袁 平 吳國斌 劉欣欣

γ-干擾素釋放試驗在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價值

袁 平 吳國斌 劉欣欣

目的 探討γ-干擾素釋放試驗(IGRA)在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價值。方法 選取我院肺結(jié)核患者40例和肺炎患者41例作為研究對象，將肺結(jié)核和肺炎患者同步行血液和肺泡灌洗液的γ-干擾素釋放試驗檢測，觀察比較患者的診斷結(jié)果。結(jié)果 觀察組患者血液IGRA檢測陽性率92.5%明顯高于對照組的4.9%(2=23.05，P=0.000)；對照組、觀察組肺泡灌洗液IGRA檢測結(jié)果均為陰性，兩組比較無顯著性差異(2=0.00，P=1.000)。結(jié)論 γ-干擾素釋放試驗在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價值高，但是仍然存在假陽性及假陰性的診斷結(jié)果，因此在肺結(jié)核疾病診斷中要謹慎使用，必要時進行反復(fù)求證。

γ-干擾素釋放試驗； 肺結(jié)核； 診斷

結(jié)核病是長期危害全世界范圍內(nèi)人類健康的慢性傳染病，據(jù)統(tǒng)計其致死率在所有傳染性疾病中居于第二位[1]。據(jù)世界衛(wèi)生組織[2]統(tǒng)計，我國是結(jié)核病高負擔(dān)國家之一，該病致死率高，已成為威脅國民健康的重大殺手，因此加強核感染疾病的診斷研究至關(guān)重要[3]?，F(xiàn)階段結(jié)核病仍主要通過細菌學(xué)檢查予以確診，然而結(jié)核桿分支菌所需培養(yǎng)時間較長，且部分致病菌可能培養(yǎng)失敗，且檢出率低、特度較差。這對于結(jié)核病的臨床診治而言十分不利，所以需要一種對肺結(jié)核診斷靈敏度與特異性均較高的指標[4]。近年來以早期分泌抗原(ESAT-6)和培養(yǎng)濾過蛋白(CFP-10)為結(jié)核特異性刺激抗原的T細胞，γ-干擾素釋放試驗被用于肺結(jié)核臨床診斷。γ-干擾素釋放試驗是借助CFP-10、ESAT-6刺激致敏T細胞，使之合成γ干擾素，之后借助T-SPOT方法檢測對于結(jié)核桿菌有反應(yīng)的效應(yīng)T細胞數(shù)量，依次判斷患者是否存在結(jié)核感染，對肺結(jié)核診診斷提供了新的方法路徑。筆者主要探討γ-干擾素釋放試驗在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價值，將結(jié)果報告如下：

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取我院于2015年6月～2016年5月收治的肺結(jié)核患者40例和肺炎患者41例作為研究對象，所有患者均知情同意，現(xiàn)將臨床資料整理如下：肺炎患者41例作為對照組，其中男26例，女15例，年齡21～66歲，平均年齡(46.4±5.6)歲；患病時間1～3年，平均患病時間(1.1±0.5)年。肺結(jié)核患者40例作為觀察組，其中男25例，女15例，年齡20～65歲，平均年齡(46.3±5.4)歲；患病時間：1～2年，平均患病時間(1.1±0.1)年。兩組患者在性別、年齡、患病時間等資料方面無顯著差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入及排除標準

根據(jù)2008年8月衛(wèi)生部發(fā)布實施的《中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準》肺結(jié)核診斷標準進行判定，具體如下：①臨床有結(jié)核中毒癥狀, 如發(fā)熱、乏力、消瘦等; ②經(jīng)胸部影像學(xué)檢查提示肺結(jié)核病灶; ③痰涂片或結(jié)核菌培養(yǎng)陽性; ④結(jié)核菌素純蛋白衍生物(PPD)試驗陽性[5]。肺炎診斷標準：①感染中毒癥狀和呼吸道癥狀, 如發(fā)熱、咳嗽，咳痰等; ②經(jīng)胸部影像學(xué)檢查提示肺炎滲出性病灶; ③外周血檢查提示白細胞數(shù)增高，分類提示中性比例增高[6]。

1.3 方法

1.3.1 設(shè)備 兩組患者均同步行血液和肺泡灌洗液的γ-干擾素釋放試驗檢測，需要用到的設(shè)備：IGRA檢測試劑盒。

1.3.2 血液的γ-干擾素釋放試驗檢測 兩組患者均采用肝素抗凝真空管進行靜脈血標本采集，抽取患者靜脈血4 ml混勻編號放置。2 h內(nèi)分類裝到“N”(本底對照培養(yǎng)管)、“T”(測試培養(yǎng)管)、“P”(陽性對照培養(yǎng)管)1 ml培養(yǎng)管中，需要培養(yǎng)24h左右，4000 rpm/min離心10 min，之后取上清進行γ-干擾素釋放試驗檢測。結(jié)果判定：根據(jù)陽性對照孔抗原A(ESAT-6)孔、抗原B(CFP-10)孔斑點計數(shù)情況進行結(jié)果評價，陰性對照孔點數(shù)為0-5，陽性樣本應(yīng)為(抗原A或抗原B斑點數(shù))減去(陰性對照孔斑點數(shù))≥6；而若陰性對照孔斑點數(shù)≥6時，陽性樣本應(yīng)為：(抗原A或抗原B斑點數(shù))≥2(陰性對照孔斑點數(shù))。

1.3.3 肺泡灌洗液的γ-干擾素釋放試驗檢測 兩組患者同時進行了肺泡灌洗液的γ-干擾素釋放試驗檢測，具體方法：患者的肺泡灌洗回收液用雙層無菌紗布過濾，除去粘液，記錄總回收液量，裝入硅質(zhì)容器中，置于冰水(-4℃)中送檢驗室，應(yīng)在2～3 h內(nèi)對灌洗液進行檢查、分析。

1.4 觀察指標

觀察統(tǒng)計兩組患者的IGRA檢測結(jié)果，比較兩組患者血液和肺泡灌洗液的γ-干擾素釋放試驗檢測的結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

觀察組患者血液IGRA檢測陽性率92.5%明顯高于對照組的4.9%(2=23.05，P=0.000)；對照組、觀察組肺泡灌洗液IGRA檢測結(jié)果均為陰性，兩組比較無顯著差異(2=0.00，P=1.000)。見表1。

表1 兩組患者血液及肺泡灌洗液IGRA檢測結(jié)果分析n(%)

3 討論

肺結(jié)核是臨床常見病癥，但有時又與肺部其他感染病灶難以區(qū)分，診斷難度大，目前在肺結(jié)核診斷中采用的標準是在患者痰液中檢測或培養(yǎng)出結(jié)核分枝桿菌、或進行肺病理活檢證實。雖然這些檢查方法也各自有其優(yōu)勢，操作簡單或者檢測時間縮短，但是對患者身體損傷大并且結(jié)果精確性不高，價格昂貴，難以廣泛應(yīng)用，不能滿足臨床診斷的需求[7]。近年來，檢測外周血結(jié)核抗原特異性γ-干擾素釋放試驗已應(yīng)用于臨床，在肺結(jié)核的診斷中有參考價值[8]。筆者從肺結(jié)核和肺炎患者中同步行血液和肺泡灌洗液的γ-干擾素釋放試驗檢測，探討γ-干擾素釋放試驗對肺結(jié)核的診斷價值[9]。

γ-干擾素釋放試驗是新型檢測方法，在肺結(jié)核早期診斷中具有較高的敏感性與特異性[10-11]。本研究中采用了第IGRA檢測，共采用了血液和肺泡灌洗液的γ-干擾素釋放試驗檢測兩種檢測方法，通過檢測淋巴細胞釋放的γ-干擾素水對患者是否感染結(jié)核桿菌進行判定，有效避免了與卡介苗接種和其他分枝桿菌感染存在交叉反應(yīng)，檢測結(jié)果相對準確。研究中，兩組患者均采用了血液和肺泡灌洗液的γ-干擾素釋放試驗檢測進行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，觀察組患者血液IGRA檢測陽性率92.5%明顯高于對照組的4.9%(2=23.05，P=0.000)；對照組、觀察組肺泡灌洗液IGRA檢測結(jié)果均為陰性，兩組比較無顯著差異(2=0.00，P=1.000)。由此可見，γ-干擾素釋放試驗檢測可用于肺結(jié)核患者的臨床診斷，但應(yīng)注意在診斷中，應(yīng)選取血液作為檢測標本，而肺泡灌洗液對于肺結(jié)核患者的γ-干擾素釋放試驗并無明顯用處。

綜上所述，γ-干擾素釋放試驗在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價值高，但是仍然存在假陽性及假陰性的診斷結(jié)果，因此在肺結(jié)核疾病診斷中要謹慎使用，必要時進行反復(fù)求證。

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R521

A

10.3969/j.issn.1671-332X.2016.10.029

袁 平 吳國斌 劉欣欣 ： 贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院 江西贛州 341000