能大孢子經(jīng)過3次有絲分裂形成成熟胚囊，成熟胚囊由位于合點(diǎn)端的3個反足細(xì)胞、珠孔端的2個助細(xì)胞、1個卵細(xì)胞及1個中央細(xì)胞組成，屬于蓼型胚囊發(fā)育模式。在胚囊發(fā)育過程中，雌花序的外部形態(tài)也在不斷發(fā)生變化(表2)，從花序完全露出芽鱗，柱頭紅色，四叉完全張開到花粉可授期，授粉后花序不斷伸長，柱頭逐漸萎蔫、干枯，隨著胚囊發(fā)育進(jìn)程的完成，子房變得膨大飽滿。

授粉前12 h左右，雌花序完全露出芽鱗，柱頭紅色，明顯分叉，開裂角度約90°(圖1-P)，功能大孢子進(jìn)入胚囊發(fā)育過程。繼續(xù)水培12 h，雌蕊柱頭的開裂角度不斷變大(圖1-Q)，至開裂角度約180°(圖1-R)，四叉完全張開，到可授期，體積逐漸增大，細(xì)胞核位于中央，形成少量單核胚囊(圖3-B)。授粉后12 h，雌花序外部形態(tài)變化不大，單核胚囊繼續(xù)發(fā)育生長，經(jīng)過1次有絲分裂，形成二核胚囊，可以觀察到2個核處于中央(圖3-C)。授粉后24 h，雌蕊柱頭發(fā)暗變?yōu)楹稚?個核分別移向胚囊的兩端(圖3-D)。授粉后36 h，雌花序小花之間的距離稍拉開，花序變得松散，柱頭開始萎蔫，二核胚囊位于珠孔端和合點(diǎn)端的2個細(xì)胞核進(jìn)行第2次有絲分裂，形成四核胚囊(圖3-E)，兩端各2個細(xì)胞核。授粉后48 h，雌花序進(jìn)一步伸長，柱頭萎蔫，四核胚囊占多數(shù)，少量發(fā)育快的四核胚囊進(jìn)行第3次有絲分裂，形成八核胚囊(圖3-F)。授粉后60 h，雌花序進(jìn)一步伸長，柱頭干枯，此時可看到大量的七細(xì)胞結(jié)構(gòu)的八核胚囊。授粉后72 h，雌花序繼續(xù)伸長，子房膨大，胚囊逐漸發(fā)育成熟。授粉后120 h，子房飽滿，成熟胚囊已完成雙受精，胚囊發(fā)育到胚和游離胚乳核時期。

圖 3　銀腺楊胚囊發(fā)育進(jìn)程

授粉后時間/hAfterpollinationtime發(fā)育時期Developmentperiod花序特征Inflorescencecharacter-12四分體至單核胚囊Tetradtouni-nucleateembryosac花序完全露出,柱頭紅色,明顯分叉,開裂角度約90°Allofcatkinstickedout;Thestigmawasredanditsbrancheswereobvious,anditscrackinganglewasabout90°0四分體至二核胚囊Tetradtotwo-nucleateembryosac花序完全露出,柱頭四叉完全張開,開裂角度約180°,到可授期Allofcatkinstickedout;Fourbranchesofthestigmawereopencompletelyanditscrackinganglewasabout180°,andit’spollina-tiontime12單核胚囊至二核胚囊Uni-nucleatetotwo-nucleateembryosac花序變化不大,柱頭紅色Catkinhadfewchangesandthestigmawasred24單核胚囊至四核胚囊Uni-nucleatetofour-nucleateembryosac花序變化不大,柱頭褐色Catkinhadfewchangesandthestigmawasbrown36單核胚囊至八核胚囊Uni-nucleatetoeight-nucleateembryosac花序開始松散,柱頭開始萎蔫Thecatkinbecametobeincompactandthestigmasbegantowilt48二核胚囊至八核胚囊Two-nucleatetoeight-nucleateembryosac花序伸長,柱頭萎蔫Catkinelongated;Stigmawilted60四核期至成熟胚囊Four-nucleatetoeight-nucleateembryosac花序伸長,柱頭干枯Catkinelongated;Stigmaseared72成熟胚囊Matureembryosac花序伸長,子房膨大Catkinelongated;Ovaryswelled120胚與游離胚乳核時期Embryoandfreeendospermnuclearperiod子房飽滿Plumpovary

3討論與結(jié)論

在番茄、彩色馬蹄蓮等植物的細(xì)胞學(xué)研究中，研究者將雌花芽的形態(tài)特征用于判別其大孢子的發(fā)育進(jìn)程[14-15]。本研究發(fā)現(xiàn)，銀腺楊大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂和胚囊發(fā)育進(jìn)程與花芽的外部形態(tài)變化存在一定的相關(guān)性，花序微露時，大孢子母細(xì)胞進(jìn)入減數(shù)分裂細(xì)線期；1/4花序露出芽鱗時，減數(shù)分裂進(jìn)入粗線期；1/3露出芽鱗時，發(fā)育到減數(shù)分裂終變期；1/2伸出芽鱗時，發(fā)育到減數(shù)分裂中期Ⅰ；2/3伸出芽鱗時，進(jìn)入減數(shù)分裂后期Ⅰ；花序全部露出、長約1.55 cm時，進(jìn)入減數(shù)分裂四分體時期。授粉前12 h，功能大孢子進(jìn)入胚囊發(fā)育時期，雌蕊柱頭開裂角度約180°時，發(fā)育到單核胚囊；授粉后24 h，柱頭褐色，發(fā)育到二核胚囊；授粉后36 h，柱頭開始萎蔫，發(fā)育到四核胚囊；授粉后60 h，柱頭干枯，發(fā)育到八核胚囊。由此可根據(jù)雌花芽外部形態(tài)來判斷大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂及胚囊發(fā)育進(jìn)程。

2n雌配子受精后可以100%形成三倍體，具有很高的利用價值，但2n大孢子誘導(dǎo)處理時機(jī)較難把握。李艷華等[16]、侯延俠等[17]、張妍等[18]根據(jù)白楊、響葉楊、毛白楊雌雄配子發(fā)生、發(fā)育的時序性對應(yīng)關(guān)系，以小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)程為參照，即時判別大孢子母細(xì)胞的減數(shù)分裂時期，但大、小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)程的相關(guān)性會隨氣候、溫度等的變化有所差異。從銀腺楊大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂及胚囊的發(fā)育與花芽外部形態(tài)的相關(guān)性看，依據(jù)雌花芽的外部形態(tài)特征，能夠判別大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂和胚囊發(fā)育時期，適時進(jìn)行染色體加倍處理，不需要以小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)程為參照，實現(xiàn)了雌配子體發(fā)育時期的即時判別，并且花芽的外部形態(tài)特征受環(huán)境、氣候影響較小，因此是一種簡單、實用的技術(shù)方法。

本研究發(fā)現(xiàn)，銀腺楊大孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂進(jìn)程呈現(xiàn)出明顯的不同步性，這與李艷華等[16]的研究結(jié)果一致。同一花枝的不同花芽，同一花芽的不同小花，甚至同一小花的不同胚珠間均存在著明顯的發(fā)育差異，因此在水培時間相同的情況下，同一來源的大孢子母細(xì)胞也可以觀察到減數(shù)分裂的不同時期，如水培至270 h，發(fā)育快的大孢子母細(xì)胞進(jìn)入減數(shù)分裂的后期Ⅰ，發(fā)育慢的尚處于終變期。胚囊的發(fā)育也同樣存在不同步性，如授粉后60 h，發(fā)育快的已到成熟胚囊，發(fā)育慢的則還在四核胚囊時期，在白楊派其他樹種如河北楊和青楊派樹種[19-20]中也有相似的情況，顯示了種群變異的多樣性和豐富性,這一發(fā)育差異性特點(diǎn)對種群進(jìn)化有重要意義。因此在對大孢子和胚囊進(jìn)行大批量同期加倍處理時，取材部位應(yīng)盡量一致，以保證花芽發(fā)育的大體一致性。

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Meiosis of megaspore mother cell and embryo sac development inPopulusalba×P.glandulosa

CUI Bin-bin1,WEI Jun-jie1,ZHANG Yan1,CAO Liu-qing1,LIU Shuai-yong1,SHEN Yi-lan2,SUN Yu-han2

(1DepartmentofBiochemistry,BaodingUniversity,Baoding,Hebei071000,China;2NationalEngineeringLaboratoryforTreeBreeding,CollegeofBiologicalSciencesandTechnology,BeijingForestryUniversity,Beijing100083,China)

Abstract:【Objective】 Meiosis of megaspore mother cells and embryo sac development process of Populus alba×P.glandulosa were studied to provide cytological reference for chromosome doubling treatment and improve the efficiency of triploid breeding by female gametes chromosome doubling. 【Method】 In January 2014,female flowering branches of P.alba×P.glandulosa were collected and water cultured,then flower bud were collected every 3 h after water culture 48 h.The meiosis of megasporocytes and development of embryo sacs of P.alba×P.glandulosa were studied by paraffin section method,and the flower bud morphology was observed simultaneously.【Result】 The megaspore mother cell meiosis and embryo sac development were related to flower bud morphology.When a little catkin appeared,the meiosis of megaspore mother cells entered leptotene.When the meiosis of megasporocytes entered metaphase Ⅰ,1/2 catkin ran out. When the catkin was ～1.55 cm long,the meiosis of megasporocytes entered tetrad period.At 12 h before pollination,functional megaspore entered embryo sac development period.When the cracking angle of stigma was ～180 °,the embryo sac entered uni-nucleate period.At 24 h after pollination,stigma was brown and the embryo sac entered two-nucleate period.At 36 h after pollination,stigma began wilting and the embryo sac entered four-nucleate period;while at 60 h after pollination,stigma was withered and the embryo sac entered eight-nucleate period.【Conclusion】 The flower bud morphology could be used to judge the megaspore mother cell meiosis and embryo sac development period,so that they could be treated by chromosome doubling technique timely.Meanwhile,meiosis stages of megaspore mother cells and development of embryo sacs presented asynchrony.There were significant development diversities in different florets of same inflorescence and different ovules in same floret,which has important significance for population evolution.

Key words:Populus alba×P.glandulosa;megaspore mother cell;meiosis;development of embryo sac

DOI：網(wǎng)絡(luò)出版時間:2016-04-0709:0010.13207/j.cnki.jnwafu.2016.05.014

[收稿日期]2015-11-21

[基金項目]國家自然科學(xué)基金項目(31300562)；河北省自然科學(xué)基金項目(C2013104053)；保定學(xué)院首批科研團(tuán)隊(KYTD2013001)；保定市科學(xué)技術(shù)協(xié)會自然科學(xué)課題(KX2014A27)

[作者簡介]崔彬彬(1975-)，女，河北保定人，副教授，博士，主要從事林木遺傳育種與生物技術(shù)研究。E-mail：cbb0508@163.com[通信作者]孫宇涵(1983-)，男，吉林長春人，講師，博士，主要從事林木遺傳育種與生物技術(shù)研究。E-mail：syh831008@163.com

[中圖分類號]S792.119.04

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

[文章編號]1671-9387(2016)05-0105-08

網(wǎng)絡(luò)出版地址:http://www.cnki.net/kcms/detail/61.1390.S.20160407.0900.028.html